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体外定向诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞向许旺细胞样细胞分化的研究

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器官移植 2015年第2期6卷 105-110页

作者：周丽娜崔晓军苏开鑫王晓红蔡雪彦郭金华雷林忠广东医学院解剖教研室广东湛江524023

目的探讨体外定向诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向许旺细胞样细胞转化的有效方法。方法分别进行成年大鼠许旺细胞原代培养和BMSC分离培养。根据诱导方法不同,分为化学诱导组和共培养诱导组。采用显微镜观察许旺细胞和BMSC的生长情... 详细信息

目的探讨体外定向诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向许旺细胞样细胞转化的有效方法。方法分别进行成年大鼠许旺细胞原代培养和BMSC分离培养。根据诱导方法不同,分为化学诱导组和共培养诱导组。采用显微镜观察许旺细胞和BMSC的生长情况,分别采用免疫荧光化学染色法[检测神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体和S-100抗体等许旺细胞标志蛋白]和流式细胞术鉴定两种细胞;显微镜下动态观察两组细胞的形态和生长情况;共培养诱导组共培养3 d后,化学诱导组诱导作用4 h、1 d后分别采用免疫荧光化学染色的方法评估两组细胞的诱导分化情况。结果化学诱导组诱导后的细胞发生了明显的许旺细胞样细胞形态改变,预诱导4 h后即出现GFAP抗体表达阳性,维持诱导1 d后,GFAP抗体阳性表达率为(80.9±3.5)%,S-100抗体阳性表达率为(59.0±1.1)%。诱导2 d后分化细胞开始出现脱落死亡,3 d后大部分分化细胞脱落死亡。共培养诱导组共培养3 d后,被诱导的BMSC未出现类似化学诱导组明显的细胞形态改变,GFAP抗体阳性表达率为(89.8±2.4)%,S-100抗体阳性表达率为(80.9±1.7)%。共培养诱导组S-100、GFAP抗体阳性表达率均高于化学诱导组,差异均有统计学意义(均为P1)。结论共培养诱导法不仅对BMSC向许旺细胞样细胞定向分化具有明确的效果,而且对BMSC的存活和增殖均有促进作用,因此该法相对于化学诱导法更加安全和有效。

关键词：骨髓间充质干细胞许旺细胞共培养诱导分化

成年大鼠骨髓间充质干细胞复合组织工程人工神经修复1cm坐骨神经缺损

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器官移植 2015年第3期6卷 157-161,168页

作者：周丽娜崔晓军苏开鑫王晓红蔡雪彦郭金华纳青青广东医学院解剖教研室广东湛江524023

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)作为组织工程化人工神经的种子细胞移植治疗外周神经损伤的效果。方法从成年大鼠的骨髓中分离培养得到BMSC,复合去细胞神经支架构建"组织工程化人工神经"。移植后分为BMSC+去细胞SD大鼠神经导管组(BMSC... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)作为组织工程化人工神经的种子细胞移植治疗外周神经损伤的效果。方法从成年大鼠的骨髓中分离培养得到BMSC,复合去细胞神经支架构建"组织工程化人工神经"。移植后分为BMSC+去细胞SD大鼠神经导管组(BMSC治疗组)和空细胞SD大鼠神经导管组(阴性对照组),每组各5只。比较两组大鼠术后2、4、8周损伤侧坐骨神经功能指数(SFI),术后8周损伤侧坐骨神经传导功能和小腿三头肌湿重恢复率等修复效果的指标。结果BMSC治疗组的坐骨神经修复术后2、4、8周损伤侧坐骨神经功能指数,术后8周损伤侧坐骨神经传导功能和小腿三头肌湿重恢复率均优于阴性对照组(均为P<0.05)。结论 BMSC复合去细胞神经支架的组织工程化人工神经可有效促进神经再生和功能恢复。

关键词：骨髓间充质干细胞移植去细胞神经支架神经再生

日本血吸虫主要虫卵抗原Sjp40在感染新西兰白兔肝脏中的表达与免疫定位

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南方医科大学学报 2015年第6期35卷 826-831页

作者：夏丹邓淦明滕萍英谢郁李耀民王春梅陈淑洁陈敏芳麦荣嘉廖海燕石玲玉欧丽妍陈启伟陈晓光周晓红南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系//广东普通高校新发传染病防治重点实验室广东广州510515

目的观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法日本血吸虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶(G... 详细信息

目的观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法日本血吸虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,Taqman探针q RT-PCR检测Sjp40 m RNA的表达;提取各组肝脏总蛋白,以硫酸铵盐析法和Protein G免疫亲和柱层析法纯化的抗Sjp40-Mc Ab 9G7和抗弓形虫t SAG1-Mc Ab Y3A8(对照抗体),western blot检测Sjp40蛋白的表达;制备肝脏石蜡切片,HE染色观察肝脏虫卵肉芽肿的形成与发展,进一步以免疫荧光技术进行Sjp40在肝脏沉积虫卵及其肉芽肿组织中的定位。结果日本血吸虫感染兔呈急性肝肉芽肿病变期的45 dpi肝脏沉积虫卵中Sjp40 m RNA水平显著高于29 dpi尚未形成虫卵肉芽肿结节的肝脏沉积的未成熟虫卵(P<0.05),westernb blot证实了Sjp40蛋白在29 dpi和45 dpi兔肝脏中的表达。免疫荧光显示:Sjp40在29 dpi兔肝脏中定位于未成熟虫卵内,而45 dpi可见感染兔肝脏中沉积大量成簇内含毛蚴的成熟虫卵及其周围肉芽肿组织均有明显荧光。结论 Sjp40在日本血吸虫感染兔肝脏沉积虫卵中的转录水平随虫卵发育成熟而显著增加,在感染兔急性肉芽肿病变期(45dpi)呈现由虫卵向其周围肉芽肿组织扩散现象,提示该分子在血吸虫肉芽肿形成与发展过程中具有重要作用。

关键词：日本血吸虫血吸虫病 SjP40 虫卵肉芽肿免疫荧光定位

HPV感染宫颈组织中14-3-3σ表达及启动子甲基化水平检测

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中国麻风皮肤病杂志 2016年第7期32卷 405-409页

作者：齐淑贞王少明张瑞丽周斌兵尤志学苏晓红王千秋中国医学科学院皮肤病医院南京210042 中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所北京100021 南京医科大学附属无锡第二医院皮肤科江苏无锡214002 南京医科大学第一附属医院妇科南京210029

目的:检测HPV感染宫颈组织中14-3-3σ启动子甲基化与14-3-3σmRNA的表达。方法:采用甲基化特异性PCR技术检测26例宫颈CIN3+宫颈原位鳞癌,39例宫颈尖锐湿疣及35例对照标本中14-3-3σ基因启动子区CpG岛甲基化状态,q-PCR法检测14-3-3σmRN... 详细信息

目的:检测HPV感染宫颈组织中14-3-3σ启动子甲基化与14-3-3σmRNA的表达。方法:采用甲基化特异性PCR技术检测26例宫颈CIN3+宫颈原位鳞癌,39例宫颈尖锐湿疣及35例对照标本中14-3-3σ基因启动子区CpG岛甲基化状态,q-PCR法检测14-3-3σmRNA表达,Western Blot检测14-3-3σ蛋白的表达。结果:宫颈CIN3+宫颈原位鳞癌组中14-3-3σ基因启动子区CpG岛甲基化率为73.08%,明显高于对照组的22.86%,差异有统计学意义(P17.94%与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈CIN3+宫颈原位鳞癌组的14-3-3σmRNA及蛋白表达较对照组减少,宫颈尖锐湿疣组14-3-3σmRNA及蛋白表达较对照组增加。结论:HPV感染宫颈CIN3+宫颈原位鳞癌组织中14-3-3σ表达减少可能与14-3-3σ启动子高甲基化相关。

关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒宫颈上皮内瘤变宫颈原位鳞癌甲基化 14-3-3σ

壮药调理补虚方质量标志物初步预测:基于质量标志物“五原则”

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亚太传统医药 2022年第11期18卷 216-225页

作者：陈海燕随家宁李芳婵郭勇秀谢孟姣赖信宏黄小洪梁资就蒋林广西中医药大学广西南宁530200 广西壮瑶药工程技术研究中心广西南宁530200 广西高校中药制剂共性技术研发重点实验室广西南宁530200

壮药调理补虚方是壮族民间常用验方,具有暖肾祛寒、温脾养肝、缩尿止遗之功,主治肾阳虚、脾肾两虚,下元虚冷之腰膝酸软,尿频遗尿等症。对壮药调理补虚方中各药味的化学成分、药理作用进行总结,并在此基础上,通过质量标志物的“五原则”... 详细信息

壮药调理补虚方是壮族民间常用验方,具有暖肾祛寒、温脾养肝、缩尿止遗之功,主治肾阳虚、脾肾两虚,下元虚冷之腰膝酸软,尿频遗尿等症。对壮药调理补虚方中各药味的化学成分、药理作用进行总结,并在此基础上,通过质量标志物的“五原则”概念,对总方的q-marker进行预测分析,提示益智仁多糖、金樱子多糖、肉苁蓉多糖、黄精多糖、桑椹多糖、枸杞多糖、原儿茶酸、白杨素、补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚、山柰酚-3-O-芸香糖苷、毛蕊花糖苷、松果菊苷、甘草酸均可作为质量标志物成分,研究为壮药调理膏质量控制及质量溯源体系的建立提供了参考依据。

关键词：壮药调理补虚方化学成分药理作用质量标志物五原则质量控制

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蜂胶总黄酮在心血管疾病中的应用

吉林中医药 2018年第8期38卷 951-953页

作者：孙光伟邢晓虹孙文瑞崔洪涛隋欣王伟楠何天竺姜铁超吉林省中医药科学院第一临床医院长春130021 吉林大学长春130000 吉林大学中日联谊医院长春130033 吉林大学第一医院长春130000 长春中医药大学长春130117

目的总结国外对蜂胶现代药理研究进展。方法对蜂胶总黄酮抗氧化、抗炎等生物学特性及治疗活性,与其他作用于心血管疾病机理研究进行归纳探讨,总结蜂胶总黄酮作用于心血管相关疾病的国内外研究进展;并探讨中医痰饮、瘀血、经络因素在心... 详细信息

目的总结国外对蜂胶现代药理研究进展。方法对蜂胶总黄酮抗氧化、抗炎等生物学特性及治疗活性,与其他作用于心血管疾病机理研究进行归纳探讨,总结蜂胶总黄酮作用于心血管相关疾病的国内外研究进展;并探讨中医痰饮、瘀血、经络因素在心系疾病中的病因病机,阐发有形与无形之痰都是心系疾病的重要病因。结果瘀血日久会导致心力衰竭等危重疾病的发生,经络相关疾病多以心痛为发病热点,蜂胶总黄酮能够减轻心肌缺血范围和心肌缺血的程度,且有抗炎、抗心肌缺血等功效。结论蜂胶可以在多种心系疾病中辨证应用。

关键词：蜂胶总黄酮心肌缺血心系疾病

基于Rho-ROCK信号转导通路研究竹沥对肝纤维化小鼠的作用

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中国肝脏病杂志（电子版） 2021年第4期13卷 38-45页

作者：王玖恒徐成军王晓宏张小冰刘青松王云中郑洋赵铁建段雪琳河北省承德市宽城满族自治县医院消化内科河北承德067600 广西中医药大学赛恩斯新医药学院南宁530222 广西中医药大学基础医学院生理教研室南宁530021 广西中医药大学壮医药学院南宁530021

目的探究竹沥对肝纤维化小鼠Ras同源基因-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Ras homologousgene-Rho-associatedcoiled-coilcontainingkinases,Rho-ROCK)信号转导通路的作用,分析竹沥抗肝纤维化的分子机制。方法将40只KM小鼠随机分为空白组、模... 详细信息

目的探究竹沥对肝纤维化小鼠Ras同源基因-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Ras homologousgene-Rho-associatedcoiled-coilcontainingkinases,Rho-ROCK)信号转导通路的作用,分析竹沥抗肝纤维化的分子机制。方法将40只KM小鼠随机分为空白组、模型组、竹沥组和丹参酚酸B组,每组10只,模型组、竹沥组和丹参酚酸B组小鼠给予40%CCl4花生油混合液(剂量2μl/g),空白组给予等量生理盐水,腹腔注射,2次/周,连续8周。模型构建成功后,竹沥组以竹沥灌胃,每日1次,每次30 ml/100 g;丹参酚酸B组以丹参酚酸B溶液灌胃,每日1次,每次用量0.25 mg/100 g;其余2组给予等量生理盐水灌胃,持续4周。末次给药后对小鼠眼球取血并处死,采用HE染色观察肝组织病理并进行Ishak评分,采用γ放射免疫全自动双探头计数器检测肝纤维化指标,包括透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原和Ⅳ型胶原,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测Rho A和ROCK2m RNA的相对表达量,采用Western blot检测Rho A和ROCK2蛋白的相对表达量。结果空白组、模型组、竹沥组和丹参酚酸B组小鼠Ishak评分分别为(0.40±0.05)分、(4.80±0.84)分、(3.20±0.45)分和(2.80±0.83)分,差异有统计学意义(F=34.807,P1),其中空白组显著低于模型组、竹沥组和丹参酚酸B组(t=8.690,P1;t=5.674,P1;t=4.768,P=0.001),模型组显著高于竹沥组和丹参酚酸B组(t=3.016,P=0.017;t=3.922,P=0.004),竹沥组和丹参酚酸B组差异无统计学意义(t=0.809,P=0.464)。空白组小鼠肝纤维化指标均显著低于模型组、竹沥组和丹参酚酸B组[透明质酸:(26.14±2.69)μg/L vs(53.69±5.87)μg/L vs(37.21±3.04)μg/L vs(32.88±3.60)μg/L,层粘连蛋白:(120.37±15.57)μg/L vs(214.48±21.39)μg/L vs(162.54±19.22)μg/L vs(161.66±14.23)μg/L,Ⅲ型前胶原:(4.04±1.01)μg/L vs(11.70±3.09)μg/L vs(8.12±1.87)μg/L vs(7.80±1.72)μg/L,Ⅳ型胶原:(12.96±2.82)μg/L vs(31.34±4.44)μg/L vs(23.72±3.69)μg/L vs(22.85±3.00)μg/L;P均0.05)。空白组Rho A和ROCK2m RNA相对表达量均显著低于模型组、竹沥组和丹参酚酸B组(Rho A m RNA:1.05±0.18 vs 2.61±0.37 vs 1.62±0.21 vs 1.50±0.14,ROCK2 m RNA:1.04±0.17vs2.32±0.29vs1.46±0.08vs1.45±0.09;P均0.05)。空白组Rho A和ROCK2蛋白相对表达量均显著低于模型组、竹沥组和丹参酚酸B组(Rho A蛋白:0.14±0.03 vs 0.43±0.05 vs 0.26±0.02 vs 0.30±0.15;ROCK2蛋白:0.28±0.03 vs 0.76±0.09 vs 0.38±0.04 vs 0.49±0.03;P均0.05)。结论竹沥可抑制Rho-ROCK信号转导通路的活动,可能是其抗肝纤维化的作用机制。

关键词：肝纤维化竹沥 Rho A ROCK2

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人脂肪干细胞膜片的构建及其生物学特性初探

解放军医学院学报 2018年第2期39卷 144-149页

作者：杨芳陈书强芦洁董杰孙惠君郭雯娓王晶晶张建华马媛王晓红空军军医大学(第四军医大学)唐都医院生殖医学中心陕西西安710038

目的利用分离纯化后的人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)构建ADSCs膜片,并探讨人ADSCs膜片的生物学特性。方法收集年轻女性腹部手术皮下脂肪组织,用酶消化法成功分离纯化人ADSCs,进行流式细胞学鉴定,使用含有活性因子的... 详细信息

目的利用分离纯化后的人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)构建ADSCs膜片,并探讨人ADSCs膜片的生物学特性。方法收集年轻女性腹部手术皮下脂肪组织,用酶消化法成功分离纯化人ADSCs,进行流式细胞学鉴定,使用含有活性因子的完全培养基诱导构建人ADSCs膜片后,扫描电镜观察细胞膜片组织形态,并采用q RT-PCR和ELISA检测人脂肪干细胞膜片相关促生长细胞因子及干性基因的表达水平。结果成功分离人ADSCs,流式细胞学鉴定发现其间充质干细胞表面标记分子CD29、CD44、CD90、CD105均为阳性,造血干细胞表面标记CD45分子为阴性,符合ADSCs表面分子表达特点;人ADSCs进行成脂和成骨诱导后,油红O与茜素红染色阳性,提示人ADSCs具有多向分化潜能;扫描电镜观察膜片中的细胞呈网格样叠加生长,细胞之间连接紧密;qRT-PCR检测结果显示人ADSCs膜片中TGF-β1、FGF2、HGF、VEGF、Col 1A1等促生长细胞因子和OCT4、NANOG等干性基因显著高表达。ELISA检测结果显示人ADSCs膜片上清液高表达促生长细胞因子TGF-β1、FGF、HGF、VEGF。结论我们成功利用人ADSCs诱导成人细胞膜片,该膜片可分泌更高含量的促生长细胞因子并表达更高水平的干性基因,为人ADSCs膜片应用于组织损伤修复提供了重要理论依据。

关键词：人脂肪干细胞细胞膜片组织再生

染色体3q21.3常见变异rs10934853单核苷酸多态性与前列腺癌风险的关联

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中国老年保健医学 2011年第2期9卷 24-27页

作者：周林魏东史晓红张耀光刘铭王鑫周昌虎陈鑫杨一歌杨泽王建业卫生部北京老年医学研究所 100730 卫生部北京医院泌尿外科 100730

目的探讨3q21.3内常见变异rs10934853单核苷酸多态性与中国人前列腺癌发病风险的关系,并探讨其与临床相关危险因素的相互作用。方法应用病例对照方法,选取90例前列腺癌患者以及年龄、性别匹配的109例正常对照人群为研究对象,采用聚合酶... 详细信息

目的探讨3q21.3内常见变异rs10934853单核苷酸多态性与中国人前列腺癌发病风险的关系,并探讨其与临床相关危险因素的相互作用。方法应用病例对照方法,选取90例前列腺癌患者以及年龄、性别匹配的109例正常对照人群为研究对象,采用聚合酶链反应-高分辨熔解曲线(PCR-HRM)技术结合测序验证法检测其3q21.3内rs10934853单核苷酸多态性的分布情况。结果①前列腺癌组中AA,CC,AC基因型分别为19例(21.1%),34例(37.8%),37例(41.1%);正常对照组中AA,CC,AC基因型分别为24例(22.0%),34例(31.2%),51例(46.8%);两组间基因型频率和等位基因频率的分布无显著性差异(P>0.05)。②Rs10934853单核苷酸多态性的不同基因型与前列腺癌患者的年龄,BMI指数,Gleason评分以及PSA浓度指标间均无显著相关性(P>0.05)。结论 Rs10934853单核苷酸多态性与中国人前列腺癌的发生无明显相关性,可能与中国人前列腺癌发病风险无关。

关键词：前列腺癌染色体3q21.3 单核苷酸多态性关联