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羊布鲁杆菌M5-90BP26抗原单克隆抗体的制备及鉴定

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中国地方病学杂志 2012年第4期31卷 361-364页

作者：丘金浪吴静波黎诚耀王文敬南方医科大学输血医学研究所广州510515

目的制备高亲和性的羊布鲁杆菌M5—90BP26抗原单克隆抗体，并对抗体进行鉴定。方法将质粒pET-28a—BP26转化感受态大肠埃希菌（***）BL21（DE3），构建原核表达质粒pET-28a—BP26，用镍离子金属螯合亲和层析法（Ni—NTA）纯化、重组BP2... 详细信息

目的制备高亲和性的羊布鲁杆菌M5—90BP26抗原单克隆抗体，并对抗体进行鉴定。方法将质粒pET-28a—BP26转化感受态大肠埃希菌（***）BL21（DE3），构建原核表达质粒pET-28a—BP26，用镍离子金属螯合亲和层析法（Ni—NTA）纯化、重组BP26蛋白（rBP26）。将纯化后的rBP26蛋白与弗氏完全佐剂等体积混合成乳化抗原。按每只100μg／0．1ml在BALB／c小鼠皮下多点注射进行初次免疫；2周后，按每只50μg／0．1ml在小鼠皮下多点注射进行再次免疫。再次免疫后2周，小鼠尾静脉取血测效价，检测免疫效果；在细胞融合前3天，将乳化抗原按每只小鼠50μg腹腔注射加强免疫。将小鼠骨髓瘤SP2／O细胞与脾细胞按1：5比例在聚乙二醇（PEG）1450作用下进行细胞融合，置于37℃、5％CO2培养箱中培养；10d后取细胞培养上清液，用间接酶联免疫吸附法（ELISA）测定，筛选分泌抗rBP26抗体的杂交瘤细胞；再经过反复3次克隆，筛选出单克隆全阳性的杂交瘤细胞建株，用杂交瘤细胞株制备BP26抗原单克隆抗体，并以初始杂交瘤细胞克隆号命名。利用羊布鲁杆菌M5～90疫苗株制备膜蛋白提取物（NMP），采用免疫印迹法（Western）及斑点间接酶联免疫吸附法（Dot—ELISA）对筛选的单克隆抗体进行免疫学特性鉴定，用单克隆抗体亚型试剂盒进行抗体分型和Kappa（K）和Lambda（入）轻链鉴定。结果成功地获得2株能稳定分泌抗rBP26抗原的高亲和性杂交瘤3C3和5A5单克隆抗体，并能与羊布鲁杆菌M5—90疫苗株上的NMP结合，构建成M5—90BP26抗原单克隆抗体，抗体亚型分别为IgG1和IgG2b，轻链均为K链。结论鉴定结果表明，成功制备2株羊布鲁杆菌BP26抗原的高亲和性单克隆抗体，抗体具有识别M5—90疫苗株的膜蛋白构象表位的能力，优势表位的识别可为羊布鲁杆菌M5—90疫苗株的改造提供实验依据。

关键词：布鲁杆菌,羊膜间质蛋白BP26 抗体,单克隆

对甲氧苯基2-O-苯甲酰基-3-O-烯丙基-4,6-O-苄叉基-α-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-2,3,6-三-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成

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湘潭大学自然科学学报 2008年第4期30卷 89-93页

作者：陈朗秋赖端郭起蔡进湘潭大学化学学院环境友好化学与应用省部共建教育部重点实验室湖南湘潭411105

以异丙基2-O-苯甲酰基-3-O-烯丙基-4,6-O-苄叉基-β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(5)为供体与受体对甲氧苯基2,3-O-苯甲酰基-6-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)偶联得到了对甲氧苯基2-O-苯甲酰基-3-O-烯丙基-4,6-O-苄叉基-α-D-吡喃半乳糖基-(1→4... 详细信息

以异丙基2-O-苯甲酰基-3-O-烯丙基-4,6-O-苄叉基-β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(5)为供体与受体对甲氧苯基2,3-O-苯甲酰基-6-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)偶联得到了对甲氧苯基2-O-苯甲酰基-3-O-烯丙基-4,6-O-苄叉基-α-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-2,3,6-三-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷(9).通过4,6-O-苄叉基和3-O-All的共同影响改变了存在于C-2酯基的邻基参与效应,得到了立体专一性的α-连接的二糖9.化合物9采用MS1、H NMR和13C NMR等方法进行了表征.

关键词：二糖半乳糖邻基参效应立体选择性

苯胺与邻-氨基苯磺酸电化学共聚的原位紫外-可见光谱研究

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分析测试学报 2011年第4期30卷 368-373页

作者：黄文华王百木郎秋华张雷永城职业学院河南永城476600 上海师范大学生命与环境科学学院化学系上海200234

运用原位紫外-可见吸收光谱法和红外光谱法分别研究了苯胺(AN)和邻-氨基苯磺酸(ABSA)在0.1mol/L HClO4溶液中的单独聚合及共聚过程。结果表明,在AN和ABSA的共聚过程中,ABSA首先被氧化生成其阳离子自由基,然后ABSA阳离子自由基与继而生成... 详细信息

运用原位紫外-可见吸收光谱法和红外光谱法分别研究了苯胺(AN)和邻-氨基苯磺酸(ABSA)在0.1mol/L HClO4溶液中的单独聚合及共聚过程。结果表明,在AN和ABSA的共聚过程中,ABSA首先被氧化生成其阳离子自由基,然后ABSA阳离子自由基与继而生成的AN阳离子自由基和溶液中的AN及ABSA单体发生交互反应,生成混合低聚物中间体,在吸收光谱中对应于550 nm处的吸收峰。另外,随着混合溶液中AN浓度的增加,AN的聚合逐渐占主导地位,说明AN与ABSA的共聚过程与单体浓度比有关。红外光谱分析表明ABSA有效地连接在聚苯胺(PAN)骨架上,得到了自掺杂聚苯胺。

关键词：苯胺邻-氨基苯磺酸电化学共聚原位紫外-可见光谱电化学

发酵中药渣对草原红牛生长性能和血清生化指标的影响

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饲料研究 2022年第17期45卷 1-4页

作者：刘明远李林陈群邱玉朗吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林省农业科学院营养与饲料研究所吉林长春136100

试验旨在研究发酵中药渣对草原红牛生长性能和血清生化指标的影响。选择15头体重相近、健康的草原红牛,随机分为3组,每组5个重复,每个重复1头牛。对照组(试验A组)为基础日粮,试验B组、试验C组分别为含有5%和8%发酵中药渣的日粮。试验期6... 详细信息

试验旨在研究发酵中药渣对草原红牛生长性能和血清生化指标的影响。选择15头体重相近、健康的草原红牛,随机分为3组,每组5个重复,每个重复1头牛。对照组(试验A组)为基础日粮,试验B组、试验C组分别为含有5%和8%发酵中药渣的日粮。试验期60 d。结果显示,各组牛末重、平均日采食量、平均日增重、料重比和腹泻率差异均不显著(P>0.05)。与对照组相比,试验C组牛的十字部高增加量显著提高了171.43%(P<0.05);试验C组牛血清总蛋白(TP)、葡萄糖(GLU)含量显著升高(P<0.05),血清尿素氮(BUN)含量显著降低(P<0.05)。试验C组牛血清BUN含量显著低于试验B组(P<0.05)。研究表明,日粮中添加5%~8%的发酵中药渣对草原红牛生长性能具有提高趋势,发酵中药渣在促进蛋白质和葡萄糖代谢方面作用明显。

关键词：发酵中药渣草原红牛生长性能血清生化指标

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烷基-α-D-吡喃甘露糖苷中间体的合成

湘潭大学自然科学学报 2015年第2期37卷 75-79页

作者：伍桂龙旷娜陈朗秋陈静湘潭大学化学学院环境友好化学与应用省部共建教育部重点实验室湖南湘潭411105

烷基-α-D-吡喃甘露糖苷是重要的表面活性剂和抗菌剂.以D-甘露糖为原料,经乙酰化、选择性脱C1位乙酰基、转化成三氯乙酰亚胺酯、与受体偶联和脱保护五步反应立体专一性地合成了八种烷基-α-D-吡喃甘露糖苷中间体,目标化合物的结构经氢... 详细信息

烷基-α-D-吡喃甘露糖苷是重要的表面活性剂和抗菌剂.以D-甘露糖为原料,经乙酰化、选择性脱C1位乙酰基、转化成三氯乙酰亚胺酯、与受体偶联和脱保护五步反应立体专一性地合成了八种烷基-α-D-吡喃甘露糖苷中间体,目标化合物的结构经氢谱和质谱分析得到了确证,方法有效并且产率高.

关键词：烷基-α-D-吡喃甘露糖苷 D-甘露糖合成

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壳聚糖酶的理化性质初步研究

甘肃科学学报 2013年第1期25卷 31-34页

作者：尹爱国邱勇浪广东石油化工学院广东茂名525000

对壳聚糖酶理化性质进行初步实验研究,通过测定不同条件下酶的活力来研究酶的性质.实验结果表明,所用菌种所产壳聚糖酶最适反应温度和pH值分别为50℃和5.6,NH+对该酶有明显的促进作用,而Na+,K+,Mg2+,Cu2+,Ag+,NH+,Mn2+对该酶有一定的抑... 详细信息

对壳聚糖酶理化性质进行初步实验研究,通过测定不同条件下酶的活力来研究酶的性质.实验结果表明,所用菌种所产壳聚糖酶最适反应温度和pH值分别为50℃和5.6,NH+对该酶有明显的促进作用,而Na+,K+,Mg2+,Cu2+,Ag+,NH+,Mn2+对该酶有一定的抑制作用.Fe3+,Ca2+对酶的抵制作用最明显.

关键词：壳聚糖酶理化性质酶活力

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架子牛育肥营养与饲料配制技术研究进展

饲料研究 2022年第19期45卷 137-140页

作者：王金宇陈群邱玉朗李林吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 吉林省农业科学院动物营养与饲料研究所吉林公主岭136100

架子牛育肥技术是目前大多数肉牛养殖场普遍使用的育肥技术,具有改善牛肉品质、降低饲料成本、缩短育肥时间、增重快等优点。但部分养殖场仍存在饲料资源浪费、肉牛日增重低等问题,严重影响养殖效益。文章综述粗饲料加工和搭配组合、架... 详细信息

架子牛育肥技术是目前大多数肉牛养殖场普遍使用的育肥技术,具有改善牛肉品质、降低饲料成本、缩短育肥时间、增重快等优点。但部分养殖场仍存在饲料资源浪费、肉牛日增重低等问题,严重影响养殖效益。文章综述粗饲料加工和搭配组合、架子牛全混合日粮的配制与应用及阶段饲养模式的研究进展,以期为架子牛全混合日粮配制、阶段育肥相关研究与实际生产应用提供参考。

关键词：架子牛组合效应营养水平饲料添加剂阶段育肥

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水位与进尺及支护时机对富水隧道稳定性的影响

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中南大学学报（自然科学版） 2018年第11期49卷 2843-2851页

作者：黄戡杨伟军安永林胡文轩李依傅蕾周经伟邱朗长沙理工大学土木工程学院湖南长沙410114 湖南科技大学土木工程学院湖南湘潭411201

以实际富水隧道为参考背景,通过不同水位、支护、开挖条件建立三维数值模拟,分析富水隧道在不同条件下的稳定性及围岩变形。研究结果表明:地表沉降和开挖面的水平位移均随着水位的上升而增加,并且水位越接近地表,地表沉降和开挖面的水... 详细信息

以实际富水隧道为参考背景,通过不同水位、支护、开挖条件建立三维数值模拟,分析富水隧道在不同条件下的稳定性及围岩变形。研究结果表明:地表沉降和开挖面的水平位移均随着水位的上升而增加,并且水位越接近地表,地表沉降和开挖面的水平位移增加得越明显;支护在滞后2.5 m时,相应的拱顶沉降和塑性区与及时支护条件下相差不大,但在支护滞后5.0 m时,拱顶沉降和塑性区域显著增大,并且塑性区向上部围岩蔓延;随着进尺增加,围岩位移与塑性应变增大;随着渗流时间增加,掌子面前方的孔隙水压力逐渐减少,逐渐呈现漏斗状分布。

关键词：富水隧道水位线支护开挖方法

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癸二酸二水杨酰肼的合成

合成化学 2009年第3期17卷 354-356,359页

作者：蔡进陈朗秋郭起高清姣湘潭大学化学学院环境友好化学与应用省部共建教育部重点实验室湖南湘潭411105

分别以水杨酰肼和癸二酰氯,或水杨酰氯和癸二酸二酰肼为原料合成了癸二酸二水杨酰肼(5),其结构经1H NMR,13C NMR,MS和元素分析表征。合成5的较适宜反应条件为:癸二酰氯13mmol,n(水杨酰肼)∶n(癸二酰氯)=2.2∶1.0,三乙胺作缚酸剂,DMF作溶... 详细信息

分别以水杨酰肼和癸二酰氯,或水杨酰氯和癸二酸二酰肼为原料合成了癸二酸二水杨酰肼(5),其结构经1H NMR,13C NMR,MS和元素分析表征。合成5的较适宜反应条件为:癸二酰氯13mmol,n(水杨酰肼)∶n(癸二酰氯)=2.2∶1.0,三乙胺作缚酸剂,DMF作溶剂,于90℃反应7h,收率80%。

关键词：水杨酰肼癸二酰氯癸二酸二酰肼合成