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顺铂处理癌细胞后CDC25 mRNA剪接异构体的变化

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贵州医科大学学报 2017年第2期42卷 159-164页

作者：杨梦莉陈香岭马春霞姚宇峰史荔马千里俞建昆中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 昆明医科大学第三附属医院胸外科云南昆明650118

目的:探讨顺铂(CDDP)对肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞CDC25磷酸酶mRNA的选择性剪接的影响。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa、CaSki细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,实验组细胞用CDDP处理,对照组细胞用DMS... 详细信息

目的:探讨顺铂(CDDP)对肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞CDC25磷酸酶mRNA的选择性剪接的影响。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa、CaSki细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,实验组细胞用CDDP处理,对照组细胞用DMSO处理,设计CDC25A、CDC25B、CDC25C引物,利用RTPCR检测CDC25 mRNA剪接异构体的表达变化。结果:与对照组细胞比较,随着CDDP浓度的增加,肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和CaSki细胞以及人胚肾293FT细胞中CDC25B、CDC25C mRNA剪接异构体比例有明显变化,而CDC25A mRNA剪接异构体变化不明显。结论:CDDP引起细胞DNA损伤时,可发生CDC25mRNA选择性剪接异构体的比例发生变化,这可能与肿瘤药物治疗时的抗性有关。

关键词： CDC25磷酸酶 mRNA剪接异构体顺铂肿瘤细胞,培养的聚合酶链式反应 DNA损伤

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洋芋中龙葵素的提取工艺研究

中国农学通报 2012年第15期28卷 264-267页

作者：钱天寿康孟利凌建刚胡远党范鹏志俞静芬林旭东朱麟宁海县农业环境与农产品质量安全监督管理总站浙江宁海315600 宁波市农业科学研究院农产品加工研究所宁波市农产品加工研究中心浙江宁波315040

洋芋不耐贮藏,传统贮藏因缺乏质量安全评估易造成薯皮变绿、发芽。为了更好地开展洋芋安全贮藏保鲜,以胡陈洋芋为试验材料,通过回流法比较不同温度、溶剂、料液比和提取时间等提取条件,研究用索氏提取法提取洋芋龙葵素的最佳工艺条件对... 详细信息

洋芋不耐贮藏,传统贮藏因缺乏质量安全评估易造成薯皮变绿、发芽。为了更好地开展洋芋安全贮藏保鲜,以胡陈洋芋为试验材料,通过回流法比较不同温度、溶剂、料液比和提取时间等提取条件,研究用索氏提取法提取洋芋龙葵素的最佳工艺条件对洋芋外观品质及龙葵素含量的影响。结果表明,影响洋芋中龙葵素的提取效果大小的因素依次为:料液比>溶剂种类>提取时间;最佳提取条件为:10:1的乙醇-乙酸,15:1料液比,提取时间为3 h。

关键词：洋芋龙葵素提取工艺

顺铂处理下肺癌细胞中剪接因子SRSF2 mRNA异构体的变化

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贵州医科大学学报 2017年第9期42卷 1010-1015页

作者：马春霞杨梦莉陈香玲李明阳杨渊刘淑媛史荔俞建昆中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的:分析不同浓度顺铂(CDDP)处理后肺癌细胞中剪接因子2(SRSF2)mRNA异构体及蛋白水平的变化及机制。方法:分别使用8、16、24、32、40、48及56μmol/L的CDDP处理肺癌细胞系A549和12、24、36、48、60、72及84μmol/L的CDDP处理肺癌细胞系... 详细信息

目的:分析不同浓度顺铂(CDDP)处理后肺癌细胞中剪接因子2(SRSF2)mRNA异构体及蛋白水平的变化及机制。方法:分别使用8、16、24、32、40、48及56μmol/L的CDDP处理肺癌细胞系A549和12、24、36、48、60、72及84μmol/L的CDDP处理肺癌细胞系H1299为实验组,同时设立实验组最高浓度CDDP浓度组等体积的DMSO处理的两种细胞的对照组;提取处理后细胞的总RNA,设计SRSF2基因不同的引物(F1∶R1,F2∶F2,F2∶R1),RT-PCR检测mRNA剪接异构体的变化;采用Western-blot检测不同浓度CDDP处理后A549细胞中SRSF2蛋白的表达。结果:在A549和H1299细胞中检测到了6种异构体(a、b、c、d、e、f),且随着处理CDDP浓度的增加,非编码蛋白的mRNA异构体的比例明显上升,主要是Isoform-b和Isoform-e的上升;而编码蛋白的mRNA异构体所占比例明显下降,主要是Isoform-d的下降;同时处理后两种细胞SRSF2的总mRNA水平也逐渐降低,但SRSF2蛋白水平则逐渐升高。结论:在CDDP处理的肺癌细胞A549和H1299中,SRSF2蛋白水平被上调,这种上调可能被SRSF2通过向自身mRNA选择性剪接上调非编码蛋白和下调编码蛋白的mRNA异构体的转录水平来调节。

关键词：顺铂剪接因子2 mRNA选择性剪接 mRNA异构体细胞凋亡

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种植密度对短毛独活光合特性及生长的影响

中国林副特产 2020年第3期 13-16页

作者：蒋欣梅魏梦丽陈映彤刘汉兵胡兆平赵恒田于锡宏农业农村部东北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室东北农业大学哈尔滨150030 林下经济资源研发与利用协同创新中心哈尔滨150040 黑龙江省伊春市农业技术研究推广中心黑龙江伊春153000 中国科学院东北地理与农业生态研究所哈尔滨150040

以一年生短毛独活为试材,研究不同栽培密度对短毛独活光合特性及生长的影响。结果表明:一年生短毛独活露地种植时,低密度(D30,株行距为30 cm×60 cm)有利于光合产物的积累;中等密度(D20,株行距为20 cm×60 cm)有利蒸腾速率、气孔导度、... 详细信息

以一年生短毛独活为试材,研究不同栽培密度对短毛独活光合特性及生长的影响。结果表明:一年生短毛独活露地种植时,低密度(D30,株行距为30 cm×60 cm)有利于光合产物的积累;中等密度(D20,株行距为20 cm×60 cm)有利蒸腾速率、气孔导度、胞间CO2浓度的提高。采取株行距为10 cm×60 cm的垄作(高密度,D10)可获得小区高产,采取株行距为20 cm×60 cm的垄作(D20)可改善品质,有利于黄酮和VC的积累。

关键词：种植密度短毛独活光合特性品质生长

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温度对红菜薹贮藏效果的影响

长江蔬菜 2014年第22期 75-77页

作者：陈学玲俞静芬关健何建军凌建刚康孟利梅新施建斌邱正明聂启军湖北省农业科学院/湖北省农业科技创新中心农产品加工分中心武汉430064 宁波市农业科学院

针对红菜薹不耐贮藏的难题，将红菜薹分别置于0、5、10、20℃条件下贮藏，测量其呼吸强度，并进行综合感官评价，研究了不同温度对3个品种红菜薹贮藏效果的影响。研究结果表明，红菜薹最适贮藏温度为5-10℃，相同贮藏条件下，红菜薹品... 详细信息

针对红菜薹不耐贮藏的难题，将红菜薹分别置于0、5、10、20℃条件下贮藏，测量其呼吸强度，并进行综合感官评价，研究了不同温度对3个品种红菜薹贮藏效果的影响。研究结果表明，红菜薹最适贮藏温度为5-10℃，相同贮藏条件下，红菜薹品种耐贮性从大到小依次为：SYH〉YZH〉JHB。

关键词：温度红菜薹贮藏效果

顺铂处理后几种hTERT mRNA剪接异构体的变化

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贵州医科大学学报 2016年第11期41卷 1279-1284页

作者：杨梦莉陈香岭隋旭廉亚茹马春霞姚宇峰史荔马千里俞建昆中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 昆明理工大学云南昆明650093 昆明医科大学第三附属医院胸外科云南昆明650118

目的:利用顺铂处理肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞,检测人类端粒酶逆转录酶催化亚单位(hTERT)mRNA的选择性剪接是否发生变化。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和Ca Ski细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,用顺... 详细信息

目的:利用顺铂处理肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞,检测人类端粒酶逆转录酶催化亚单位(hTERT)mRNA的选择性剪接是否发生变化。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和Ca Ski细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,用顺铂处理实验组细胞,DMSO处理对照组细胞;设计hTERTα+β+、α+β-、α-β+、INS3及DEL[e2]引物,提取两组细胞的总RNA,利用RT-PCR检测hTERT mRNA剪接异构体表达。结果:与对照组细胞相比,随着顺铂浓度的增加,肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和Ca Ski细胞以及人胚肾293FT细胞中hTERTα+β-和INS3异构体比例升高,而DEL[e2]异构体变化不明显。结论:在顺铂引起的DNA损伤情况下,细胞可利用hTERT mRNA选择性剪接调控机制进行调节,通过改变不同异构体的量和所占比例,从而调节端粒酶功能活性。

关键词：肺肿瘤宫颈肿瘤人胚肾细胞细胞,培养的人类端粒酶逆转录酶催化亚单位顺铂

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土壤中POPs检测方法参数的优化

中国农学通报 2008年第7期24卷 430-435页

作者：凌建刚王方盛朱优峰陈国康孟利陈海燕吕燕俞静芬钱天寿王美英赵健朱勇宁波市农科院农产品加工研究所浙江宁波315040 宁波市农业局科教处浙江宁波315012 浙江大学环境工程系浙江杭州310029 华中农业大学湖北武汉430070 宁波市农产品质量检测中心浙江宁波315040 浙江宁海县农产品监测中心浙江宁海315600

研究了环境土壤中部分毒害性有机污染物的多残留监测确证技术,采用符合实际的采样方案,应用超声提取、固相萃取前处理及净化手段,充分发挥气相色谱(GC)双柱双检测器和气相色谱-质谱联用(GC-MS)选择离子监测(SIM)优势互补技术,建立了环... 详细信息

研究了环境土壤中部分毒害性有机污染物的多残留监测确证技术,采用符合实际的采样方案,应用超声提取、固相萃取前处理及净化手段,充分发挥气相色谱(GC)双柱双检测器和气相色谱-质谱联用(GC-MS)选择离子监测(SIM)优势互补技术,建立了环境土壤中艾氏剂等10种持久性有机污染物多残留检测确证方法。充分挖掘GC和MS的互补优化技术,通过标准添加和对实际样品的监测,证明方法具有前处理简洁、速度快、定量检测和定性确证结合、适合批量等优点。

关键词：环境有机污染物监测气相色谱-质谱联用

梯度浓度顺铂处理对6种肿瘤细胞中CASP9的mRNA选择性剪接的影响

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贵州医科大学学报 2017年第9期42卷 1003-1009页

作者：杨勤兴马春霞陆成龙杨艳波杨梦莉刘舒媛李明阳杨渊史荔俞建昆中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的:分析顺铂处理后多种肿瘤细胞中CASP9基因mRNA选择性剪接异构体的表达及其变化规律。方法:用梯度浓度的顺铂处理肺癌细胞(A549、H1299)、人胚肾细胞(293FT)、宫颈癌细胞(SiHa、CaSki、C33A)6种细胞,提取各细胞的总RNA,用半定量RT-PC... 详细信息

目的:分析顺铂处理后多种肿瘤细胞中CASP9基因mRNA选择性剪接异构体的表达及其变化规律。方法:用梯度浓度的顺铂处理肺癌细胞(A549、H1299)、人胚肾细胞(293FT)、宫颈癌细胞(SiHa、CaSki、C33A)6种细胞,提取各细胞的总RNA,用半定量RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳及胶图像分析软件检测分析CASP9基因mRNA异构体的组成及其比例和相对表达水平的变化。结果:6种细胞中,CASP9f∶r1引物检测到的CASP9a和c(NR-102732)两种异构体,但随着顺铂浓度的增加,两种异构体的比例在6种细胞中均无变化;而CASP9f∶r2引物可检测到的异构体CASP9a和b、a/b比例在A549、H1299、SiHa、C33A、Ca Ski中呈逐渐增加趋势,而在293FT细胞中则呈相反趋势;在A549顺铂抗性株中,顺铂处理前后CASP9a/b的比例显著差异变化明显减弱。结论:在顺铂处理下,检测的5种细胞中的Casp9是通过增加casp9a/b的比例来应对,仅293FT例外;顺铂抗性A549细胞株在顺铂处理后casp9a/b的比例比例与细胞凋亡和抗性有关,提示调节casp9a/b的比例是治疗癌症的可能的有效途径之一。

关键词：顺铂 CASP9 mRNA选择性剪接 mRNA异构体细胞凋亡

新疆石河子市牛源大肠杆菌分离鉴定及对β-内酰胺类药物的耐药性分析

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中国动物检疫 2022年第7期39卷 49-54页

作者：许淑芸何白雪俞杰马雪胡晓彦邹思颖李劼周霞黄新钟发刚吴桐中韩猛立张星星石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆农垦科学院新疆石河子832000

为调查石河子市牛源大肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药表型和耐药基因携带情况,采集健康牛群粪便,采用常规细菌分离鉴定方法并结合16S rRNA PCR检测方法进行分离鉴定;参考Clermont方法对分离菌株进行系统分子分群,采用PCR方法检测分离菌... 详细信息

为调查石河子市牛源大肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药表型和耐药基因携带情况,采集健康牛群粪便,采用常规细菌分离鉴定方法并结合16S rRNA PCR检测方法进行分离鉴定;参考Clermont方法对分离菌株进行系统分子分群,采用PCR方法检测分离菌株的β-内酰胺类耐药基因bla_(CTX-M)、bla_(OXA)、bla_(SHV)和bla_(TEM)携带情况,通过K-B纸片法测定分离菌株耐药表型。结果显示:分离鉴定出100株牛肠道大肠杆菌分属于A、B1、C和F群;分离株对头孢唑林和阿莫西林的耐药率在50%以上,对氨苄西林、头孢氨苄与头孢吡肟的耐药率均在5%以下,所有分离株对头孢吡肟敏感;5株分离菌株检测到bla_(SHV)基因片段,1株检测到bla_(CTX-M)基因片段,所有菌株均未检测到bla_(OXA)和bla_(TEM)基因片段。结果表明,石河子市牛源正常大肠杆菌已少部分携带耐药基因,且对部分β内酰胺类药物产生了耐药性。结果提示,应加快减抗政策的实施。

关键词：牛源大肠杆菌 β-内酰胺类药物分子分群耐药基因耐药表型