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利用流式监控高质量小鼠脾细胞的制备

国际检验医学杂志 2012年第2期33卷 136-137,140页

作者：李敏惠刘阳杨平郑静杨淑霞阳泰张露邹强李华成都医学院科研中心 610083 成都医学院生化教研室 610083 成都军区总医院肿瘤科

目的流式技术监控小鼠脾细胞裂解过程,在确保脾淋巴细胞高活力的同时,充分裂解其中的红细胞。方法以流式细胞术监控ACK和Tris-NH4Cl两种红细胞裂解液的裂解效果,通过细胞融合率判断淋巴细胞活力。结果结合FSC和PI荧光强度分析,在确保淋... 详细信息

目的流式技术监控小鼠脾细胞裂解过程,在确保脾淋巴细胞高活力的同时,充分裂解其中的红细胞。方法以流式细胞术监控ACK和Tris-NH4Cl两种红细胞裂解液的裂解效果,通过细胞融合率判断淋巴细胞活力。结果结合FSC和PI荧光强度分析,在确保淋巴细胞相对存活率大于或等于90%的前提下,ACK处理0.5～1min即可去除90%以上的红细胞,Tris-NH4Cl处理10min也可去除82%的红细胞,获得的淋巴细胞的融合效率为85%～90%。结论流式细胞术能够实时监控ACK和Tris-NH4Cl的裂解过程,获得高质量的脾淋巴细胞以适用于杂交瘤细胞的制备。

关键词：流式细胞术细胞融合红细胞裂解液

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社区个体化干预对精神分裂症的康复作用

上海精神医学 2008年第5期20卷 279-281页

作者：何敏慧陶梅芳章晖徐粉喜卞玉娟陆峥王祖承上海市普陀区精神卫生中心 200065 上海市精神卫生中心

目的探索社区个体化干预对精神分裂症康复效果的有效途径。方法采用随机抽样法,对50例精神分裂症患者进行为期二年的社区个体化干预,并设50例对照组。社会功能缺陷筛选量表、MorningSide康复状态量表评估患者的康复情况。结果干预组患... 详细信息

目的探索社区个体化干预对精神分裂症康复效果的有效途径。方法采用随机抽样法,对50例精神分裂症患者进行为期二年的社区个体化干预,并设50例对照组。社会功能缺陷筛选量表、MorningSide康复状态量表评估患者的康复情况。结果干预组患者复发8例,复发比例16%;对照组复发20例,复发比例40%,两组差异有统计学意义(χ2=53.65,P<0.01)。干预组患者的社会功能缺陷筛选量表总分和MorningSide康复状态量表各项分数也优于对照组。结论社区个体化干预对精神分裂症患者的康复是有效方法之一。

关键词：社区个体化干预精神分裂症康复

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误诊为肾癌的肾错构瘤1例报告

泌尿外科杂志（电子版） 2022年第3期14卷 63-66页

作者：李鹏林肖民辉肖龙徐万超卢方伟杨师卫昆明理工大学附属医院泌尿外科昆明650032 云南省第一人民医院泌尿外科昆明650032

回顾性分析了2021年在昆明理工大学附属医院泌尿外科就诊的1例误诊为肾癌的肾错构瘤患者诊疗经过,并复习相关文献。对于不典型肾错构瘤,除了传统B超、CT或MRI外,还可以借助于肾动脉造影、超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)... 详细信息

回顾性分析了2021年在昆明理工大学附属医院泌尿外科就诊的1例误诊为肾癌的肾错构瘤患者诊疗经过,并复习相关文献。对于不典型肾错构瘤,除了传统B超、CT或MRI外,还可以借助于肾动脉造影、超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)、CT纹理分析(CT texture analysis,CTTA)或磁共振纹理分析(MR texture analysis,MRTA)进行鉴别,术中快速冰冻检查也是一种不错的选择。肾错构瘤与肾癌的鉴别至关重要,有助于减少误诊率及不必要的手术。

关键词：肾错构瘤肾癌肾脏切除术

不同消解方法对电感耦合等离子体质谱法检测PM_(2.5)中金属元素的影响

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分析仪器 2023年第4期 76-81页

作者：张敏会连中宇徐瑞吴珺玮冯晓青杨鹏飞杨学艺王露淮安市疾病预防控制中心淮安223001 江苏护理职业学院淮安223001

目的:比较不同消解方法对电感耦合等离子体质谱法检测PM_(2.5)中主要金属元素的影响。方法:分别采用水浴超声提取法和微波消解法对空气PM_(2.5)滤膜样品进行消解,再用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定铅、铝、镉、砷、铬、镍、锑、... 详细信息

目的:比较不同消解方法对电感耦合等离子体质谱法检测PM_(2.5)中主要金属元素的影响。方法:分别采用水浴超声提取法和微波消解法对空气PM_(2.5)滤膜样品进行消解,再用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定铅、铝、镉、砷、铬、镍、锑、铍、锰、铊、硒、汞等12种金属元素的含量。结论:12种金属元素的相关系数都在0.999以上,精密度RSD在1.2﹪~2.2﹪,检测限在0.08~2.0μg·L~(-1),定量限在0.27~6.7μg·L^(-1)。通过比较两种消解方法对12种金属元素的回收率的影响,发现两种消解方法均具适用于PM_(2.5)滤膜样品中金属元素的消解。

关键词：水浴超声提取法微波消解法电感耦合等离子体质谱法 PM_(2.5) 金属元素

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诚信体系在黄酒企业的应用研究

酿酒 2023年第2期50卷 18-20页

作者：何洪城钱斌周建弟李智慧王兰赖敏辉秦连陈志明陆华英浙江古越龙山绍兴酒股份有限公司浙江绍兴312000 国家黄酒工程技术研究中心浙江绍兴312000

人无信不立,业无信不兴。诚信,已成为企业在激烈的市场竞争中立于不败之地的“特殊资本”,建立企业诚信管理体系已成为企业做大做强不可或缺的基石。对食品诚信体系小组、原辅料包装材料的描述、传统黄酒的生产工艺流程、诚信体系的特... 详细信息

人无信不立,业无信不兴。诚信,已成为企业在激烈的市场竞争中立于不败之地的“特殊资本”,建立企业诚信管理体系已成为企业做大做强不可或缺的基石。对食品诚信体系小组、原辅料包装材料的描述、传统黄酒的生产工艺流程、诚信体系的特征、诚信因素的识别、诚信因素的评价、诚信因素的控制、改进措施、体系的运行进行了详细分析。

关键词：黄酒企业诚信体系应用

小儿急性呼吸窘迫综合征前瞻性多中心临床流行病学研究

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中华急诊医学杂志 2005年第6期14卷 448-453页

作者：喻文亮陆铸今王莹施丽萍匡凤梧张剑晖谢敏慧钱素云樊寻梅孙波复旦大学附属儿科医院上海200032 上海第二医科大学附属上海儿童医学中心浙江大学医学院附属儿童医院重庆医科大学附属儿童医院广州儿童医院苏州大学附属儿童医院首都医科大学附属北京儿童医院复旦大学附属儿科医院呼吸与危重病实验室上海200032

目的调查我国儿科重症监护病房(PICU)急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的患病率、原发病、病死率及其影响因素。方法应用小儿危重病例评分和美国PICU入出院指南对2004年1月1日至2004年12月31日期间国内25家儿童医院及某些三级甲等医院的PICU中... 详细信息

目的调查我国儿科重症监护病房(PICU)急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的患病率、原发病、病死率及其影响因素。方法应用小儿危重病例评分和美国PICU入出院指南对2004年1月1日至2004年12月31日期间国内25家儿童医院及某些三级甲等医院的PICU中29d至14周岁院患儿进行危重病例筛选;应用1994年美欧标准对ARDS病例进行诊断。结果此次研究共有危重病例6839例,其中ARDS97例,病死61例,患病率1.42%,病死率、24h及24h后病死率分别为62.9%、23.7%、51.4%;占同期PICU病死率的13.1%,死亡相对危险性是PICU平均水平的9.3倍。肺炎(54.6%)、败血症(22.7%)为ARDS最常见的原发病。小于1岁起病者40例(41.2%),显著高于其他年龄段(P<0.01),ARDS起病距原发病出现时间为(75.6±53.0)h,其第25、50、75、90、95百分位分别为24、72、120、144、168h。起病距入PICU时间小于24h者59例,占60.8%。ARDS存活者人均住院费用为危重病例的4.5倍。结论小儿ARDS是PICU中的低患病率、高病死率、高疾病负担的危重症,起病原因多为肺炎和败血症。确诊24h内的ICU救治是提高ARDS存活率的关键之一。

关键词：流行病学研究急性呼吸窘迫综合征(ARDS) 小儿多中心前瞻性儿科重症监护病房 2004年1月 PICU 临床三级甲等医院危重病例评分人均住院费用病死率 1994年相对危险性 ICU救治 24h 患病率原发病病例筛选儿童医院

基于293T-Cas9细胞株构建ICP34.5基因敲除的oHSV-1/Ecfp病毒

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成都医学院学报 2024年第4期19卷 573-577页

作者：蒋明正万阳周意川蒲诗琪卢琳均李嘉琪张雨馨邱莉芸杨平李敏惠成都医学院基础医学院成都610500 成都医学院检验医学院成都610500 成都医学院生物科学与技术学院成都610500 成都医学院临床医学院成都610500 成都医学院科研实验中心成都610500

目的构建稳定表达Cas9蛋白的工具细胞,并利用短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)编辑技术改造1型单纯疱疹病毒(HSV-1),获得ICP34.5基因敲除的oHSV-1/Ecfp重组病毒。方法利用慢病毒包装体系,将包装Cas9表达质粒的病毒感染HEK293T细胞... 详细信息

目的构建稳定表达Cas9蛋白的工具细胞,并利用短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)编辑技术改造1型单纯疱疹病毒(HSV-1),获得ICP34.5基因敲除的oHSV-1/Ecfp重组病毒。方法利用慢病毒包装体系,将包装Cas9表达质粒的病毒感染HEK293T细胞,然后经嘌呤霉素筛选获得稳定表达Cas9蛋白的293T-Cas9细胞株,通过聚合酶链式反应(PCR)及蛋白质免疫印迹技术检测Cas9基因及蛋白表达情况;利用分子克隆技术构建HSV-1病毒ICP34.5基因敲除的基因编辑质粒(pU6-Ecfp);pU6-Ecfp转染293T-Cas9细胞后感染野生型HSV-1病毒,在胞内通过CRISPR/Cas9技术敲除HSV-1病毒中ICP34.5基因,再利用增强型青色荧光(Ecfp)示踪及极限稀释法进行病毒富集纯化,通过PCR法进行oHSV-1/Ecfp病毒鉴定。结果PCR扩增、核酸电泳及蛋白质免疫印迹技术结果显示,细胞株293T-Cas9高转录Cas9基因及高表达Cas9蛋白;通过PCR鉴定及荧光示踪结果显示,基因编辑质粒pU6-Ecfp构建成功;Ecfp荧光示踪、PCR扩增及核酸电泳结果显示,Ecfp成功插入ICP34.5基因敲除位点,获得oHSV-1/Ecfp重组病毒。结论稳定表达Cas9蛋白的293T-Cas9细胞可作为CRISPR/Cas9基因编辑的工具细胞,构建的HSV-1/Ecfp病毒实现了ICP34.5基因敲除及Ecfp示踪蛋白的敲入。

关键词：短回文重复序列/相关蛋白9基因编辑技术稳定表达基因敲除单纯疱疹病毒

编码草鱼呼肠孤病毒VP5与NS38 B细胞表位的DNA疫苗壳聚糖纳米口服制剂的研制与评价

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安徽农业大学学报 2019年第3期46卷 389-393页

作者：唐庆权张子涵毛颖睿鲁子怡陶敏慧徐婷婷曾杭樊慧敏许晓牧彭开松朱若林鲍传和安徽农业大学动物科技学院水生健康与公共卫生实验室合肥230036 安徽农业大学新农村研究院江淮分水岭(定远)综合试验站定远233200 安徽省现代农业产业技术体系(水产)健康养殖研究室合肥230036

以编码II型GCRV VP5和NS38的B细胞线性表位的cDNA串联构建pcDNA3.1(+)-Bs5-10(GenBank登录号为MH234474),并包被成纳米级壳聚糖颗粒;无GCRV草鱼(11~12 cm、25~30 g)随机分为空白对照组、空白对照-GCRV攻毒组、裸空载体注射组、壳寡糖包... 详细信息

以编码II型GCRV VP5和NS38的B细胞线性表位的cDNA串联构建pcDNA3.1(+)-Bs5-10(GenBank登录号为MH234474),并包被成纳米级壳聚糖颗粒;无GCRV草鱼(11~12 cm、25~30 g)随机分为空白对照组、空白对照-GCRV攻毒组、裸空载体注射组、壳寡糖包被空载体口服组、裸DNA疫苗注射组(每尾鱼注射10μg载体,1d和29d各免疫1次)、壳寡糖包被DNA疫苗口服组(每尾鱼大约投喂50μg载体,1~3d、15~17d和43~45 d各口服免疫1次),在28℃水温下评价疫苗保护力和特异性抗体水平。结果显示,裸DNA疫苗注射组和壳寡糖包被DNA疫苗口服组的相对保护率分别为66.67%和50%;两组血清抗VP5和抗NS38的IgM水平均随加强免疫而显著升高(P<0.05);且在对应时间点(22 d或50 d),前组特异性IgM水平均显著高于后者(P<0.05)。结果表明,壳聚糖包被的DNA疫苗口服免疫能在一定程度上抵抗GCRV攻击,且体液免疫参与了该保护机制。

关键词：草鱼呼肠孤病毒多基因DNA疫苗口服免疫注射免疫

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两系杂交粳稻鄂粳杂3号的选育与应用

湖北农业科学 2006年第1期45卷 27-28页

作者：方国成曾庆四卢兴桂湖北省农业科学院粮食作物研究所武汉430064

鄂粳杂3号系以粳型光敏感核不育系N5088S为母本,粳型恢复系闵恢128为父本组配而成的两系杂交粳稻新组合,2004年3月通过湖北省农作物品种审定委员会审定。该组合穗大粒多,穗型半直立,适合于湖北省稻瘟病无病区或轻病区作晚稻种植。介绍... 详细信息

鄂粳杂3号系以粳型光敏感核不育系N5088S为母本,粳型恢复系闵恢128为父本组配而成的两系杂交粳稻新组合,2004年3月通过湖北省农作物品种审定委员会审定。该组合穗大粒多,穗型半直立,适合于湖北省稻瘟病无病区或轻病区作晚稻种植。介绍了鄂粳杂3号的选育经过、产量表现及主要特征特性。提出了稀播壮秧、适时早插,重施底肥、酌施穗肥,科学管水、适度轻晒等关键栽培技术。

关键词：两系杂交粳稻鄂粳杂3号选育应用