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Effect of polysaccharide fractions from Fortunella margarita on the fecal microbiota of mice and SCFA production in vitro

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Food Science and Human Wellness 2022年第1期11卷 97-108页

作者： Peilin Chen Suzhen Lei mingyao tong Qing Chang Baodong Zheng Yi Zhang Hongliang Zeng College of Food Science Fujian Agriculture and Forestry UniversityFuzhou 350002China Fujian Provincial Key Laboratory of Quality Science and Processing Technology in Special Starch Fujian Agriculture and Forestry UniversityFuzhou 350002China China-Ireland International Cooperation Centre for Food Material Science and Structure Design Fujian Agriculture and Forestry UniversityFuzhou 350002China

Fortunella margarita polysaccharides(FMPS)are composed of 4 polysaccharide fragments,namely mannogalactoglucan,galactoglucan,glucan and arabinoglucan.This study investigated the in vitro fermentation of FMPS fractions and their effect on the fecal microbiota of mice and short chain fatty acids(SCFAs)production.The results showed that the structure of the fecal microbiota was changed after FMPS fermentation.At the phylum level,the polysaccharide fractions reduced the relative abundance of Bacteroidetes compared with the inulin group.At the genus level,the polysaccharide fractions increased the abundance of Lactobacillus,and decreased the abundance of Granulicatella,Proteus and Rummeliibacillus.Polysaccharide fractions could promote the proliferation of beneficial bacteria(Lactobacillus),and decreased harmful bacteria(Granulicatella,Proteus,Rummeliibacillus and Serratia).Furthermore,there was a significant distinction in the genus level flora processed by different polysaccharide fractions,especially mannogalactoglucan.Polysaccharide fractions showed potential prebiotic effects,with mannogalactoglucan,in particular,promoting proliferation of SCFA-producing bacteria.SCFAs were regulated by monosaccharide composition,molecular weight of the FMPS fractions,and the composition of the fecal bacteria.Polysaccharide fractions could modulate metabolic function of the fecal microbiota,altering the levels of SCFAs.These results suggested that FMPS are important functional components in gut health,especially mannogalactoglucan.

关键词： Polysaccharide fraction Fortunella margarita Fermentation Fecal microbiota Short chain fatty acid

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“抗性淀粉-肠道菌群-代谢产物”营养轴的研究进展

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食品科学 2022年第5期43卷 264-274页

作者：何书琪童铭瑶雷素珍张怡曾红亮福建农林大学食品科学学院福建福州350002 福建省特种淀粉品质科学与加工技术重点实验室福建福州350002 中爱国际合作食品物质学与结构设计研究中心福建福州350002

抗性淀粉(resistant starch,RS)在小肠内不易消化吸收,但可被大肠肠道菌群利用产生短链脂肪酸等代谢物并调节肠道菌群平衡,促进短链脂肪酸的产生及调节胆汁酸代谢。因此,本文构建“RS-肠道菌群-代谢产物”营养轴系统,概述RS调控肠道菌... 详细信息

抗性淀粉(resistant starch,RS)在小肠内不易消化吸收,但可被大肠肠道菌群利用产生短链脂肪酸等代谢物并调节肠道菌群平衡,促进短链脂肪酸的产生及调节胆汁酸代谢。因此,本文构建“RS-肠道菌群-代谢产物”营养轴系统,概述RS调控肠道菌群介导代谢物产生的作用机制,比较菌群发酵对RS表观结构、晶体结构和分子结构产生的影响,阐述RS结构特性与肠道菌群群落结构、短链脂肪酸产量和胆汁酸排泄之间的关系,总结RS通过调节肠道菌群及肠道代谢物改善代谢性疾病的作用机制。此外,进一步展望RS-肠道菌群-胆汁酸之间的作用途径以及RS在代谢性疾病中与胆汁酸和短链脂肪酸的作用机制。

关键词：抗性淀粉肠道菌群代谢产物结构特性短链脂肪酸胆汁酸

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猴痘病毒mRNA疫苗的构建及免疫评价

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中国病原生物学杂志 2024年第3期19卷 257-262页

作者：唐家凤庄忻雨姜人月狄亚心杨松惠张桐许智强于潼田明尧金宁一广西大学动物科学技术学院广西南宁530000 中国农业科学院长春兽医研究所延边大学农学院东北农业大学动物医学学院吉林大学动物医学学院吉林农业大学动物医学学院

目的设计猴痘病毒(MPXV)抗原,选择多种方案设计抗猴痘病毒mRNA候选疫苗,并完成其表达鉴定及小鼠体内的免疫效果评价。方法选取猴痘病毒M1R、A35R、A29L、H3L基因设计三组候选抗原基因(命名为:M1RA35R、A29L-H3L-A35R、A35R-Fc),并设置... 详细信息

目的设计猴痘病毒(MPXV)抗原,选择多种方案设计抗猴痘病毒mRNA候选疫苗,并完成其表达鉴定及小鼠体内的免疫效果评价。方法选取猴痘病毒M1R、A35R、A29L、H3L基因设计三组候选抗原基因(命名为:M1RA35R、A29L-H3L-A35R、A35R-Fc),并设置一组痘苗病毒(VACV)基因(L1R-A33R)作为对照,分别连接至mRNA制备专用载体pGEM-3Zf-n3,通过线性化、体外转录、纯化和加帽获得功能性mRNA,利用Western blot、IFA对目的抗原进行鉴定。通过微流控芯片制备LNP-mRNAs疫苗,制定免疫程序并完成小鼠的免疫及特异性抗体水平监测。结果成功构建3组抗猴痘病毒的mRNA疫苗和1组抗痘苗病毒的mRNA疫苗,四组疫苗均能表达抗原蛋白,并且制备的4组LNP-mRNAs疫苗在免疫后84 d仍维持较高的特异性抗体水平。结论成功完成猴痘病毒mRNA疫苗的构建、表达及鉴定,并通过对不同猴痘病毒抗原设计的验证,为以后猴痘疫苗的研发提供数据支撑。

关键词：猴痘病毒痘苗病毒 mRNA疫苗 EEV IMV LNP-mRNAs

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流感病毒球状头部结构域HA1的原核表达及纯化

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中国生物制品学杂志 2024年第5期37卷 566-570,592页

作者：曾博宇许智强于潼陈璐儿张桐陈振海庄忻雨田明尧金宁一扬州大学兽医学院江苏扬州225100 军事医学研究院军事兽医研究所吉林长春130122 延边大学农学院吉林延边133000 吉林大学动物医学学院吉林长春130122

目的原核表达流感病毒(influenza virus,IV)球状头部结构域HA1基因,优化其诱导表达条件,并进行蛋白纯化,以期获得具有良好免疫原性的IV HA1蛋白。方法将Influenza A virus[A/Saratov/CRIE-250/2017(H3N2)]、Influenza A virus[A/Hebei/F076/2018(mixed)]和Influenza A virus[A/USA/LAN_(P5)_HA/2018(H1N1)]进行截短,取63~286头状结构域氨基酸序列,按照大肠埃希菌常用密码子进行优化,合成基因命名为17Sa、Hebei和USA,并对基因17Sa进行点突变命名为基因17Sa变。将4个基因分别克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组质粒,将重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,优化蛋白表达条件,并利用His标签镍离子蛋白纯化柱纯化蛋白。结果成功插入长度为762 bp的目的基因,重组质粒经双酶切(NheⅠ/XhoⅠ)鉴定构建正确。表达的重组蛋白USA相对分子质量约为26000,17Sa、p17Sa和Hebei相对分子质量约为28000,均可与鼠抗His抗体特异性结合。重组蛋白均以包涵体形式表达,在诱导温度37℃,诱导8 h表达量最高。纯化的重组蛋白17Sa、17Sa变、Hebei和USA纯度分别为90%、85%、95%和80%。结论通过原核表达系统成功表达并纯化了目的蛋白,该蛋白具有良好的反应原性,为流感抗体检测和新型疫苗的开发奠定了基础。

关键词：流感病毒 HA1 原核表达纯化

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高寒地区冬小麦抗寒育种研究进展

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东北农业大学学报 2010年第8期41卷 141-147页

作者：李卓夫付连双王晓楠孙艳丽佟明耀东北农业大学农学院

高寒地区冬小麦抗寒育种是打破冬小麦种植禁区的关键技术之一。该地区冬小麦育种的重点应放在提高越冬成活率与产量性状间平衡上。文章依据国内外冬小麦抗寒研究与育种的结果,对该地区冬小麦育种工作应着重做好的若干工作进行了系统分析。

关键词：高寒地区冬小麦抗寒性育种

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呼吸道合胞病毒mRNA候选疫苗的表达、鉴定及免疫效果验证

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中国病原生物学杂志 2024年第5期19卷 497-501页

作者：姜人月庄忻雨田明尧唐家凤狄亚心杨松惠许智强于潼张桐金鑫金宁一延边大学农学院吉林延吉133002 中国农业科学院长春兽医研究所广西大学动物科学技术学院东北农业大学动物医学学院吉林农业大学动物医学学院吉林大学动物医学学院

目的制备呼吸道合胞病毒F蛋白的融合前构象(pre-F)mRNA疫苗,进行可行性验证。方法对抗原基因进行密码子优化设计,分别连接至pGEM-3Zf-N3载体上,通过质粒线性化、体外转录、纯化和Cap1加帽处理,得到功能性mRNAs。在转染至293T细胞后,利用... 详细信息

目的制备呼吸道合胞病毒F蛋白的融合前构象(pre-F)mRNA疫苗,进行可行性验证。方法对抗原基因进行密码子优化设计,分别连接至pGEM-3Zf-N3载体上,通过质粒线性化、体外转录、纯化和Cap1加帽处理,得到功能性mRNAs。在转染至293T细胞后,利用Western blot和间接免疫荧光试(IFA)来确定目标蛋白的表达情况。通过微流控装置制备LNP/mRNAs疫苗免疫C57BL/6小鼠,检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体效价,评估免疫效果。结果成功构建重组质粒Pre-F-GCN4t和mDS-Cav1,通过双酶切验证条带符合预期大小。表达目的抗原大小为57.57 ku和64.35 ku。成功检测小鼠血清中抗原特异性IgG抗体,Pre-F-GCN4t免疫组的效果优于mDS-Cav1组,3次免疫较2次免疫提升了2倍,抗体效价最高可达1∶4×10^(4)。结论两种抗原设计模式均具有可行性,Pre-F-GCN4t的设计方式对于激活机体的体液免疫应答更有优势,mRNA疫苗无需体内转录,为呼吸道合胞病毒mRNA疫苗的优化设计提供理论基础。

关键词：呼吸道合胞病毒 mRNA疫苗密码子优化体液免疫

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Corrigendum to“Long-term correction of hemophilia B through CRISPR/Cas9 induced homology-independent targeted integration”[Journal of Genetics and Genomics(2022)49,1114-1126]

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Journal of Genetics and Genomics 2024年第5期51卷 578-578页

作者： Xi Chen Xuran Niu Yang Liu Rui Zheng Lei Yang Jian Lu Shuming Yin Yu Wei Jiahao Pan Ahmed Sayed Xueyun Ma Meizhen Liu Fengxiang Jing mingyao Liu Jiazhi Hu Liren Wang Dali Li Shanghai Frontiers Science Center of Genome Editing and Cell Therapy Shanghai Key Laboratory of Regulatory BiologyInstitute of Biomedical Sciences and School of Life SciencesEast China Normal UniversityShanghai 200241China The MOE Key Laboratory of Cell Proliferation and Differentiation Genome Editing Research CenterSchool of Life SciencesPeking-Tsinghua Center for Life SciencesPeking UniversityBeijing 100871China Xinhua Hospital Shanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200092China Biochemistry Laboratory Chemistry DepartmentFaculty of ScienceAssiut UniversityAssiut 71516Egypt Shanghai Turtle Technology Co. Shanghai 201900China

The authors regret that the grant number“21CJ1402200”in the Acknowledgments session should be replaced as“21JC1402200”.The corrected contents areprovided as follows.

关键词： CRISPR/Cas9 correction ledgment

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高寒地区超强抗寒新品种“东农冬麦1号”的选育

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东北农业大学学报 2010年第7期41卷 1-4页

作者：佟明耀郑家兰李卓夫付连双董广林张胜利王晓楠孙艳丽东北农业大学农学院哈尔滨150030 黑龙江省饶河县农业技术推广中心黑龙江饶河155700

为选育出能在黑龙江省高寒地区安全越冬的冬小麦品种,从1994年开始进行了冬小麦抗寒育种工作和保护越冬的栽培技术研究。由于冬麦抗寒性属于数量遗传性状,因此选用抗寒较强的品种间杂交和多亲本杂交,以利于抗寒基因累加和超亲遗传。几... 详细信息

为选育出能在黑龙江省高寒地区安全越冬的冬小麦品种,从1994年开始进行了冬小麦抗寒育种工作和保护越冬的栽培技术研究。由于冬麦抗寒性属于数量遗传性状,因此选用抗寒较强的品种间杂交和多亲本杂交,以利于抗寒基因累加和超亲遗传。几年来共杂交471个组合,于2002年从Norstar×(牡引88-13×Alabaskaja)组合中,选育出一个抗寒高产的新品系(东农024)。后经四年区域试验和生产试验,并结合保护越冬栽培措施,不论雪大或雪小年份都能安全越冬。2007年1月通过黑龙江省农作物品种审定委员会审定,正式命名"东农冬麦1号"开始推广,成为有史以来第一个能在黑龙江省高寒地区越冬的冬小麦新品种。

关键词：高寒地区冬小麦抗寒育种

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基于Box Behnken法的油炸金线鱼鱼饼配方优化的研究

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农产品加工 2020年第15期 32-35,41页

作者：杨舒琦童铭瑶程子润张怡曾红亮福建农林大学食品科学学院福建福州350002 闽台特色海洋食品加工及营养健康教育部工程中心福建福州350002

为了研究油炸金线鱼鱼饼的配方,分别考查大豆分离蛋白添加量、马铃薯淀粉添加量、食盐添加量对油炸鱼饼感官评分的影响,以油炸金线鱼鱼饼的感官评价分值为响应值,采用Box Behnken响应面法对油炸金线鱼鱼饼的工艺进行优化。结果表明,油... 详细信息

为了研究油炸金线鱼鱼饼的配方,分别考查大豆分离蛋白添加量、马铃薯淀粉添加量、食盐添加量对油炸鱼饼感官评分的影响,以油炸金线鱼鱼饼的感官评价分值为响应值,采用Box Behnken响应面法对油炸金线鱼鱼饼的工艺进行优化。结果表明,油炸金线鱼鱼饼的最佳工艺参数为大豆分离蛋白添加量3.57%,马铃薯淀粉添加量10.17%,食盐添加量1.38%,在此条件下,油炸鱼饼的感官评分为95.2756分。

关键词：金线鱼油炸鱼饼感官评定加工工艺

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Enhanced genome editing to ameliorate a genetic metabolic liver disease through co-delivery of adeno-associated virus receptor

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Science China(Life Sciences) 2022年第4期65卷 718-730页

作者： Shuming Yin Lie Ma Tingting Shao Mei Zhang Yuting Guan Liren Wang Yaqiang Hu Xi Chen Honghui Han Nan Shen Wenjuan Qiu Hongquan Geng Yongguo Yu Shichang Li Weishi Yu mingyao Liu Dali Li Shanghai Key Laboratory of Regulatory Biology Institute of Biomedical Sciences and School of Life SciencesEast China Normal UniversityShanghai200241China Bioray Laboratories Inc. Shanghai200241China Xinhua Hospital Shanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai200092China College of Physical Education and Health East China Normal UniversityShanghai200241China Key Laboratory of Adolescent Health Assessment and Exercise Intervention Ministry of EducationCollege of Physical Education and HealthEast China Normal UniversityShanghai200241China CIPHER GENE LLC Beijing100089China

Genome editing through adeno-associated viral(AAV) vectors is a promising gene therapy strategy for various diseases,especially genetic disorders. However, homologous recombination(HR) efficiency is extremely low in adult animal models. We assumed that increasing AAV transduction efficiency could increase genome editing activity, especially HR efficiency, for in vivo gene therapy. Firstly, a mouse phenylketonuria(PKU) model carrying a pathogenic R408W mutation in phenylalanine hydroxylase(Pah) was generated. Through co-delivery of the general AAV receptor(AAVR), we found that AAVR could dramatically increase AAV transduction efficiency in vitro and in vivo. Furthermore, co-delivery of SaCas9/sgRNA/donor templates with AAVR via AAV8 vectors increased indel rate over 2-fold and HR rate over 15-fold for the correction of the single mutation in Pah;mice. Moreover, AAVR co-injection successfully increased the site-specific insertion rate of a 1.4 kb Pah cDNA by 11-fold, bringing the HR rate up to 7.3% without detectable global off-target effects. Insertion of Pah cDNA significantly decreased the Phe level and ameliorated PKU symptoms. This study demonstrates a novel strategy to dramatically increase AAV transduction which substantially enhanced in vivo genome editing efficiency in adult animal models, showing clinical potential for both conventional and genome editing-based gene therapy.

关键词： CRISPR/Cas9 gene therapy adeno-associated virus(AAV) AAVR Pah PKU

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