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Engineering human seleno-glutaredoxin containing consecutive rarecodons as an artificial glutathione peroxidase

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Chinese Science Bulletin 2012年第1期57卷 25-32页

作者： ZHANG Wei luo Quan WANG XiaoPing ZHANG DongMei MIAO Lu XU JiaYun luo guimin SHEN JiaCong LIU JunQiu State Key Laboratory of Supramolecular Structure and Materials Jilin UniversityChangchun 130012China Key Laboratory for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education Jilin UniversityChangchun 130012China

The active center of human glutaredoxin(hGrx1)shares a common thioredoxin fold and specific affinity for substrate glutathione (GSH)with natural glutathione peroxidase(GPx).hGrx1 was redesigned to introduce the catalytic selenocysteine residue to imi- tate the function of antioxidant selenoenzyme GPx in *** human hGrx1 scaffold is a good candidate for potential medical application compared with other animal-originated protein *** consecutive rare codons(AGG-AGG)in the open reading frame of hGrx1 mRNA encoding Arg26-Arg27 residues can reduce seleno-hGrx1 expression level significantly in the Cys auxotrophic Escherichia coli strain ***,we optimized the rare codons,which resulted in a remarkable in- crease of the expression level in the Cys auxotrophic cells,which may be sufficient for future medical *** engineered artificial selenoenzyme displays high GPx catalytic activity,rivaling that of some natural GPx *** analysis of the engineered seleno-hGrx1 showed a typical ping-pong kinetic mechanism;its catalytic properties are similar to those of some nat- urally occurring GPx proteins.

关键词：谷胱甘肽过氧化酶稀有密码子氧工程硒硫氧还蛋白营养缺陷型动力学机制人造

Biosynthesis of selenosubtilisin: A novel way to target selenium into the active site of subtilisin

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Chinese Science Bulletin 2008年第16期53卷 2454-2461页

作者： LI Jing LIU XiaoMan JI YueTong QI ZhenHui GE Yan XU JiaYun LIU JunQiu luo guimin SHEN JiaCong State Key Laboratory of Supramolecular Structure and Materials Jilin University Changchun 130012 China Key Laboratory for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education Jilin University Changchun 130023 China

Glutathione peroxidase (GPx, EC1.***.1.9), an important anti-oxidative selenoenzyme, can catalyze the reduction of harmful hydroperoxides with concomitant glutathione, thereby protecting cells and other biological issues against oxidative damage. It captures considerable interest in redesign of its function for either the mechanism study or the pharmacological development as an antioxidant. In order to de- velop a general strategy for specifically targeting and operating selenium in active sites of enzymes, the catalytically essential residue selenocysteine (Sec) was first successfully bioincorporated into the catalytic center of subtilisin by using an auxotrophic expression system. The studies of the catalytic activity and the steady-state kinetics demonstrated that selenosubtilisin is an excellent GPx-like bio- catalyst. In comparison with the chemically modified method, biosynthesis exhibits obvious advan- tages: Sec could be site-directly incorporated into active sites of enzymes to overcome the non-speci- ficity generated by chemical modification. This study provides an important strategy for specifically targeting and operating selenium in the active site of an enzyme.

关键词：生物合成硒非金属元素枯草杆菌蛋白酶

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仿硒酶研究进展

化学进展 2007年第12期19卷 1928-1938页

作者：刘俊秋罗贵民沈家骢吉林大学超分子结构与材料教育部重点实验室长春130012

硒是人体中必需的微量元素,它与各种疾病和人类健康息息相关。硒在生物体内以硒代半胱氨酸形式表现其生理活性和功能。为了探索硒在硒蛋白中结构和功能关系并可能发展成硒相关的适用药物,人们付出许多努力来发展硒蛋白模拟化学。由于硒... 详细信息

硒是人体中必需的微量元素,它与各种疾病和人类健康息息相关。硒在生物体内以硒代半胱氨酸形式表现其生理活性和功能。为了探索硒在硒蛋白中结构和功能关系并可能发展成硒相关的适用药物,人们付出许多努力来发展硒蛋白模拟化学。由于硒酶——谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)重要的抗氧化作用以及潜在的药用价值,国际上广泛开展了对它的人工模拟研究。本文对近年来硒酶模拟化学和生物学相关研究进展进行了综述。

关键词：硒酶谷胱甘肽过氧化物酶人工酶硒抗氧化

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φ53 m高效浓密机在平果铝土矿的应用

金属矿山 2005年第Z2期34卷 452-454页

作者：罗桂民黄振艺中铝股份广西分公司中铝股份广西分公司

针对NT-30普通浓密机在平果铝土矿一期工程的应用现状,认真分析了铝土矿矿泥的特性及其对浓密机絮凝、沉降的影响.介绍了φ53 m高效浓密机的结构和性能特点以及在平果铝土矿二期工程的应用实践,并就浓密机的操作控制及工艺难点进行了系... 详细信息

针对NT-30普通浓密机在平果铝土矿一期工程的应用现状,认真分析了铝土矿矿泥的特性及其对浓密机絮凝、沉降的影响.介绍了φ53 m高效浓密机的结构和性能特点以及在平果铝土矿二期工程的应用实践,并就浓密机的操作控制及工艺难点进行了系统分析,对其操作条件的完善及优化改进进行了探索.

关键词：铝土矿矿泥高效浓密机优化

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具有谷胱甘肽过氧化物酶活力的含硒三肽

高等学校化学学报 2016年第7期37卷 1302-1306页

作者：尹居鑫李祖宏牟颖吕绍武罗贵民吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室长春130012 吉林大学生命科学学院长春130012 浙江大学智能系统与控制研究所杭州310027

合成了由硒代半胱氨酸(U)、谷氨酰胺(Q)和色氨酸(W)组成的QUW,QWU,WQU,WUQ,UWQ和UQW 6个具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的含硒三肽;采用双酶偶联法进行了GPx活力测定和稳态动力学分析;通过噻唑蓝(MTT)比色法、划痕愈合实验和Western b... 详细信息

合成了由硒代半胱氨酸(U)、谷氨酰胺(Q)和色氨酸(W)组成的QUW,QWU,WQU,WUQ,UWQ和UQW 6个具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的含硒三肽;采用双酶偶联法进行了GPx活力测定和稳态动力学分析;通过噻唑蓝(MTT)比色法、划痕愈合实验和Western blot技术表征了含硒三肽对肝癌Hep G2细胞生长和迁移能力的影响.结果表明,当U位于氨基端时,含硒三肽的GPx活力高于U位于中间位置或者羧基端时.UWQ催化谷胱甘肽(GSH)还原H2O2的活力最高,其催化机制为乒乓机制.UWQ可使Hep G2细胞运动能力减弱,降低肝癌细胞的浸润转移能力.

关键词：谷胱甘肽过氧化物酶模拟物含硒三肽

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基于刀轨调整的叶片前后缘几何自适应加工

航空制造技术 2023年第4期66卷 78-83,89页

作者：陈振林罗贵敏朱正清中国航发沈阳黎明航空发动机有限责任公司沈阳110043 中国航发南方工业有限公司株洲412002 北京航空航天大学北京100191

航空发动机压气机叶片在前期净近成形工艺中,其前后缘曲率变化剧烈,形状特殊,无法直接成形,需要进行二次加工。然而,前期工艺会使叶片产生变形,理论数模已经无法适用于其二次加工。因此,为了解决因变形带来的前后缘加工问题,实现前后缘... 详细信息

航空发动机压气机叶片在前期净近成形工艺中,其前后缘曲率变化剧烈,形状特殊,无法直接成形,需要进行二次加工。然而,前期工艺会使叶片产生变形,理论数模已经无法适用于其二次加工。因此,为了解决因变形带来的前后缘加工问题,实现前后缘与叶身的光滑转接加工,提出了一种基于刀轨修改的叶片前后缘几何自适应的加工方法。首先,在前后缘附近的已成形区域上提取特征测量点并对其进行实测;然后,通过特征点实测数据分析叶片前期工艺变形情况,并基于变形数据建立叶片截面Z坐标值与变形规律的映射关系函数;最后,根据变形映射函数,相应地调整原始理论刀位文件,以调整完的刀轨实现叶片前后缘的自适应加工。以某型号航空发动机精锻叶片为例进行仿真试验验证,试验结果表明该方法优化效果显著,原理论刀位文件与调整后的刀位文件的加工误差相比,后者偏差基本在0.01 mm以内,极大程度地减少了加工误差。该方法能有效解决精锻叶片进排气边的光滑转接加工问题。

关键词：叶片自适应加工变形映射刀轨修改前后缘

Generation of a novel selenium-containing scFv abzyme with antioxidant effect

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Generation of a novel selenium-containing scFv abzyme with a...

The Seventh China-Japan Joint Symposium on Enzyme Engineering

作者： Ying Mu Weijia Li Ye Sun Shaowu Lv Kun Zhang Zhihua Jiang Feng Lin Ruiying wang Ganglin Yan guimin luo Key Laboratory for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education Jilin University

＜正＞INTRODUCTION Glutathione peroxidase（EC 1.***.1.9,GPX）is one of the most important antioxidant enzymes in organism,which distributes extensively in cell,blood and *** prevents the organism from the damage of free radicals by scavenging hydroperoxide and lipid hydroperoxide,and maintains the normal physiological functions of the cell and *** is in close relationship with many diseases,but for the disadvantages of native GPX,*** availability,it is hard to be used *** many artificial mimics of GPX have been made.A novel Se-ScFv abzyme was generated and its antioxidant effect was studied in this paper.

关键词：

来源： cnki会议评论

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滚轧直螺纹钢筋连接施工质量控制方法

北京工业职业技术学院学报 2015年第4期14卷 121-124页

作者：罗桂民北京方圆工程监理有限公司北京100039

以新桥家园1号、2号住宅楼工程为示例,针对钢筋滚轧直螺纹连接出现的外露部分完整丝扣较多、套筒2端均未露有效完整丝扣等主要问题,详细分析原因并提出解决办法,并进一步提出施工质量控制的方法与建议,对实际工程中钢筋滚轧直螺纹连接... 详细信息

以新桥家园1号、2号住宅楼工程为示例,针对钢筋滚轧直螺纹连接出现的外露部分完整丝扣较多、套筒2端均未露有效完整丝扣等主要问题,详细分析原因并提出解决办法,并进一步提出施工质量控制的方法与建议,对实际工程中钢筋滚轧直螺纹连接有指导意义。

关键词：钢筋滚轧直螺纹连接质量控制方法

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碳纤维改性对SLS覆膜砂铸型强度的影响

特种铸造及有色合金 2018年第1期38卷 54-58页

作者：罗贵敏芦刚严青松魏蓉段勇标南昌航空大学轻合金加工科学与技术国防重点科学实验室

采用不同的改性剂对碳纤维进行了改性处理,制备了含碳纤维增强材料的SLS覆膜砂试样。通过对试样进行力学性能测试与SEM形貌分析,研究了碳纤维改性及其含量对SLS覆膜砂铸型抗拉和抗弯强度的影响。结果表明,经过浓硝酸与硅烷偶联剂KH550... 详细信息

采用不同的改性剂对碳纤维进行了改性处理,制备了含碳纤维增强材料的SLS覆膜砂试样。通过对试样进行力学性能测试与SEM形貌分析,研究了碳纤维改性及其含量对SLS覆膜砂铸型抗拉和抗弯强度的影响。结果表明,经过浓硝酸与硅烷偶联剂KH550共同改性处理的碳纤维对SLS覆膜砂铸型的强化效果最佳,并随着改性碳纤维含量的增加,铸型强度先增大后减小。当改性碳纤维含量为3%时,SLS覆膜砂铸型后固化抗拉强度与抗弯强度均达到最大值,分别为6.385 MPa、8.011 MPa,比添加未改性碳纤维的铸型分别提升了46.18%、33.92%,较未添加碳纤维的铸型也分别提高了23.18%、31.46%。

关键词：碳纤维改性 SLS覆膜砂铸型抗拉强度抗弯强度