检索结果-南通市图书馆

Mechanism of Immune Hyporesponsiveness Induced by Recipient-derived Immature Dendritic Cells in liver Transplantation Rat

引用

Chinese Medical Sciences Journal 2011年第1期26卷 28-35页

作者： li li sheng-ning zhang jiang-hua ran jing liu zhu li lai-bang li Department of Hepatobiliary Pancreatic Surgery First People＇s Hospital of Kunming Kunming Medical College Liver Transplantation Center of Organ Transplantation Institute of Yunnan Province Kunming 650011 China

Objective To investigate the mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen- unloaded recipient-derived immature dendritic cell （imDC） of liver grafts in rats. Methods Forty Sprague-Dawley rats （donor） and forty male Wistar rats （recipient） were randomly divided into 4 groups： control, cyclosporine A （CsA）, mature DC （mDC）, and imDC groups respectively, with 10 donor rats and 10 recipient rats in each group. Recipient rats in CsA group were treated with 10 mg-kg-~＇d-I CsA starting day 2 after the transplantation. Recipients in the mDC or imDC groups were given Wistar rat derived mDCs （1 × 10^6/rat） or imDCs （1 × 10^6/rat） via dorsal vein of the penis respectively 1 day before the transplantation. In each group, 5 recipients were kept for determination of survival time and the other 5 rats were executed at day 10 after transplantation. Blood samples were collected for the measurement of serum alanine aminotransferase （ALT）, total bilirubin （TBIL）, interleukin 2 （IL-2）, interferon gamma （IFN-γ）, IL-4, and IL-10 levels. liver tissue was harvested for HE staining and acute rejection evaluation. Expression levels of Fas-L/Fas in the grafts were detected by immunohistochemical staining; andWestern blot was used to detect the expression level of Scurfm. Results The survival time of CsA and imDC groups was significantly longer than that of control and mDC groups （all P〈0.05）. The levels of serum ALT and TBIL in the control group （2072.20±217.93 IU/L and 147.42±22.02pmol/L） and mDC group （2117.00±285.13 IU/L and 141.58±20.82 pmol/L） were significantly higher than those in the CsA group （59.68±13.48 IU/L and 15.40±2.13 pmol/L） or imDC group （50.80±9.63 IU/L and 14.44±3.49 pmol/L）（all P〈0.05）. In the CsA and imDC groups, the levels of IL-2 （22.52±3.75 pg/mL and 22.12±3.90 pg/mL） and IFN-γ （309.20±25.19 pg/mL and 321.00±21.64 pg/mL） were significantly lower, but the levels of IL-4 （297.60±25.07 pg/mL and 277.00±22.47 pg/mL） and IL-10 （1226.00±140.49 pg/mL an

关键词： rat liver transplantation rejection immature dendritic cell immunehyporesponsiveness

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Mechanism of Immune Hyporesponsiveness Induced by Recipientderived Immature Dendritic Cells in Rat liver Transplantation

引用

Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition) 2011年第1期20卷 36-46页

作者： li li zhang sheng-ning ran jiang-hua liu jing li zhu ZHAO Yong-heng li lai-bang Department of Hepatobiliary Pancreatic Surgery First People ＇s Hospital of Kunming Kunming Medical CollegeLiver Transplantation Center of Organ Transplantation Institute of Yunnan Province Kunming 650011China

Objective： The use of donor-derived immature dendritic cells （imDC） has become a promising approach to induce immune tolerance or immune hyporesponsiveness. However, donor-derived imDC needs to be harvested for a few days and transfused into the recipient in 5-10 days before transplantation, which is practically impossible in a clinical setting where donor organs are mainly harvested from cadavers. Moreover, donor-derived imDC might be cleared by allogeneic reaction offsetting induced immune tolerance or immune hyporesponsiveness. In our study, we further explored the underlying mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC by transfusing these imDC into rats in 1 day before liver transplantation. This paper is to study the mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC and its protection of liver grafts in rats. Methods： 40 SD rats （donor） and 40 male Wistar rats （recipient） were randomly divided into 4 groups： control, cyclosporine A （CsA）, mature DC （mDC）, and imDC; with 10 SD rats and 10 Wistar rats for each group. Animal models of acute graft rejection were established with these rats. Corresponding treatments were given before or after transplantation. In the control group, Wistar rats received no treatment other than liver transplantation. In the CsA group, Wistar rats underwent liver transplantation plus CsA treatment （10 mg/kg·d） in the starting day 2 after transplantation. For the mDC group, recipient-derived mDC （1 × 10^6/rat） were infused intravenously via the dorsal vein of the penis to recipient rats. For the imDC group, imDC （1× 10^6/rat） were injected into recipient rats via the dorsal vein of the penis. In each group, 5 recipients were executed at 10 days after transplantation; the remaining five recipients were kept for the observation of survival time. Blood samples were collected for the measurement of ALT and TBIL; IL-2, IFN-γ, IL-4 and IL-10 and l

关键词： rat liver transplantation rejection immature dendritic cell immune hyporesponsiveness

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠减体积肝移植腹腔出血的原因分析

引用

南方医科大学学报 2010年第5期30卷 1075-1078页

作者：刘静李江张升宁李铸李来帮冉江华李立昆明医学院附属甘美医院肝胆胰一科云南昆明650011 昆明医学院附属第一医院肝胆外科云南昆明650032

目的探讨大鼠减体积肝移植腹腔出血的原因。方法实验大鼠均为健康的SD大鼠,体质量260～280g,供体为雌性,受体为雄性,供、受体体质量相差10g左右,一般为供体体质量比受体体质量轻;供体采用单人裸眼操作,在取肝的过程中即进行减体积操作;... 详细信息

目的探讨大鼠减体积肝移植腹腔出血的原因。方法实验大鼠均为健康的SD大鼠,体质量260～280g,供体为雌性,受体为雄性,供、受体体质量相差10g左右,一般为供体体质量比受体体质量轻;供体采用单人裸眼操作,在取肝的过程中即进行减体积操作;受体采用双人裸眼配合操作建立大鼠减体积的稳定模型。结果成功实施的270对大鼠减体积肝移植模型中,因腹腔出血而死亡44例,死亡率为16.3﹪;出血部位的总体分布为肝上下腔静脉吻合口出血28例次,肝脏包膜渗血9例次,肝左外侧叶减体积结扎点出血9例次,肝乳头叶结扎点出血7例次,肝三角叶结扎点出血7例次,右肾上腺和腰静脉出血5例次,肝脏人为损伤出血4例次,门静脉套管口出血4例次,肝下下腔静脉套管口出血4例次,其中肝上下腔静脉吻合口合并肝左外侧叶减体积结扎点出血的有8例,两个减体积结扎点均出血的5例;10例经过缝扎或单纯结扎后止血,肝脏包膜渗血采用热盐水冲洗、浸泡后自行止血6例。结论减体积肝移植术后腹腔出血最常见的是肝上下腔静脉吻合口出血,通过对大鼠减体积肝移植术后腹腔出血的原因分析,其结果可以指导我们实验手术操作的进一步改进,从而提高大鼠肝移植模型的实验手术成功率。

关键词：减体积肝移植,大鼠腹腔出血

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

改良法构建大鼠减体积肝移植模型

引用

中国组织工程研究与临床康复 2010年第18期14卷 3252-3257页

作者：刘静李江张升宁李铸李来帮冉江华李立昆明医学院附属甘美医院肝胆胰一科云南省昆明市650011 昆明医学院附属第一医院肝胆外科云南省昆明市650032

背景:目前有关活体肝移植后肝脏再生的研究较少。在大鼠肝移植实验中不断改进手术方法和技术,提高肝移植成功率是进行大鼠肝移植研究和获得可靠实验数据的基础。目的:验证以改良方法构建减体积肝移植大鼠模型的有效性。方法:选用健康SD... 详细信息

背景:目前有关活体肝移植后肝脏再生的研究较少。在大鼠肝移植实验中不断改进手术方法和技术,提高肝移植成功率是进行大鼠肝移植研究和获得可靠实验数据的基础。目的:验证以改良方法构建减体积肝移植大鼠模型的有效性。方法:选用健康SD大鼠,70对制备减体积肝移植改良前模型,100对制备减体积肝移植改良后模型。供体为雌性,受体为雄性,供体体质量比受体轻10g左右。改良前方案采用取下全肝后在修肝盆中进行减体积肝移植。改良后方案如下:供体采用单人裸眼操作,在取肝的过程中即进行减体积操作;修肝时将套管柄置于门静脉和肝下下腔静脉的正前方,将幽门静脉结扎点外翻于套管外并置于套管柄的左侧,即肝脏的左侧;将右肾静脉结扎点外翻于套管外并置于套管柄的右侧,即肝脏的右侧;供肝套管完成后用灌注液对门静脉和肝下下腔静脉进行冲洗;然后以左膈静脉为标识点进行7/0无损伤血管缝线吊线;受体采用双人裸眼配合操作,肝上下腔静脉吻合时,左右固定位点采用"8"字形外翻缝合,后壁和前壁分别采用连续吻合,门静脉和肝下下腔静脉采用改良的双袖套法,胆管支撑管法建立大鼠减体积的稳定模型。结果与结论:改良后供体手术时间为(32±2)min,修肝时间为(6±2)min,受体手术时间为(40±3)min,无肝期时间为(14±3)min。移植成功率为92%,移植后3d生存率为85%,移植后2周生存率83%。与改良前比较,移植后并发症发生率降低(P<0.05),供肝的冷保存时间缩短(P<0.05)。提示改良后的大鼠减体积肝移植模型比较稳定、可靠,移植成功率较高,移植后并发症发生率较低,为研究减体积肝移植后肝脏再生提供了有效的改良手段。

关键词：减体积肝移植大鼠改良模型器官移植

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肝移植后乙型肝炎复发核苷类抗乙肝药物联合小剂量乙肝免疫球蛋白可能防治吗?

引用

中国组织工程研究与临床康复 2010年第5期14卷 811-814页

作者：刘静张升宁李铸李来帮冉江华李立昆明医学院附属甘美医院肝胆胰一科云南省昆明市650011

背景:近年来国内外均报道,抗乙型肝炎免疫球蛋白和拉米夫定在预防乙型肝炎、肝硬化肝移植后乙型肝炎的复发中取得了良好效果,但各大中心对于抗乙型肝炎免疫球蛋白使用剂量的报道不尽相同。目的:拟验证和探讨核苷类抗乙肝药物联合小剂量... 详细信息

背景:近年来国内外均报道,抗乙型肝炎免疫球蛋白和拉米夫定在预防乙型肝炎、肝硬化肝移植后乙型肝炎的复发中取得了良好效果,但各大中心对于抗乙型肝炎免疫球蛋白使用剂量的报道不尽相同。目的:拟验证和探讨核苷类抗乙肝药物联合小剂量乙肝免疫球蛋白预防肝移植后乙型肝炎病毒复发的效果。方法:回顾性分析2006-05/2009-02昆明市第一人民医院暨昆明医学院附属甘美医院肝移植中心因乙型肝炎相关性肝病行肝移植患者59例,移植前诊断为乙型肝炎后肝硬化失代偿期50例,其中乙型肝炎病毒DNA阳性15例。移植前5例给予拉米夫定治疗,1例给予阿德福韦酯治疗,1例给予恩替卡韦片治疗,治疗时间为2周～1年。移植后所有患者术后第1天开始肌注200U/d的乙肝免疫球蛋白,1个月后根据患者的乙肝两对半的滴度情况进行调整,55例患者同时口服拉米夫定,3例服用阿德福韦酯,1例服用恩替卡韦。结果与结论:2例患者移植后出现乙型肝炎病毒再感染,未检测是否为YMDD变异毒株感染,移植后1年和1年以上乙型肝炎病毒再感染率均为2%。移植前血清乙型肝炎病毒DNA阴性者移植后乙型肝炎病毒再感染率为2%,乙型肝炎病毒DNA阳性者移植后乙型肝炎病毒再感染率为7%。提示因乙型肝炎相关性肝病而行肝移植患者,移植后服用核苷类抗乙肝药物,同时联合200U小剂量乙型肝炎免疫球蛋白可以很好地预防肝移植后乙型肝炎的复发。

关键词：核苷类抗乙肝药物乙肝免疫球蛋白肝炎病毒乙型肝移植复发

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Efficacy and safety of sirolimus early conversion protocol in liver transplant patients with hepatocellular carcinoma:A single-arm, multicenter, prospective study

引用

Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International 2022年第2期21卷 106-112页

作者： Ren-Yi Su Sun-Bin ling Qiao-Nan Shan Xu-Yong Wei Rui Wang Chang-Ku Jia li Zhuang Tian Shen li-Min Ding Zhi-Dan Xu lai-bang Luo li-Bo Sun Guang-Ming li Tai-Shi Fang Nan jiang Kun zhang Zhao-Jie Su Zhi-Hai Peng Ren Lang Tao jiang Qiang He lin-Sen Ye Yang Yang Yu-Ting He Wen-Zhi Guo liu-Gen Lan Xu-Yong Sun Dong Chen Zhi-Shui Chen Da-Wei Zhou Shao-Jun Ye Qi-Fa Ye Min Tian Jian-hua Shi Bo Wang jiang liu Qian Lu Wei Rao Jin-Zhen Cai Tao Lv Jia-Yin Yang Pu-Sen Wang lin Zhong jing-sheng Ma Qi-Gen li sheng-Dong Wu Chang-jiang Lu Cai-De Lu Dong-hua zhang Xuan Wang Zi-Qiang li Mu-Jian Teng Jun-Jie li Wen-Tao jiang Jian-hua li Quan-Bao zhang ning-Qi zhu Zheng-Xin Wang Kang He Qiang Xia Shao-hua Song Zhi-Ren Fu Wei Qiu Guo-Yue Lv Rui-Peng Song Ji-Zhou Wang Zheng Wang Jian Zhou Gang Chen Ying-Peng Zhao li li Ze-Min Hu Qi-Jie Luo Zhong-Zhou Si Bin Xie Xiao-Shun He Zhi-Yong Guo Shu-Sen Zheng Xiao Xu Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery The Center for Integrated Oncology and Precision MedicineAffiliated Hangzhou First People’s HospitalZhejiang University School of MedicineHangzhou 310006China NHC Key Laboratory of Combined Multi-organ Transplantation Hangzhou 310003China Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery Shulan(Hangzhou)HospitalZhejiang Shuren University School of MedicineHangzhou 310022China Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery The First Affiliated HospitalZhejiang University School of MedicineHangzhou 310003China Department of Transplantation Jiangxi Provincial People’s Hospital Affiliated to Nanchang UniversityNanchang 330006China liver Transplantation Center Beijing You’an HospitalCapital Medical UniversityBeijing 100069China Department of Hepatic Surgery National Clinical Research Center for Infectious DiseaseShenzhen Third People’s HospitalThe Second Affiliated Hospital of Southern University of Science and TechnologyShenzhen 518112China Department of General Surgery Xiang’an Hospital of Xiamen UniversityXiamen 361000China Deartment of Hepatobiliary and Pancreaticosplenic Surgery Beijing Chaoyang HospitalCapital Medical UniversityBeijing 100020China Department of Hepatic Surgery and liver Transplantation Center The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen UniversityGuangzhou 510630China Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery The First Affiliated Hospital of Zhengzhou UniversityZhengzhou 450052China Department of liver Transplantation The Second Affiliated Hospital of Guangxi Medical UniversityNanning 530000China Institute of Organ Transplantation Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and TechnologyWuhan 430030China Institute of Hepatobiliary Diseases of Wuhan University Transplant Center of Wuhan UniversityHubei Key Laboratory of Medical Technology on TransplantationZhongnan Hospital of Wuhan UniversityWuhan 430071China Department of Hepatobiliary Surgery The First Affiliated Hos

Mammalian target of rapamycin(m TOR) inhibitor as an attractive drug target with promising antitumor effects has been widely investigated. High quality clinical trial has been conducted in liver transplant(LT) recipients in Western countries. However, the pertinent studies in Eastern world are paucity. Therefore, we designed a clinical trial to test whether sirolimus can improve recurrence-free survival(RFS) in hepatocellular carcinoma(HCC) patients beyond the Milan criteria after LT. This is an open-labeled, single-arm, prospective, multicenter, and real-world study aiming to evaluate the clinical outcomes of early switch to sirolimus-based regimens in HCC patients after LT. Patients with a histologically proven HCC and beyond the Milan criteria will be enrolled. The initial immunosuppressant regimens are center-specifc for the frst 4-6 weeks. The following regimens integrated sirolimus into the regimens as a combination therapy with reduced calcineurin inhibitors based on the condition of patients and centers. The study is planned for 4 years in total with a 2-year enrollment period and a 2-year follow-up. We predict that sirolimus conversion regimen will provide survival benefts for patients particular in the key indicator RFS as well as better quality of life. If the trial is conducted successfully, we will have a continued monitoring over a longer follow-up time to estimate indicator of overall survival. We hope that the outcome will provide better evidence for clinical decision-making and revising treatment guidelines based on Chinese population data.

关键词： Sirolimus Immunosuppressive agents Hepatocellular carcinoma liver transplantation Conversion

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠减体积肝移植术中的呼吸停止

引用

中国组织工程研究与临床康复 2010年第44期14卷 8191-8196页

作者：刘静李江张升宁李铸李来帮廖丽琼冉江华李立昆明医学院附属甘美医院肝胆胰一科云南省昆明市650011 昆明医学院附属第一医院肝胆外科云南省昆明市650032

背景:大鼠减体积肝移植模型的成功建立是进行相应实验的基础和前提条件,呼吸停止是影响大鼠减体积肝移植模型成功建立的主要因素之一,对呼吸停止的分析和急救有助于提高模型建立的成功率。目的:探讨大鼠减体积肝移植术中呼吸停止的原因... 详细信息

背景:大鼠减体积肝移植模型的成功建立是进行相应实验的基础和前提条件,呼吸停止是影响大鼠减体积肝移植模型成功建立的主要因素之一,对呼吸停止的分析和急救有助于提高模型建立的成功率。目的:探讨大鼠减体积肝移植术中呼吸停止的原因及急救处理。方法:实验选用SD大鼠,供体为雌性,受体为雄性,均采用乙醚吸入麻醉;供体采用单人裸眼操作,在取肝的过程中即进行减体积操作;受体采用双人裸眼配合操作,采用改良的门静脉和肝下下腔静脉双袖套法,胆管支撑管法建立大鼠减体积的稳定模型。对受体术中呼吸停止随即分成3组进行抢救:实验组1采用"简易人工呼吸"加胸外按压的急救方法;实验组2采用单纯的"简易人工呼吸"的方法;对照组采用单纯的胸外按压的急救方法。结果与结论:成功实施的270对大鼠减体积肝移植模型中,术中因吸入麻醉导致的呼吸停止50只,其原因主要是麻醉过度42只,大量气体栓塞3只,气胸3只,急性肺水肿2只。实验组1、实验组2、对照组大鼠呼吸停止后急救成功率分别为84.6%(22/26),54.5%(6/11),30.8%(4/13);对于因吸入麻醉过度导致的呼吸停止,实验组1急救的成功率为95.6%(22/23)。实验组2抢救成功率为66.7%(6/9)。对照组复苏成功率为40%(4/10)。结果表明,大鼠减体积肝移植术中呼吸停止的原因主要是麻醉过度,其次是大量气体栓塞、气胸和急性肺水肿;简易的人工呼吸加胸外按压对于因吸入麻醉过度导致的术中呼吸停止的抢救最有效,其次为单纯的人工呼吸和单纯的胸外按压。

关键词：减体积肝移植大鼠术中,呼吸停止急救简易人工呼吸

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

DA至Lewis大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立:技术改良分析

引用

中国组织工程研究与临床康复 2011年第7期15卷 1179-1185页

作者：李铸李立冉江华张升宁刘静刘滇生李来邦陈娟昆明市第一人民医院肝胆胰一病区昆明医学院附属甘美医院云南省昆明市650011

背景:国际上研究肝移植免疫耐受的基础动物模型是大鼠肝移植急性排斥反应模型,国际上公认的肝移植急性排斥反应模型鼠种配对方式为DA至Lewis大鼠、DA至BN大鼠及BN至Lewis大鼠,但由于鼠种缺乏和操作技术有待成熟的原因,国内较少引用以上... 详细信息

背景:国际上研究肝移植免疫耐受的基础动物模型是大鼠肝移植急性排斥反应模型,国际上公认的肝移植急性排斥反应模型鼠种配对方式为DA至Lewis大鼠、DA至BN大鼠及BN至Lewis大鼠,但由于鼠种缺乏和操作技术有待成熟的原因,国内较少引用以上鼠种配对方式进行该模型的建立。目的:课题组在大量SD大鼠肝移植模型建立训练的基础上,采用DA大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,摸索DA至Lewis大鼠肝移植急排模型建立技巧和经验。方法:通过改良二袖套法,以雄性DA大鼠为供体,雄性Lewis大鼠为受体,建立原位肝移植动物模型60只,受体大鼠术前1d和术后1周内饲喂治疗剂量的他克莫司,1周后半量递减并停药,记录移植手术时间,观察受体大鼠的术后生存状况、手术成功率及生存期,分别于术后7,14,21,28d处死受体大鼠,获取肝组织标本,苏木精-伊红染色,观察肝脏大体和镜下的病理学变化,进行急性排斥反应评分。结果与结论:供肝冷缺血时间30～60min,供体手术时间(18.5±4.0)min,供肝修整时间(7±3)min,受体手术时间(35.0±7.3)min,无肝期为(13.0±3.0)min,手术成功率为98%,1周存活率为91.6%。术后2周随着他克莫司撤药,受体大鼠迅速发生急性排斥反应,于术后14～28d死亡,平均生存时间为(20.85±0.71)d,中位生存时间为21d。实验建立DA至Lewis大鼠肝移植急性排斥反应动物模型需要以大量SD大鼠肝移植训练为基础进行,通过对二袖套法技术的改良和围手术期短期应用他克莫司有助于该模型的稳定建立。

关键词：急性排斥反应 DA大鼠 Lewis大鼠原位肝移植术动物模型他克莫司

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠肝卵圆细胞的增殖模型建立和体外分离培养、诱导分化研究

引用

中国现代医学杂志 2010年第5期20卷 663-666,671页

作者：李铸李立冉江华张升宁刘静李来邦陈娟昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区云南昆明650011

目的建立大鼠肝卵圆细胞(HOC)的增殖模型,探讨分离培养及鉴定HOC的方法。方法采用2-乙酰氨基芴/部分肝切除术刺激建立成体大鼠肝卵圆细胞增殖模型,于肝切除术后第12天切取剩余肝脏,使用胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞... 详细信息

目的建立大鼠肝卵圆细胞(HOC)的增殖模型,探讨分离培养及鉴定HOC的方法。方法采用2-乙酰氨基芴/部分肝切除术刺激建立成体大鼠肝卵圆细胞增殖模型,于肝切除术后第12天切取剩余肝脏,使用胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞,免疫荧光技术和RT-PCR分析法检测肝卵圆细胞标志物mRNA表达。行体外培养并添加干细胞生长因子(SCF)、肝细胞生长因子(HGF)和表皮生长因子(EGF)诱导其分化。结果分离得到的肝卵圆细胞存活率达到90%,经c-kit免疫荧光显色,PCR分析显示有CK19和白蛋白mRNA表达。生长因子诱导下有向胆管细胞和肝细胞分化的特性。结论肝卵圆细胞分离纯化及鉴定方法和肝卵圆细胞成功培养,为进一步研究肝干细胞生物学特性和与肝癌的关系提供了物质基础。

关键词：干细胞肝卵圆细胞细胞分离培养分化

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

脂质体介导pBLAST2-hHGF质粒转染Lewis大鼠肝卵圆细胞

引用

中国组织工程研究与临床康复 2010年第49期14卷 9199-9202页

作者：李铸李立冉江华张升宁刘静刘滇生李来邦陈娟昆明市第一人民医院昆明医学院附属甘美医院肝胆胰一病区云南省昆明市650011

背景:在体外将外源基因导入肝细胞相当困难,而利用肝脏干细胞导入外源性基因较为容易。目前大鼠肝卵圆细胞增殖模型的建立已较为成熟,但作为原代细胞,肝卵圆细胞的稳定培养和传代是较为困难的。目的:建立pBLAST2-hHGF质粒稳定转染大鼠... 详细信息

背景:在体外将外源基因导入肝细胞相当困难,而利用肝脏干细胞导入外源性基因较为容易。目前大鼠肝卵圆细胞增殖模型的建立已较为成熟,但作为原代细胞,肝卵圆细胞的稳定培养和传代是较为困难的。目的:建立pBLAST2-hHGF质粒稳定转染大鼠肝卵圆细胞的细胞株,观察转染细胞的生物学特性。方法:取稳定培养的第4代雄性Lewis大鼠肝卵圆细胞,采用脂质体介导DNA转染的方法将pBLAST2-hHGF质粒转染到肝卵圆细胞,然后在倒置显微镜下观察转染细胞的形态变化、细胞增殖情况,检测细胞转染后的增殖分化能力,确定转染细胞的稳定培养条件,使用western blot和EliSA方法检测转染细胞hHGF蛋白的表达。结果与结论:第4代以脂质体介导成功转染pBLAST2-hHGF质粒的肝卵圆细胞在培养基中添加不同剂量和种类细胞因子的条件下转染细胞可稳定传代14代,其形态与未转染细胞比较无明显变化,但生长增殖速度明显快于未转染细胞,去除培养液中的生长因子后pBLAST2-Hhgf/肝卵圆细胞迅速分化为肝细胞和胆管上皮细胞,western blot方法检测转染细胞有hHGF蛋白表达,EliSA法检测培养液中hHGF蛋白含量高。结果提示,使用脂质体介导pBLAST2-hHGF质粒转染肝卵圆细胞方法可靠,转染细胞稳定培养并传代次数长于肝卵圆细胞,转染细胞具备分泌hHGF的能力,可用于后续研究。

关键词： pBLAST2-hHGF 肝卵圆细胞质粒转染脂质体传代

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：