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Effect of Tangnaikang on TGF-β_1-induced transdifferentiation of human renal tubular epithelial HK-2 cells

Journal of Traditional Chinese Medicine 2013年第3期33卷 388-393页

作者： Lixia Yang Xinhuan Ma Tao Cheng Tonghua Liu Lili Wu Wen Sun margetts peter joseph Central Laboratory of Gansu Province Academy of Traditional Chinese Medicine Pharmacy Department Gansu Province Hospital of Traditional Chinese Medicine Institute of Traditional Chinese Medicine Information Gansu Province Academy of Traditional Chinese Medicine Science and Technology Department Beijing University of Traditional Chinese Medicine Department of Nephrology St. Joseph's Hospital of McMaster University

OBJECTIVE： To explore the function of Tangnai- kang （TNK） in the prevention and treatment of re- nal interstitial fibrosis through transdifferentiation of the human renal tubular epithelial cell line HK-2 induced bytransforming growth factor-β1 （TGF-β1）. METHODS： HK-2 cells cultured in dulbecco＇s modi- fied eagle medium/F12 （1：1） with 10% fetal calf se- rum were divided into six groups： blank control group, TGF-β1 group （TGF-β1 10 ng/mL）, serum con- trol group （TGF-β1 10 ng/mL ＋ 10% serum）, treat- ment group 1 （TGF-β1 10 ng/mL ＋ 5% TNK serum）, treatment group 2 （TGF-β1 10 ng/mL＋10% TNK se-rum）, and treatment group 3 （TGF-β1 10 ng/mL＋ 20% TNK serum）. Cell proliferation was detected by 4,5-Dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazoliu m bromide assay. Expression of a-smooth muscle ac- tin （a-SMA） and E-cadherin were observed by im- munohistochemical assay. The contents of collagen Ⅰ （Col Ⅰ）, collagen Ⅲ（ColⅢ）, and fibronectin （FN） in the culture medium supernatant were detected by ELISA. RESULTS： E-cadherin was expressed and α-SMA was not expressed in normal HK-2 cells. In HK-2 cells cultured with TGF-β1, α-SMA expression signifi- cantly increased, HK-2 cells significantly proliferat- ed, and secretion of Col Ⅰ, Col Ⅲ, and FN significantly increased compared with the blank control group （all P〈0.05）. In the HK-2 cells cultured with TGF-β1 and TNK serum, the expression of α-SMA signifi- cantly decreased, the expression of E-cadherin sig- nificantly increased, and the cell proliferation and the secretion of Col Ⅰ, Col Ⅲ and FN were significant- ly inhibited compared with the TGF-β1 group （all P〈 0.05. CONCLUSION： TNK can inhibit cell proliferation and reduce secretion of Col Ⅰ, Col Ⅲ, and *** in- dicates that TNK can inhibit transdifferentiation of human renal tubular epithelial cells induced by TGF-β1, with the effect of preventing and treating renal interstitial fibrosis.

关键词： Transforming growth factor beta 1 Epi-thelial cells Cell proliferation Cell Transdifferentia-tion Tangnaikang

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基于Smads信号通路探讨止消通脉宁干预TGF-β_1诱导HK-2细胞转分化的研究

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西部中医药 2013年第6期26卷 10-12页

作者：舒畅杨丽霞程涛刘铜华吴丽丽 margetts peter joseph 甘肃中医学院甘肃兰州730000 甘肃省中医药研究院北京中医药大学麦克马斯特大学

目的:探讨止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化Smad信号通路的影响。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110 ... 详细信息

目的:探讨止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化Smad信号通路的影响。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、中药含药血清低剂量组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁含药血清)、中药含药血清中剂量组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁含药血清)、中药含药血清高剂量组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁含药血清)。药物干预24小时后,荧光定量PCR检测TβRI、TβRⅡ的mRNA表达,Western blot检测Smad 2、Smad 3的蛋白表达。结果:HK-2细胞经TGF-β1诱导后,TβRI、TβRⅡ的mRNA表达和Smad 2、Smad 3的蛋白表达显著上升,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),经止消通脉宁含药血清干预后,其表达逐步下降,与单纯TGF-β1诱导组相比差异有统计学意义(P<0.05)。而空白血清无此作用。结论:止消通脉宁能够调控TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化Smad信号通路,在一定程度上具有抑制肾间质纤维化的作用。

关键词：止消通脉宁 TGF-β1 HK-2细胞 TβRI TβRII Smad2 Smad3

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止消通脉宁对TGF-β_1诱导的HK-2细胞Smad2、3、7 mRNA表达的影响

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西部中医药 2013年第9期26卷 16-19页

作者：杨频杨丽霞刘铜华吴丽丽 margetts peter joseph 甘肃省中医学校甘肃兰州730050 甘肃省中医药研究院北京中医药大学 McMaster University Hamilton Ontario

目的:探讨止消通脉宁对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)Smad 2、Smad 3、Smad 7的影响。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1:1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL... 详细信息

目的:探讨止消通脉宁对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)Smad 2、Smad 3、Smad 7的影响。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1:1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、中药含药血清低剂量组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁含药血清)、中药含药血清中剂量组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁含药血清)、中药含药血清高剂量组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁含药血清)。药物干预24小时后,荧光定量PCR检测Smad 2、smad 3、Smad 7的mRNA表达。结果:HK-2细胞经TGF-β1诱导后,Smad 2、smad 3的mRNA表达显著上升,Smad 7的mRNA表达下降,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05),但经止消通脉宁含药血清干预后,Smad 2、smad 3的mRNA表达逐步下降,Smad 7的mRNA表达上调,与单纯TGF-β1诱导组相比有显著性差异(P<0.05)。而空白血清无此作用。结论:止消通脉宁能够调控TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化Smad信号通路mRNA表达的作用,在一定程度上具有抑制肾间质纤维化的作用。

关键词：止消通脉宁转化生长因子-β1 HK-2细胞 Smad2mRNA Smad3mRNA Smad 7mRNA

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Defining the association between the prolonged operative time and 90-day complications in patients undergoing radical cystectomy

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Asian Journal of Urology 2024年第3期11卷 429-436页

作者： peter Hanna joseph Zabell Badrinath Konety Christopher Warlick Department of Urology University of MinnesotaMinneapolisMNUSA Department of Urology Aswan UniversityAswanEgypt Department of Urology Rush UniversityChicagoILUSA

Objective:Radical cystectomy is a complex lengthy procedure associated with postoperative *** aimed to assess the operative time(OT)in patients undergoing radical cystectomy and its impact on 90-day postoperative complications and readmission ***:The retrospective cohort study included 296 patients undergoing radical cystectomy and urinary diversion from May 2010 to December 2018 in our *** OT of 369 min was set as a cutoff value between short and long OT *** primary outcome was 90-day postoperative complication *** outcomes were gastrointestinal recovery time,length of hospital stay,and 90-day readmission ***:The overall incidence of 90-day postoperative complications was 79.7%where 43.2%representing low-grade complications according to the ClavieneDindo classification(Grade 1 and Grade 2),and 36.5%representing high-grade complications(Grade3).Gastrointestinal tract and infectious complications are the most common complications in our data set(45.9%and 45.6%,respectively).On multivariable analysis,prolonged OT was significantly associated with odds of high-grade complications(odds ratio 2.340,95%confidence interval 1.288e4.250,p=0.005).After propensity score-matched analysis,a higher incidence of major complications was identified in the long OT group 55(51.4%)compared to 35(32.7%)in the short OT group(p=0.006).A shorter gastrointestinal tract recovery time was noticed in the short OT group(p=0.009).Prolonged OT was associated with a higher 90-day readmission rate on univariate and multivariate analyses(p<0.001,p=0.001,respectively).

关键词： Radicalcystectomy Operativetime Complication Readmission

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止消通脉宁干预TGF-β_1诱导HK-2细胞增殖的研究

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西部中医药 2012年第8期25卷 10-13页

作者：任虹杨丽霞吴丽丽刘铜华 margetts peter joseph 兰州市西固区人民医院甘肃兰州730060 甘肃省中医药研究院北京中医药大学 McMaster University

目的:通过观察止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖的影响,探讨治疗糖尿病肾病有效中药复方止消通脉宁在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养... 详细信息

目的:通过观察止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖的影响,探讨治疗糖尿病肾病有效中药复方止消通脉宁在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁含药血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁含药血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁含药血清)。倒置显微镜下观察各组细胞形态,MTT法检测细胞增殖。结果:TGF-β110 ng/mL能显著诱导人肾小管上皮细胞增殖,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05),且其作用随处理时间的延长而增强,但和止消通脉宁含药血清共同作用后,其促细胞增殖作用受到一定抑制(P<0.05)。结论:止消通脉宁能抑制HK-2细胞增殖,在一定程度上具有防治肾间质纤维化的作用。

关键词： TGF-β1 HK-2细胞止消通脉宁增殖

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止消通脉宁对转化生长因子-β_1诱导的人肾小管上皮细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及纤连蛋白mRNA表达的影响

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中国中医药信息杂志 2012年第11期19卷 33-35页

作者：张邦能杨丽霞程涛刘铜华吴丽丽 margetts peter joseph 甘肃省中医院甘肃省中医药研究院甘肃兰州730050 北京中医药大学北京100029 加拿大麦克马斯特大学

目的探讨止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)mRNA表达的影响。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养,分为空白对照组、T... 详细信息

目的探讨止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)mRNA表达的影响。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养,分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁含药血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁含药血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁含药血清)。药物干预24 h后,荧光定量PCR检测ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达。结果 HK-2细胞经TGF-β1诱导后,ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达显著上升,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经止消通脉宁含药血清干预后,其表达逐步下降,与单纯TGF-β1诱导组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。空白血清无此作用。结论止消通脉宁在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化作用。

关键词：止消通脉宁转化生长因子-β1 人肾小管上皮细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原纤连蛋白

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止消通脉宁干预TGF-β_1诱导的HK-2细胞VEGF mRNA的表达

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中国中西医结合肾病杂志 2013年第8期14卷 674-676页

作者：张玉梅杨丽霞程涛刘铜华吴丽丽 margetts peter joseph 甘肃省兰州市西固区人民医院兰州730060 甘肃省中医药研究院兰州730050 北京中医药大学北京100029 McMaster University

目的:通过观察止消通脉宁药物血清干预转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达,进一步探讨其在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培... 详细信息

目的:通过观察止消通脉宁药物血清干预转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达,进一步探讨其在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110ng/ml)、空白血清对照组(TGF-β110ng/ml+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110ng/ml+10%低剂量止消通脉宁药物血清)、干预2组(TGF-β110ng/ml+10%中剂量止消通脉宁药物血清)、干预3组(TGF-β110ng/ml+10%高剂量止消通脉宁药物血清)。药物干预24h后,荧光定量PCR检测VEGF mRNA的表达。结果:HK-2细胞经TGF-β1诱导后,VEGF mRNA的表达显著上升,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),经止消通脉宁药物血清干预后,VEGFmRNA的表达逐步下降,与单纯TGF-β1诱导组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:止消通脉宁在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞纤维化,其机制的可能与调节纤维化细胞因子VEGF的mRNA表达有关。

关键词：止消通脉宁转化生长因子-β1 人肾小管上皮细胞血管内皮生长因子

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止消通脉宁干预转化生长因子-β_1诱导人肾小管上皮细胞表型转化的研究

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中国中医药信息杂志 2013年第1期20卷 37-39,42页

作者：杨丽霞李晓东程涛刘铜华吴丽丽 margetts peter joseph 甘肃省中医药研究院甘肃兰州730050 北京中医药大学北京100029 加拿大麦克马斯特大学

目的观察止消通脉宁药物血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化的影响,并探讨其机制。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养并分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空... 详细信息

目的观察止消通脉宁药物血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化的影响,并探讨其机制。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养并分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁药物血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁药物血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁药物血清)。药物干预24 h后,免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。在24、48、72 h应用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)的含量。结果正常HK-2细胞表达E-cadherin,不表达α-SMA,经TGF-β1刺激后细胞表型发生转变,E-cadherin的表达明显减弱,α-SMA表达明显增强,且ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。止消通脉宁药物血清干预后α-SMA表达明显减弱,E-cadherin表达明显增强;同时抑制了ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌,与TGF-β1诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论止消通脉宁在一定程度上能够抑制人肾小管上皮细胞表型转化,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化的作用。

关键词：止消通脉宁转化生长因子-β1 人肾小管上皮细胞表型转化 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原纤连蛋白

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糖耐康对转化生长因子-β_1诱导的HK-2细胞分泌细胞外基质成分的影响

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中国中医药信息杂志 2013年第8期20卷 39-41页

作者：李钦杨丽霞张邦能刘铜华吴丽丽孙文 margetts peter joseph 甘肃省中医学校甘肃兰州730050 甘肃省中医院甘肃省中医药研究院甘肃兰州730050 北京中医药大学北京100029 麦克马斯特大学

目的观察糖耐康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)对细胞外基质成分表达的影响,探讨糖耐康治疗肾间质纤维化的作用机制。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养,并分为6组:空白对照组、TGF-... 详细信息

目的观察糖耐康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)对细胞外基质成分表达的影响,探讨糖耐康治疗肾间质纤维化的作用机制。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养,并分为6组:空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+5%糖耐康药物血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%糖耐康药物血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+20%糖耐康药物血清)。药物干预24 h,荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)的mRNA表达。结果 HK-2细胞经TGF-β1诱导后,ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达显著上升,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经糖耐康药物血清干预后,其表达逐步下降,与TGF-β1诱导组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。而空白血清无此作用。结论糖耐康在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化的作用。

关键词：糖耐康转化生长因子-β1 HK-2细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原纤连蛋白

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止消通脉宁对TGF-β_1诱导的人肾小管上皮细胞CTGF、PAI-1、MMP-9 mRNA表达的影响

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中国中医药信息杂志 2013年第3期20卷 43-45,85页

作者：马新换颜春鲁杨丽霞张邦能刘铜华吴丽丽 margetts peter joseph 甘肃省中医院甘肃省中医药研究院甘肃兰州730050 甘肃中医学院甘肃兰州730000 北京中医药大学北京100029 加拿大麦克马斯特大学

目的观察止消通脉宁药物血清(以下简称"药物血清")清干预转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表达,探讨其在防治肾间质纤维... 详细信息

目的观察止消通脉宁药物血清(以下简称"药物血清")清干预转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表达,探讨其在防治肾间质纤维化方面的作用。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养。实验分为空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量药物血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量药物血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量药物血清)。药物干预24 h后,荧光定量PCR检测CTGF、PAI-1和MMP-9 mRNA的表达。结果 HK-2细胞经TGF-β1诱导后,CTGF、PAI-1 mRNA表达显著上升,MMP-9 mRNA表达减弱,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经止消通脉宁药物血清干预后,CTGF、PAI-1 mRNA表达逐步下降,MMP-9 mRNA表达逐步上升,与单纯TGF-β1诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论止消通脉宁在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞纤维化,其机制可能与调节纤维化细胞因子CTGF、PAI-1和MMP-9的mRNA表达有关。

关键词：止消通脉宁转化生长因子-β1 人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子纤溶酶原激活物抑制物-1 基质金属蛋白酶-9

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