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猪血清淀粉样蛋白3分子SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

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中国动物传染病学报 2017年第3期25卷 80-86页

作者：郇贝丽刘珂马改妮魏建超邵东华李蓓蓓邱亚峰石元元马志永中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

分别根据猪血清淀粉样蛋白3(serum amyloid A3,SAA3)基因序列以及猪三磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因全长序列设计特异性扩增引物,进行PCR扩增,并将PCR扩增片段连接至相应载体上构建重组质粒。... 详细信息

分别根据猪血清淀粉样蛋白3(serum amyloid A3,SAA3)基因序列以及猪三磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因全长序列设计特异性扩增引物,进行PCR扩增,并将PCR扩增片段连接至相应载体上构建重组质粒。两个重组质粒经测序鉴定和纯化后,倍比稀释作为标准曲线样品,用于实时荧光定量PCR中SAA3、GAPDH标准曲线的制备,并进行反应的灵敏性、特异性和重复性检测。结果显示,标准曲线线性关系R2均在0.98以上;特异性检测显示该引物可以特异性检测到猪SAA3、GAPDH扩增曲线;组内和组间变异系数均小于5%,说明本研究成功建立猪SAA3的荧光定量PCR检测方法。运用建立的荧光定量RT-PCR对正常以及感染猪繁殖与呼吸综合征病毒的肺泡巨噬细胞和猪组织进行检测,可检测到猪SAA3的表达,正常组与接毒组之间显示出明显的表达差异。本研究初步建立了检测猪SAA3基因的SYBR Green荧光定量RT-PCR的方法,为后续对猪传染性疾病与猪SAA3之间相互关系的研究提供了一种特异、灵敏的检测方法。

关键词：猪血清淀粉样蛋白3 SYBR Green Ⅰ 实时荧光定量PCR

老年髋部骨折患者合并骨折的临床特征及其危险因素分析

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中国矫形外科杂志 2019年第22期27卷 2028-2032页

作者：芮云峰马彬彬倪明鲁攀攀谢添李荥娟邹继红陈辉王宸东南大学附属中大医院骨科南京210009 东南大学附属中大医院老年髋部骨折多学科综合诊疗协作组(MDT) 南京210009 东南大学附属中大医院创伤救治中心南京210009 东南大学附属中大医院老年科南京210009 中国人民解放军总医院第一医学中心骨科北京100853

[目的]回顾性分析老年髋部骨折患者合并骨折的临床特征及其危险因素。[方法]通过电子病历系统收集2005年1月~2014年12月本院诊治的老年髋部骨折患者的临床资料,共1 289例纳入本研究。记录包括年龄、性别、合并内科疾病情况、骨折类型和... 详细信息

[目的]回顾性分析老年髋部骨折患者合并骨折的临床特征及其危险因素。[方法]通过电子病历系统收集2005年1月~2014年12月本院诊治的老年髋部骨折患者的临床资料,共1 289例纳入本研究。记录包括年龄、性别、合并内科疾病情况、骨折类型和是否合并其他部位骨折等,行描述性统计分析,采用单因素和多因素分析寻找老年髋部骨折患者合并骨折的危险因素。[结果] 1 289例老年髋部骨折患者中合并骨折者107例,占8.30%。尺桡骨、肱骨和胸腰椎体是老年髋部骨折常见合并骨折部位。女性、股骨颈骨折、合并高血压和神经系统疾病的老年患者合并骨折比例显著高于其他患者(P<0.05)。逻辑回归分析结果显示,高龄(OR=1.306,P<0.05)、女性(OR=2.255,P<0.05)、股骨颈骨折(OR=2.146,P<0.05)和伴有高血压(OR=2.197,P<0.05)是老年髋部骨折患者合并骨折的显著危险因素。[结论]老年髋部骨折患者常合并其他部位骨折,常见的骨折部位为尺桡骨、肱骨和胸腰椎体。老龄、女性、骨折类型和合并高血压是老年髋部骨折患者合并骨折的危险因素。

关键词：髋部骨折老年人合并骨折危险因素

LaBO_3(B=ni,Mn,Fe)/石墨烯复合薄膜的制备及光催化性能

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中国有色金属学报 2014年第1期24卷 152-159页

作者：胡婕王丽娜马嘉华黄浩燕山大学环境与化学工程学院河北省应用化学重点实验室秦皇岛066004 燕山大学亚稳材料制备技术与科学国家重点实验室秦皇岛066004

为提高纳米钙钛矿型氧化物薄膜的光催化性能,应用改进的Hummer法制备出薄层石墨烯材料,并采用溶胶-凝胶法结合旋转涂膜技术在玻璃上制备出石墨烯基LaBO3(B=ni,Mn,Fe)复合薄膜。利用XRD、FTIR、FESEM和TEM对薄膜样品的结构、晶粒尺寸及... 详细信息

为提高纳米钙钛矿型氧化物薄膜的光催化性能,应用改进的Hummer法制备出薄层石墨烯材料,并采用溶胶-凝胶法结合旋转涂膜技术在玻璃上制备出石墨烯基LaBO3(B=ni,Mn,Fe)复合薄膜。利用XRD、FTIR、FESEM和TEM对薄膜样品的结构、晶粒尺寸及微观形貌进行表征,利用显微拉曼光谱仪测量制备出的石墨烯和薄膜样品在激光功率为400 mW时位于100?3 000 cm-1之内的拉曼光谱。将该复合薄膜作为光催化剂,研究石墨烯用量、不同B位元素对该复合薄膜光催化活性的影响。结果表明:复合薄膜的光催化活性显著优于纯钙钛矿薄膜的光催化活性;当石墨烯悬浮液的浓度为0.1 g/L,ni作为B位阳离子时,该复合薄膜的光催化活性最好。

关键词：钙钛矿石墨烯复合薄膜光催化

金华体育中心体育场看台罩棚前端大拱管桁架施工技术

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施工技术 2012年第5期41卷 28-31页

作者：江涛孟壮志马文科倪英戈冯建峰陈利芳王伟力中天建设集团有限公司浙江金华321000 浙江中和建筑设计有限公司浙江绍兴312000 金华市建设工程质量监督站浙江金华321000 浙江致远建设工程咨询监理有限公司浙江金华321000

金华市体育中心体育场月牙形看台罩棚钢结构为双层曲面螺栓球网架与前端大拱相结合的形式,前端大拱和落地处局部采用管桁架,跨度大,高度高,工期紧,需要直接在现场拼装,精度控制要求高,施工困难。管桁架通过设置临时支撑架作为支撑点进... 详细信息

金华市体育中心体育场月牙形看台罩棚钢结构为双层曲面螺栓球网架与前端大拱相结合的形式,前端大拱和落地处局部采用管桁架,跨度大,高度高,工期紧,需要直接在现场拼装,精度控制要求高,施工困难。管桁架通过设置临时支撑架作为支撑点进行分段吊装、高空拼装、整体卸载等施工技术,圆满地完成了安装任务。

关键词：钢结构管桁架临时支撑安装定位卸载

杂质元素Si、Ca对YBa_2Cu_3O_(7-δ)超导性的影响

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无机材料学报 1991年第1期6卷 117-120页

作者：唐功本崔硕景陈久华马贤锋谢云芬师昌怀倪加缵中国科学院长春应用化学研究所

通过对含有 Si,Ca 等非稀土杂质的 YBa_2Cu_3O_(7-δ)氧化物超导体的 J_c,T_c测量、X 射线粉末衍射和扫描电镜等微结构分析、热重分析和热机械分析铜价态和氧含量的化学分析以及材料稳定性的测试等,发现杂质 Ca 有利于提高材料的 J_c,... 详细信息

通过对含有 Si,Ca 等非稀土杂质的 YBa_2Cu_3O_(7-δ)氧化物超导体的 J_c,T_c测量、X 射线粉末衍射和扫描电镜等微结构分析、热重分析和热机械分析铜价态和氧含量的化学分析以及材料稳定性的测试等,发现杂质 Ca 有利于提高材料的 J_c,增强其结构质点间的怍用力,降低材料在空气中的失氧量,提高稳定性;杂质Si 的作用则与 Ca 的作用相反。

关键词：超导体稳定性硅钙电流密度

高温对荷斯坦种公牛精液品质及精清生化指标的影响研究

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畜牧与兽医 2005年第11期37卷 10-12页

作者：李俊杰桑润滋倪俊卿赵驻军张军辉马亚宾河北农业大学动物科技学院河北保定071001 河北省畜牧良种服务中心河北石家庄050064

以荷斯坦种公牛为试验牛研究了高温对其精液品质和精清生化指标的影响。结果表明:(1)高温可造成种公牛精液品质显著下降。使原精活力、精子密度、活精子百分数和顶体完整率分别比春季下降3·13%(P<0·05)、34·8%(P<0·01)、15·0%(P<0... 详细信息

以荷斯坦种公牛为试验牛研究了高温对其精液品质和精清生化指标的影响。结果表明:(1)高温可造成种公牛精液品质显著下降。使原精活力、精子密度、活精子百分数和顶体完整率分别比春季下降3·13%(P<0·05)、34·8%(P<0·01)、15·0%(P<0·01)和17·8%(P<0·01),精子畸形率比春季上升25·5%(P<0·01)。(2)夏季荷斯坦种公牛精清睾酮含量仅为4·31pg/mL,极显著低于非高温季节(P<0·01)。(3)高温环境使得荷斯坦种公牛精清钾、钙、镁处于最低水平(P<0·01),精清碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)处于最高水平(P<0·01),使精清钠由春季至夏季呈显著下降趋势。

关键词：高温荷斯坦种公牛精液品质精清生化指标

DTPA浸提-电感耦合等离子体质谱法测定石灰性土壤中的有效态钴和有效态铅

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岩矿测试 2012年第6期31卷 950-953页

作者：韩张雄熊英王龙山马娅妮李力争王晓雁刘琦陕西省地质矿产实验研究所陕西西安710054

传统的原子吸收光谱和分光光度法测定土壤有效态钴和有效态铅,操作繁琐,且分析效率低,不适用于大量样品的测定;利用先进仪器测定虽然提高了分析效率,但由于浸提剂的浓度影响仪器灵敏度,测定结果不准确。本文用DTPA溶液浸提,电感耦合等... 详细信息

传统的原子吸收光谱和分光光度法测定土壤有效态钴和有效态铅,操作繁琐,且分析效率低,不适用于大量样品的测定;利用先进仪器测定虽然提高了分析效率,但由于浸提剂的浓度影响仪器灵敏度,测定结果不准确。本文用DTPA溶液浸提,电感耦合等离子体质谱法测定石灰性土壤中有效态钴和有效态铅的含量。稀释倍数实验表明,浸提液稀释2倍时,石灰性土壤国家标准物质的测定值与标准值基本一致;稀释5倍或10倍时,测定值较标准值偏高;不稀释时,由于浸提液的浓度较高,受到基体干扰,测定值偏低。本方法确定对浸提液稀释2倍进行实验,有效态钴的检出限为0.0130μg/g,有效态铅的检出限为0.0142μg/g,精密度(RSD,n=9)小于8%。用土壤国家标准物质进行验证,测定值与标准值的相对误差小于9%(n=9),满足了DD 2005-03对土壤样品中有效态钴和有效态铅的测定要求。

关键词：石灰性土壤有效态钴有效态铅浸提液稀释电感耦合等离子体质谱法

蛇床子素对体外培养大鼠股骨组织吸收的抑制作用

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中国骨伤 2015年第9期28卷 832-837页

作者：周建任雪梅马小妮高玉海闫丽娟石文贵陈克明中国人民解放军区兰州军区兰州总医院骨科研究所甘肃兰州730050 中国人民解放军区兰州军区兰州总医院输血科甘肃兰州730050

目的 :研究蛇床子素(Osthole,OS)对体外培养股骨组织(骨干和骨骺端)吸收活性的影响。方法 :取(80±5)g雄性SD大鼠6只,体外分离培养大鼠股骨组织的骨干和骨骺端,随机分为对照组、雌二醇组(estradiol,E)和蛇床子素处理组。同时在股骨组织... 详细信息

目的 :研究蛇床子素(Osthole,OS)对体外培养股骨组织(骨干和骨骺端)吸收活性的影响。方法 :取(80±5)g雄性SD大鼠6只,体外分离培养大鼠股骨组织的骨干和骨骺端,随机分为对照组、雌二醇组(estradiol,E)和蛇床子素处理组。同时在股骨组织分离培养48 h后采用终浓度为1×10-5mol/L的蛇床子素和1×10-8mol/L雌二醇对体外培养骨干和骨骺端进行处理;分别在药物处理后的第3、6、9、12天后测定抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,Str ACP)活性、培养基中葡萄糖(Glucose,Glu)、乳酸(Lactic acid,La)的含量、Real-Time RT-PCR Str ACP、集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,MCSF)、组织激酶K(Cathepsin K,CTSK)m RNA的表达水平。结果:1×10-5mol/L蛇床子素组碱性磷酸酶(ALP)活性为2226,1×10-8 mol/L雌二醇组ALP活性为2498;与对照组比较1×10-5mol/L蛇床子素和1×10-8mol/L雌二醇组在加药处理后的第6、9和12天显著抑制Str ACP酶活性(P<0.05);1×10-5mol/L蛇床子素处理体外培养大鼠骨骺端和骨干组织的第3、6、9天后显著增加培养基中乳酸含量(P<0.05),并显著减少培养基中葡萄糖的含量(P<0.05)。与对照组比较,1×10-5mol/L的蛇床子素处理体外培养大鼠股骨组织后的第6和9天蛇床子素能显著抑制Str ACP,MCSF,CTSK m RNA的表达水平(P<0.05)。结论 :蛇床子素抑制体外培养大鼠股骨组织的骨骺端和骨干吸收活性同时可提高营养代谢水平。

关键词：蛇床子素股骨骨和骨组织抗酒石酸酸性磷酸酶

应用生物配体模型评价海洋沉积物重金属毒性的研究进展

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海洋环境科学 2012年第5期31卷 758-764页

作者：李力马德毅国家海洋局第一海洋研究所山东青岛266061

海洋沉积物中金属毒性的判定一直是较为复杂的科学问题。近年来较多的研究表明,沉积物中金属的毒性和生物可利用性与其总含量无关,而与其存在形态密切相关。沉积物生物配体模型(s-BLM)是建立在较新的科研成果上用以判断沉积物中金属毒... 详细信息

海洋沉积物中金属毒性的判定一直是较为复杂的科学问题。近年来较多的研究表明,沉积物中金属的毒性和生物可利用性与其总含量无关,而与其存在形态密切相关。沉积物生物配体模型(s-BLM)是建立在较新的科研成果上用以判断沉积物中金属毒性的一个综合模型。s-BLM主要应用于有氧环境下,在测定活性金属、硫化物、有机碳的基础上,结合间隙水中的化学成分来计算多种金属的毒性阈值。s-BLM与以往应用于厌氧环境下的酸可挥发性硫化物/同步萃取金属(AVS/SEM)模型形成互补,从而能够全面系统的判断沉积物中的多种重金属(Cu、Pb、Zn、ni、Cd、Ag)的生物毒性。本文全面介绍了s-BLM的由来和构建,重点探讨了其应用、研究进展及局限性。目前,该模型在国际上已受到广泛关注和应用,但我国在该方面的研究尚属空白。类似模型的研究和发展对于更科学的制定沉积物环境质量标准有重要意义。

关键词：沉积物重金属生物毒性生物配体模型