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Science China(Life Sciences) 2005年第5期48卷 487-494页

作者： SUN Zhaogang zhang manfu Lab for Animal Molecular Virology College of Biological Sciences China Agricultural University Beijing 100094 China Lab for Animal Molecular Virology College of Biological Sciences China Agricultural University Beijing 100094 China

The secreted alphaherpesvirus glycoprotein G (gG) works differently from other proteins. Analysis of the role of ILTV gG in virus attachment, penetration, direct cell-to-cell spread (CTCS) and the growth curve showed that gG or its antibody had no effect on ILTV attachment and penetration and that the gG antibody reduced the virus plaque size and the one-step growth curve on chicken embryo liver (CEL) cells, but gG did not affect the virus plaque size or the one-step growth curve on CEL cells. Laser scanning confocal microscopy (LSCM) detection showed that ILTV gG is located in the perinuclear region and the membrane of the CEL cells. These results suggested that ILTV gG might contribute to direct cell-to-cell transmission.

关键词： infectious laryngotracheitis virus, glycoprotein G, direct cell-to-cell transmission.

Prokaryotic expression, localization and function of the infectious laryngotracheitis virus glycoprotein G

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Chinese Science Bulletin 2005年第18期50卷 2033-2038页

作者： SUN Zhaogang zhang manfu Lab of Animal Molecular Virology College of Biological Science China Agricultural University Beijing 100094 China Department of Bacteriology and Immunology Beijing TB & thoracic Tumor Research Institute Beijing 101149 China

The infectious laryngotracheitis virus (ILTV) glycoprotein G (gG) gene of E3 and Zhonghai strains was cloned, sequenced and compared with the gG gene of other Type I animal herpesviruses. To find the localization and the function of the gG in the infected cells, the 35 kD fusion pro-tein (His-GG) was expressed by inserting the coding region of gG except for the signal peptide into pET30a (+). After puri-fication of the His-GG fusion protein, the rats’ antibody to the His-GG was prepared and purified by using the protein G Sepharose. Results of laser scanning confocal microscopy (LSCM) detection showed that the ILTV gG was in the peri-nuclear region and membrane of chicken embryo liver (CEL) and kidney (CEK) cells, and that the gG accumulated more in the coalescent part than in the other parts of the adjacent CEL or CEK cells. The plaque size and the one-step growth curve tests suggested that the ILTV gG was required for viral growth by cell-to-cell direct infection in tissue-cultured CEL cells.

关键词：原核表达糖蛋白传染性喉气管炎缩氨酸

Residues of 862, 921 of VP3 are associated with virulence in infectious bursal disease virus

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Natural Science 2010年第7期2卷 718-725页

作者： Renmao Li Haiying Wang Guangming Huang manfu zhang 不详

Reverse genetics was used to study the effect of particular amino acids of infectious bursal disease virus (IBDV) on virulence. Using site-directed mutagenesis, altering of two amino acids in VP2 (Q253H, A284T) and VP3 (H783Q, V862M, I921V) in the segment A of a Chinese very virulent IBDV field strain Harbin-1, 4 virus mutants including H253/284, H783/862, H862/921, H921/783 were rescued. To evaluate the characteristics of the recovered viruses in vivo, we inoculated 4-week-old chickens with virus mutants and rescued Harbin- 1 (rHarbin-1), analyzed their bursae for pathological lesions 4 days postinfection. rHarbin-1 and H783/862, H253/284 caused severe bursal lesion, milder lesion for H862/921, mildest for H921/783. However, H253/284 caused the lowest mortality. The results showed that residue at position Q253, A284 of VP2 and V862, I921 of VP3 gene are involved with virulence, but there is difference between VP2 and VP3’s role in virulence. The ability of 862 and 921 to control virulence in VP3 is stronger than 253 and 284.

关键词： IBDV VP3 Mutagenesis Reverse Genetics Viru-lence

新城疫北京强毒株融合糖蛋白(F)基因的克隆及序列分析

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农业生物技术学报 1998年第4期6卷 29-32+34-37页

作者：霍龙飞张曼夫中国农业大学生物学院生物化学与生物分子学系

ＮＤＶ北京强毒株Ｆ４８Ｅ９经ＳＰＦ鸡胚增殖，超速离心纯化，异硫氰酸胍法提取病毒ＲＮＡ后，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增，得到其融合糖蛋白（Ｆ）基因。将扩增产物与ｐＧＥＭ○Ｒ－Ｔ载体相连接转化，经过Ａｍｐ－ＩＰＴＧ－Ｘｇａｌ（ＡＩ... 详细信息

ＮＤＶ北京强毒株Ｆ４８Ｅ９经ＳＰＦ鸡胚增殖，超速离心纯化，异硫氰酸胍法提取病毒ＲＮＡ后，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增，得到其融合糖蛋白（Ｆ）基因。将扩增产物与ｐＧＥＭ○Ｒ－Ｔ载体相连接转化，经过Ａｍｐ－ＩＰＴＧ－Ｘｇａｌ（ＡＩＸ）平板筛选、ＨｉｎｄⅢ酶切及ＰＣＲ鉴定，初步获得了含Ｆ基因的阳性克隆。用渐近法（Ｐｒｉｍｅｒｗａｌｋｉｎｇ）对克隆片段进行全序列分析，证明得到了全长１７４４个核苷酸的ＮＤＶＦ蛋白基因。所获得Ｆ基因与国外已报道的６个强毒株序列进行比较，可知Ｆ４８Ｅ９与其它毒株均有一定差异（氨基酸差异在２６／５５３～４４／５５３），但较接近于Ａｕｓｔｒａｌｉａ－Ｖｉｃｔｏｒａ毒株（氨基酸差异为２６／５５３）。

关键词：新城疫病毒融合糖蛋白 RT-PCR 基因克隆序列分析

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多空间尺度景观格局与地表水质响应关系研究

环境科学学报 2022年第2期42卷 23-31页

作者：刘可暄王冬梅常国梁张满富北京林业大学水土保持学院北京100083 北京市水科学技术研究院北京100048 北京市水务局北京100038

截至2020年底,北京市已建成466条生态清洁小流域,其中,密云水库上游(北京境内)179条小流域,将于2022年底全部达到生态清洁小流域标准.本研究对密云水库流域进行子流域划分并创建缓冲区,通过汛期水质监测,结合统计分析和景观格局指数计算... 详细信息

截至2020年底,北京市已建成466条生态清洁小流域,其中,密云水库上游(北京境内)179条小流域,将于2022年底全部达到生态清洁小流域标准.本研究对密云水库流域进行子流域划分并创建缓冲区,通过汛期水质监测,结合统计分析和景观格局指数计算,量化不同空间尺度景观格局和水质的响应关系.结果表明:①密云水库主要河流水质除总氮指标外均满足地表水Ⅱ类标准,汛期氮污染风险较其他水质指标大,其变异系数为48%;②总磷(TP)与蔓延度指数(CONTAG)呈显著正相关,且氮、磷的净化能力随着景观复杂程度的增加而减弱;③林地是流域内优势景观类型,耕地和建设用地比例随缓冲区宽度增加而逐渐降低;④不同空间尺度缓冲区景观格局指数对地表水水质具有较好的解释度,200 m缓冲区景观结构对水质的解释能力最强,耕地和建设用地对水质的影响最显著,是未来水务管理的关键区域.

关键词：密云水库景观格局地表水水质不同空间尺度

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新时期北京市农业高效节水建设思路探讨

中国水利 2015年第11期 49-50,53页

作者：张满富北京市水务局北京100038

北京农业节水工作经过多年发展,节水灌溉面积比例已经超过80%,农业用新水占年度用水总量比例已经不足20%,灌溉水利用系数已经超过0.7,农业节水水平位居全国前列。2014年习近平总书记视察北京工作时,提出北京要加大农业节水发展力度,解... 详细信息

北京农业节水工作经过多年发展,节水灌溉面积比例已经超过80%,农业用新水占年度用水总量比例已经不足20%,灌溉水利用系数已经超过0.7,农业节水水平位居全国前列。2014年习近平总书记视察北京工作时,提出北京要加大农业节水发展力度,解决地面灌溉的问题。为落实总书记的指示,破解北京农业节水发展的瓶颈,在分析北京市农业节水发展存在问题的基础上,提出了"细定地、严管井、上设施、增农艺、统收费、节有奖"的农业高效节水新思路。

关键词：北京市农业高效节水思路

正义和反义Calpastatin cDNA真核表达载体的构建

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畜牧兽医学报 2000年第2期31卷 97-101页

作者：杜敏南庆贤朱美君张曼夫中国农业大学食品学院北京100094 中国农业大学生物学院北京100094

本研究利用真核表达载体 pRC/RSV ,将位于 pBS SK质粒中的CalpastatincDNA以正反两个方向构入载体 ;经酶切分析 ,构建的质粒结构正确。所构建质粒 pRC/RSV正义、反义CalpastatincDNA两个表达载体 ,为进一步转化肌细胞 ,人为控制Calpasta... 详细信息

本研究利用真核表达载体 pRC/RSV ,将位于 pBS SK质粒中的CalpastatincDNA以正反两个方向构入载体 ;经酶切分析 ,构建的质粒结构正确。所构建质粒 pRC/RSV正义、反义CalpastatincDNA两个表达载体 ,为进一步转化肌细胞 ,人为控制Calpastatin基因的表达 ,从而控制Calpain活性 ,深入研究钙蛋白酶在肌肉发育及肉嫩化中的作用打下基础。

关键词：钙蛋白酶真核表达载体肌肉发育基因表达家畜

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狂犬病分子流行病学的研究进展

中国兽医杂志 1999年第5期25卷 48-49页

作者：李伟张曼夫王树蕙中国农业大学分子病毒室中国医学科学院基础所微生物与免疫室

狂犬病是一种危害严重的人兽共患病。以往主要用血清中和试验和单克隆抗体方法进行狂犬病病毒分型和流行病学调查。近年来，由于狂犬病在野生动物中发生流行以及狂犬病病毒分子生物学研究的迅速发展，单纯用常规方法已不能满足对狂犬病... 详细信息

狂犬病是一种危害严重的人兽共患病。以往主要用血清中和试验和单克隆抗体方法进行狂犬病病毒分型和流行病学调查。近年来，由于狂犬病在野生动物中发生流行以及狂犬病病毒分子生物学研究的迅速发展，单纯用常规方法已不能满足对狂犬病病毒分型及其流行病学调查和研究的需...

关键词：狂犬病分子流行病学研究进展

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超高滚流对高热效率汽油机燃烧过程影响研究

内燃机工程 2018年第2期39卷 29-34页

作者：张满富祖炳锋王振徐玉梁刘丽娜白杨天津大学内燃机研究所天津300072 天津大学机械工程学院天津300072

以某自然吸气高压缩比直喷汽油机为研究对象,利用一维软件和三维软件对汽油机的工作过程进行了数值模拟,探究了超高滚流进气系统在高热效率燃烧系统中对燃烧性能的趋势性影响。研究中设计了三款不同滚流比气道和四种计算方案,对不同计... 详细信息

以某自然吸气高压缩比直喷汽油机为研究对象,利用一维软件和三维软件对汽油机的工作过程进行了数值模拟,探究了超高滚流进气系统在高热效率燃烧系统中对燃烧性能的趋势性影响。研究中设计了三款不同滚流比气道和四种计算方案,对不同计算方案的瞬态滚流比、瞬态湍动能、缸内速度场、当量比分布、放热率和缸内平均压力等进行了对比分析。研究结果表明:滚流比的大小影响缸内混合气的分布和湍动能的强度,较强的滚流比可以将更多能量保留到上止点附近,提高点火时刻缸内平均湍动能,从而影响缸内燃烧,进而影响发动机的性能;带凹坑的活塞形状设计可以使湍动能在不同滚流比下都保持在相对中心位置,使火花塞处在湍动能较高区域,有利于点火之后火焰的迅速传播;在此燃烧系统中,滚流比增大到一定程度后,缸内的平均压力峰值难再提高,对性能的增益已接近极限,过高的滚流比对发动机性能的提升已无明显作用。

关键词：自然吸气直喷汽油机进气道滚流比数值模拟

狂犬病病毒3aG株核蛋白基因cDNA的克隆及序列分析

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农业生物技术学报 1999年第3期7卷 223-229页

作者：李伟张新梅张曼夫王树惠中国医学科学院基础医学研究所!北京100005 中国农业大学生物学院!北京100094

从狂犬病病毒感染的ＢＨＫ细胞裂解上清液中快速提取病毒ＲＮＡ，用反转录聚合酶链式反应（ＲＴＰＣＲ）方法得到编码核蛋白完整结构基因的ｃＤＮＡ。进一步将此基因克隆入ｐＵＣ１８中，进行核苷酸序列分析，并与国外ＰＶ、Ｃ... 详细信息

从狂犬病病毒感染的ＢＨＫ细胞裂解上清液中快速提取病毒ＲＮＡ，用反转录聚合酶链式反应（ＲＴＰＣＲ）方法得到编码核蛋白完整结构基因的ｃＤＮＡ。进一步将此基因克隆入ｐＵＣ１８中，进行核苷酸序列分析，并与国外ＰＶ、ＣＶＳ、ＳＡＤＢ１９株以及国内５ａＧ株的Ｎ基因序列进行了同源性比较，证明所克隆Ｎ基因正确。

关键词：狂犬病病毒核蛋白 RTPCR cDNA