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RNA干扰Rbl-2基因调控DNA甲基化转移酶介导心脏干细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2010年第12期26卷 2306-2310页

作者：夏慧苏余细勇林秋雄李晓红朱杰宁麦丽萍林曙光广东省人民医院广东省心血管病研究所广东省医学科学院广东广州510080

目的:视网膜母细胞瘤样蛋白2(Rbl-2)在调控DNA甲基化转移酶(DNMT)中发挥重要作用,而DNMT影响干细胞的分化。本文旨在探讨调控Rbl-2基因的表达对心脏干细胞凋亡的影响。方法:分离培养人心脏干细胞,转染Rbl-2 siRNA。采用real time RT-PC... 详细信息

目的:视网膜母细胞瘤样蛋白2(Rbl-2)在调控DNA甲基化转移酶(DNMT)中发挥重要作用,而DNMT影响干细胞的分化。本文旨在探讨调控Rbl-2基因的表达对心脏干细胞凋亡的影响。方法:分离培养人心脏干细胞,转染Rbl-2 siRNA。采用real time RT-PCR检测Rbl-2和DNMT-3B mRNA表达水平,Westernblotting检测DNMT-3B蛋白表达和caspase-3活化片段,并以Annexin V-FITC/PI双染色-流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:在人心脏干细胞中,转染siRNA后Rbl-2 mRNA表达水平与阴性对照组相比显著降低(P<0.01),同时DNMT-3B mRNA和蛋白表达水平与阴性对照组相比均显著升高(P<0.01),差异显著。与阴性对照组相比,转染Rbl-2 siRNA的人心脏干细胞caspase-3激活,表现为caspase-3活性片段与caspase-3前体的比值显著增高(P<0.01),annexin V阳性细胞凋亡率上升(P<0.05)。结论:Rbl-2基因在心脏干细胞的生存中具有正性调控作用,抑制其表达能促进心脏干细胞的凋亡,其调控机制与表观遗传学的修饰密切相关。

关键词：视网膜母细胞瘤样蛋白质2 DNA甲基化转移酶心脏干细胞细胞凋亡

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巨噬细胞移动抑制因子基因的克隆和原核表达

中国病理生理杂志 2005年第4期21卷 815-816,819页

作者：单志新余细勇林秋雄杨敏符永恒谭虹虹郑猛林曙光广东省人民医院医学研究中心

目的:扩增、克隆人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组MIF蛋白。方法:根据人MIF基因序列,设计、合成PCR引物,利用RT -PCR技术从人T淋巴细胞mRNA中扩增MIF基因。将MIF定向插入原核表达载体pGEX - 4T ... 详细信息

目的:扩增、克隆人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组MIF蛋白。方法:根据人MIF基因序列,设计、合成PCR引物,利用RT -PCR技术从人T淋巴细胞mRNA中扩增MIF基因。将MIF定向插入原核表达载体pGEX - 4T - 1,并将构建正确的重组表达载体pGEX - 4T -MIF转化工程菌BL2 1(DE3) ,用异丙基硫代- β-D -半乳糖(IPTG)诱导表达重组MIF蛋白。用GSTrap亲合柱纯化表达产物GST-MIF ,行柱上凝血酶消化,洗脱获得MIF蛋白。用巨噬细胞移动抑制试验(MMI)鉴定MIF蛋白的生物活性。结果:限制性内切酶分析和DNA测序结果表明,成功构建了重组质粒pGEX - 4T -MIF ,人MIFcDNA长348bp ,编码115个氨基酸。经IPTG诱导,高效表达出可溶的GST -MIF蛋白。SDS -PAGE和Westernblotting分析显示,GST -MIF经凝血酶消化,获得13kU的MIF蛋白。MIF蛋白对巨噬细胞移动的抑制率达30 % ,具有生物活性。结论:克隆、测定了人MIF基因,在大肠杆菌表达出具有生物活性的MIF蛋白。

关键词：巨噬细胞游走抑制因子克隆,分子基因表达

β_1肾上腺受体反义基因对高血压大鼠前肾素、血管紧张素Ⅱ的影响

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中华高血压杂志 2007年第6期15卷 481-484页

作者：梁远红林曙光周燕王晋明王芳余细勇广东省人民医院医学研究中心广东省心血管病研究所广东广州510100 武汉大学人民医院湖北武汉430060

目的观察β1肾上腺受体反义基因对肾性高血压大鼠血压、前肾素原 mRNA和血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响,探讨基因治疗降低血压的机制。方法制作两肾一夹肾性高血压模型,阳离子脂质体与β1反义寡核苷酸经鼠尾静脉注射。共聚焦检测荧光,... 详细信息

目的观察β1肾上腺受体反义基因对肾性高血压大鼠血压、前肾素原 mRNA和血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响,探讨基因治疗降低血压的机制。方法制作两肾一夹肾性高血压模型,阳离子脂质体与β1反义寡核苷酸经鼠尾静脉注射。共聚焦检测荧光,鼠尾袖带法(tail-cuff法)测血压,半定量RT-PCR测定前肾素原 mRNA水平,放免法测定血浆AngⅡ水平。结果β1反义寡核苷酸可使血压下降维持4周,血压最大下降39mmHg;与高血压组比较,注射后第7天反义组的前肾素原 mRNA、AngⅡ水平无统计学意义;注射后第28天,反义组的前肾素原 mRNA、AngⅡ水平降低差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论以β1肾上腺受体为靶基因的反义基因治疗降压效果显著,其机制是先作用于交感神经系统再作用于肾素血管紧张素系统来发挥作用。

关键词： β1肾上腺受体基因治疗两肾-夹高血压血管紧张素Ⅱ

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福建省农村卫生监督体系现状及建议

职业与健康 2008年第10期24卷 993-995页

作者：王谋凤莫申巨林曙光福建省卫生厅卫生监督所福州市350001

解读国家有关政策要求,对福建卫生监督体系建设现状进行了分析。结果福建省卫生监督体系建设进展偏慢,广大农村卫生监督力量较薄弱,因此,提出加强农村卫生监督的建议与应急方案,改善农村卫生状况,需要更多的卫生人才进驻农村,以改变卫... 详细信息

解读国家有关政策要求,对福建卫生监督体系建设现状进行了分析。结果福建省卫生监督体系建设进展偏慢,广大农村卫生监督力量较薄弱,因此,提出加强农村卫生监督的建议与应急方案,改善农村卫生状况,需要更多的卫生人才进驻农村,以改变卫生监督力量薄弱的现实:政府应加大投入,予以高度重视。

关键词：卫生监督体系建设农村卫生建议

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卡维地洛对映体的抗心肌细胞凋亡作用

中国临床药理学与治疗学 2006年第9期11卷 1035-1038页

作者：刘晓颖杨敏林秋雄余细勇单志新郑猛林曙光广东省人民医院医学研究中心广东省心血管病研究所

目的:研究卡维地洛(carvedilol)R(+)和S(-)型对映体对心肌细胞的凋亡保护作用。方法:异丙肾上腺素(ISO)2 mmol.L-1作用12 h以诱导H9C2-1心肌细胞凋亡,Hoechst 33258染色法定性凋亡细胞,AnnexinⅤ-FITC/PI双染标记细胞后以流式细胞仪测... 详细信息

目的:研究卡维地洛(carvedilol)R(+)和S(-)型对映体对心肌细胞的凋亡保护作用。方法:异丙肾上腺素(ISO)2 mmol.L-1作用12 h以诱导H9C2-1心肌细胞凋亡,Hoechst 33258染色法定性凋亡细胞,AnnexinⅤ-FITC/PI双染标记细胞后以流式细胞仪测定标记率以定量凋亡率。处理组同时加入R(+)或S(-)carvedilol,分2和10μmol.L-1两个浓度组。并分别测定10μmol.L-1R(+)或S(-)carvedilol单一作用的细胞凋亡率。结果:2 mmol.L-1ISO作用12 h后H9C2-1细胞大量凋亡(P<0.01);R(+)或S(-)carvedilol+ISO组细胞凋亡率显著低于ISO组(P<0.05);与低剂量组间比较,R(+)carvedilol+ISO细胞晚期凋亡率和总凋亡率低于S(-)carvedilol+ISO,差异有显著性意义(P<0.05);高剂量S(-)carvedilol组细胞凋亡率略有升高,但显著低于S(-)Carv 10μmol.L-1+ISO组(P<0.05)。结论:ISO可诱导-H9C2-1心肌细胞凋亡,低剂量R(+)或S(-)carvedilol对此均有明显的抑制作用,并且R(+)和S(-)型carvedilol的抗心肌细胞凋亡效应间存在一定的立体选择性差异,R(+)carvedilol显示出更具潜力。

关键词：卡维地洛对映体抗凋亡心肌细胞

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稀土异戊橡胶/天然橡胶并用胶性能研究

橡胶工业 2012年第1期59卷 24-27页

作者：石路颖李花婷林曙光刘峰郭中台孙虹中国石油锦州石化公司辽宁锦州121001 北京橡胶工业研究设计院北京100143

研究稀土异戊橡胶(NdIR)/天然橡胶(NR)并用胶的性能,并与NR进行对比。结果表明:NdIR/NR并用胶混炼工艺性能、硫化特性和流变性能与NR胶料相当;NdIR/NR并用胶物理性能、耐热空气老化性能、耐切割性能、滚动阻力和动态力学性能与NR硫化胶... 详细信息

研究稀土异戊橡胶(NdIR)/天然橡胶(NR)并用胶的性能,并与NR进行对比。结果表明:NdIR/NR并用胶混炼工艺性能、硫化特性和流变性能与NR胶料相当;NdIR/NR并用胶物理性能、耐热空气老化性能、耐切割性能、滚动阻力和动态力学性能与NR硫化胶基本一致,NdIR可部分或全部替代NR。

关键词：稀土催化剂异戊橡胶天然橡胶并用胶

A novel and validated liquid chromatography-tandem mass spectrometry method for analysis of hydrocortisone 17-butyrate in rabbit plasma and its skin penetration study

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中国病理生理杂志 2012年第11期 2100-2100页

作者： ZHOU Zhi-ling,YANG Min,YU Xi-yong,CHEN Tie-feng,SHAN Zhi-xin,lin Qiu-xiong,DENG Chun-yu,WU Yue-heng,LI Xiao-hong,ZHONG Shi-long,MAI Li-ping,lin shu-guang(Medical Research Center of guangdong General Hospital,guangdong Academy of Medical Sciences,guangzhou 510080,China)

AIM:Topical cream formulation containing 0.1%hydrocortisone 17-butyrate(H-17-B)has most commonly used in cases of inflammatory skin diseases and *** is critical to develop a sensitive and selective method for the dete...

关键词：

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调血脂药物在冠心病二级预防中的应用

中国医师进修杂志（内科版） 2007年第10期30卷 3-6页

作者：林曙光陈纪言杨峻青广东省人民医院心内科广州510080

冠心病的二级预防对冠心病预后改善的作用已日益明确，晚近的临床研究结果表明，强化冠心病二级预防与冠状动脉介入治疗及药物治疗效果相当，更确立了二级预防在冠心病治疗中的中心地位。在冠心病二级预防中，调血脂治疗是最重要的治疗... 详细信息

冠心病的二级预防对冠心病预后改善的作用已日益明确，晚近的临床研究结果表明，强化冠心病二级预防与冠状动脉介入治疗及药物治疗效果相当，更确立了二级预防在冠心病治疗中的中心地位。在冠心病二级预防中，调血脂治疗是最重要的治疗方法之一，大量的临床研究结果表明，以他汀类药物为中心的调血脂治疗可以提高冠心病患者的生存率、降低病死率、降低心肌梗死率、降低血运重建术率、稳定冠状动脉粥样硬化斑块及使动脉粥样硬化斑块消退，确立了调血脂药物在冠心病二级预防中的中心地位。

关键词：冠心病治疗调血脂药物二级预防冠状动脉粥样硬化斑块冠状动脉介入治疗调血脂治疗临床研究冠心病患者

导向药物转化生长因子α-Sporin对增殖平滑肌细胞生长的抑制作用

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中国动脉硬化杂志 2001年第2期9卷 104-107页

作者：杨军余细勇唐其东林曙光南华大学附属第一医院心内科湖南省衡阳市421001 广东省心血管病研究所广东省广州市510080

为证实生物导向药物对平滑肌细胞增殖的作用 ,用SPDP化学联结法合成了转化生长因子α -Saporin ,通过MTS比色法观察了转化生长因子α-Saporin对培养中的增殖平滑肌细胞的细胞毒性作用 ,并用氚标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入法进一步探讨了转化... 详细信息

为证实生物导向药物对平滑肌细胞增殖的作用 ,用SPDP化学联结法合成了转化生长因子α -Saporin ,通过MTS比色法观察了转化生长因子α-Saporin对培养中的增殖平滑肌细胞的细胞毒性作用 ,并用氚标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入法进一步探讨了转化生长因子α -Saporin对平滑肌细胞的DNA合成的影响以及过量转化生长因子α对转化生长因子α -Saporin的受体竞争抑制作用。结果发现 ,联结后的转化生长因子α -Saporin可明显抑制平滑肌细胞的增殖 ,而Saporin的抑制作用却很弱。转化生长因子α -Saporin对培养的平滑肌细胞氚标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入量有明显抑制作用 ,与对照组比较氚标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入量降低了 39.1% (P =0 .0 0 17) ,而在加入表皮生长因子受体的配体转化生长因子α后可明显竞争抑制转化生长因子α -Saporin对平滑肌细胞增殖的细胞毒性作用。实验结果提示 :转化生长因子α saporin通过表皮生长因子受体介导已具有较Saporin明显增强的细胞毒性作用 ,本实验为转化生长因子α saporin在经皮腔内冠状动脉成形术术后再狭窄的临床防治中的应用的研究提供初步的实验依据。

关键词：转化生长因子α Saporin 培养细胞生长抑制剂血管平滑肌