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Transcriptome sequencing-based study on the mechanism of action of Jintiange capsules (金天格胶囊) in regulating Synovial mesenchymal stem cells exosomal miRNA and Articular chondrocytes mRNA for the treatment of osteoarthritis

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2024年

作者： CHEN Zhongying ZHANG Xue ZHANG Xiaofei ZOU Junbo yuan puwei SHI Yajun Shaanxi Province Key Laboratory of New Drugs and Chinese Medicine Foundation Research， Pharmacy College， Shaanxi University of Chinese Medicine The First Clinical Medical College， Shaanxi University of Chinese Medicine

OBJECTIVE: To corroborate the efficacy of Jintiange capsules (JTGs) (金天格胶囊) in the treatment of osteoarthritis (OA) by exploring the potential mechanism of action of synovial mesenchymal stem cell exosomes (SMSC-Exos) and articular chondrocytes (ACs) through transcriptome sequencing (RNA-seq).METHODS: Type II collagenase was used to induce OA in rats. The efficacy of JTGs was confirmed by macroscopic observation of articular cartilage， micro-CT observation， and safranin fast green staining. After SMSC-Exos and ACs were qualified， RNA-seq was used to screen differentially expressed miRNAs and mRNAs. The target genes of differentially expressed miRNAs in Synovial mesenchymal stem cells (SMSCs) were predicted based on the multiMiR R package. The co-differentially expressed genes of SMSC-Exos and ACs were obtained by venny 2.1.0. The miRNA-mRNA regulatory network was constructed by Cytoscape software. Based on the OmicShare platform， Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes enrichment analysis was performed on the mRNA regulated by key miRNAs. Expression trend analysis was performed for co-differentially expressed genes. Correlation analysis was performed on micro-CT efficacy indicators， co-differentially expressed genes mRNA and ***: The efficacy of each administration group of JTGs was significant compared with the model group. SMSC-Exos and ACs were identified by their characteristics. The expression of rno-miR-23a-3p， rno-miR-342-3p， rno-miR-146b-5p， rno-miR-501-3p， rno-miR-214-3p was down-regulated in OA pathological state， and the expression of rno-miR-222-3p， rno-miR-30e-3p， rno-miR-676， and rno-miR-192-5p expression was up-regulated， and the expression of all these miRNAs was reversed after the intervention with JTGs containing serum. The co-differentially expressed genes were enriched in the interleukin 17 signaling pathway， tumor necrosis factor signaling pathway， transforming growth factor-β signaling pathway， etc. The expression tr

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骨关节炎的孟德尔随机化分析研究进展

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中华骨科杂志 2024年第10期44卷 708-716页

作者：殷恺琦王军威袁普卫刘楠向宇晓陕西中医药大学咸阳712046 陕西中医药大学附属医院咸阳712000

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的关节慢性退行性疾病,是导致慢性疼痛和残疾的主要原因之一。多项研究表明OA与许多因素存在因果关联,如细胞因子、代谢性疾病、营养物质、肠道菌群和生活行为等。危险因素包括肥胖、高血脂水平... 详细信息

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的关节慢性退行性疾病,是导致慢性疼痛和残疾的主要原因之一。多项研究表明OA与许多因素存在因果关联,如细胞因子、代谢性疾病、营养物质、肠道菌群和生活行为等。危险因素包括肥胖、高血脂水平和骨矿物质密度等,保护因素包括使用保钾利尿剂和醛固酮拮抗剂、叶酸和精氨酸等。这些因素主要通过参与机体的炎症反应和物质代谢过程或通过改变负重关节的生物力学从而影响OA的进展。此外,OA的慢性疼痛症状、炎性因子的表达以及非甾体类抗炎药的使用可能会增加其他疾病的患病风险,如2型糖尿病、重度抑郁症和帕金森病。孟德尔随机化是一种探索疾病与危险因素之间因果关联的新方法,该方法利用遗传变异的随机分配模拟随机对照试验,使用与危险因素相关的工具变量与疾病进行分析,从而检验两者之间的因果关联。本综述纳入OA的孟德尔随机化相关研究,分析OA与代谢性疾病、心血管疾病、骨骼肌肉系统疾病、中枢神经系统疾病、精神疾病、细胞因子、代谢组学、营养物质、肠道菌群、生活行为以及端粒长度和线粒体异质性之间的因果关联,对OA的预防和治疗具有重要意义。

关键词：骨关节炎孟德尔随机化分析危险因素综述

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Semaphorin 3A expression in spinal cord injured rats after olfactory ensheathing cell transplantation

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Neural Regeneration Research 2011年第10期6卷 756-761页

作者： Guoyu Wang Xijing He puwei yuan Haopeng Li Rui Chang Second Department of Orthopedics Second Hospital of Xi'an Jiaotong University Xi'an 710004 Shaanxi Province China

Semaphorin 3A expression is thought to increase following spinal cord *** impact of olfactory ensheathing cell transplantation remains *** current study demonstrated that spinal cord hemorrhage,edema,degeneration,necrosis,cyst formation,proliferation of glial cells,regeneration of nerve fibers and various pathological reactions occurred following a simple cross-section of spinal cord *** of olfactory ensheathing cells was found to significantly relieve the pathological reactions in the spinal cord described above,decrease the extent of necrosis in damaged neurons and nerve fibers,and downregulate semaphorin 3A expression in the injured *** results confirmed that olfactory ensheathing cell transplantation plays a protective role on the injured spinal cord by reducing the expression of semaphorin 3A.

关键词： olfactory ensheathing cells cell transplantation spinal cord injury tissue pathology semaphorin 3A neural regeneration

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基于转录组测序探讨金天格胶囊调控滑膜间充质干细胞外泌体miRNA和关节软骨细胞mRNA治疗大鼠骨关节炎的作用机制

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中国现代应用药学 2024年第11期41卷 1464-1475页

作者：王智超张雪张小飞史亚军郭东艳栾飞翟秉涛邹俊波袁普卫陕西中医药大学药学院陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712046 陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712046 陕西中医药大学第一临床医学院陕西咸阳712046

目的对金天格胶囊治疗骨关节炎的药效进行确证,基于高通量测序技术探讨滑膜间充质干细胞外泌体(synovial mesenchymal stem cell exosomes,SMSC-Exos)与关节软骨细胞(articular chondrocytes,ACs)治疗骨关节炎的潜在作用机制。方法采用... 详细信息

目的对金天格胶囊治疗骨关节炎的药效进行确证,基于高通量测序技术探讨滑膜间充质干细胞外泌体(synovial mesenchymal stem cell exosomes,SMSC-Exos)与关节软骨细胞(articular chondrocytes,ACs)治疗骨关节炎的潜在作用机制。方法采用Ⅱ型胶原酶诱导大鼠骨关节炎,通过一般行为学观察、双足平衡差异试验、机械足反射阈值、MicroCT观察与番红固绿染色进行药效验证。将SMSC、ACs在适宜浓度的含药血清中培养,对照组、模型组和金天格组ACs进行mRNA测序以及SMSC-Exos进行miRNA测序。筛选差异表达mRNA与差异表达miRNA,并进行靶基因预测。通过Venn图对SMSC与ACs的差异表达基因求交集得到共同差异表达基因,运用Cytoscape软件构建miRNA-m RNA调控网络。对共同差异表达基因进行表达趋势分析以及对差异表达基因mRNA与miRNA、Micro-CT药效指标与差异表达基因mRNA进行相关性分析。结果骨关节炎病理状态下,miRNA-23a-3p、miRNA-342-3p、miRNA-146b-5p、mi RNA-501-3p、miRNA-214-3p表达下调,miRNA-222-3p、miRNA-30e-3p、miRNA-676-3p、miRNA-192-5p表达上调(P<0.05),这些miRNA的表达均在金天格胶囊含药血清干预后逆转表达,且趋势明显。Micro-CT药效指标、m RNA与miRNA之间存在一定的相关性。结论金天格胶囊治疗骨关节炎的药效作用明显,其作用机制可能与促进SMSC-Exos靶向ACs转运miRNA进而调控Serpinb10、Ntn1、Il1b、Tgm2、Megf10、Il11、Cd40、Slc15a3、Pou2f2等基因有关。

关键词：骨关节炎转录组测序金天格胶囊滑膜间充质干细胞外泌体关节软骨细胞

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Clinical effect of Sidong Wubu method in treatment of closed fracture of upper limbs

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2012年第3期32卷 393-396页

作者： puwei yuan Deyu Liu Qiang Zan Yangquan Hao Qunli Dou Genyin Zhang Haiguang yuan Haiguang yuan Orthopedic Instituteunder Shaanxi College of Traditional Chinese MedicineXianyang 712000China

OBJECTIVE:To objectively evaluate the clinically curative effect of sidong wubu method on closed fracture of upper ***:A single-blind randomized controlled trial was used to divide 654 patients with closed fracture of upper limbs at early stage into two groups.298 patients in the surgical group were treated with open reduction and internal fixation and 356 patients in the treatment group with sidong wubu method for 6 months as a course of ***:As for short-term curative effect(after 6 courses of treatment),the total effective rate was 97.7% in the treatment group and 92.9% in the control group,and the excellent and good rate was 83.7% and 76.5% ***-healing time,treatment cost,function-recovering time,scores of symptoms and signs obviously declined in both groups with remarkable difference between the two *** to long-term curative effect(after follow-up visit for one year to 5 years and 2 months),there was still noticeable difference(χ 2 = 7.536,P<0.05) in total curative effect and in excellent and good rate between the two ***:With low cost,short treatment course,good function and other advantages,sidong wubu method can be first used to treat closed fracture of upper limbs.

关键词： Fractures Closed Upper extremity sidong wubu method Fracture fixation Internal

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中西医治疗类风湿关节炎并发骨质疏松症的研究

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中国骨质疏松杂志 2024年第1期30卷 151-156页

作者：董佩袁普卫康武林高亚丽白元帅王振凯刘扬姚彬陕西中医药大学陕西咸阳712000 陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712000

类风湿关节炎是一种慢性致残性疾病,易导致骨质疏松症和骨折的发生,对全球健康状况具有巨大影响。骨质疏松症作为类风湿关节炎的主要合并症之一,其发病机制主要与炎症、细胞因子释放和自身抗体产生有关。针对类风湿关节炎并发骨质疏松... 详细信息

类风湿关节炎是一种慢性致残性疾病,易导致骨质疏松症和骨折的发生,对全球健康状况具有巨大影响。骨质疏松症作为类风湿关节炎的主要合并症之一,其发病机制主要与炎症、细胞因子释放和自身抗体产生有关。针对类风湿关节炎并发骨质疏松症的治疗,中医学强调整体观念,注重辨证论治,治疗主要用经方(独活寄生汤、桂枝附子汤)、中药自拟方、中成药等;西医学根据病因及临床表现抗风湿治疗、抗骨质疏松等治疗;此外,还有中西医结合疗法。笔者经查阅文献,总结类风湿关节炎并发骨质疏松症的治疗方法,以期为基础研究及临床应用提供思路与方法。

关键词：类风湿关节炎骨质疏松症中医药疗法西医学疗法中西医结合疗法

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Olfactory ensheathing cell transplantation and inhibition of NogoA,NgR and RhoA expression in the damaged zone to ameliorate spinal cord injury

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Neural Regeneration Research 2010年第13期5卷 999-1003页

作者： puwei yuan Xijing He Guoyu Wang Yangquan Hao Deyu Liu Department of Orthopaedics Affiliated Hospital Shaanxi College of Traditional Chinese Medicine Xianyang 712046 Shaanxi Province China Second Department of Orthopaedics Second Hospital of Xi'an Jiaotong University Xi'an 710042 Shaanxi Province China

BACKGROUND： Olfactory ensheathing cell （OEC） transplantation promotes repair of spinal cord injury. Neural regeneration inhibits binding of the myelin protein Nogo to its receptor （NgR）, activates downstream inhibitory signal RhoA, and leads to axonal degeneration. OBJECTIVE： To determine the relationship between OECs transplantation for spinal cord injury and NogoA, NgR, and RhoA protein expression in the damaged zone. DESIGN, TIME AND SETTING： A randomized, controlled, animal experiment was performed from September 2006 to May 2007 at the Key Laboratory of Environment and Genes in Xi＇an Jiaotong University School of Medicine, China. MATERIALS： OECs were harvested from healthy, adult, male, Sprague Dawley rats aged 6 months. Mouse anti-rat NogoA, NgR, and RheA monoclonal antibodies were utilized for detection. METHODS： A total of 40 adult Sprague Dawley rats were randomly assigned to four groups： normal, model, OECs, and DF12, with 10 animals in each group. Transverse section spinal cord injury was established in the OECs and DF12 groups, followed by injection of 1μL OECs suspension （1×10^8/mL） or equivalent DF12 medium at 1 mm above and below the injury site. MAIN OUTCOME MEASURES： Immunohistochemistry and Western blot were utilized to detect NogoA, NgR, and RhoA expression in the spinal cord injury lesions. Morphological changes were observed by argyrophilia staining, and lower extremity function of the animals was assessed using Basso, Beattie, and Bresnahan scores. RESULTS： Eight weeks following OECs transplantation, a significant increase in new axons was observed in the OECs group, and nerve fibers crossed the injury site to repair spinal cord injury. Qualitative and quantitative results from the OECs group were superior to the model and DF12 groups. At 8 weeks after transplantation, Basso, Beattie, and Bresnahan scores were significantly greater in the OECs group compared with the model and DF12 groups （P 〈 0.01）, but expression of NogoA, NgR, and RhoA prote

关键词： olfactory ensheathing cells NogoA NgR RhoA cell transplantation spinal cord peripheral nerve injury neural regeneration

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蠲痹胶囊不同提取部位对绝经后膝骨关节炎大鼠的影响

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中国医院药学杂志 2024年第6期44卷 656-662页

作者：黄文博秦书亚邹俊波李珣康武林袁普卫陕西中医药大学第一临床医学院陕西咸阳712046 陕西中医药大学药学院陕西咸阳712046 陕西中医药大学附属医院骨病科陕西咸阳712099

目的:观察蠲痹胶囊各提取部位对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠的作用,筛选其药效主要活性部位。方法:使用系统溶剂提取法获得蠲痹胶囊乙醇、水、石油醚、三氯甲烷、正丁醇和乙酸乙酯提取活性部位,并以改良Hulth法并摘除... 详细信息

目的:观察蠲痹胶囊各提取部位对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠的作用,筛选其药效主要活性部位。方法:使用系统溶剂提取法获得蠲痹胶囊乙醇、水、石油醚、三氯甲烷、正丁醇和乙酸乙酯提取活性部位,并以改良Hulth法并摘除双侧卵巢建立大鼠绝经后KOA模型为研究对象。实验大鼠被随机分为不同组别:正常对照组、模型对照组以及蠲痹胶囊乙醇提取部位组、水提取部位组、石油醚提取部位组、三氯甲烷提取部位组、正丁醇提取部位组、乙酸乙酯各提取部位组,观察这些组在各提取部位的干预下,膝骨关节炎大鼠膝关节横向直径的变化,使用micro-CT分析膝关节骨微结构;利用ELISA法检测血清、关节液中的相关炎症介质TNF-α、IL-1β、MMP9水平;通过Western blot检测软骨组织中MMP9、COX-2蛋白表达水平。结果:与模型对照组相比,蠲痹胶囊乙醇提取部位较其他部位更加显著降低KOA大鼠膝关节肿胀;有效改善大鼠膝关节骨小梁相对体积、骨小梁厚度、骨小梁数量等骨微结构变化;能明显降低大鼠血清、关节液中TNF-α、IL-1β、MMP9水平,抑制软骨中MMP9、COX-2蛋白的表达水平。结论:蠲痹胶囊各提取部位均可不同程度缓解KOA大鼠关节炎症状,其中乙醇提取部位是其药效主要活性部位。

关键词：蠲痹胶囊提取部位绝经膝骨关节炎 Micro-CT 炎症

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脑胶质瘤相关铜死亡基因预后模型构建、多组学分析及潜在中药预测

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中医学报 2024年第9期39卷 1992-2009页

作者：李越董博袁普卫刘德玉康武林陕西中医药大学第一临床医学院西安交通大学附属红会医院陕西中医药大学附属医院

目的：探讨铜死亡相关基因在脑胶质瘤发生发展中的作用及其与预后的关系，并筛选出可能影响这些基因表达或功能的中药。方法：获取脑胶质瘤相关数据集；采用R、Perl语言评估铜死亡相关基因的表达、变异；分别进行铜死亡基因分型、预后... 详细信息

目的：探讨铜死亡相关基因在脑胶质瘤发生发展中的作用及其与预后的关系，并筛选出可能影响这些基因表达或功能的中药。方法：获取脑胶质瘤相关数据集；采用R、Perl语言评估铜死亡相关基因的表达、变异；分别进行铜死亡基因分型、预后差异基因分型、多组学分析；构建预后模型、风险评分。按照风险评分分组，亚组多组学分析，检验生存预测能力；以铜死亡相关基因为靶点，采用传统中药系统药理学数据库（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform, TCMSP）和Cytoscape软件构建“铜死亡靶点-成分-中药”网络，得出核心中药和核心成分。结果：大多数铜死亡相关基因在脑胶质瘤中表达异常，并能发生拷贝数变异，突变基因有NLR家族焦糖样域含有蛋白3（NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3）(1%)、铜输送ATP酶1（ATPase copper transporting alpha, ATP7A）(1%)、周期蛋白依赖性激酶抑制因子2A（cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,CDKN2A）(1%)、铜输送ATP酶2（ATPase copper transporting beta, ATP7B）(1%)、金属调节转录因子1（metal regulatory transcription factor 1,MTF1）(1%)、谷氨酰胺合成酶（glutaminase, GLS）(1%);预后相关基因有ATP7A（P<0.001）、二肽基转移酶（dihydrolipoamide branched chain transacylase E2,DBT）(P=0.012)、甘油酸缩合酶（glycine cleavage system H protein, GCSH）(P<0.001)、核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,NFE2L2）(P<0.001)、NLR家族焦糖样域含有蛋白3（NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3）(P<0.013),对铜死亡相关基因表达量数据经过聚类分析，差异有统计学意义（P<0.001）。在铜死亡分型中，A亚型的患者预后相对较好，该亚型在铜死亡及免疫相关通路中低表达，即活化的CD4+T淋巴细胞、活化的CD8+T淋巴细胞、活化的树突状细胞等免疫细胞呈低表达（P<0.001）。相反，铜死亡分型中的B亚型患者预后相对较差，与A亚型患者比较，差异有统计学意义（P<0.05）。A亚型与B亚型患者的差异性基因数量达到598个。通过将不同的铜死亡基因进行重新聚类分析，可以区分出3个不同的基因型（P<0.001）。在这些铜死亡预后差异基因分型中，3组的曲线下面积（area under the curve, AUC）值均大于0.7,其中B亚型患者预后最佳，而C亚型患者预后最差。B亚型的特点主要是铜死亡基因的低表达，而C亚型则主要是铜死亡基因高表达（P<0.001）。预后模型风险评分将患者分为高风险组、低风险组，低风险组铜死亡基因低表达、预后好，高风险组相反。通过列线图可对患者不同临床特征进行预后评估（女性、年龄49岁、低风险评分的患者预后得分为95.3分，其1年、3年、5年生存率分别为97.0%、85.5%、74.7%）;免疫细胞与风险评分相关性多呈负相关（P<0.05）;肿瘤微环境中基质细胞、免疫细胞及总评分均为低风险组更低，肿瘤突变负荷则高风险组更高（P<0.001）;干细胞与风险得分呈负相关（P<0.05）。“铜死亡靶点-成分-中药”网络得出核心成分主要包括鞣花酸、黄芩素、香叶木素、黄连碱、汉黄芩素、番茄红素等；核心中药主要包括牛膝、木蝴蝶、黄芩、银杏叶、赤芍、旋覆花等。归经主要在肝经（66次）、脾经（49次）、肺经（58次）、胃经（46次）,四气以平（36次）、温（34次）、寒（33次）为主，五味主要以苦（86次）、甘（51次）、辛（45次）为主。结论：铜死亡相关基因影响脑胶质瘤患者免疫和预后，牛膝、木蝴蝶、黄芩、银杏叶等中药可调节该基因在脑胶质瘤中的作用。

关键词：脑胶质瘤铜死亡基因生物信息学多组学分析预后模型

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中医药调控氧化应激治疗骨关节炎的研究进展

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中医正骨 2024年第5期36卷 54-60页

作者：姚彬王占魁康武林董佩白元帅陈永程袁普卫陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712046 陕西中医药大学陕西咸阳712046

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是临床常见的一种慢性退行性疾病,其发病机制目前尚未完全明确。近年来,氧化应激在OA发生发展中的作用备受学术界关注。目前研究已证实,中医药可通过多种途径调控氧化应激,延缓OA的病情进展。本文概述了氧... 详细信息

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是临床常见的一种慢性退行性疾病,其发病机制目前尚未完全明确。近年来,氧化应激在OA发生发展中的作用备受学术界关注。目前研究已证实,中医药可通过多种途径调控氧化应激,延缓OA的病情进展。本文概述了氧化应激,介绍了氧化应激在OA发生发展中的作用,对中医药调控氧化应激治疗OA的研究进展进行了综述,为OA的临床治疗提供了新的思路。

关键词：骨关节炎氧化性应激活性氧中医药疗法综述

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