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Gateway技术构建盐和干旱胁迫下水稻根系混合cDNA文库及其质量鉴定

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应用与环境生物学报 2014年第2期20卷 291-294页

作者：彭晓珏刘瑢阳菁丁霞王芳李阳生蔡耀辉南昌大学生命科学与食品工程学院/分子生物学与基因工程实验室南昌330031 武汉大学生命科学学院/植物遗传发育学教育部重点实验室武汉430072 杂交水稻国家重点实验武汉430072 江西省超级水稻研究发展中心南昌330200

为研究水稻非生物胁迫响应信号转导的网络途径,揭示水稻抗逆的分子机制,以NaCl胁迫、干旱胁迫处理及正常生长的水稻根系为材料,采用Gateway技术构建了水稻根系受盐和干旱诱导的混合cDNA文库.cDNA文库质量分析表明,未经扩增的原始文库容... 详细信息

为研究水稻非生物胁迫响应信号转导的网络途径,揭示水稻抗逆的分子机制,以NaCl胁迫、干旱胁迫处理及正常生长的水稻根系为材料,采用Gateway技术构建了水稻根系受盐和干旱诱导的混合cDNA文库.cDNA文库质量分析表明,未经扩增的原始文库容量为1.5×106 cfu,插入片段大小主要为1 kb左右,重组率为100%.文库随机挑选克隆测序,结果显示插入序列完整性良好,文库中包含水解酶基因、逆境响应蛋白基因、氧化还原酶基因和富含甘氨酸的RNA结合蛋白质基因等.因此,本研究构建的盐和干旱诱导的水稻根系混合cDNA文库符合高质量文库的标准,可以用于进一步开展相关基因的克隆及功能研究.

关键词：水稻抗逆 Gateway cDNA文库盐胁迫干旱胁迫

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水稻窄叶突变体相关基因的研究进展

分子植物育种 2017年第12期15卷 4879-4887页

作者：潘境涛谢红卫钱明娟徐斌蔡耀辉彭晓珏南昌大学生命科学学院江西省分子生物学与基因工程重点实验室南昌330031 江西省超级水稻研究发展中心水稻国家工程实验室南昌330200

片是作物光合作用与呼吸作用的重要场所,同时也作为蒸腾作用的主要调节器官。其形态构成与转录因子、激素以及小RNA相关并受其调控,深入探究叶片发育的网络调控机理对高光效育种工作具有非常重要的意义。窄叶性状是叶形态的一种,在超高... 详细信息

片是作物光合作用与呼吸作用的重要场所,同时也作为蒸腾作用的主要调节器官。其形态构成与转录因子、激素以及小RNA相关并受其调控,深入探究叶片发育的网络调控机理对高光效育种工作具有非常重要的意义。窄叶性状是叶形态的一种,在超高产株型育种中偏向选择窄叶,窄叶是株型构成非常重要方面,而株型与作物产量又密不可分,因此水稻窄叶作为一种叶型农艺性状,在株型育种中具有非常重要的应用价值。本研究归纳总结了至今为止已定位克隆的水稻窄叶突变体相关基因及其调控机理,并进一步探讨窄叶突变体基因的一因多效型,分析其在育种中的应用,以期为水稻株型育种中叶型性状的选择提供理论依据。

关键词：水稻株型育种窄叶突变体

粳稻95122A和95122B悬浮系建立及抗氧化性分析

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基因组学与应用生物学 2015年第12期34卷 2757-2762页

作者：黄金秋胡明华廖鹏飞欧阳解秀彭晓珏李绍波南昌大学生命科学学院南昌330031

细胞质雄性不育是杂种优势利用的基石,揭示其发生机理将有助于水稻杂种优势的利用。本研究选取已有配组品种的包台型粳稻细胞质雄性不育系95122A及其保持系95122B为材料,基于MS(N6)培养基主成分建立了其状态良好的悬浮细胞系,发现95122... 详细信息

细胞质雄性不育是杂种优势利用的基石,揭示其发生机理将有助于水稻杂种优势的利用。本研究选取已有配组品种的包台型粳稻细胞质雄性不育系95122A及其保持系95122B为材料,基于MS(N6)培养基主成分建立了其状态良好的悬浮细胞系,发现95122B悬浮细胞活力和生长势在各个生长阶段均比95122A的强,两种悬浮细胞从第3~6天进入指数生长期。用不同浓度的H2O2处理第4天活力较强的两种悬浮细胞,对其4种抗氧化酶即过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)活性进行检测时发现,两种悬浮细胞中的4种酶活性均是低H2O2浓度时先略有升高,随后降低,但升高和降低的程度及对应的H2O2浓度依酶的种类不同有所差异,而在相同的情况下,95122B悬浮细胞比95122A悬浮细胞具有较高的抗氧化酶活性,显示95122B具有较95122A强的H2O2抗性。初步确定了适于95122A和95122B悬浮细胞逆境处理的H2O2浓度为10~20 mmol/L。为进一步研究粳稻95122A不育发生的分子遗传机理奠定基础,也为粳型细胞质雄性不育系应用于生产实践提供有力的理论依据。

关键词：细胞质雄性不育抗氧化作用悬浮细胞粳稻

基于CRISPR/Cas9技术创建OssHSP家族基因突变体

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分子植物育种 2019年第19期17卷 6343-6349页

作者：陈亚新陈秋生陈洁张月婷杨璐帅艳玲彭晓珏南昌大学生命科学学院江西省分子生物学与基因工程重点实验室

分子伴侣是在生物大分子的折叠、组装、转运及降解等过程中起协助作用,但自身并不发生任何变化的一大类广泛存在于生物体内的蛋白质分子。小热激蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类在抵抗逆境胁迫过程中扮演重要角色的蛋白质分... 详细信息

分子伴侣是在生物大分子的折叠、组装、转运及降解等过程中起协助作用,但自身并不发生任何变化的一大类广泛存在于生物体内的蛋白质分子。小热激蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类在抵抗逆境胁迫过程中扮演重要角色的蛋白质分子。本研究在OssHSP基因外显子区域设计了带有PAM序列的靶位点,利用PCR扩增获得OssHSP基因sgRNA表达盒,成功构建了CRISPR/Cas9敲除载体;利用根癌农杆菌介导的遗传转化获得2个OssHSP基因(Os01g0136100和Os02g0782500)的T0代CRISPR转基因植株;通过PCR扩增和测序确定突变类型,获得48株不同突变类型的OssHSP1突变单株,6株不同突变类型的OssHSP2突变单株,6株不同突变类型的OssHSP1和OssHSP2双突变单株,为进一步开展OssHSP基因功能的研究提供了材料。

关键词：分子伴侣 OssHSP家族基因 CRISPR/Cas9技术

肠道微生态失调对小鼠海马星形胶质细胞的影响

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南昌大学学报（理科版） 2018年第2期42卷 147-152页

作者：刘聪吴雨宸毛立辉韦海波毛心怡袁建赣郑雄敏彭晓珏丁霞南昌大学生命科学学院与生命科学研究院江西南昌330031

精神分裂症是一种多病因的精神疾病。流行病学研究表明,肠道微生物与精神分裂症发生有关。繁育了精神分裂症易感基因Nrg1基因敲除(Nrg1^(-/-))小鼠,用抗生素破坏野生型和(Nrg1^(-/-))小鼠的肠道微生物系统,通过观察肠道微生态失调对小... 详细信息

精神分裂症是一种多病因的精神疾病。流行病学研究表明,肠道微生物与精神分裂症发生有关。繁育了精神分裂症易感基因Nrg1基因敲除(Nrg1^(-/-))小鼠,用抗生素破坏野生型和(Nrg1^(-/-))小鼠的肠道微生物系统,通过观察肠道微生态失调对小鼠大脑海马区星形胶质细胞的影响,来研究肠道微生态与精神分裂症发生的关系。将20d的C57BL/6雄性小鼠随机分成4组:对照组、肠道微生态失调组、易感基因Nrg1/敲除组、肠道微生态失调与易感基因互作组,每组12只。处理30d后,采用免疫荧光技术定量分析各组小鼠大脑海马区星形胶质细胞的分布与形态。结果显示,肠道微生态失调和敲除易感基因Nrg1都能激活星形胶质细胞,细胞膨大(P<0.05),分支增多(P<0.01)。在一定程度上,肠道微生态失调与易感基因Nrg1交互作用加剧星形胶质细胞的活化(P<0.05)。

关键词：精神分裂症肠道微生物星形胶质细胞海马

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ICP-MS法测定医用口罩中可萃取重金属

印染 2023年第5期49卷 62-64,82页

作者：覃冬杰张鹏甘仕黄筱珏覃华亮柳州市质量检验检测研究中心广西柳州545006 广西壮族自治区花红药业集团股份公司广西柳州545007

为测定医用口罩中12种可萃取重金属含量,样品采用酸性汗液进行萃取,内标法定量,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)进行测定。结果表明,各重金属元素在相应的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9986~0.9999,检出限为0.0001~0.002 mg/... 详细信息

为测定医用口罩中12种可萃取重金属含量,样品采用酸性汗液进行萃取,内标法定量,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)进行测定。结果表明,各重金属元素在相应的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9986~0.9999,检出限为0.0001~0.002 mg/kg,精密度RSD为2.6%~5.1%,回收率为80.8%~95.8%。该方法准确、可靠、灵敏度高,适用于医用口罩中12种可萃取重金属的测定。

关键词：测试重金属可萃取 ICP-MS 医用口罩