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利用酵母双杂交系统鉴定甘蓝SCR与SRK胞外域片段间的相互作用

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中国农业科学 2011年第9期44卷 1953-1962页

作者：杨红朱利泉张贺翠杨永军薛丽琰杨昆余浩彭一波罗兵吴志刚黄丹高启国王小佳西南大学农学与生物科技学院重庆市蔬菜重点实验室

【目的】利用酵母双杂交系统鉴定甘蓝自交不亲和决定因子S位点富含半胱氨酸蛋白/S位点蛋白11(SCR/SP11)与S位点受体激酶(SRK)胞外域(eSRK)片段间可能的相互作用区域。【方法】以结球甘蓝B3为材料,利用分子克隆技术,分别构建以pGBKT7为... 详细信息

【目的】利用酵母双杂交系统鉴定甘蓝自交不亲和决定因子S位点富含半胱氨酸蛋白/S位点蛋白11(SCR/SP11)与S位点受体激酶(SRK)胞外域(eSRK)片段间可能的相互作用区域。【方法】以结球甘蓝B3为材料,利用分子克隆技术,分别构建以pGBKT7为载体的全长SCRB3、SCRB3-1、SCRB3-2的重组诱饵质粒;以pGADT7为载体的全长eSRKB3、eSRKB3-1、eSRKB3-2的重组激活域(AD)质粒。用PEG/liAc法将上述重组诱饵质粒转化感受态酵母菌Y2HGold,重组AD质粒转化感受态酵母菌Y187;Y2HGold[pGBKT7-SCRB3-s]、Y187[pGADT7-eSRKB3-s]两两融合培养,观察交配菌在SD/-Trp-Leu/x-α-gal/AbA(DDO/x/A)、SD/-Trp-Leu-Ade-His/x-α-gal/AbA(QDO/x/A)平板上的生长情况。【结果】酵母双杂交重组表达载体构建成功,且无毒性和自激活作用产生;9个试验组中只有SCRB3-1、SCRB3-2与eSRKB3-1、eSRKB3-2重组表达质粒转化子两两组合的4个融合株在QDO/x/A平板上出现蓝色克隆,激活了报告基因AUR1-C、MEL1、HIS3、ADE2。【结论】酵母双杂交系统适用于SCR与SRK蛋白相互作用的研究,初步确定了SCR与eSRK存在相互作用,SRK跨膜域的存在与否对其相互作用的研究没有影响。

关键词：结球甘蓝自交不亲和 S位点受体激酶(SRK) S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR) 酵母双杂交

三仁汤对脾胃湿热证大鼠神经内分泌免疫功能影响的研究

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现代消化及介入诊疗 2014年第3期19卷 147-149,152页

作者：洪冰李云鹏武凯歌马文校钱益啸罗丹文小敏南方医科大学中西医结合医院 510315 南方医科大学中医药学院 510515

目的探讨三仁汤对脾胃湿热证大鼠神经内分泌免疫功能相关指标的影响作用。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、三仁汤(高、中、低剂量)组,利用复合因素复制脾胃湿热证动物模型。通过称量法计算胸腺和脾脏指数,同时采用放... 详细信息

目的探讨三仁汤对脾胃湿热证大鼠神经内分泌免疫功能相关指标的影响作用。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、三仁汤(高、中、低剂量)组,利用复合因素复制脾胃湿热证动物模型。通过称量法计算胸腺和脾脏指数,同时采用放射免疫法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、血清皮质醇(Cor)、白介素2(IL-2)的水平。结果造模成功后的各组大鼠血浆CRH、ACTH及血清Cor升高,三仁汤治疗组各剂量对其均有降低作用。造模后各模型组大鼠胸腺、脾脏指数及血清IL-2降低,三仁汤(高、中、低剂量)组可以升高模型组大鼠上述指标的水平(P<0.05);且以上两种结果均以中剂量组效果最好。结论复合因素造模可以使脾胃湿热证大鼠神经内分泌免疫功能发生异常改变,三仁汤可以调节脾胃湿热证大鼠上述功能,这可能是清热祛湿的机理之一。

关键词：三仁汤脾胃湿热证神经内分泌免疫

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新型冠状病毒肺炎诊断流程的构建及评价

中华医学杂志 2020年第16期100卷 1223-1229页

作者：熊曾傅蕾周晖刘进康王爱民黄燕黄勋易斌吴静李春辉全俊李敏冷月爽罗维军胡成平廖伟华中南大学湘雅医院放射科长沙410008 中南大学湘雅医院感染科长沙410008 中南大学湘雅医院急诊科长沙410008 中南大学湘雅医院感染控制中心长沙410008 中南大学湘雅医院检验科长沙410008 中南大学湘雅医院医务科长沙410008 中南大学湘雅医院呼吸科长沙410008

目的构建新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的诊断流程(简称湘雅流程),评估其准确度。方法纳入2020年1月23日至2月3日在中南大学湘雅医院排查COVID-19的≥12岁人群连续队列,按时间顺序分为试验库和验证库;记录该队列患者的性别、年龄、病程、... 详细信息

目的构建新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的诊断流程(简称湘雅流程),评估其准确度。方法纳入2020年1月23日至2月3日在中南大学湘雅医院排查COVID-19的≥12岁人群连续队列,按时间顺序分为试验库和验证库;记录该队列患者的性别、年龄、病程、流行病学史及发热,检测血常规及流感抗体。所有患者均行胸部CT,评价罹患COVID-19的可能性(第1类和第2类被认为CT-COVID-19阳性,可能为COVID-19),评估肺受累范围。按国家卫健委推荐诊疗方案(简称卫健委方案),采集疑似病例咽拭子标本,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测新型冠状病毒核酸,在试验库中计算流行病学史、发热、血淋巴细胞降低及CT检出核酸阳性的效能,多指标构建COVID-19诊断的湘雅流程,检验湘雅流程及卫健委方案检出核酸阳性的效能,最后在验证库内验证湘雅流程的效能。结果共纳入382例排查者,其中试验库261例、验证库121例;男192例(50.3%)、女190例(49.7%),中位年龄35岁(范围:15~92岁),有流行病学史183例(47.9%)、发热275例(72.0%)、血淋巴细胞降低212例(55.5%),胸部CT异常114例(29.8%),CT-COVID-19阳性43例(11.3%),咽拭子核酸阳性30例(7.9%)。胸部CT检出核酸阳性的灵敏度及特异度分别为0.950与0.704,准确度(0.809)均高于流行病学史(0.660)、发热(0.532)及血淋巴细胞降低(0.596)(P=0.001、0.002、0.003)。湘雅流程与卫健委方案均具有较高的灵敏度(均为1.000),但特异度、准确度均高于后者(0.872比0.765、0.778比0.592,均P<0.001)。湘雅流程需检测核酸的人数少于卫健委方案(31比64例),相差率为51.6%,核酸检测阳性率为64.5%(20/31)。在验证库中,湘雅流程筛选疑似病例的准确度为0.967,核酸检测阳性率为76.9%(10/13)。结论湘雅流程能预判新型冠状病毒核酸的检测结果,在流行期内可作为湖北省外地区≥12岁人群筛选COVID-19疑似病例的参考,但还需扩大样本进一步验证。

关键词：肺炎,病毒性诊断临床方案方案评价体层摄影术,X线计算机

Small P values may not yield robust findings:an example using REST-meta-PD

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Science Bulletin 2021年第21期66卷 2148-2152,M0003页

作者： Xi-Ze Jia Na Zhao Hao-ming Dong Jia-Wei Sun Marek Barton Roxana Burciu Nicolas Carrière Antonio Cerasa Bo-Yu Chen Jun Chen Stephen Coombes Luc Defebvre Christine Delmaire Kathy Dujardin Fabrizio Esposito Guo-Guang Fan Federica Di Nardo yi-Xuan Feng Brett W.Fling Saurabh Garg Moran Gilat Martin Gorges Shu-Leong Ho Fay BHorak xiao Hu xiao-Fei Hu Biao Huang Pei-Yu Huang Ze-Juan Jia Christina Jones Jan Kassubek Lenka Krajcovicova Ajay Kurani Jing li Qing li Ai-Ping liu Bo liu Hu liu Wei-Guo liu Renaud Lopes Yu-Ting Lou Wei luo Tara Madhyastha Ni-Ni Mao Grainne McAlonan Martin J.McKeown Shirley Pang Andrea Quattrone Irena Rektorova Alessia Sarica Hui-Fang Shang James M.Shine Priyank Shukla Tomas Slavicek xiao-Peng Song Gioacchino Tedeschi Alessandro Tessitore David Vaillancourt Jian Wang Jue Wang Z.Jane Wang Lu-Qing Wei Xia wu xiao-Jun Xu Lei Yan Jing Yang Wan-Qun Yang Nai-lin Yao De-Long Zhang Jiu-quan Zhang min-ming Zhang Yan-ling Zhang Cai-Hong zhou Chao-Gan Yan Xi-Nian Zuo Mark Hallett Tao wu Yu-Feng Zang Center for Cognition and Brain Disorders the Affiliated HospitalHangzhou Normal UniversityHangzhou 310015China Zhejiang Key Laboratory for Research in Assessment of Cognitive Impairments Hangzhou 311121China National Basic Science Data Center Beijing 100190China State Key Laboratory of Cognitive Neuroscience and Learning&McGovern Institute for Brain Research Beijing Normal UniversityBeijing 100875China School of Information and Electronics Technology Jiamusi UniversityJiamusi 154007China Neuroscience Program Central European Institute of TechnologyCEITECMasaryk UniversityBrno 62500Czech Republic Department of Applied Physiology and Kinesiology University of FloridaGainesville FL 32611USA Univ.lille InsermCHU LilleU1172-LilNCog-Lille Neuroscience&CognitionLille F-59000France The Institute for Biomedical Research and Innovation National Research CouncilMangone CS 87050Italy Department of Radiology The First Affiliated Hospital of China Medical UniversityShenyang 110001China Department of Radiology Guangdong Provincial Hospital of Chinese MedicineGuangzhou 510120China Department of Medicine Surgery and DentistryScuola Medica SalernitanaUniversity of SalernoFiscianoSA 132-84084Italy Department of Advanced Medical and Surgery Sciences University of Campania“Luigi Vanvitelli”Caserta 81100Italy Eye Center of the 2nd Affiliated Hospital Medical College of Zhejiang UniversityHangzhou 310020China Zhejiang Provincial Key Lab of Ophthalmology Hangzhou 310020China Department of Health and Exercise Science Colorado State UniversityFort Collins CO 80523USA Pacific Parkinson’s Research Centre University of British ColumbiaVancouver BC V6E 2M6Canada Department of Medicine(Neurology)University of British Columbia Vancouver BC V6T 1B7Canada Brain and mind Center The University of SydneySydney NSW 2006Australia Department of Neurology Ulm UniversityUlm 89081Germany Division of Neurology Department of MedicineQueen Mary HospitalUniversity of Hong KongHong Kong 999077China Department of

Thousands of resting state functional magnetic resonance imaging(RS-f MRI)articles have been published on brain *** precise localization of abnormal brain activity,a voxel-level comparison is *** of the large number of voxels in the brain,multiple comparison correction(MCC)must be performed to reduce false positive rates,and a smaller P value(usually including either liberal or stringent MCC)is widely recommended[1].

关键词：帕金森病 precise correction

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膜荚黄芪苯丙氨酸解氨酶特性的初步研究

辽宁林业科技 2010年第5期 1-2,35页

作者：孙晓丹金美玉严一字全雪丽吴松权延边大学农学院吉林龙井133400

该文初步研究了荚膜黄芪苯丙氨酸解氨酶(PAL)的基本特性。结果表明:PAL的最适反应时间为30min,PAL在Tris-HCl缓冲液中适宜的pH值为8.0,最适反应温度为37℃,PAL酶浓度过高或过低不利于酶的活力,PAL最适底物浓度为2mmol/L。

关键词：膜荚黄芪苯丙氨酸解氨酶特性

退变性脊柱侧凸手术加速康复外科围手术期管理策略专家共识

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第二军医大学学报 2020年第3期41卷 233-242页

作者：白玉树翟骁陈自强魏显招杨明园杨操周许辉李危石李利吴继功许建中赵建华王达义钱邦平朱泽章胡勇孙武权房敏郑召民王征李淳德丁文元夏磊沈建雄仉建国孙天胜罗卓荆海涌吕国华郝定均邱勇李明海军军医大学(第二军医大学)长海医院骨科上海200433 华中科技大学同济医学院协和医院骨科武汉430022 海军军医大学(第二军医大学)长征医院骨科上海200003 北京大学第三医院骨科北京100191 解放军总医院第四医学中心骨科北京100048 战略支援部队特色医学中心骨科北京100101 陆军军医大学重庆西南医院骨科重庆400038 陆军特色医学中心大坪医院脊柱外科重庆400042 湖北医药学院附属太和医院脊柱外科十堰442008 南京大学医学院附属鼓楼医院脊柱外科南京210008 香港大学李嘉诚医学院矫形与创伤外科学系香港999077 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院推拿科上海200437 中山大学第一附属医院脊柱外科广州510080 解放军总医院骨科北京100853 北京大学第一医院骨科北京100433 河北医科大学第三医院脊柱外科石家庄050051 郑州大学第一附属医院骨科郑州510370 中国医学科学院、北京协和医学院北京协和医院骨科北京100730 解放军总医院第七医学中心骨科北京100700 空军军医大学西京医院骨科西安710032 首都医科大学附属北京朝阳医院骨科北京100020 中南大学湘雅二医院脊柱外科长沙410011 西安交通大学附属红会医院脊柱外科西安710054

退变性脊柱侧凸常见于老年患者,通常合并高血压病、冠心病、糖尿病和骨质疏松等基础疾病,手术风险高、并发症多。加速康复外科(ERAS)要求综合考量患者的年龄、症状、体征、身体状况和骨质量等因素,以制定个体化的手术方案和围手术期干... 详细信息

退变性脊柱侧凸常见于老年患者,通常合并高血压病、冠心病、糖尿病和骨质疏松等基础疾病,手术风险高、并发症多。加速康复外科(ERAS)要求综合考量患者的年龄、症状、体征、身体状况和骨质量等因素,以制定个体化的手术方案和围手术期干预措施,这对改善患者预后和康复十分重要。经全国多位脊柱外科专家多次讨论,在循证医学证据支持下,针对退变性脊柱侧凸手术ERAS围手术期管理策略制定本共识意见,供临床工作参考和应用。

关键词：退变性脊柱侧凸外科学加速康复外科围手术期专家共识

基于miRNA及mRNA调控网络探讨氯化两面针碱干预肝细胞癌的作用机制

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中华中医药杂志 2021年第10期36卷 5882-5886页

作者：杨霞赖泽锋刘丽敏阳洁熊丹丹党裔武何融泉吴华裕黄志广庞玉艳陈罡广西医科大学第一附属医院南宁530021 广西医科大学南宁530021 广西医科大学第一附属医院病理科南宁530021

目的:探讨氯化两面针碱(NC)通过调控miRNA及mRNA表达抑制肝细胞癌(HCC)进展的潜在分子机制。方法:建立HCC裸鼠移植瘤模型,连续给药15d取瘤体提取总RNA,通过高通量测序技术检测NC处理前后miRNA及mRNA表达水平,对差异mRNA进行GO功能注释及... 详细信息

目的:探讨氯化两面针碱(NC)通过调控miRNA及mRNA表达抑制肝细胞癌(HCC)进展的潜在分子机制。方法:建立HCC裸鼠移植瘤模型,连续给药15d取瘤体提取总RNA,通过高通量测序技术检测NC处理前后miRNA及mRNA表达水平,对差异mRNA进行GO功能注释及KEGG通路分析,构建NC抗HCC的miRNA及mRNA调控网络;并以miR-300为例,验证miRNA在HCC中发挥的关键调控作用。结果:NC处理后25个miRNA显著下调;60个mRNA在NC处理后显著上调,137个mRNA显著下调;差异mRNA参与了多条与肿瘤相关的代谢通路;并与miRNA构成了NC抗HCC的miRNA及mRNA调控网络。结论:miRNA及mRNA调控网络是NC发挥抗HCC作用的分子机制之一。

关键词：氯化两面针碱肝细胞癌 miRNA mRNA miR-300

中国t(8;21)AML患者临床特征及预后分析:一项多中心回顾性研究

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中国实验血液学杂志 2017年第4期25卷 980-986页

作者：宫丹李薇胡亮钉罗建民沈建良方美云杨清明王恒湘克晓燕陈惠仁王昭刘辉刘峰马一盖王景文李红华王全顺靖彧高晓宁窦丽萍李永辉于力解放军总医院血液科北京100853 解放军第222医院血液科吉林吉林132011 吉林大学第一附属医院血液科吉林长春130000 河北医科大学第二附属医院血液科河北石家庄050000 解放军第307医院血液科北京100071 海军总医院血液科北京100037 大连医科大学第一附属医院血液科辽宁大连116011 解放军总医院第一附属医院医院干部病房北京100037 空军总医院血液科北京100142 北京大学第三医院血液科北京100191 解放军陆军总医院血液科北京100700 首都医科大学友谊医院血液科北京100050 卫生部北京医院血液科北京100730 中国医学科学院西苑医院血液科北京100091 中日友好医院血液科北京100029 首都医科大学同仁医院血液科北京100730

目的:通过回顾性分析中国北方15个血液病研究中心的586例伴有t(8;21)的急性髓系白血病(AML)患者临床资料,总结其在外周血、免疫分型、融合基因、细胞遗传学改变等的临床特点。方法:用COX回归进行预后因素的单因素和多因素分析,探究能够... 详细信息

目的:通过回顾性分析中国北方15个血液病研究中心的586例伴有t(8;21)的急性髓系白血病(AML)患者临床资料,总结其在外周血、免疫分型、融合基因、细胞遗传学改变等的临床特点。方法:用COX回归进行预后因素的单因素和多因素分析,探究能够影响t(8;21)AML患者预后生存的因素。结果:t(8;21)AML患者的免疫分型中以HLA-DR^+、CD117^+、CD34^+、MPO^+、CD38^+、CDl3^+、CD33^+多见(>95%),部分患者伴有CD19^+和CD56^+;最常见的伴随基因突变为C-KIT突变(37.8%);除t(8;21)异位外,最常见的伴随染色体异常为性染色体缺失(38.9%);单因素分析显示,初诊时WBC≤3.5×10~9/L、不伴随C-KIT突变、做过HSCT的成人t(8;21)AML患者在OS、PFS上均有明显优势(P3.5×10~9/L的患者(P<0.05)。结论:中国的t(8;21)AML患者临床特征与报道的国外人群基本相似,WBC≤3.5×10~9/L是t(8;21)AML的预后良好因素,C-KIT突变是t(8;21)AML的预后不良因素。

关键词：急性髓系白血病 AML1-ETO 预后分析

eSRK_s酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

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西南大学学报（自然科学版） 2011年第4期33卷 58-63页

作者：杨红朱利泉彭一波罗兵杨昆张贺翠吴志刚黄丹高启国西南大学农学与生物科技学院重庆400716 西南大学重庆市蔬菜重点实验室重庆400716

为研究甘蓝自交不亲和决定因子S位点富含半胱氨酸蛋白/S位点蛋白11(SCR/SP11)与S位点受体激酶(SRK)胞外域高变区(eSRKs)的相互作用,构建了eSRKs基因的酵母双杂交诱饵载体,检测其自激活作用,并验证是否适用于后续的相互作用研究.以甘蓝B... 详细信息

为研究甘蓝自交不亲和决定因子S位点富含半胱氨酸蛋白/S位点蛋白11(SCR/SP11)与S位点受体激酶(SRK)胞外域高变区(eSRKs)的相互作用,构建了eSRKs基因的酵母双杂交诱饵载体,检测其自激活作用,并验证是否适用于后续的相互作用研究.以甘蓝B3为材料,通过RT-PCR技术获得eSRKs目的基因片段,将其克隆到pGBKT7载体中,构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-eSRKs;测序正确后,将重组质粒转入Y2HGold,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性以及对报告基因有无自激活作用,结果获得了正确的eSRKs基因片段,并成功克隆到pGBKT7诱饵载体中,且转化在有诱饵载体pGBKT7-eSRKs的Y2HGold在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,表明表达产物对酵母细胞无毒性;显色反应结果表明对报告基因也无自激活作用,为下一步利用酵母双杂交系统检测SCR蛋白与SRK蛋白胞外域高变区的相互作用奠定基础.

关键词： eSRKs 酵母双杂交诱饵载体构建自激活作用