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玉米赤霉烯酮与脱氧雪腐镰刀菌烯醇联合染毒对雄性小鼠生殖毒性的影响及茶多酚的缓解作用

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动物营养学报 2020年第4期32卷 1946-1956页

作者：曹利赵杰陈铃霞谢昕冉梦申茂玉朱雷冯士彬李玉吴金节王希春安徽农业大学动物科技学院合肥230036

本试验旨在研究茶多酚对玉米赤霉烯酮(ZEN)与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合染毒小鼠生殖毒性损伤的缓解作用。选取8周龄雄性昆明小鼠75只[体重(40±5)g],随机分成5组,每组分别灌服生理盐水(对照组)、200 mg/kg茶多酚(Ⅰ组)、1 mg/kg ZEN+... 详细信息

本试验旨在研究茶多酚对玉米赤霉烯酮(ZEN)与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合染毒小鼠生殖毒性损伤的缓解作用。选取8周龄雄性昆明小鼠75只[体重(40±5)g],随机分成5组,每组分别灌服生理盐水(对照组)、200 mg/kg茶多酚(Ⅰ组)、1 mg/kg ZEN+0.5 mg/kg DON(Ⅱ组)、100 mg/kg茶多酚+1 mg/kg ZEN+0.5 mg/kg DON(Ⅲ组)和200 mg/kg茶多酚+1 mg/kg ZEN+0.5 mg/kg DON(Ⅳ组),每组15只。试验期28 d。在试验第1、14、28天,从每组随机抽取5只小鼠称重采样,检测小鼠精子质量、睾丸脏器系数、睾丸组织标志酶活性、血清性激素含量及睾丸组织氧化与抗氧化指标,并制作睾丸组织切片。结果表明:1)与对照组相比,Ⅱ组小鼠睾丸脏器系数、精子活率及数量、血清性激素含量显著降低(P<0.05),睾丸组织碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05);精子畸形率、血清丙二醛(MAD)含量显著上升(P<0.05)。添加茶多酚后,小鼠的睾丸脏器系数、精子活率及数量、血清性激素含量、睾丸组织AKP、LDH、γ-GGT、CAT、SOD及GSH-Px活性显著上升(P<0.05),精子畸形率、血清MAD含量显著降低(P<0.05)。随着时间的推移,与第1天相比,Ⅰ组小鼠睾丸组织GSH-Px活性显著升高(P<0.05),Ⅱ组小鼠睾丸脏器系数、精子质量、睾丸组织标志酶活性、血清性激素含量、睾丸组织氧化与抗氧化指标均发生显著变化(P<0.05),Ⅲ组小鼠睾丸组织CAT及GSH-Px活性显著降低(P<0.05),Ⅳ组小鼠睾丸组织CAT活性显著降低(P<0.05)。2)睾丸组织病理切片显示染毒组小鼠睾丸生精小管基膜不完整,细胞排列紊乱,数量减少,体积缩小,细胞之间空泡化,管腔内精子数量减少,经茶多酚保护后得到改善。综上,茶多酚能有效改善ZEN与DON联合染毒小鼠精子质量与睾丸组织内标志酶活性,提高血清性激素含量及睾丸组织抗氧化功能,显著降低生殖毒性。

关键词：茶多酚玉米赤霉烯酮脱氧雪腐镰刀菌烯醇小鼠生殖毒性

CAV-1感染MDCK中各IFN及受体分子表达谱的差异

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实验动物科学 2020年第3期37卷 1-5页

作者：孟兴佟相慧陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150069

目的分析犬肾细胞系(MDCK)感染犬腺病毒1型(CAV-1)后各种干扰素(IFN)亚型及其受体分子转录水平的表达情况。方法建立犬IFN-β、IFN-β受体(IFNAR1)、IFN-λ1、IFN-λ1受体(IFN-λ1R)、IFN-λ3和IFN-λ3受体(IFN-λ3R)的染料法定量PCR方... 详细信息

目的分析犬肾细胞系(MDCK)感染犬腺病毒1型(CAV-1)后各种干扰素(IFN)亚型及其受体分子转录水平的表达情况。方法建立犬IFN-β、IFN-β受体(IFNAR1)、IFN-λ1、IFN-λ1受体(IFN-λ1R)、IFN-λ3和IFN-λ3受体(IFN-λ3R)的染料法定量PCR方法,分析了MDCK在PolyⅠ∶C处理和接种CAV-1后细胞内各IFN及受体分子转录水平的相对含量。结果正常MDCK细胞内存在较高含量的IFN-λ3R且含量显著高于其他IFN及受体分子的转录水平;用PolyⅠ∶C处理MDCK细胞24 h后,IFN-λ1R、IFN-λ3和IFN-λ3R的表达量均显著性上调,而IFN-β、IFN-λ1和IFNAR1几乎没变化;接种CAV-1后,IFN-α的含量急剧上升至6倍。结论MDCK细胞存在不同水平浓度的IFN分子及其受体转录产物,且在PolyⅠ∶C刺激和腺病毒感染时受体分子的表达谱不同。

关键词：犬肾细胞系干扰素受体转录表达水平

围术期应用氨溴索和呼吸训练器对体外循环术后患者排痰效果的影响

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解放军护理杂志 2015年第8期32卷 38-40页

作者：陈园园杨敏周敏杨萌郭灵霞山东大学齐鲁医院心脏外科山东济南250012

目的探讨围术期应用氨溴索和呼吸训练器对体外循环术后患者排痰效果的影响。方法将2010年11月至2011年8月山东大学齐鲁医院心脏外科行心脏瓣膜置换手术的80例患者按随机对照实验方法分为氨溴索与呼吸训练器联合组(A组)、氨溴索组(B组)... 详细信息

目的探讨围术期应用氨溴索和呼吸训练器对体外循环术后患者排痰效果的影响。方法将2010年11月至2011年8月山东大学齐鲁医院心脏外科行心脏瓣膜置换手术的80例患者按随机对照实验方法分为氨溴索与呼吸训练器联合组(A组)、氨溴索组(B组)、呼吸训练器组(C组)和对照组(D组),比较各组患者的术后咳嗽程度、痰液黏稠度、排痰难度、呼吸机辅助通气时间及ICU监护时间。结果各组患者术后咳嗽程度无明显差异;氨溴索组和联合组痰液黏稠度较其他组低(P<0.05),两组间无明显差异;氨溴索组和联合组排痰难度较其他组低(P<0.01),而联合组排痰难度较氨溴索组更低(P<0.05)。联合组呼吸机辅助时间及ICU入住时间均明显短于其他3个组别,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论围术期联合应用呼吸训练器和氨溴索可以发挥协同作用,更有效地促进体外循环术后患者排痰。

关键词：呼吸训练器氨溴索体外循环排痰

HPLC法同时测定拟缺香茶菜不同部位中3个活性成分的含量

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北京中医药大学学报 2016年第6期39卷 494-497,501页

作者：代丽萍赵猛赵娇娇苗明三刘孟奇张玲霞陈随清河南中医药大学河南450046 呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心

目的建立HPLC法同时测定拟缺香茶菜不同入药部位中布卢门醇A、尾叶香茶菜丙素、鄂西香茶菜素含量的方法。方法色谱柱：YMC C18（4.6 mm×250 mm,5μm）反相色谱柱;流动相：乙腈-水（32∶68）等度洗脱;流速：1.0 m L/min;柱温：30℃;检... 详细信息

目的建立HPLC法同时测定拟缺香茶菜不同入药部位中布卢门醇A、尾叶香茶菜丙素、鄂西香茶菜素含量的方法。方法色谱柱：YMC C18（4.6 mm×250 mm,5μm）反相色谱柱;流动相：乙腈-水（32∶68）等度洗脱;流速：1.0 m L/min;柱温：30℃;检测波长：230 nm。结果布卢门醇A、尾叶香茶菜丙素、鄂西香茶菜素分别在0.001 1~0.022 2 g/L（r=0.999 7）,0.001 9~0.037 1g/L（r=0.999 5）,0.013 3~0.265 g/L（r=0.999 7）范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.58%（RSD=2.29%）,99.51%（RSD=1.65%）,102.78%（RSD=1.57%）。不同产地拟缺香茶菜不同部位中3个活性成分的含量均以叶中最高。结论所建立的方法灵敏、准确、稳定,可用于拟缺香茶菜不同部位中3个活性成分的含量测定。

关键词：拟缺香茶菜不同部位指标性成分高效液相色谱法

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MHC单倍体型无特定病原体鸭的培育

实验动物科学 2018年第4期35卷 14-20页

作者：王兴童孟兴佟相慧陈洪岩韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150069

目的培育MHC单倍型无特定病原体单倍型鸭。方法以国家禽类实验动物种子中心培育并保存的无特定病原体(SPF)麻鸭为基础,根据位于主要组织相容性复合体(MHC)核心区域的鸭抗原处理相关转运体分子(TAP)双拷贝基因(Tap1和Tap2)的多态性,分别... 详细信息

目的培育MHC单倍型无特定病原体单倍型鸭。方法以国家禽类实验动物种子中心培育并保存的无特定病原体(SPF)麻鸭为基础,根据位于主要组织相容性复合体(MHC)核心区域的鸭抗原处理相关转运体分子(TAP)双拷贝基因(Tap1和Tap2)的多态性,分别利用Tap1基因组短串联重复序列(STR)、TAP2的肽结合区序列以及Tap2全基因组序列的基因型分型,连续选育主要组织相容性复合体(MHC)单倍型SPF鸭。结果 F0代和F1代鸭的STR结果完全一致;F2和F3代鸭的Tap1和Tap2基因组序列完全纯合。连续6个世代的Tap2基因组序列分析,B3群鸭有2个位点发生突变,B1、B2和B4遗传学稳定。结论成功建立了4个MHC单倍体型SPF鸭群B1、B2、B3和B4,为深入开展鸭的免疫遗传学研究提供了实验动物支撑条件。

关键词：鸭主要组织相容性复合体无特定病原体单倍体型抗原处理相关转运体

干旱胁迫下发菜蔗糖合成酶基因Sus2克隆与差异表达

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分子植物育种 2018年第20期16卷 6662-6669页

作者：李晓旭丁苗苗刘阳王猛严奉坤梁文裕徐婷婷王俊王玲霞宁夏大学生命科学学院银川750021 宁夏大学农学院银川750021 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室银川750021 宁夏大学民族预科教育学院银川750021

蔗糖合成酶(Sus2)是调控蔗糖代谢的关键酶。为了解发菜Sus2分子信息及其对干旱胁迫的响应,设计特异性引物克隆发菜Sus2全长并进行序列分析和原核表达,分析干旱胁迫下发菜Sus2在转录水平上表达变化和蔗糖含量变化。结果表明,发菜Sus2基... 详细信息

蔗糖合成酶(Sus2)是调控蔗糖代谢的关键酶。为了解发菜Sus2分子信息及其对干旱胁迫的响应,设计特异性引物克隆发菜Sus2全长并进行序列分析和原核表达,分析干旱胁迫下发菜Sus2在转录水平上表达变化和蔗糖含量变化。结果表明,发菜Sus2基因全长312 bp (GeenBank登录号为MG598619),与点形念珠藻的Sus2基因及其推译氨基酸的序列相似性分别为94%和93%。推译氨基酸在第81位的Ile疏水性最强,在第27位的Gln亲水性最强。Thr有3个磷酸化位点,Ser有12个磷酸化位点,Tyr有3个磷酸化位点。Sus2蛋白二级结构及三级结构由α螺旋、β折叠、随机卷曲和β转角共同构成。将Sus2基因进行原核表达,得到一个12.29 kD的外源蛋白,LC-MS/MS分析证明该外源蛋白为蔗糖合成酶。干旱胁迫下发菜Sus2在转录水平的表达量和蔗糖含量均逐渐增加。研究结果为进一步认识发菜Sus2的分子信息以及干旱胁迫下发菜蔗糖代谢的分子机理提供了科学依据。

关键词：发菜蔗糖合成酶克隆差异表达干旱胁迫

先天性心脏病患儿父母疾病不确定感与焦虑、抑郁的关系

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郑州大学学报（医学版） 2015年第2期50卷 256-259页

作者：李贺琴郑蔚张利霞张苇史艳萍孙萌王兆国纪玲霞郑州大学第二临床学院护理部郑州450014

目的:探讨先天性心脏病(CHD)患儿父母疾病不确定感与焦虑、抑郁的关系。方法:采用问卷调查法,应用中文版疾病不确定感父母量表(PPUS)和医院焦虑、抑郁量表(HADS)对113例CHD患儿父母进行测评。结果:CHD患儿父母的疾病不确定感总分为(82.6... 详细信息

目的:探讨先天性心脏病(CHD)患儿父母疾病不确定感与焦虑、抑郁的关系。方法:采用问卷调查法,应用中文版疾病不确定感父母量表(PPUS)和医院焦虑、抑郁量表(HADS)对113例CHD患儿父母进行测评。结果:CHD患儿父母的疾病不确定感总分为(82.62±11.02)分,焦虑总分为(11.48±3.67)分,抑郁总分为(10.35±4.23)分,疾病不确定感总分及不明确性、信息缺乏性、不可预测维度与焦虑呈正相关;疾病不确定感总分及不明确性、复杂性、不可预测性维度与抑郁呈正相关(P<0.05)。回归分析显示,不明确性、家庭人均月收入和信息缺乏性是患儿父母焦虑的影响因素(β=0.596、-0.240和0.193,P<0.05);不明确性、家长性别是抑郁的影响因素(β=0.274和0.226,P<0.05)。结论:CHD患儿父母存在较高程度的疾病不确定感、焦虑和抑郁,临床工作中应对患儿父母的疾病不确定感进行评估并给予个体化干预,通过降低疾病不确定感,缓解焦虑和抑郁情绪。

关键词：先天性心脏病父母疾病不确定感焦虑抑郁

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荇菜组织培养及植株再生体系的建立

分子植物育种 2019年第18期17卷 6080-6087页

作者：杨涓王猛华剑锋常皓然李晓旭丁苗苗王玲霞梁文裕宁夏大学生命科学学院

荇菜(Nymphoides peltatum)是一种具有观赏、药用及水质净化作用的水生植物。为建立荇菜组织培养和离体再生体系,以野生荇菜为材料,研究了不同外植体(根,茎和叶)和不同植物生长调节剂配比对其愈伤组织、不定芽和再生根诱导分化的影响。... 详细信息

荇菜(Nymphoides peltatum)是一种具有观赏、药用及水质净化作用的水生植物。为建立荇菜组织培养和离体再生体系,以野生荇菜为材料,研究了不同外植体(根,茎和叶)和不同植物生长调节剂配比对其愈伤组织、不定芽和再生根诱导分化的影响。结果表明,培养基为MS+NAA(0.3 mg/L)+6-BA(1.0 mg/L)时,叶的愈伤组织诱导率为73.3%;MS+NAA(0.2 mg/L)+6-BA(1.5 mg/L)培养基中丛生芽的诱导率达到76.7%,形成的丛生芽长势较好;培养基为MS+NAA(0.3 mg/L)+6-BA(1.0 mg/L)时,带节茎段不定芽诱导率达66.7%;采用MS+NAA(0.3 mg/L)培养基诱导不定根,生根率为100%。再生苗移栽后存活率可达90%。研究结果为快速恢复和保护荇菜资源,并利用遗传转化实现新种质培育提供了实验依据。

关键词：荇菜(Nymphoides peltatum) 组织培养植株再生植物生长调节剂

发菜GPR基因(proA)克隆及其干旱胁迫下的差异表达

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分子植物育种 2019年第14期17卷 4648-4655页

作者：丁苗苗刘阳李晓旭王猛田姣王玲霞徐婷婷纳小凡梁文裕宁夏大学生命科学学院银川750021 宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室银川750021

proA编码的γ-谷氨酰磷酸还原酶(GPR)是脯氨酸合成途径的关键酶。该研究通过设计特异性引物克隆获得全长1 308 bp的发菜proA基因(GenBank登录号为KX553954)。与点形念珠藻的proA基因及其推译的氨基酸序列相似性分别为91%和93%;氨基酸序... 详细信息

proA编码的γ-谷氨酰磷酸还原酶(GPR)是脯氨酸合成途径的关键酶。该研究通过设计特异性引物克隆获得全长1 308 bp的发菜proA基因(GenBank登录号为KX553954)。与点形念珠藻的proA基因及其推译的氨基酸序列相似性分别为91%和93%;氨基酸序列中第123位的Leu疏水性最强,第80位的Lys亲水性最强;Thr、Ser和Tyr分别有19、12、4个磷酸化位点;proA编码的蛋白为膜外蛋白,其二级结构由α螺旋、β折叠、无规卷曲和β转角构成。将proA基因在大肠杆菌表达,获得一个47.22 kD的外源蛋白,MALDI-TOF-TOF/MS分析证明该外源蛋白为γ-谷氨酰磷酸还原酶。随着干旱胁迫程度的增加,发菜proA在转录水平的差异表达及脯氨酸含量均呈现增加的趋势。研究结果对深入研究发菜proA的分子功能及阐明其在干旱胁迫下的调控机制具有重要意义。

关键词：干旱胁迫发菜 γ-谷氨酰磷酸还原酶基因克隆差异表达