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1株分离自云南省师宗县库蠓的新型西藏环状病毒

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畜牧兽医学报 2021年第1期52卷 166-176页

作者：杨振兴谢佳芮李占鸿李卓然廖德芳牛保生姚萍芬李乐杨恒云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224 云南省师宗县动物疫病预防控制中心曲靖655700

西藏环状病毒(Tibet orbivirus, TIBOV)为环状病毒属的新成员,病毒于2009年首次从我国西藏墨脱县采集的圆斑按蚊中分离,目前,对该病毒的认识仍十分有限。本研究对1株分离自我国云南省师宗县库蠓的新型TIBOV毒株YNSZ/V290/2019进行了鉴定... 详细信息

西藏环状病毒(Tibet orbivirus, TIBOV)为环状病毒属的新成员,病毒于2009年首次从我国西藏墨脱县采集的圆斑按蚊中分离,目前,对该病毒的认识仍十分有限。本研究对1株分离自我国云南省师宗县库蠓的新型TIBOV毒株YNSZ/V290/2019进行了鉴定,结果表明,病毒可在C6/36与BHK-21细胞上引起明显的细胞病变,电镜下观察,病毒粒子呈球形,直径55~75 nm,具有环状病毒属病毒典型形态特征。电泳结果显示,病毒基因组为十节段双链RNA,呈现“3-3-3-1”的电泳带型特征。对环状病毒属病毒高度保守的基因节段及其编码蛋白(Seg-3/T2)的序列分析显示,YNSZ/V290/2019为TIBOV的成员,与其他TIBOV毒株的核酸与氨基酸序列相似度分别为80.90%~81.70%与97.20%~97.30%。对决定环状病毒属病毒血清型的基因节段及其编码蛋白(Seg-2/OC1)的序列分析显示,YNSZ/V290/2019与已知TIBOV毒株的核酸与氨基酸序列相似度分别为26.90%~30.60%与28.50%~33.20%,表明该毒株可能是一种新血清型的TIBOV。对采集于师宗县牧场的40份黄牛与68份山羊血清进行血清中和试验,结果显示,新型TIBOV在牛、羊的阳性率分别为22.50%与4.41%。新型TIOBV在我国的发现,丰富了我国虫媒病毒的研究,为深入研究我国TIBOV的分布、致病性、感染宿主范围与诊断试剂的开发提供了基础。

关键词：库蠓病毒分离鉴定西藏环状病毒序列分析

牛源流行性出血病病毒(EHDV)血清10型毒株在我国的分离鉴定

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病毒学报 2019年第1期35卷 112-120页

作者：李占鸿肖雷杨振兴孟锦昕廖德芳高林李华春杨恒云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室昆明650224

我国存在多种血清型流行性出血热病毒(Epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)的流行,但尚未有关于EHDV-10型毒株的分离报道。为了解云南省EHDV的流行情况,2012～2015年,本研究在云南省设立江城、师宗、芒市三个监控点,定期采集监... 详细信息

我国存在多种血清型流行性出血热病毒(Epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)的流行,但尚未有关于EHDV-10型毒株的分离报道。为了解云南省EHDV的流行情况,2012～2015年,本研究在云南省设立江城、师宗、芒市三个监控点,定期采集监控动物血液,接种幼仓鼠肾细胞(Baby hamster kidney cell,BHK-21)进行病毒分离;通过PCR检测、血清中和试验、琼脂糖凝胶电泳和电镜观察等方法对分离病毒进行鉴定;对分离毒株的Seg-2/VP2与Seg-3/VP3基因节段进行克隆、测序与序列分析。2013年在云南省师宗县的哨兵牛上分离出一株EHDV毒株(YNSZ-V277-2013),病毒可引起BHK-21细胞出现圆缩、裂解的细胞病变(Cytopathic effect,CPE);电镜下病毒粒子呈球形,无囊膜,表面有大量纤维突,直径在70～80nm之间;病毒基因组dsRNA的琼脂糖凝胶电泳显示分离毒株与其他血清型EHDV一致,呈现"3-3-3"的电泳带型;序列分析显示YNSZ-V277-2013毒株的Seg-2/VP2与Seg-3/VP3序列与日本EHDV-10型毒株(ON-4/N/98)相似度最高,分别为97.5%/98.5%与98.1%/99.8%,证实分离毒株为EHDV-10型;系统发育分析显示YNSZ-V277-2013毒株的Seg-2与日本EHDV-10型毒株(ON-4/N/98)的亲缘关系最近,Seg-3与分离至日本和澳大利亚的EHDV毒株同属Eastern型。本研究首次报道了EHDV-10型毒株在我国的分离以及分离毒株的Seg-2与Seg-3基因序列特征,为进一步开展中国EHDV-10型的流行病学调查与致病性研究提供了基础。

关键词：流行性出血热病毒(EHDV) 分离鉴定序列分析

1株多重耐药大肠杆菌噬菌体BP32的分离鉴定及生物学特性分析

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中国畜牧兽医 2024年第8期51卷 3540-3551页

作者：吴静楠李占鸿李富祥张振兴张以芳宋建领云南农业大学动物医学院昆明650201 云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224

[目的]拟分离1株可裂解多重耐药大肠杆菌的噬菌体,明确其生物学特性及基因组特征。[方法]本研究从病死山羊肺脏组织中分离大肠杆菌,并通过药敏试验分析其耐药性。以大肠杆菌ER2738菌株为宿主菌,从养殖场污水中进行噬菌体的初步增殖,通... 详细信息

[目的]拟分离1株可裂解多重耐药大肠杆菌的噬菌体,明确其生物学特性及基因组特征。[方法]本研究从病死山羊肺脏组织中分离大肠杆菌,并通过药敏试验分析其耐药性。以大肠杆菌ER2738菌株为宿主菌,从养殖场污水中进行噬菌体的初步增殖,通过点滴法确定分离噬菌体的宿主谱,采用双层琼脂平板法分离纯化特异性裂解大肠杆菌的噬菌体,进一步对其形态、最佳感染复数(MOI)、生长曲线、酸碱度和温度耐受性等生物学特性进行研究;通过高通量测序平台测定其全基因组序列,并对其基因组及遗传进化特征进行分析。[结果]从病死山羊肺脏中分离到1株多重耐药性大肠杆菌,命名为YNEC001。从养殖场污水中分离到1株可特异性裂解YNEC001菌株的噬菌体BP32,电镜观察显示噬菌体BP32属于肌尾科噬菌体,最佳MOI为0.1,潜伏期约为30 min,爆发期持续约60 min,裂解量约为660 PFU/cell,在30~50℃和pH 4.0~10.0条件下可保持稳定的活性。噬菌体BP32基因组长度为166346 bp,GC含量偏低(35.42%),未发现耐药基因和毒力因子,基因组共包含261个开放阅读框(ORF),其中125个为已知功能基因,含有8个tRNA。在全基因组水平上,噬菌体BP32与肠杆菌噬菌体Escherichia phage BF15(MW822007)核苷酸序列相似性最高(98.25%),但基于末端酶大亚基序列的进化分析则表明BP32与大肠杆菌噬菌体Escherichia phage vB_EcoM_SP1(MT682709)的亲缘关系最近,而与Escherichia phage BF15(MW822007)的关系较远。[结论]本研究分离到1株多重耐药大肠杆菌YNEC001,并分离到可特异性裂解YNEC001菌株的噬菌体BP32,该噬菌体具有较强的裂解能力和良好的稳定性,具备开发为耐药性大肠杆菌治疗制剂的潜力。

关键词：多重耐药大肠杆菌噬菌体生物学特征全基因组分析

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小菊新品种‘汴京紫精灵’

园艺学报 2022年第S02期49卷 177-178页

作者：曹琴赵艳莉李战鸿高萌萌戴妙飞李永华李会宽孙珍珠卞书迅李菲开封市农林科学研究院河南开封475008 河南农业大学风景园林与艺术学院郑州450002

收取‘国庆红’自然授粉的种子,从实生后代中筛选出观赏小菊新品种‘汴京紫精灵’。植株低矮,株型紧凑,生长势旺。花朵繁多,半重瓣,花序直径2.7cm,花色靓丽,舌状花紫色,基部有少量乳白色,花心黄色。花期早,10月10日左右初花,10月15日左... 详细信息

收取‘国庆红’自然授粉的种子,从实生后代中筛选出观赏小菊新品种‘汴京紫精灵’。植株低矮,株型紧凑,生长势旺。花朵繁多,半重瓣,花序直径2.7cm,花色靓丽,舌状花紫色,基部有少量乳白色,花心黄色。花期早,10月10日左右初花,10月15日左右盛花期,10月底末花期。可用于布置国庆节花坛和菊花文化节花展。

关键词：菊花丛生型半重瓣紫色品种

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蓝舌病病毒血清9型毒株在我国的首次分离

畜牧兽医学报 2019年第2期50卷 354-363页

作者：李占鸿王金萍杨恒廖德芳宋建领高林何于雯李华春云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室昆明650224

旨在分离流行于我国云南省的蓝舌病病毒(BTV),掌握分离BTV的遗传特征与感染特性。采用"鸡胚—C6/36细胞—BHK-21细胞"接种的方式,采集哨兵牛的BTV阳性血液进行病毒分离;采用血清中和试验以及Segment 2与Segment 6ORF区的克隆测序确定分... 详细信息

旨在分离流行于我国云南省的蓝舌病病毒(BTV),掌握分离BTV的遗传特征与感染特性。采用"鸡胚—C6/36细胞—BHK-21细胞"接种的方式,采集哨兵牛的BTV阳性血液进行病毒分离;采用血清中和试验以及Segment 2与Segment 6ORF区的克隆测序确定分离病毒的血清型;通过病毒噬斑形成和增殖曲线的测定,分析病毒在BHK-21细胞的增殖特性;通过qRT-PCR与血清中和试验分析BTV感染动物血液中病毒含量与中和抗体动态变化情况。结果显示:2013年8月,在云南芒市设定的哨兵牛中分离出一株BTV(毒株号V013/YN/2013),血清中和试验显示V013/YN/2013为BTV-9型病毒,Segment 2与Segment 6序列分析表明分离的病毒属BTV-9Eastern型,与日本毒株和澳大利亚BTV-9型毒株具有最近的亲缘关系。病毒噬斑与增殖曲线测定结果显示V013/YN/2013在BHK-21细胞上增殖能力明显强于BTV-9型参考毒株。自然感染V013/YN/2013的牛在连续5个月的监控期内未出现临床症状,感染动物虽产生了特异性中和抗体,但血液中始终能持续检测到病毒核酸。本研究首次报道了BTV-9Eastern型毒株V013/YN/2013在我国的分离,为进一步开展中国BTV-9型病毒的全基因组测序、诊断方法的建立、流行病学调查与致病性研究奠定了基础。

关键词：蓝舌病病毒病毒分离血清型序列分析感染特性

首次在云南省哨兵牛上分离出一种新型西藏环状病毒

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病毒学报 2021年第4期37卷 922-932页

作者：李占鸿杨振兴谢佳芮高翔胡忠燕李卓然廖德芳李华春杨恒云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室昆明650224 云南省景洪市动物疫病预防控制中心景洪655700 昆明学院农学与生命科学学院昆明650214

西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV)为环状病毒属新成员,2009年首次在西藏墨脱县多斑按蚊中发现,目前该病毒对动物健康和公共卫生的危害尚不清楚,本文首次报道了牛体上一株新型TIBOV的分离。2019年在云南省景洪市设置哨兵牛3头,每周... 详细信息

西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV)为环状病毒属新成员,2009年首次在西藏墨脱县多斑按蚊中发现,目前该病毒对动物健康和公共卫生的危害尚不清楚,本文首次报道了牛体上一株新型TIBOV的分离。2019年在云南省景洪市设置哨兵牛3头,每周采血进行虫媒病毒的监测与病毒分离。监测期的第4周,其中一头牛采集的血液样本接种C6/36细胞盲传3代出现细胞病变,提取病毒核酸进行琼脂糖凝胶电泳,显示病毒基因组为10节段双链RNA,呈"3-3-3-1"的带型特征。电镜观察可见直径约70 nm,具有环状病毒属病毒典型形态特征的病毒粒子,将分离的病毒命名为V298/YNJH/2019。对决定环状病毒种属的基因节段及其编码蛋白(Seg-3/T2)序列分析显示,分离毒株的Seg-3/T2与其它TIBOV毒株的核酸(nt)与氨基酸序列(aa)相似度分别在79.6%~79.9%与96.3%~96.4%之间,其T2蛋白在系统发生树上与其它TIBOV聚为一簇;对决定病毒血清型的基因节段及其编码蛋白(Seg-2/OC1)的序列分析显示,分离毒株与其它TIBOV毒株Seg-2/OC1的序列相似度分别在42.3%~43.4%(nt)与29.3%~31.7%(aa)之间,其OC1蛋白形成独立于其它TIBOV毒株的进化分支,以上结果提示V298/YNJH/2019为一种新血清型TIBOV。通过实时荧光定量RT-PCR与血清中和试验,对病毒在牛上感染特征的回溯分析显示:在分离到病毒的前一周,动物血液中可检到低水平的病毒核酸,在分离到病毒的当周,血液中病毒核酸含量处于高峰,但两周后检测结果为阴性;动物在病毒感染后第2周开始产生中和抗体,在随后两周达到高峰,在感染后4个月仍保持较高水平。本研究首次报道了一种新型TIBOV在牛体上的分离,丰富了我国流行TIBOV多样性与感染特性的认知,为TIBOV的流行病学、致病性与诊断试剂的研究提供了基础。

关键词：西藏环状病毒新血清型序列分析感染特性

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菊花新品种‘汴京庆典黄’

园艺学报 2022年第S02期49卷 175-176页

作者：赵艳莉李战鸿曹琴戴妙飞高萌萌孙珍珠李会宽李永华卞书迅黄淦开封市农林科学研究院河南开封475008 河南农业大学风景园林与艺术学院郑州450002

‘汴京庆典黄’是由‘北京紫小菊’自然授粉的后代中选育出的菊花新品种。重瓣,盛开时花径3.5cm,舌状花金黄色。株型紧凑,花色靓丽、花朵繁多、花期长,自然花期10月初到10月末,个体、群体观赏效果俱佳,宜作园林应用,可做小菊生产主栽品... 详细信息

‘汴京庆典黄’是由‘北京紫小菊’自然授粉的后代中选育出的菊花新品种。重瓣,盛开时花径3.5cm,舌状花金黄色。株型紧凑,花色靓丽、花朵繁多、花期长,自然花期10月初到10月末,个体、群体观赏效果俱佳,宜作园林应用,可做小菊生产主栽品种种植。

关键词：菊花丛生型重瓣金黄色品种

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地铁振动对相邻砖木结构房屋影响实测分析

住宅科技 2018年第6期38卷 41-44页

作者：李占鸿王英陆珏上海市房地产科学研究院

以上海市某砖木结构房屋为研究对象,对其受相邻地铁振动的影响进行实测,包括房屋振动响应及损伤实测。结果表明:地铁经过时,房屋各层楼板测点的铅垂向Z振级VLz的昼间和夜间评价量均小于《城市区域环境振动标准》(GB 10070—88)中有关"... 详细信息

以上海市某砖木结构房屋为研究对象,对其受相邻地铁振动的影响进行实测,包括房屋振动响应及损伤实测。结果表明:地铁经过时,房屋各层楼板测点的铅垂向Z振级VLz的昼间和夜间评价量均小于《城市区域环境振动标准》(GB 10070—88)中有关"交通干线道路两侧昼间和夜间标准值"的规定限值;建筑物未出现明显的裂缝、倾斜、位移等损伤。该研究成果可为进一步研究地铁振动诱发建筑物的振动水平提供依据,为保障地铁沿线既有住宅安全使用及管理提供一定的技术参考。

关键词：地铁振动砖木结构房屋振动响应损伤

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空调外机角钢支架的SAP2000分析

住宅科技 2008年第11期28卷 38-41页

作者：李占鸿林华史先进陈洋上海市房地产科学研究院

文章结合对上海市既有建筑空调外机支架安全状况的调查统计结果,采用SAP2000分别计算分析了空调外机角钢支架未锈蚀以及锈蚀后的承载力,得出具有安全保证的空调外机支架最大锈蚀率。另根据调查结果统计分析所得的水平角钢锈蚀率与时间... 详细信息

文章结合对上海市既有建筑空调外机支架安全状况的调查统计结果,采用SAP2000分别计算分析了空调外机角钢支架未锈蚀以及锈蚀后的承载力,得出具有安全保证的空调外机支架最大锈蚀率。另根据调查结果统计分析所得的水平角钢锈蚀率与时间的关系拟合曲线公式,计算不同锈蚀率对应的使用时间,得出为保证空调外机支架的安全使用的建议使用年限。

关键词：空调外机角钢支架 SAP2000