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Efficient scar-free knock-ins of several kilobases in plants by engineered CRISPR-Cas endonucleases

Molecular Plant 2024年第5期17卷 824-837页

作者： Tom Schreiber Anja Prange Petra Schafer Thomas Iwen Ramona Grutzner Sylvestre Marillonnet Aurelie Lepage Marie Javelle wyatt paul Alain Tissier Department of Cell and Metabolic Biology Leibniz Institute of Plant BiochemistryWeinberg 306120 Halle(Saale)Germany Limagrain Centre de RechercheRoute d’EnnezatCS 9012663720 ChappesFrance

In plants and mammals,non-homologous end-joining is the dominant pathway to repair DNA doublestrand breaks,making it challenging to generate knock-in *** this study,we identified two groups of exonucleases from the herpes virus and the bacteriophage T7 families that conferred an up to 38-fold increase in homology-directed repair frequencies when fused to Cas9/Cas12a in a tobacco mosaic virus-based transient assay in Nicotiana *** achieved precise and scar-free insertion of several kilobases of DNA both in transient and stable transformation *** Arabidopsis thaliana,fusion of Cas9 to a herpes virus family exonuclease led to 10-fold higher frequencies of knock-ins in the first generation of *** addition,we demonstrated stable and heritable knock-ins in wheat in 1%of the primary *** together,our results open perspectives for the routine production of heritable knock-in and gene replacement events in plants.

关键词： homology-directed repair knockin gene replacement CRISPR-Cas 50 exonuclease plants

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FLASHR介绍

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计算机光盘软件与应用（COMPUTER ARTS数码艺术） 2008年第4期 110-111页

作者： paul wyatt

Flashr使你可以为自己的Flash作品加入Flickr管理的照片。paul wyatt带你进入这个简单的介绍性教程。在这里他将为你展示怎样在Flash中建立小型的图像阅读器。

关键词： Flash作品阅读器图像

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背阔肌皮瓣乳房再造术设计算法（摘要）

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中国美容整形外科杂志 2011年第3期22卷 I0020-I0020页

作者： Alan J. Durkin Yvonne N. Pierpont Shitel Patel M. Lance Tavana M. Georgina Uberti wyatt G. Payne David J. Smith paul D. Smith 魏峰(译) 高景恒(译) 张晨(译) 美国佛罗里达州南佛罗里达大学外科部整形外科中心松树湾退伍军人医疗事务部组织再生与整复中心佛罗里达大学尚兹医院整形外科《中国美容整形外科杂志》编辑部大连大学附属新华医院整形外科

目的肿瘤外科医师对手术技术的改进，使乳腺癌切除术后残留的乳房形态得到改善。以背阔肌皮瓣行乳房再造术效果肯定。本研究将评估不同类型的用于乳房再造术的背阔肌皮瓣的皮岛设计，寻找一种广泛用于修复各种乳腺癌切除术后缺损的背阔... 详细信息

目的肿瘤外科医师对手术技术的改进，使乳腺癌切除术后残留的乳房形态得到改善。以背阔肌皮瓣行乳房再造术效果肯定。本研究将评估不同类型的用于乳房再造术的背阔肌皮瓣的皮岛设计，寻找一种广泛用于修复各种乳腺癌切除术后缺损的背阔肌皮瓣设计算法设计原则。方法本研究回顾性分析自2001年2月至2005年4月收治的单侧或双侧乳腺癌切除术后背阔肌皮瓣乳房再造患者的临床资料。在掌握如下情况的前提下进行再造手术：①术前组织是否经放疗处理；②体质量指数是否〉30；③当前有无吸烟习惯；④之前是否做过腹腔骨盆手术；⑤患者的要求。并对患者依据缺损形式进行分组：①乳房下皱襞完整但皮肤量不足；②乳房下皱襞完整且皮肤量足够；③乳房下皱襞缺损伴或不伴皮肤量不足。根据缺损的不同。设计不同的皮岛来优化手术效果，并减少供区瘢痕形成。结果本组患者54例，共应用64块背阔肌皮瓣行乳房再造术。各组间术后外观美学效果及供区瘢痕形成情况不同。结论本研究制定了一种背阔肌皮瓣乳房再造术的相关算法设计模式。通过对乳腺癌切除术后缺损的准确评价，在利用背阔肌皮瓣进行乳房再造术时，可定向切取皮岛，减少供区瘢痕形成，提高美学效果，获得疗效持久、外观自然、美观的乳房。

关键词：乳房再造术背阔肌皮瓣皮岛设计算法双侧乳腺癌乳房下皱襞术后缺损摘要

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