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利用二代测序技术对柔嫩艾美耳球虫T-DNA整合位点的分析及鉴定

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中国农业大学学报 2023年第8期28卷 183-190页

作者：郝振凯汤新明张媛媛谢福杰陈君敏索静霞索勋刘贤勇中国农业大学动物医学院/兽医公共卫生安全全国重点实验室/农业农村部动物流行病学重点实验室北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 中国农业大学生物学院北京100193

为建立一种适用于转基因球虫的快速且准确的分析T-DNA整合位点的方法,本研究利用二代测序技术对转基因柔嫩艾美耳球虫EtM2e虫株进行基因组重测序分析,基于嵌合体reads比对分析T-DNA的插入位点,通过T-DNA特有序列以及外源基因与球虫同源... 详细信息

为建立一种适用于转基因球虫的快速且准确的分析T-DNA整合位点的方法,本研究利用二代测序技术对转基因柔嫩艾美耳球虫EtM2e虫株进行基因组重测序分析,基于嵌合体reads比对分析T-DNA的插入位点,通过T-DNA特有序列以及外源基因与球虫同源序列的测序深度进而分析T-DNA拷贝数,最后利用PCR扩增验证分析位点。结果表明:(1)二代测序下机数据过滤后获得数据7.2 Gb,Q20为96.1%,Q30为89.2%,能够比对至柔嫩艾美耳球虫参考基因组的reads数为23992361×2,平均测序深度为80×,reads全基因覆盖结果表明整个染色体被覆盖的较为均匀,测序的随机性比较好,可以进行后续分析;(2)比对至T-DNA序列的reads数为3106和3036,平均测序深度为140×,嵌合体reads序列信息表明T-DNA只存在一个插入位点,位于HG994969.1:2704213~2705255;(3)T载体骨架特有序列卡那抗性基因的平均测序深度为67×,T-DNA特有序列EYFP基因的平均测序深度为85×,而T-DNA与球虫同源序列His4基因的5′调控区序列的平均测序深度为154×,Actin基因的3′调控区序列的平均测序深度为164×,同源序列的平均测序约为特有序列平均测序深度的2倍,这表明T-DNA为单拷贝,与发现一个插入位点的结果相符合;(4)经PCR验证分析成功鉴定了该整合位点。转基因艾美耳球虫EtM2e虫株T-DNA整合位点的鉴定为后续转基因球虫鉴定提供了技术平台,也为球虫活载体疫苗的研发提供了一个潜在的靶位点。

关键词： T-DNA整合位点柔嫩艾美耳球虫二代测序技术转基因

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阻燃聚碳酸酯的研究进展

山东化工 2023年第19期52卷 131-133页

作者：刘显勇刘羽玲杨东方徐文明谢冠春广东中塑新材料股份有限公司广东东莞523860

综述了阻燃聚碳酸酯中阻燃剂种类,着重介绍了卤系、硅系、磺酸盐系、硼系、无机、磷系等六大类阻燃剂的阻燃机理以及在阻燃聚碳酸酯领域的研究进展。

关键词：聚碳酸酯阻燃剂阻燃机理研究进展

磷酸二氢铵阻燃PTMG/TDI体系聚氨酯弹性体制备及性能研究

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山东化工 2023年第22期52卷 60-62页

作者：刘显勇刘羽玲杨东方徐文明谢冠春广东中塑新材料股份有限公司广东东莞523860

将磷酸二氢铵(ADP)作为阻燃剂,以聚四氢呋喃醚(PTMG)、甲苯二异氰酸酯(TDI)、4,4'-亚甲基二(2-氯苯胺)(MOCA)为主要原料,通过预聚体法合成了阻燃剂含量不同的聚氨酯弹性体。讨论了ADP含量对PTMG/TDI体系聚氨酯弹性体的阻燃性及力学性能... 详细信息

将磷酸二氢铵(ADP)作为阻燃剂,以聚四氢呋喃醚(PTMG)、甲苯二异氰酸酯(TDI)、4,4'-亚甲基二(2-氯苯胺)(MOCA)为主要原料,通过预聚体法合成了阻燃剂含量不同的聚氨酯弹性体。讨论了ADP含量对PTMG/TDI体系聚氨酯弹性体的阻燃性及力学性能的影响。结果表明:ADP对聚氨酯弹性体的力学性能影响较大,随着ADP用量的增多,拉伸强度、断裂伸长率、撕裂强度以及耐磨性能下降;聚氨酯弹性体的阻燃性能提高,氧指数(LOI)随着ADP含量的增多而增大,阻燃等级从UL-94 V-2级达到V-0级。

关键词：磷酸二氢铵聚氨酯弹性体预聚体法阻燃性氧指数

视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗息肉样脉络膜血管病变并发浆液性视网膜色素上皮脱离的疗效和安全性

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眼科新进展 2024年第3期44卷 208-212页

作者：徐恩沛孙先勇高荣玉刘建东李南杨娟娟潍坊眼科医院山东省潍坊市261041

目的探讨视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗息肉样脉络膜血管病变(PCV)并发浆液性视网膜色素上皮脱离(sPED)的疗效和安全性。方法选取2019年7月至2021年2月于潍坊眼科医院行视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体... 详细信息

目的探讨视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗息肉样脉络膜血管病变(PCV)并发浆液性视网膜色素上皮脱离(sPED)的疗效和安全性。方法选取2019年7月至2021年2月于潍坊眼科医院行视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗的PCV并发sPED患者共13例(13眼),所有患眼术前接受过至少3次(每月1次)的玻璃体内抗血管内皮生长因子(VEGF)(雷珠单抗)注射治疗,且治疗无效。检测术前和术后1周、1个月、3个月、6个月患者的最佳矫正视力(BCVA)、中央视网膜厚度(CRT)、黄斑中心凹PED高度及宽度变化,记录术中及术后并发症发生情况。结果术后1周患眼BCVA较术前好转,差异有统计学意义(Z=-3.237,P=0.001);术后1周、1个月、3个月、6个月患眼CRT均较术前变薄,差异均有统计学意义(Z=-3.180、-3.180、-3.110、-3.180,P=0.001、0.001、0.002、0.001);术后1周、1个月、3个月、6个月患眼PED高度和宽度均较术前下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。术前13眼平均接受过(4.15±1.40)次玻璃体内注药(雷珠单抗)治疗,治疗时间为(5.92±3.95)个月(相当于每6周注射1次)。术后随访6个月内13眼平均接受了(2.31±1.97)次玻璃体内重复注射(康柏西普)治疗(相当于每10周注射1次)。偏相关分析结果显示,术后6个月时患眼BCVA提高量与CRT的降低量呈弱正相关(r=0.416,P=0.203);术后6个月时患眼BCVA提高量与PED高度和宽度的变化量无明显相关性(r=0.218、0.209,P=0.520、0.538)。术后1个月时,9眼出现PED复发或不同程度的视网膜神经上皮下积液,后期配合玻璃体内重复注射康柏西普治疗,PED均改善。术后6个月时,3眼黄斑中心凹下PED完全消失,视网膜解剖完全复位,1眼黄斑区视网膜仍存在活动性渗出。13眼术后随访期间均未出现全身及严重眼部并发症。结论视网膜下抽液联合玻璃体内注射康柏西普和气体治疗PCV并发sPED能够安全有效地降低患者CRT和改善PED,减少PED长期存在对视网膜的损害,但对术后6个月时患者BCVA的提高无明显帮助。

关键词：视网膜下抽液息肉样脉络膜血管病变浆液性视网膜色素上皮脱离血管内皮生长因子

Effect of culture medium pH on growth and stage conversion of Toxoplasma gondii

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Effect of culture medium pH on growth and stage conversion o...

社区育龄妇女主动自愿与被动自愿口服叶酸的依从性对比研究

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者： Song Qijun~1,Zou Jun~1,Ji Yongsheng~1,liu xianyong~(1*),Suo Xun~(1*),Zhu Xingquan~2 1.National Animal Protozoa Laboratory & College of Veterinary Medicine,China Agricultural University,Beijing 100193,China 2.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,,Lanzhou,Gansu Province 730046,China

The asexual phase of Toxoplasma gondii switches between tachyzoite and bradyzoite stage in mammalian *** studies showed that both parasite proliferation and stage conversion of T. gondii could be influenced by changing in vitro culture *** this study,the effect of different culture conditions on parasite growth and stage conversion was studied by using a transgenic *** strain ME49/*** fluorescent protein(YFP) and red fluorescent protein(RFP) can be expressed in this transgenic parasite under the control of tubulin and bradyzoite-specific bagl promoters of ***, *** ME49/DUAL tachyzoites were cultured in neutral medium in 37℃incubator with ambient CO supply,the red fluorescence drived by bradyzoite-specific bag1 promoter could be detected on the sixth day after induction,indicating the stage switch from tachyzoite to *** ME49/DUAL tachyzoites were cultured in medium with high/low pH(8.1/6.8) in 37℃incubator with ambient CO supply,expression of red fluorescence could be detected on the fourth ***,not all parasites within one cyst were RFP-expressing,indicating the asynchronous development of parasites in one *** number of red parasites was increased by using medium with high/low pH adjusted to 6.8 or 8.1 while the formation of cysts prevented tachyzoite overgrowth and enabled the study of in vitro bradyzoites cultured in HFFs for up to 10 *** HFFs,parasite proliferation rate was found to be higher under acidic condition(pH 6.8) than under alkaline condition(pH 8.1).The same phenomenon was also demonstrated in Vero *** findings suggest that culture medium pH could affect the growth and stage conversion of *** study was supported by the State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology(SKLVEB2011KFKT001) and the National Natural Science Foundation of China (31172309).

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国社区医师 2018年第22期34卷 164-165页

作者：刘贤勇魏茂慧张彩云郑向艳山东省日照经济技术开发区奎山卫生院 276803 山东省日照市岚山区碑廓中心卫生院 276809

目的:探讨社区育龄妇女主动自愿与被动自愿口服叶酸的依从性。方法:将社区服用叶酸的育龄妇女100例分为两组。对照组不给予干预,观察组给予免费补服叶酸的健康管理,比较两组依从性。结果:对照组主动自愿率38%,依从率38%;观察组依从率100... 详细信息

目的:探讨社区育龄妇女主动自愿与被动自愿口服叶酸的依从性。方法:将社区服用叶酸的育龄妇女100例分为两组。对照组不给予干预,观察组给予免费补服叶酸的健康管理,比较两组依从性。结果:对照组主动自愿率38%,依从率38%;观察组依从率100%。结论:免费补服叶酸的健康管理使社区育龄妇女口服叶酸知晓率达到100%,提高了其依从性。

关键词：育龄妇女叶酸神经管缺陷依从性分析

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近景摄影测量系统中非编码点匹配算法研究

工具技术 2010年第6期44卷 94-97页

作者：刘先勇袁建英邱志强王文斌西南科技大学信息工程学院四川省绵阳市621002 绵阳铁牛科技有限公司西南科技大学

从同一场景的多幅图像中找出对应的非编码点,是实现近景摄影测量的必要前提。分析了同场景多幅图像中非编码点之间的几何约束,提出了以三视极线和图像拓扑结构为约束的离散图像点匹配算法。先将同时满足三视图三极线和图像拓扑结构约束... 详细信息

从同一场景的多幅图像中找出对应的非编码点,是实现近景摄影测量的必要前提。分析了同场景多幅图像中非编码点之间的几何约束,提出了以三视极线和图像拓扑结构为约束的离散图像点匹配算法。先将同时满足三视图三极线和图像拓扑结构约束的点作为确定的匹配点并赋予编码值;再利用已经编码的标记点,以对极几何和图像拓扑结构为约束对剩下的未匹配点进行匹配。将该方法应用于铁牛三维光学测量系统的特征点测量系统进行的实例验证表明,当拍摄像平面和物平面夹角较小时,匹配完全正确;而在一般的拍摄条件下,其正确匹配率约为97%。

关键词：近景摄影测量非编码点匹配三视极线图像拓扑结构

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井下噪声的频谱分析

新技术新工艺 2014年第8期 87-89页

作者：钟全亮刘先勇倪士虎于群王涛西南科技大学信息工程学院四川绵阳621000

噪声是一种普遍存在于各种环境的有害因素。针对矿井下恶劣的环境,用噪声振动分析测试仪对井下的压风机、局扇和风锤的噪声信号进行数据采集及分析,得到压风机、局扇和风锤的最大噪声级强度分别为101.3、104.4和120 dB,并明确了噪声源... 详细信息

噪声是一种普遍存在于各种环境的有害因素。针对矿井下恶劣的环境,用噪声振动分析测试仪对井下的压风机、局扇和风锤的噪声信号进行数据采集及分析,得到压风机、局扇和风锤的最大噪声级强度分别为101.3、104.4和120 dB,并明确了噪声源的分布规律。用DSO-2902数字存储示波器分析得出了噪声的频谱成分和频谱结构:移动压风机的频率为20 Hz^3 kHz,局扇的频率为20 Hz^4.5 kHz,风锤的频率范围为20 Hz^10 kHz。

关键词：噪声频谱分析测量矿井

肠型与弥漫型胃癌中Sonic hedgehog与Wnt3A/β-catenin的表达

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2019年第3期40卷 248-254页

作者：刘先勇王建宁仇伟李加虎周宇王玉红张若梅孟春芹南京医科大学附属江宁医院中西医结合科江苏南京211100 南京医科大学附属江宁医院消化内科江苏南京211100 南京医科大学附属江宁医院病理科江苏南京211100 南京医科大学附属江宁医院内镜室江苏南京211100 南京医科大学附属江宁医院中心实验室江苏南京211100

目的:观察音猬因子(Shh)、Wnt3A/β-catenin(β-连环蛋白)及分泌型卷曲相关蛋白-1(Sfrp1)在慢性浅表性胃炎(CSG)、肠型胃癌(IGC)及弥漫型胃癌(DGC)中表达特点,并研究它们的相关性,初步揭示这两种胃癌有完全不同的发病机制.方法:运用免... 详细信息

目的:观察音猬因子(Shh)、Wnt3A/β-catenin(β-连环蛋白)及分泌型卷曲相关蛋白-1(Sfrp1)在慢性浅表性胃炎(CSG)、肠型胃癌(IGC)及弥漫型胃癌(DGC)中表达特点,并研究它们的相关性,初步揭示这两种胃癌有完全不同的发病机制.方法:运用免疫组织化学法、Western Blotting方法检测30例CSG(作为对照组)、42例IGC及42例DGC标本中Shh、Wnt3A/β-catenin及Sfrp1蛋白表达特点,比较每种蛋白在各组中表达的差异,并分析它们之间的相关性.结果:免疫组织化学法检测发现:Shh主要表达在细胞浆和细胞膜.在CSG中Shh多阳性或强阳性表达;在IGC中,Shh大多表达减少,呈弱阳性表达,部分甚至不表达;在DGC中,Shh多呈强阳性表达.Shh在3组之间的表达有统计学差异(H=46.064,P<0.001).CSG中Shh表达水平明显高于IGC(P<0.001),显著低于DGC(P<0.05).Shh在DGC中表达水平显著高于IGC(P<0.001).在CSG中,β-catenin主要表达在细胞膜,细胞浆一般不染色或局部淡染,胞核不染色.在IGC中,β-catenin表达水平显著增高,并可观察到胞质与胞核中异位表达,但在DGC中却表达显著减少,有一些甚至不表达.β-catenin在3组之间的表达有统计学差异(H=38.629,P<0.001).β-catenin在CSG中表达水平显著低于IGC(P<0.05),显著高于DGC(P<0.001).β-catenin在IGC中表达显著高于DGC(P<0.001).蛋白免疫印迹试验检测发现:Shh在3组之间的表达有统计学差异(F=739.731,P<0.001).与CSG组比较,Shh蛋白在IGC组表达水平显著减少,在DGC组表达水平显著增高;与DGC组比较,Shh蛋白IGC表达水平显著降低.各组间比较均有显著统计学差异(P<0.001).β-catenin在3组之间的表达有统计学差异(F=253.540,P<0.001).与CSG组比较,β-catenin蛋白在IGC组表达水平显著增高,在DGC组表达水平显著降低;与DGC组比较,β-catenin蛋白在IGC组表达水平显著增高,各组间比较均有显著统计学差异(P<0.001).Shh与β-catenin在IGC与DGC中表达呈负相关(P<0.001).Wnt3A与Sfrp1在3组中多不表达.结论:从CSG到IGC发展进程中,Shh减少,可能打破了Shh与Wnt两个信号通路在胃腺体中的动态平衡,β-catenin表达水平增高,且部分从细胞膜转移至细胞核表达,激活了经典Wnt通路,导致了IGC发生;从CSG到DGC发展进程中,Shh表达显著增多,可能与DGC发病密切相关.

关键词：音猬因子 β连环蛋白弥漫型胃癌肠型胃癌相关性