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Identification of a chitinase from the hepatopancreas of Chinese black sleeper(Bostrychus sinensis)

Acta Oceanologica Sinica 2021年第6期40卷 50-60页

作者： Yulei Chen Zhipeng Tao Minghui Zhang Lechang Sun Guangming Liu minjie cao College of Food and Biological Engineering Jimei UniversityXiamen 361021China Fujian Collaborative Innovation Center for Exploitation and Utilization of Marine Biological Resources Xiamen 361102China

Chinese black sleeper(Bostrychus sinensis)is a fish that lives both in seawater and freshwater,feeds on crustaceans,aquatic insects and occasionally shellfish.The existence of digestive enzyme in viscera to act on chitinous exoskeleton of the prey is of interest.In this study,a chitinase was purified to homogeneity using ammonium sulfate precipitation,DEAE-Sephacel ion exchange,Sephacryl S-200 HR and Superdex 200 gel filtration columns.The purified protein presents a molecular mass of 58 kDa as determined by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)and results in a single band on native PAGE.According to peptide mass fingerprinting,two peptides containing a total of 20 amino acid residues,were 95%identical to a chitinase from yellow perch(Perca flavescens)and 100%identical to the chitinase from greater amberjack(Seriola dumerili).The purified chitinase showed optimum activity at pH 6.0,and was stable at acidic conditions and temperature below 55℃.The enzymatic activity was quite stable in the presence of NaCl,even at 1 mol/L.The chitinase was capable of degrading chitosan into low molecular mass chitooligosaccharides(COS)with sizes in a range of 200-700 Da,and the circular dichroism profile of the COS greatly differed from native chitosan.Full-length cDNA encoding the present chitinase was cloned and the transcript levels of chitinase in various tissues were determined by quantitative real-time PCR.The results showed that the transcript level of chitinase was highest in esophagus and hepatopancreas.

关键词： Bostrychus sinensis chitinase purification characterization molecular cloning chitosan

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Successive digestion of tilapia collagen by serine proteinase and proline specific endopeptidase to produce novel angiotensin l-converting enzyme inhibitory peptides

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Marine Life Science & Technology 2020年第3期2卷 268-278页

作者： Xin Hua Lechang Sun Chan Zhong Qiang Wu Panpan Xiao Asami Yoshida Guangming Liu minjie cao College of Food and Biological Engineering Jimei UniversityXiamen 361021China Collaborative Innovation Center of Marine Food Deep Processing Dalian Polytechnic UniversityDalian 116034China Department of Biological and Chemical Engineering Shaoyang UniversityShaoyang 422000China Faculty of Fisheries Nagasaki UniversityNagasaki 852-8521Japan

Serine proteinase,purified from the hepatopancreas of Pacific white shrimp(Litopenaeus vannamei), was used to hydrolyze acid solubilized collagen(ASC)isolated from Nile tilapia(Oreochromis sp.)skin to produce angiotensin I-converting enzyme(ACE)inhibitory peptides(ACEIPs).A series of column chromatography assays were used to separate the ACEIPs.A peptide,NPARTCR,was isolated as it exhibited high ACE inhibition potential.Further digestion of this peptide by a proline specific endopeptidase(PSEP),produced a pentapeptide ARTCR with ACE inhibitory activity(IC_(50))of 77.0 pmol/L.Both NPARTCR and ARTCR inhibited ACE in a non-competitive manner.An in vivo study in rats demonstrated that ARTCR has ACE inhibitory activity via lowering systolic blood pressure in spontaneously hypertensive rats(SHRs).These results suggest that processing by-products from shrimp and tilapia are ideal raw materials for the production of serine proteinase and collagen,respectively.Serine proteinase and collagen are both ideal raw materials that can be used to derive ACE inhibitory active peptides against hypertension.

关键词： Serine proteinase Purification Collagen ACE inhibitory peptides Hypertension Lowering blood pressure

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不同干燥方式对低盐腌制鲍鱼复水及品质特性的影响

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食品工业科技 2024年第10期45卷 57-65页

作者：王舒娴杜瀚林端权翁凌曹敏杰孙乐常集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 爱尔兰农业部农业与食品发展局Teagasc食品研究中心爱尔兰科克999014 水产品深加工技术国家地方联合工程中心福建厦门361021 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心大连工业大学辽宁大连116034

为研究不同干燥方式对低盐腌制鲍鱼复水品质的影响,本研究采用真空冷冻干燥、冷风干燥与热风干燥对其进行干燥处理,研究其复水过程的质量体积和复水率,并通过低场核磁共振(low field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)和磁共振成像(ma... 详细信息

为研究不同干燥方式对低盐腌制鲍鱼复水品质的影响,本研究采用真空冷冻干燥、冷风干燥与热风干燥对其进行干燥处理,研究其复水过程的质量体积和复水率,并通过低场核磁共振(low field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)和磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)研究复水过程的水分分布以及复水后的色差、质构、组织形态、游离氨基酸等变化情况。结果表明,在72 h时真空冷冻干鲍的复水率为278.73%,显著高于冷风干鲍和热风干鲍的复水率(P<0.05)。由LF-NMR和MRI结果分析得出,不易流动水和自由水含量是三种干鲍水分含量增加的主要因素。真空冷冻干鲍、冷风干燥和热风干鲍分别在72、48和24 h时复水完成。不同的干燥方式影响复水后的质构,结果显示,三种干燥方式的鲍鱼样品硬度与咀嚼性均有显著差异(P<0.05),真空冷冻干燥鲍鱼复水后硬度和咀嚼性最低,分别为954.01和708.59 g;热风干燥鲍鱼复水后硬度与咀嚼性最高,分别为1230.14和920.02 g。组织学染色与扫描电镜结果显示,真空冷冻干鲍的肌肉组织为较疏松的多孔结构;冷风干鲍和热风干鲍的组织为较细长和致密的结构。综上,真空冷冻干燥鲍鱼的复水率最高,硬度和咀嚼性最低,口感最好,但滋味不及热风干燥鲍鱼。本研究结果可为了解不同干燥方法对低盐腌制鲍鱼产品品质的影响提供理论参考。

关键词：鲍鱼复水品质特性干燥方式

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水产品过敏原及其检测技术概述

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中国食品学报 2024年第2期24卷 454-466页

作者：刘红陈一瑜刘庆梅张凌晶曹敏杰刘光明集美大学海洋食品与生物工程学院、厦门市海洋功能食品重点实验室、福建省海洋功能食品工程技术研究中心福建厦门361021 华侨大学材料科学与工程学院福建厦门361009

水产品因鲜美的味道和丰富的营养而深受消费者青睐。水产品属于联合国粮农组织和世界卫生组织认定的过敏食物,其在加工、运输、贮藏过程中有可能受到外来过敏原的污染,由此引起的食品安全问题日益严峻,严重制约了行业的发展。明确水产... 详细信息

水产品因鲜美的味道和丰富的营养而深受消费者青睐。水产品属于联合国粮农组织和世界卫生组织认定的过敏食物,其在加工、运输、贮藏过程中有可能受到外来过敏原的污染,由此引起的食品安全问题日益严峻,严重制约了行业的发展。明确水产食品中的过敏原,并利用适当的检测技术进行检测、监控,有利于预防水产食物过敏疾病的发生。本文概述水产食品中的主要过敏原,以及基于基因水平的核酸检测技术、蛋白水平的免疫检测技术及质谱检测技术研究进展,为丰富水产品过敏原及其检测手段提供理论依据。

关键词：水产品过敏原核酸检测免疫检测质谱检测

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复杂地质条件下智能化煤矿不安全行为综合防控研究

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技术与创新管理 2024年第1期45卷 81-86,118页

作者：华海洋曹卫何敏洁皖北煤电集团招贤矿业有限公司陕西宝鸡721599 中煤西安北斗科技有限公司陕西西安710100

不安全行为是引发煤矿事故的主要原因,不安全行为防控能有效遏制各类事故的发生。为了研究复杂地质条件下智能化煤矿不安全行为综合防控体系,首先确定了不安全行为影响因素,将影响因素按照个体、设备、环境、管理分为4大类,并细化为20... 详细信息

不安全行为是引发煤矿事故的主要原因,不安全行为防控能有效遏制各类事故的发生。为了研究复杂地质条件下智能化煤矿不安全行为综合防控体系,首先确定了不安全行为影响因素,将影响因素按照个体、设备、环境、管理分为4大类,并细化为20个影响因素。然后,运用熵权法查找了人、机、环、管防控的关键点。最后,建立了不安全行为综合防控体系,该体系以减少和杜绝不安全行为为主线,以“基层建设、基础建设、基本功建设”为基础,以不安全行为事前源头预防、事中观察控制、事后奖惩溯源矫正为措施,对不安全行为进行全方位、全过程综合防控。

关键词：智能化不安全行为影响因素防控

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Effects of zinc on χ-Fe_(5)C_(2) for carbon dioxide hydrogenation to olefins:Insights from experimental and density function theory calculations

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Chinese Journal of Chemical Engineering 2023年第2期54卷 206-214页

作者： Xianglin Liu minjie Xu Chenxi cao Zixu Yang Jing Xu State Key Laboratory of Chemical Engineering East China University of Science and TechnologyShanghai 200237China Maoming Branch R&D Institute SINOPECMaoming 525000China Key Laboratory of Smart Manufacturing in Energy Chemical Process Ministry of EducationEast China University of Science and TechnologyShanghai 200237China

Production of light olefins from CO_(2), the primary greenhouse gases, is of great importance to mitigate the adverse effects of CO_(2) emission on environment and to supply the value-added products from nonpetroleum resource. However, development of robust catalyst with controllable selectivity and stability remains a challenge. Herein, we report that Zn-promoted Fe catalyst can boost the stable and selective production of light olefins from CO_(2). Specifically, the Zn-promoted Fe exhibits a highly stable activity and olefin selectivity over 200 h time-on-stream compared to the unpromoted Fe catalyst, primarily owing to the preservation of active χ-Fe_(5)C_(2) phase. Structural characterizations of the spent catalysts suggest that Zn substantially regulates the content of iron carbide on the surface and suppresses the reoxidation of bulk iron carbide during the reaction. DFT calculations confirm that adsorption of surface carbon atoms and graphene-like carbonaceous species are not thermochemically favored on Zn-promoted Fe catalyst. Carbon deposition by CAC coupling reactions of two surface carbon atoms and dehydrogenation of CH intermediate are also inhibited. Furthermore, the effects of Zn on antioxidation of iron carbide were also investigated. Zn favored the hydrogenation of surface adsorbed oxygen atoms to H_(2)O and the desorption of H_(2)O, which reduces the possibility of surface carbide being oxidized by the chemisorbed oxygen.

关键词： Reaction engineering χ-Fe_(5)C_(2) Zn promoter Carbon dioxide Hydrogenation Density function theory

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On-off-on fluorescence detection for biomolecules by a fluorescent cage through host-guest complexation in water

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Chinese Chemical Letters 2022年第5期33卷 2459-2463页

作者： Honghong Duan Fan cao minjie Zhang Meng Gao Liping cao College of Chemistry and Materials Science Northwest UniversityXi’an 710069China National Engineering Research Center for Tissue Restoration and Reconstruction Key Laboratory of Biomedical Engineering of Guangdong ProvinceKey Laboratory of Biomedical Materials and Engineering of the Ministry of EducationInnovation Center for Tissue Restoration and ReconstructionSouth China University of TechnologyGuangzhou 510006China

Detection of nucleoside derivatives has paramount importance because they are the essential biomolec-ular units for all life.Herein,we report a host-guest approach by using a fluorescent tetraphenylethene-based octacationic cage as host and 8-hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid trisodium salt(HPTS)as guest and fluorescent indicator to form non-fluorescent 1:1:1 host-(endo-exo)guest complex in water.This new host-(endo-exo)guest complex can be successfully used for detecting nucleosides(e.g.,ATP and GTP),DNA(e.g.,sm-DNA),and antibiotics(e.g.,Penicillin G)with off-on fluorescence response via a competitive host-guest exchange with HPTS as exo-guest in water.Furthermore,this on-off-on fluorescent host-guest com-plex is also used for cell imaging based on ATP concentration in HeLa cells.Therefore,this study not only provides insight into the construction of a supramolecular probe with on-off-on fluorescence via host-guest complexation and exchange in solution,but also realizes a universal method for detecting and monitoring biomolecules.

关键词： Host-guest complexation Tetraphenylethene-based octacationic cage Nucleoside derivatives Fluorescence Cell imaging

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甘草黄酮A对低氧条件下胃癌细胞增殖和糖酵解的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 120-127页

作者：董焕成苏韫龚红霞曹旺杰袁敏捷刘永琦黄勇甘肃中医药大学基础医学院甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730000

目的:探讨低氧条件下甘草黄酮A对胃癌细胞增殖和糖酵解的影响。方法:筛选人胃癌AGS细胞予以5%O2低氧环境培养48 h,分为5组:常氧组、低氧组、甘草黄酮A高、中、低浓度组(100、50、25μmol·L^(-1))。细胞增殖与活性检测(CCK-8)法和克隆... 详细信息

目的:探讨低氧条件下甘草黄酮A对胃癌细胞增殖和糖酵解的影响。方法:筛选人胃癌AGS细胞予以5%O2低氧环境培养48 h,分为5组:常氧组、低氧组、甘草黄酮A高、中、低浓度组(100、50、25μmol·L^(-1))。细胞增殖与活性检测(CCK-8)法和克隆形成实验检测甘草黄酮A对低氧条件下AGS细胞增殖的影响;划痕实验检测细胞迁移情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测AGS细胞中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、丙酮酸激酶M2(PKM2)、己糖激酶Ⅱ(HK2)的蛋白及mRNA表达水平。试剂盒检测葡萄糖摄取和HK的活性的表达情况。结果:CCK-8法实验结果表明,与低氧组比较,24 h时,甘草黄酮A高、中浓度组AGS细胞的增殖率显著降低(P<0.01),48 h时,甘草黄酮A高、中、低浓度组AGS细胞的增殖率显著降低(P<0.01)。克隆形成实验结果表明,与常氧组比较,低氧组AGS细胞克隆形成数显著升高(P<0.01);与低氧组比较,甘草黄铜A高、中、低浓度组AGS细胞的克隆形成数显著降低(P<0.01)。划痕实验表明,与常氧组比较,低氧组的AGS细胞迁移的能力升高(P<0.01);与低氧组比较,甘草黄酮A高、中、低浓度组的AGS细胞各个时间段迁移细胞的能力显著降低(P<0.01)。Real-time PCR表明,与常氧组比较,低氧组GLUT1、LDHA、PKM2和HK2 mRNA明显升高(P<0.05,P<0.01);与低氧组比较,甘草黄酮A高浓度组GLUT1、LDHA、PKM2、HK2 mRNA,甘草黄酮A中浓度组GLUT1、LDHA、HK2 mRNA、甘草黄酮A低浓度组HK2 mRNA明显降低(P<0.05,P<0.01)。Western blot表明,与常氧组比较,低氧组HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和HK2蛋白的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与低氧组比较,甘草黄酮A高浓度组的HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和HK2蛋白的表达明显降低(P<0.05,P<0.01),甘草黄酮A中、低浓度的HK2蛋白的表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。试剂盒检测葡萄糖摄取及HK活性结果表明,与常氧组比较,低氧组葡萄糖的摄取和HK的含量表达升高(P<0.01),与低氧组比较,甘草黄酮A高浓度组葡萄糖的摄取和HK的含量表达及甘草黄酮A中浓度组HK的含量表达降低(P<0.01)。结论:甘草黄酮A可以抑制低氧条件下AGS细胞的增殖,其作用机制可能与抑制胃癌的糖酵解有关。

关键词：甘草黄酮A 胃癌低氧糖酵解增殖

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蓝圆鲹分离蛋白酶解产物的制备及其抗大米淀粉老化特性

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水产学报 2024年第4期48卷 376-390页

作者：孙乐常孙小舒林端权陈玉磊翁凌缪松曹敏杰集美大学海洋食品与生物工程学院集美大学水产品深加工技术国家地方联合工程研究中心大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心爱尔兰农业部农业与食品发展局Teagasc食品研究中心

为了进一步拓展海洋鱼类蛋白在食品中的应用，以蓝圆鲹分离蛋白为原料，利用酶解改性得到溶解性良好的蓝圆鲹分离蛋白酶解物(BPIH)，并研究其对大米淀粉(RS)短期老化的抑制作用。通过响应面法优化酶解改性工艺制备BPIH，并分别按RS的3%... 详细信息

为了进一步拓展海洋鱼类蛋白在食品中的应用，以蓝圆鲹分离蛋白为原料，利用酶解改性得到溶解性良好的蓝圆鲹分离蛋白酶解物(BPIH)，并研究其对大米淀粉(RS)短期老化的抑制作用。通过响应面法优化酶解改性工艺制备BPIH，并分别按RS的3%、6%、9%(质量百分比)进行添加。通过测定RS的凝沉性、动态黏弹性、热学特性以及微观结构分析评价BPIH的抗淀粉老化活性。结果显示，响应面法确定的最佳条件：酶底比5 000∶1 (U/g)、酶解时间3 h、料液比1.00∶3.81、酶解温度46.36℃、酶解pH 6.30，氮溶指数(NSI)实际值为85.41%±0.82%，与预测值86.37%接近。该酶解条件下BPIH水解度达到21.62%。BPIH中小于1 000 u的肽占79.94%，主要为小分子低聚寡肽。加入BPIH可以减弱RS的凝沉现象，降低RS在4℃保存过程中的储能模量(G')，显著降低老化后RS的峰值温度(Tp)和焓值(ΔHr)；加入BPIH的大米淀粉，老化后微观结构有较大孔洞，提升了淀粉糊化后保留内部水分的能力。研究表明，BPIH能够抑制RS在4℃保存期间凝胶网络和微晶结构的形成，同时可能限制了淀粉分子间的聚集，抑制或延缓RS的短期老化。本研究为蓝圆鲹分离蛋白酶解物在食品蛋白配料中的应用提供理论参考。

关键词：蓝圆鲹分离蛋白酶解淀粉短期老化

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葡萄风信子愈伤组织再生体系的构建

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西南林业大学学报（自然科学） 2024年第2期44卷 20-26页

作者：曹晓云田淑婷时春莹谢靖雯黎敏婕杜灵娟西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨凌712100

以葡萄风信子常见种亚美尼亚的花蕾和叶片作为外植体,开展不同因素对葡萄风信子愈伤组织诱导和植株再生影响的研究。结果表明:亚美尼亚的花蕾和叶片愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方为:MS+1.0 mg/L 2,4−D+0.1 mg/L 6−BA,其愈伤组织... 详细信息

以葡萄风信子常见种亚美尼亚的花蕾和叶片作为外植体,开展不同因素对葡萄风信子愈伤组织诱导和植株再生影响的研究。结果表明:亚美尼亚的花蕾和叶片愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方为:MS+1.0 mg/L 2,4−D+0.1 mg/L 6−BA,其愈伤组织诱导率为100%,且继代35 d后不同培养基上的花源和叶源愈伤组织的鲜质量无显著差异;液体培养和光照培养有利于愈伤组织细胞增殖,1 g亚美尼亚花源和叶源愈伤组织经液体培养4个继代周期后,平均鲜质量最高可达(10.36±1.13)g和(10.55±2.29)g,表明不同培养基配方对亚美尼亚花蕾和叶片愈伤组织细胞增殖无显著影响,且液体培养和光照培养均有利于愈伤组织的增殖;胚性和非胚性2种愈伤组织分别通过体细胞胚发生和器官发生2种途径可再生形成完整植株,再生率均为100%。

关键词：葡萄风信子愈伤组织液体培养器官发生体细胞胚发生

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