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Improvement of transfection with reprogramming factors in urine-derived cells

BIOcELL 2020年第3期44卷 401-409页

作者： OLIVIA A.ROBLES-RODRÍGUEZ MARÍA J.LOERA-ARIAS JOSÉJ.PÉREZ-TRUJILLO ARNULFO VILLANUEVA-OLIVO ERNESTO PIcÓN-GALINDO LAURA VILLARREAL-MARTÍNEZ ADOLFO SOTO-DOMÍNGUEZ HUMBERTO RODRÍGUEZROcHA ARAcELY GARcÍA-GARcÍA odila saucedo-cárdenas ROBERTO MONTES DE OcA-LUNA Facultad de Medicina Departamento de HistologíaUniversidad Autónoma de Nuevo LeónMonterreyC.P.64460México Hospital Universitario“Dr.JoséEleuterio González González” Servicio de HematologíaUniversidad Autónoma de Nuevo LeónMonterreyC.P.64460México centro de Investigación Biomédica del Noreste Departamento de Genética MolecularInstituto Mexicano del Seguro SocialMonterreyC.P.64720México

Human-induced pluripotent stem cells(iPScs)are an accessible source of adult-derived,patient-specific pluripotent stem cells for use in basic research,drug discovery,disease modeling,and stem cell *** the accessibility of methods to obtain iPScs regardless of the cell source can enhance their clinical ***,our purpose is to report a simple protocol to obtain iPS-like cells from urine-derived renal epithelial cells(REcs)using different extracellular matrices and transfection *** this study,we began by culturing urine-derived cells from healthy donors to establish a primary culture of renal epithelial cells,followed by their ***,we generated iPS-like cells by transfecting renal epithelial cells(REcs)with vectors expressing Oct4,Sox2,L-Myc,Lin-28,and Klf4,and we compared the efficacy of different extracellular matrices and transfection *** resultant iPS-like cells showed a human embryonic stem cell-like morphology and expressed the specific pluripotency markers Oct3/4,Nanog,Lin28,and *** concluded that Lipofectamine Stem cell transfection reagent is more effective than FuGENE in obtaining iPS-like cells under the conditions ***,the three matrices are similar in their efficiency of obtaining iPS-like *** report provides an experimental protocol for obtaining and generating iPS-like cells from urine samples for further cell therapy research on different human diseases.

关键词： Reprogramming factors iPScs Renal epithelial cells Extracellular matrix Transfection reagent

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