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MicroRNA在建立DJ-1基因敲减细胞模型中的应用

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基础医学与临床 2011年第5期31卷 515-519页

作者：赵莎莎鲁玲玲高华吕瓅赵焕英杨慧首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069

目的与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA（miRNA）在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段。在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染M... 详细信息

目的与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA（miRNA）在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用。方法构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段。在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染MN9D细胞系,应用real-time PCR和Western blot检测目的基因DJ-1的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,转染合成microRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调90%（P〈0.05）,蛋白水平下调70%~85%（P〈0.05）;而转染siRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调50%~70%（P〈0.05）,蛋白水平下调20%~50%（P〈0.05）。结论 microRNA与siRNA均可作为基因敲减的重要研究手段。与传统的siRNA相比,合成microRNA对目的DJ-1的干扰效率更为显著。

关键词： DJ-1 microRNA siRNA RNA干扰

大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制研究

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中国抗生素杂志 2016年第4期41卷 296-300页

作者：卢玲玲郑国军涂斐佩吴海鸥瑞安市中医院检验科瑞安325200 瑞安市人民医院检验科瑞安325200

目的研究多重耐药大肠埃希菌碳青霉烯酶基因分布与耐药相关性。方法回顾性分析2010年1月至2014年12月期间本地区大肠埃希菌耐药现状,收集11株耐碳青霉烯类大肠埃希菌。对11株耐碳青霉烯类大肠埃希菌进行ESBLs检测,改良Hodge实验,金属β... 详细信息

目的研究多重耐药大肠埃希菌碳青霉烯酶基因分布与耐药相关性。方法回顾性分析2010年1月至2014年12月期间本地区大肠埃希菌耐药现状,收集11株耐碳青霉烯类大肠埃希菌。对11株耐碳青霉烯类大肠埃希菌进行ESBLs检测,改良Hodge实验,金属β-内酰胺酶检测(EDTA-协同试验),三维试验检测Amp C酶;应用PCR技术进行碳青霉烯酶相关耐药基因检测,应用PFGE(脉冲场凝胶电泳)阐述菌株之间耐药传播及亲缘关系。结果我院产ESBLs大肠埃希菌检出率高,为57.5%。耐碳青霉烯类大肠埃希菌在2014年产ESBLs菌株中检出率达4.6%。11株耐碳青霉烯类大肠埃希菌中ESBLs阳性11株(100.0%),4株(36.3%)检出碳青霉烯酶,6株(54.5%)产Amp C酶,未见EDT A协同试验阳性;11株实验菌中PCR扩增结果示:blaKPC6株,测序为blaKPC-2,未检出B类,C类,D类β-内酰胺酶基因;分为3个克隆群。结论我院产ESBLs大肠埃希菌检出率高,多重耐药性严重,以blaKPC-2为主,本地区多重耐药大肠埃希菌克隆群主要分为2个群。

关键词：大肠埃希菌碳青霉烯酶耐药性

慢病毒载体介导下DJ-1过表达细胞模型的建立

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基础医学与临床 2018年第1期38卷 1-6页

作者：任静李毅杨慧鲁玲玲首都医科大学基础医学院神经生物学系北京脑重大疾病研究院帕金森病研究所教育部神经变性病重点实验室北京100069

目的构建人野生型DJ-1及其L166P突变体的慢病毒载体并探讨慢病毒载体在构建基因过表达细胞模型中的作用。方法分别构建野生型DJ-1与L166P突变型DJ-1慢病毒载体质粒。进行测序确定比对正确后,进行质粒的大量扩增与制备并转染包装细胞系HE... 详细信息

目的构建人野生型DJ-1及其L166P突变体的慢病毒载体并探讨慢病毒载体在构建基因过表达细胞模型中的作用。方法分别构建野生型DJ-1与L166P突变型DJ-1慢病毒载体质粒。进行测序确定比对正确后,进行质粒的大量扩增与制备并转染包装细胞系HEK293T细胞,荧光法和Western blot检测野生型DJ-1与L166P突变型DJ-1在细胞系中的表达。在确定目的蛋白正确表达之后,大量转染HEK293T细胞进行包装并生产携带目的基因的慢病毒颗粒。测定病毒上清滴度后感染PC12细胞,荧光显微镜和Western blot观察GFP荧光强度以及目的蛋白的表达,确定病毒的感染效率。结果成功构建携带DJ-1野生型及其突变体的慢病毒载体。该病毒载体可以转染进入HEK293T细胞内且目的蛋白能够正确表达。LV-DJ-1与LV-DJ-1/L166P的病毒滴度分别为2×10~9TU/m L与2×10~8TU/m L。病毒上清可以高效感染PC12细胞,绝大多数细胞可表达目的蛋白。外源野生型DJ-1和L166P突变体的蛋白表达量分别是内源性含量的315%和285%。结论慢病毒感染细胞效率很高,是很好的制备基因过表达细胞的方法。通过慢病毒载体介导,本研究获得了DJ-1及其突变体的过表达细胞模型。该模型可以用于后续DJ-1功能研究。

关键词：帕金森病 DJ-1 PC12细胞慢病毒载体

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多重耐药铜绿假单胞菌的相关耐药机制研究

中国抗生素杂志 2016年第5期41卷 377-381页

作者：曾为伦吴海鸥章如玲卢玲玲涂斐佩蒋相霞瑞安市中医院内科瑞安325200

目的分析我院铜绿假单胞菌的耐药性与耐药机制,为临床抗感染治疗提供理论依据。方法采用K-B法进行体外药敏试验,收集耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌60株,检测其主动外排泵表型,PCR扩增其外膜蛋白opr D2基因、金属酶相关基因,PFGE同源性分析... 详细信息

目的分析我院铜绿假单胞菌的耐药性与耐药机制,为临床抗感染治疗提供理论依据。方法采用K-B法进行体外药敏试验,收集耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌60株,检测其主动外排泵表型,PCR扩增其外膜蛋白opr D2基因、金属酶相关基因,PFGE同源性分析等。结果我院耐碳青霉烯类耐药率较高,于2014年达8.3%。6株外排泵表型阳性,IMP阳性32份,VIM阳性16份,IMP和VIM均阳性12份,外膜蛋白Opr D2缺失3株。PFGE同源性分析,结果分为3个型。其中A型有25株,B型有20株,C型有15株。结论我院多重耐药铜绿假单胞菌检出率较高,耐药机制以IMP与VIM为主,同时存在外排泵及外膜蛋白耐药机制,PFGE同源性分析显示我院存在不同克隆株流行,需加强细菌爆发流行防护措施。

关键词：铜绿假单胞菌多重耐药耐药性耐药机制

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住院肿瘤患者去脂肪组织测定及影响因素分析

上海交通大学学报（医学版） 2014年第7期34卷 1034-1038页

作者：徐仁应唐墨莲万燕萍仇晓霞陆玲玲吴颖洁上海交通大学医学院附属仁济医院临床营养科上海200127 上海交通大学医学院附属仁济医院肿瘤内科上海200127

目的测量住院肿瘤患者的去脂肪组织体质量(FFM)并分析其影响因素。方法以107例肿瘤内科住院患者为研究对象,其中上消化道肿瘤31例,下消化道肿瘤41例,肺癌14例,其他肿瘤21例。采集患者的一般资料(性别、年龄、诊断、病程、临床分期、化... 详细信息

目的测量住院肿瘤患者的去脂肪组织体质量(FFM)并分析其影响因素。方法以107例肿瘤内科住院患者为研究对象,其中上消化道肿瘤31例,下消化道肿瘤41例,肺癌14例,其他肿瘤21例。采集患者的一般资料(性别、年龄、诊断、病程、临床分期、化学治疗(化疗)次数、肿瘤手术史、慢性疾病史等)和营养相关指标(白蛋白、前白蛋白和体质量指数);应用生物电阻抗(BIA)方法评估肿瘤患者的FFM和基础代谢率(BMR);应用24 h膳食回顾法评估患者的膳食摄入情况。结果在107例肿瘤患者中,总营养不良发生率为36.4%。上消化道肿瘤、病程>1年的患者营养不良发生率较高;蛋白质摄入充足(≥75%日推荐量)的患者营养不良发生率较低。能量和蛋白质的摄入与FFM呈正相关。男性肿瘤患者中,随着化疗次数的增加,FFM和校正后的BMR明显降低(P0.05)。结论肿瘤患者的营养不良发生率较高,蛋白质摄入充足可改善患者的营养状况,化学治疗次数多可降低男性肿瘤患者的FFM和校正后的BMR。

关键词：肿瘤营养不良化学治疗去脂肪组织基础代谢率

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国内城市低碳建设程度的实证分析

科学技术与工程 2011年第7期11卷 1631-1635页

作者：陆玲玲倪权生上海交通大学上海200030

在理论分析的基础上,通过大量实证数据,利用TOPSIS模型对国内生产总值排名前30的城市的低碳建设程度进行综合评价,并解析低碳建设程度存在差异的主要原因。结果显示,我国低碳建设程度排名前五的城市是深圳、南京、东莞、广州、成都,而... 详细信息

在理论分析的基础上,通过大量实证数据,利用TOPSIS模型对国内生产总值排名前30的城市的低碳建设程度进行综合评价,并解析低碳建设程度存在差异的主要原因。结果显示,我国低碳建设程度排名前五的城市是深圳、南京、东莞、广州、成都,而各城市在低碳建设方面都有较大的改进空间。对GDP大城市来说,主要应该关注人均能源消费、环境绿化与废物处理的改善。

关键词：低碳城市建设评价指标 TOPSIS模型

上海市浦东新区流动人口妊娠期梅毒筛查及治疗结果临床分析

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中国健康教育杂志 2014年第5期20卷 291-294页

作者：丁晓颖陆玲玲上海市浦东新区妇幼保健院妇产科

目的了解上海浦东新区流动人口妊娠期梅毒的筛查情况并分析治疗后的母儿妊娠结局。方法对2008年至2013年在浦东新区妇幼保健院产前检查及分娩的孕妇进行梅毒筛查,确诊后予以驱梅治疗;比较流动人口组与户籍人口组两组间的不良妊娠结局,... 详细信息

目的了解上海浦东新区流动人口妊娠期梅毒的筛查情况并分析治疗后的母儿妊娠结局。方法对2008年至2013年在浦东新区妇幼保健院产前检查及分娩的孕妇进行梅毒筛查,确诊后予以驱梅治疗;比较流动人口组与户籍人口组两组间的不良妊娠结局,以及流动人口患者中治疗组和未治疗组之间的不良妊娠结局。结果 1 2008年至2013年妊娠期梅毒的总筛查率为98.90%,发病率为0.57%,治疗率为88.43%;2流动人口组与户籍人口组胎窘和新生儿梅毒的发生率比较,差异有统计学意义(P0.05);3流动人口妊娠期梅毒治疗组与未治疗组比较,早产、胎窘、新生儿梅毒、胎儿宫内生长受限的发生率显著下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论上海浦东新区流动人口妊娠期梅毒患者的不良妊娠结局发生率高于户籍人口组,积极地驱梅治疗可以显著降低不良妊娠结局的发生率,提高外来流动人口妊娠期梅毒的筛查率及治疗率对改善其妊娠结局有着重要的意义。

关键词：流动人口妊娠期梅毒筛查治疗妊娠结局

优质护理干预对髋关节置换术后患者髋关节功能恢复的作用效果

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中国误诊学杂志 2020年第8期15卷 362-363页

作者：陆玲玲蔡振媛南京医科大学附属淮安第一医院骨科江苏南京223300

目的研究髋关节置换术后患者实施优质护理干预对其髋关节功能恢复的作用效果。方法选取于我院接受髋关节置换术治疗的患者94例,经区组随机化分组法分为两组,每组各47例。常态组实施常规护理,分析组开展优质护理干预+常规护理。比较两组H... 详细信息

目的研究髋关节置换术后患者实施优质护理干预对其髋关节功能恢复的作用效果。方法选取于我院接受髋关节置换术治疗的患者94例,经区组随机化分组法分为两组,每组各47例。常态组实施常规护理,分析组开展优质护理干预+常规护理。比较两组Harris髋关节功能评分及对护理措施的满意程度。结果分析组Harris髋关节功能评分比常态组明显升高,分析组护理总满意率明显高于常态组(P<0.05)。结论髋关节置换术后实施优质护理干预能够有效改善髋关节功能,提升患者对护理干预措施的满意度,具有较高的推广应用价值。

关键词：关节成形术,置换,髋优质护理干预髋关节功能

DJ-1抗氧化应激相关机制及其与帕金森发病的关系

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解剖科学进展 2012年第5期18卷 473-477页

作者：贾娇坤鲁玲玲杨慧首都医科大学 08级七年制临床3班北京100069 首都医科大学基础医学院神经生物学系北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室北京100069

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元选择性丢失和残存神经元胞质中出现嗜酸性包涵体即Lewy体为典型病理特征的进行性神经变性疾病。DJ-1基因突变后可引起常染色体隐性遗传的早发家族性PD。DJ-1蛋白的确... 详细信息

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元选择性丢失和残存神经元胞质中出现嗜酸性包涵体即Lewy体为典型病理特征的进行性神经变性疾病。DJ-1基因突变后可引起常染色体隐性遗传的早发家族性PD。DJ-1蛋白的确切功能到目前为止还不清楚,有研究表明,DJ-1可通过自身氧化、调节抗氧化基因的转录,抑制ASK1活性,激活ERK1/2信号通路,阻止线粒体损伤所致的细胞凋亡。本文将主要对DJ-1抗氧化应激相关机制及其与帕金森病的关系简单综述。

关键词： DJ-1蛋白抗氧化应激帕金森病关机 ERK1/2信号通路多巴胺能神经元常染色体隐性遗传发病