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Current state and future of co-inhibitory immune checkpoints for the treatment of glioblastoma

Cancer Biology & Medicine 2020年第3期17卷 555-568页

作者： Shaoping Shen Ling Chen Jialin Liu Lin Yang Mengna Zhang lingxiong wang Rong Zhang Yasushi Uemura Qiyan Wu Xinguang Yu Tianyi Liu Department of Neurosurgery Chinese PLA General HospitalBeijing 100853China Pediatric Center Chinese PLA General HospitalBeijing 100853China Key Laboratory of Cancer Center Chinese PLA General HospitalBeijing 100853China Division of Cancer Immunotherapy Exploratory Oncology Research and Clinical Trial CenterNational Cancer CenterKashiwa 277-8577Japan

In the interaction between a tumor and the immune system,immune checkpoints play an important role,and in tumor immune escape,co-inhibitory immune checkpoints are important.Immune checkpoint inhibitors(ICIs)can enhance the immune system's killing effect on tumors.To date,impressive progress has been made in a variety of tumor treatments;PD1/PDL1 and CTLA4 inhibitors have been approved for clinical use in some tumors.However,glioblastoma(GBM)still lacks an effective treatment.Recently,a phase III clinical trial using nivolumab to treat recurrent GBM showed no significant improvement in overall survival compared to bevacizumab.Therefore,the use of immune checkpoints in the treatment of GBM still faces many challenges.First,to clarify the mechanism of action,how different immune checkpoints play roles in tumor escape needs to be determined;which biomarkers predict a benefit from ICIs treatment and the therapeutic implications for GBM based on experiences in other tumors also need to be determined.Second,to optimize combination therapies,how different types of immune checkpoints are selected for combined application and whether combinations with targeted agents or other immunotherapies exhibit increased efficacy need to be addressed.All of these concerns require extensive basic research and clinical trials.In this study,we reviewed existing knowledge with respect to the issues mentioned above and the progress made in treatments,summarized the state of ICIs in preclinical studies and clinical trials involving GBM,and speculated on the therapeutic prospects of ICIs in the treatment of GBM.

关键词： Immunotherapy glioblastoma co-inhibitory immune checkpoint checkpoint inhibitors combination therapy

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NUMERICAL ANALYSIS OF A BDF2 MODULAR GRAD-DIV STABILITY METHOD FOR THE STOKES/DARCY EQUATIONS

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Acta Mathematica Scientia 2022年第5期42卷 1981-2000页

作者：王江珊孟令雄贾晓峰贾宏恩 College of Mathematics Taiyuan University of TechnologyTai'yuan 030024China School of Mathematics and Statistics Wuhan UniversityWuhan 430072China

In this paper,a BDF2 modular grad-div algorithm for the Stokes/Darcy model is constructed.This method not only effectively avoids solver breakdown,but also increases computational efficiency for increasing parameter values.Herein,complete stability and error analysis are provided.Finally,some numerical tests are proposed to justify the theoretical analysis.

关键词： Stokes/Darcy model decoupling method BDF2 modular grad-div

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肺鳞癌三级淋巴结构特征及其对预后的影响

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解放军医学院学报 2023年第7期44卷 725-732,749页

作者：翟今朝卯云烨李金凤董周寰王玲兄郑轩葛祥伟卢迪盛舒才巨星秦嘉沛王安胡毅汪进良解放军医学院北京100853 解放军总医院第五医学中心肿瘤医学部肿瘤内科北京100071 解放军总医院第五医学中心肿瘤医学部研究所北京100853 解放军总医院第一医学中心病理科北京100853

背景肿瘤微环境内三级淋巴结构(tertiary lymphoid structure,TLS)具有招募、活化和增殖T淋巴细胞、B淋巴细胞的功能,是肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte, TIL)的重要来源,已被证明与多种癌症的预后有关。目的探究肺鳞... 详细信息

背景肿瘤微环境内三级淋巴结构(tertiary lymphoid structure,TLS)具有招募、活化和增殖T淋巴细胞、B淋巴细胞的功能,是肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte, TIL)的重要来源,已被证明与多种癌症的预后有关。目的探究肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)患者组织内TLS特征及其对预后的影响。方法回顾性分析2010-2022年解放军总医院和解放军第一四八医院42例经根治性手术切除且病理确认LUSC患者的临床资料和病理切片,分析LUSC病理组织切片TIL和TLS特征与LUSC临床病理特征的关系及预后。结果 42例中男性40例,女性2例,中位年龄65(范围:50~81)岁;未经新辅助治疗24例,接受新辅助免疫治疗18例。QuPath软件检测发现:新辅助免疫治疗患者相比未经新辅助治疗患者的TLS所含免疫细胞显著增多。TLS与临床指标关系分析中发现:新辅助治疗组较未经新辅助治疗组的TLS密度、圆形/椭圆形TLS密度以及最大TLS面积更高;N分期不同,圆形/椭圆形TLS密度不同,高细胞密度TLS密度不同;年龄越大,最大TLS面积更大;差异均有统计学意义(P<0.05)。经新辅助免疫治疗的LUSC患者免疫应答分析显示:缓解深度≥60%患者较缓解深度<60%患者TIL密度、圆形/椭圆形TLS密度、TLS中位面积、低细胞密度TLS密度、非规则TLS密度更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。未经新辅助治疗组22例患者生存分析显示,圆形/椭圆形TLS密度高组相较于密度低组具有相对更好的预后[中位总生存期(median overall survival,m OS):53.5个月vs 25.0个月,P=0.069],最大TLS面积高组相较于面积低组具有相对更好的预后[mOS:50.0个月vs 25.0个月,P=0.074],P值接近0.05。结论接受新辅助免疫治疗者较未接受者、免疫治疗应答好者较应答差者具有更高的TLS特征,TLS密度、圆形/椭圆形TLS密度和最大TLS面积高可能预示预后良好。

关键词：肺鳞癌三级淋巴结构肿瘤浸润淋巴细胞肿瘤免疫微环境新辅助免疫治疗

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鸭坦布苏病毒高免卵黄抗体的制备及免疫攻毒保护试验

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中国动物保健 2014年第7期16卷 18-20页

作者：王领兄张婕青海省大通县城关镇畜牧兽医站青海大通810102 青海省大通县桥头镇新城畜牧兽医站青海大通810199

用鸭坦布苏病毒灭活疫苗免疫高产蛋鸡,三次强化免疫后收集所产的高免鸡蛋,制备抗鸭坦布苏病毒卵黄抗体。琼脂扩散试验测定该卵黄抗体的效价达1:64,对鸭坦布苏病毒强毒的攻毒保护率达100%,为鸭坦布苏病毒病的综合防治提供了一种有效的技... 详细信息

用鸭坦布苏病毒灭活疫苗免疫高产蛋鸡,三次强化免疫后收集所产的高免鸡蛋,制备抗鸭坦布苏病毒卵黄抗体。琼脂扩散试验测定该卵黄抗体的效价达1:64,对鸭坦布苏病毒强毒的攻毒保护率达100%,为鸭坦布苏病毒病的综合防治提供了一种有效的技术手段和实践参考。

关键词：鸭坦布苏病毒卵黄抗体攻毒保护

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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨血府逐瘀汤在非小细胞肺癌EGFR-TKI获得性耐药中的作用

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陕西中医 2022年第4期43卷 427-431页

作者：王理槐孙银辉张领兄刘欢周琴袁苏云张亚茹朱乐张红湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208 重庆市九龙坡区中医院重庆400051

目的:探讨血府逐瘀汤基于Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子(EGFR)-酪氨酸酶抑制剂(TKI)获得性耐药小鼠模型的干预作用。方法:选取SPF级Balb/c小鼠40只,腋下接种NSCLC EGFR-TKI获得性耐药细胞株构建皮下移植瘤,... 详细信息

目的:探讨血府逐瘀汤基于Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子(EGFR)-酪氨酸酶抑制剂(TKI)获得性耐药小鼠模型的干预作用。方法:选取SPF级Balb/c小鼠40只,腋下接种NSCLC EGFR-TKI获得性耐药细胞株构建皮下移植瘤,随机分为空白组、TKI组、低剂量组、高剂量组、高剂量+TKI组,共五组,每组8只。各组小鼠均经灌胃给药,给药剂量:厄洛替尼(TKI)30 mg/(kg·d),血府逐瘀汤低剂量含生药15 mg/ml、30 ml/(kg·d)给药,高剂量含生药45 mg/ml、30 ml/(kg·d)给药。空白组给予0.9%氯化钠溶液(0.4 ml/只)。比较各组瘤体体积、肿瘤生长抑制率、肿瘤细胞增殖指数、Wnt3α、P-GSK3β与β-catenin的蛋白表达情况。结果:在给药第16天、第20天时,高剂量+TKI组瘤体体积小于空白组及TKI组,在给药第20天时,高剂量组瘤体体积小于空白组(P0.05);高剂量组、高剂量+TKI组肿瘤增殖Ki67指数均低于空白组,高剂量+TKI组肿瘤增殖Ki67指数低于高剂量组(P0.05);高剂量组、高剂量+TKI组Wnt3α、β-catenin蛋白表达均低于空白组,P-GSK3β蛋白表达均高于空白组(P<0.05)。结论:高剂量血府逐瘀汤可抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活,通过下调Wnt3α、β-catenin蛋白表达,上调P-GSK3β蛋白表达来延缓EGFR-TKI获得性耐药NSCLC小鼠肿瘤进展,抑制腋下移植瘤体积,降低肿瘤细胞增殖指数。

关键词：非小细胞肺癌血府逐瘀汤表皮生长因子酪氨酸酶抑制剂获得性耐药 Wnt/β-catenin信号通路

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血府逐瘀汤对非小细胞肺癌荷瘤小鼠GSK-3β与β-catenin表达的影响

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现代中西医结合杂志 2022年第5期31卷 603-607页

作者：王理槐孙银辉张领兄刘欢周琴袁苏云张亚茹朱乐张红湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208 重庆市九龙坡区中医院重庆400000

目的探讨血府逐瘀汤对非小细胞肺癌荷瘤小鼠糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)与β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法采用右侧腋皮下接种人非小细胞肺癌A549细胞方法制备荷瘤小鼠模型,将造模成功的32只小鼠随机分为4组,每组8只。所有小... 详细信息

目的探讨血府逐瘀汤对非小细胞肺癌荷瘤小鼠糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)与β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法采用右侧腋皮下接种人非小细胞肺癌A549细胞方法制备荷瘤小鼠模型,将造模成功的32只小鼠随机分为4组,每组8只。所有小鼠均腹腔注射5 mL/kg生理盐水,模型组、血府逐瘀汤低剂量组、血府逐瘀汤中剂量组、血府逐瘀汤高剂量组再分别灌胃蒸馏水5 mL/kg、血府逐瘀汤12.5 g/kg、血府逐瘀汤25 g/kg、血府逐瘀汤50 g/kg,均1次/d,连续灌胃14 d。灌胃结束后测量各组小鼠瘤重,计算肿瘤体积和生长抑制率;采用流式细胞仪检测各组肿瘤组织细胞凋亡率;分别采用Western blot和qTR-PCR法检测各组肿瘤组织中GSK-3β和β-catenin蛋白及mRNA表达情况。结果血府逐瘀汤各剂量组瘤重、肿瘤体积均明显低于模型组(P均<0.05);血府逐瘀汤各剂量组瘤重、肿瘤体积呈剂量依赖性降低,生长抑制率呈剂量依赖性增高,各剂量组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。血府逐瘀汤各剂量组细胞凋亡率和肿瘤组织中GSK-3β蛋白及mRNA相对表达量均明显高于模型组(P均<0.05),β-catenin蛋白及mRNA相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);血府逐瘀汤各剂量组细胞凋亡率和肿瘤组织中GSK-3β蛋白及mRNA相对表达量呈剂量依赖性增高,β-catenin蛋白及mRNA相对表达量呈剂量依赖性降低,各剂量组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论血府逐瘀汤能够有效抑制非小细胞肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织生长,促进肿瘤细胞凋亡,其可能通过上调GSK-3β表达和下调β-catenin表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路活性发挥抗肿瘤作用,且随着血府逐瘀汤剂量增加作用越明显。

关键词：非小细胞肺癌小鼠血府逐瘀汤糖原合成酶激酶3β β-连环蛋白

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应用单细胞cDNA扩增技术鉴定循环肿瘤细胞

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解放军医学院学报 2015年第12期36卷 1222-1226页

作者：王玲兄潘飞李晶晶卜芳芳解放军总医院肿瘤中心实验室北京100853

目的建立单细胞cDNA扩增技术,实现在分子水平鉴定循环肿瘤细胞。方法建立结肠癌循环肿瘤细胞模型,通过免疫荧光染色和显微切割技术分离出单个血细胞和肿瘤细胞;裂解细胞后利用碱基修饰的P1(dT)_(24)引物反转录出cDNA第一链,并给第一链c... 详细信息

目的建立单细胞cDNA扩增技术,实现在分子水平鉴定循环肿瘤细胞。方法建立结肠癌循环肿瘤细胞模型,通过免疫荧光染色和显微切割技术分离出单个血细胞和肿瘤细胞;裂解细胞后利用碱基修饰的P1(dT)_(24)引物反转录出cDNA第一链,并给第一链cDNA加上PolyA尾后利用碱基修饰的P2(dT)_(24)引物合成第二链cDNA,然后利用P1(dT)_(24)和P2(dT)_(24)引物扩增分别得到血细胞和肿瘤细胞的全长cDNA;最后通过PCR检测细胞特异的标记物CD45、EpCAM和CK19。结果改良后的单细胞cDNA扩增方法能够获得高质量的全长cDNA,并能显著增加PCR检测效率;利用扩增得到的cDNA通过PCR检测细胞表面标记物CD45、EpCA M和CK19的表达,能有效鉴定出外周血中混杂的肿瘤细胞。结论通过单细胞cDNA扩增技术在基因水平识别肿瘤细胞,建立了一种新的循环肿瘤细胞的鉴定方法。

关键词：单细胞cDNA扩增技术循环肿瘤细胞激光捕获显微切割聚合酶链式反应

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Ⅰ～Ⅲ期胃癌中VEGF、 HIF-1α和TGF-β1表达的临床意义及其预后价值

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临床肿瘤学杂志 2013年第4期18卷 310-316页

作者：石燕陈丽王治宽袁静王玲兄戴广海北京解放军总医院肿瘤综合治疗科 100853 解放军总医院病理科 100853 解放军总医院肿瘤中心实验室 100853

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和转移生长因子-β1(TGF-β1)在Ⅰ～Ⅲ期胃癌中的表达及其临床意义和预后价值。方法收集2004年1月至2006年12月在解放军总医院接受根治性手术且TNM分期为Ⅰ～Ⅲ期的胃癌病例... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和转移生长因子-β1(TGF-β1)在Ⅰ～Ⅲ期胃癌中的表达及其临床意义和预后价值。方法收集2004年1月至2006年12月在解放军总医院接受根治性手术且TNM分期为Ⅰ～Ⅲ期的胃癌病例。采用组织芯片及免疫组化法检测VEGF、HIF-1α和TGF-β1的表达,并分析其表达与临床病理特征及预后的关系。结果全组343例患者中,VEGF、HIF-1α和TGF-β1的阳性表达率分别为49.3%、30.9%和39.1%,且三者表达两两相关。全组患者的中位随访时间为70.0个月,至随访截止时间,出现复发或转移者232例,死亡218例,中位无疾病生存期(DFS)为23.0个月,中位生存期(OS)为31.1个月。单因素分析显示,年龄、是否全胃切除、是否含印戒细胞癌、Lauren分型、脉管癌栓、肿瘤直径、TNM分期、辅助化疗、VEGF及HIF-1α表达与DFS和OS有关(P<0.05);VEGF、HIF-1α和TGF-β1三者共阳性组的中位DFS(8.6个月)和中位OS(17.7个月)均小于双阳性、单阳性及三者共阴性组(P<0.05)。Cox多因素分析显示,是否全胃切除、是否辅助化疗、TNM分期、VEGF及HIF-1α表达均为影响DFS和OS的独立预后因素。结论对于接受根治性手术治疗的Ⅰ～Ⅲ期胃癌患者,VEGF和HIF-1α阳性表达可能是影响胃癌患者的不良预后因素。

关键词：胃癌辅助化疗血管内皮生长因子缺氧诱导因子1α 转移生长因子-β1

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儿童原发性肾病综合征患者小而密低密度脂蛋白胆固醇水平变化及其临床价值

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国际检验医学杂志 2020年第2期41卷 146-149,153页

作者：张燕吴嘉王苏梦汪俊军宋令雄南京大学医学院附属金陵医院检验医学国家临床重点专科/全军临床检验医学研究所临床检验科

目的分析肾病综合征(NS)患儿血清小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)水平,探讨治疗前后NS患儿sdLDL-C水平的变化,评估其临床价值。方法收集2018年6—9月在南京大学医学院附属金陵医院肾内科住院并确诊的NS患儿50例(NS组)和同期健康对照... 详细信息

目的分析肾病综合征(NS)患儿血清小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)水平,探讨治疗前后NS患儿sdLDL-C水平的变化,评估其临床价值。方法收集2018年6—9月在南京大学医学院附属金陵医院肾内科住院并确诊的NS患儿50例(NS组)和同期健康对照儿童40例(对照组)。分别检测NS患儿治疗前后和对照组儿童的血清sdLDL-C水平,同时测定其总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、血脂[包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]及肾功能指标[尿素(UREA)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)]水平,并进行统计学分析。结果治疗前NS组患儿血清sdLDL-C水平中位数(四分位数)[M(P 25,P 75)]为[47.61(29.41,99.54)]mg/dL,治疗后NS组血清sdLDL-C水平为[29.13(17.72,43.90)]mg/dL,均明显高于对照组[15.88(13.66,20.08)]mg/dL,差异有统计学意义(均P<0.001);且治疗后NS患儿血清sdLDL-C水平明显低于治疗前患儿(P<0.001)。Spearman相关性分析显示,NS患儿血清sdLDL-C水平与TC(r=0.949,P<0.001)、TG(r=0.597,P<0.001)和LDL-C(r=0.874,P<0.001)水平均呈显著正相关,与TP(r=-0.692,P<0.001)、ALB(r=-0.765,P<0.001)均呈显著负相关。逐步多元线性回归分析显示,在校正其他相关因素的影响后,NS患儿血清sdLDL-C水平与ALB水平仍独立相关(β=-0.780,P<0.001,校正R 2=0.604)。结论NS患儿血清sdLDL-C水平明显升高,治疗后明显下降;且NS患儿血清sdLDL-C水平有望作为其病情评估的新指标。

关键词：小而密低密度脂蛋白胆固醇肾病综合征清蛋白儿童

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IBRV特异性噬菌体单域抗体库的构建、筛选及鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2020年第7期 1-7页

作者：包福祥徐文博芦婷王莉鑫刘欣秦岭兄李鑫泳刘树弘杜雅楠内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了开发有效的用于治疗和诊断牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhinotracheitis,IBR)的抗体,试验用牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)免疫双峰驼,构建IBRV特异性噬菌体单域抗体库,并以IBRV gD蛋白为筛选抗原,对其进行筛选,对筛选得到的单域抗体进行诱导表达、纯化及鉴定。结果表明:构建得到的IBRV特异性噬菌体单域抗体库的库容为7×10^7;经3轮富集和筛选,phage-ELISA筛选出14个与gD蛋白结合的阳性克隆,并成功对阳性值较高的重组单域抗体IB68进行表达和纯化;经ELISA和Western-blot鉴定,重组单域抗体IB68可与gD蛋白产生抗原抗体结合反应,具有较高的亲和力。说明制备的IBRV特异性噬菌体单域抗体库具有较高的库容和多样性,且筛选得到的单域抗体具有较高的抗原抗体结合活性和免疫学反应性。

关键词：牛传染性鼻气管炎 gD蛋白单域抗体抗体库原核表达

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