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太白茶HPLC指纹图谱的建立及UHPLC-QExactive Focus MS/MS联用分析

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药物分析杂志 2024年第4期44卷 585-593页

作者：李莎莎李雅娟王晓婷毛阿娟李凡李芳张红王卫锋陕西省中医药研究院西安710003 陕西中医药大学咸阳712046

目的:建立太白茶药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,并运用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS)法对太白茶中的特征峰进行定性分析。方法:采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱... 详细信息

目的:建立太白茶药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,并运用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS)法对太白茶中的特征峰进行定性分析。方法:采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长254 nm,进样量10μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012年版”,建立指纹图谱并进行相似度评价。化学成分分析选用UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS技术,采用Waters Acquity UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温30℃;质谱条件为电喷雾离子源(ESI),负离子模式扫描,扫描范围m/z 80~1200。结果:建立的太白茶特征指纹图谱中,标定共有峰8个,10批太白茶药材相似度均≥0.9,各批次之间共有峰的相对保留时间RSD均liadepsides B、坝巴酸。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法稳定可靠,专属性好,结合UHPLC-Q-Exactive Focus-MS/MS的定性分析,可用于太白茶药材的整体质量综合评价。

关键词：太白茶高效液相色谱指纹图谱质量评价超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱定性分析

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艰险山区铁路工程节约用地的关键要素识别

兰州大学学报（自然科学版） 2024年第2期60卷 262-268页

作者：郑文彧鲍学英贺振霞李亚娟兰州交通大学土木工程学院兰州730070

分析艰险山区铁路工程-土地资源占用的交互影响,提取铁路工程节约用地要素及土地资源占用要素,构建要素指标体系.构建艰险山区铁路工程节约用地的关键要素识别模型,建立双层复杂网络,运用熵权法计算要素自身属性的重要度.采用模糊集理... 详细信息

分析艰险山区铁路工程-土地资源占用的交互影响,提取铁路工程节约用地要素及土地资源占用要素,构建要素指标体系.构建艰险山区铁路工程节约用地的关键要素识别模型,建立双层复杂网络,运用熵权法计算要素自身属性的重要度.采用模糊集理论确定节点连接强度和层间连接系数,通过复杂网络模型确定要素的综合重要度.结合实际案例得到某标段节约用地的关键要素为线路走向、既有道路利用、既有廊道利用、隧道出渣、隧道占比、桥梁占比、施工便道合理规划等.

关键词：铁路工程土地利用资源节约关键要素双层复杂网络

Symmetric alteration of four knots of B-spline and NURBS surfaces

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Journal of Zhejiang University-Science A(Applied Physics & Engineering) 2006年第6期7卷 1084-1087页

作者： li ya-juan WANG Guo-zhao Institute of Computer Graphics and Image Processing Department of Mathematics Zhejiang University Hangzhou 310027 China

Modifying the knots of a B-spline curve, the shape of the curve will be changed. In this paper, we present the effect of the symmetric alteration of four knots of the B-spline and the NURBS surfaces, i.e., symmetrical alteration of the knots of surface, the extended paths of points of the surface will converge to a point which should be expressed with several control points. This theory can be used in the constrained shape modification of B-spline and NURBS surfaces.

关键词： B-spline surface NURBS surface Knot modification Path

芒果苷抑制脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的机制研究

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南方农业学报 2024年第7期55卷 1907-1915页

作者：李亚娟方秋果李玉树孙芹芹李舜黄云飞付强华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510641 佛山大学动物科技学院广东佛山528225

【目的】探究芒果苷抑制脂多糖(LPS)诱导的炎症反应作用机制,为筛选治疗脓毒症的候选药物提供科学依据。【方法】选取小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)为研究对象,通过CCK-8试剂检测芒果苷对MH-S细胞的毒性作用,根据细胞毒性试验确定芒果苷的作... 详细信息

【目的】探究芒果苷抑制脂多糖(LPS)诱导的炎症反应作用机制,为筛选治疗脓毒症的候选药物提供科学依据。【方法】选取小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)为研究对象,通过CCK-8试剂检测芒果苷对MH-S细胞的毒性作用,根据细胞毒性试验确定芒果苷的作用浓度为100μg/mL,以正常培养的MH-S细胞为对照,使用10μg/mL LPS处理24 h构建体外炎症模型(LPS组),再以100μg/mL芒果苷干预24 h(干预组);通过EliSA检测MH-S细胞上清液中的炎症因子(IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18)含量,采用实时荧光定量PCR检测IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因表达情况,并以Western blotting和免疫荧光法检测TLR4/NF-κB信号通路的变化。【结果】芒果苷浓度低于287.60μg/mL时,对MH-S细胞无明显的毒性作用。与对照组相比,LPS组MH-S细胞中的IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因相对表达量极显著升高(P<0.01,下同),细胞上清液中的IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18含量显著(P<0.05,下同)或极显著升高;但以芒果苷干预后,IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因的相对表达量及其分泌水平均显著降低,表明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞的炎症反应。此外,LPS组MH-S细胞中的NF-κB基因相对表达量与蛋白表达水平极显著高于对照组,经芒果苷干预后NF-κB基因相对表达量与蛋白表达水平均显著下降,表明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞中核转录因子的表达;LPS组MH-S细胞表面的TLR4表达水平明显升高,但经芒果苷干预后MH-S细胞表面的TLR4表达水平明显降低,说明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞表面TLR4的表达。【结论】芒果苷对MH-S细胞的增殖无明显抑制作用,其半数增殖抑制率(IC50)为287.60μg/mL;芒果苷对LPS诱导的MH-S细胞炎症反应具有良好的保护作用,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活而减少炎症因子的分泌有关。

关键词：芒果苷小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S) 脂多糖(LPS) 炎症因子 TLR4/NF-κB信号通路

马链球菌兽疫亚种重组表面蛋白rSeseC-02147免疫效力评价

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南方农业学报 2024年第6期55卷 1843-1853页

作者：林永进冯佩然杨亚林郭政李亚娟李舜孙芹芹黄云飞付强佛山大学广东佛山528225 肇庆市动物疫病预防控制中心广东肇庆526000 佛山佛科院动物医院有限公司广东佛山528225

【目的】通过原核表达系统制备马链球菌兽疫亚种(SEZ)重组表面蛋白rSeseC-02147,并系统评价其抵御SEZ感染的免疫效力,为SEZ亚单位疫苗的研发提供候选抗原。【方法】构建原核表达载体pCold I-SeseC-02147,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细... 详细信息

【目的】通过原核表达系统制备马链球菌兽疫亚种(SEZ)重组表面蛋白rSeseC-02147,并系统评价其抵御SEZ感染的免疫效力,为SEZ亚单位疫苗的研发提供候选抗原。【方法】构建原核表达载体pCold I-SeseC-02147,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,纯化回收重组蛋白rSeseC-02147并免疫BALB/c小鼠,以SEZ灭活疫苗为阳性对照、PBS为阴性对照,二免后第14 d于小鼠颌下静脉采集血清,分别采用Western blotting和酶联免疫吸附试验(EliSA)检测重组蛋白rSeseC-02147反应原性及小鼠血清抗体效价和抗体亚型属性;并通过小鼠免疫保护试验、腹腔灌洗液细菌载量测定及脏器组织病理学观察,系统评估重组蛋白rSeseC-02147对小鼠的免疫保护力。【结果】构建的原核表达载体pCold I-SeseC-02147经IPTG诱导能成功表达获得重组蛋白rSeseC-02147,其纯化后的浓度为2.86 mg/mL。重组蛋白rSeseC-02147能与免疫组和阳性对照组小鼠血清发生特异性反应,而与阴性对照组小鼠血清未发生特异性反应,表明重组蛋白rSeseC-02147具有良好的反应原性与特异性;以重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠产生的血清抗体效价远高于SEZ灭活疫苗,且IgG1亚型极显著高于IgG2a亚型(P<0.01,下同)。重组蛋白rSeseC-02147可为小鼠提供抵御SEZ感染的免疫保护力,攻毒后14 d内的存活率60%;此外,重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠后的腹腔灌洗液细菌载量极显著低于阴性对照组小鼠,且肺脏、肾脏和脾脏等组织的病理损伤程度较轻。【结论】通过原核表达系统制备获得的重组蛋白rSeseC-02147具有良好的特异性与反应原性,通过抑制SEZ增殖及减轻SEZ对机体脏器的损伤而发挥免疫保护作用。可见,重组蛋白rSeseC-02147具有开发成SEZ亚单位疫苗的潜力。

关键词：马链球菌兽疫亚种(SEZ) 表面蛋白 SeseC-02147基因免疫效力亚单位疫苗

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山区“铁路工程-水土流失”系统关键要素识别

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长江科学院院报 2024年第8期41卷 38-46,72页

作者：鲍学英张程皓贺振霞李亚娟沈杜华陈慧鑫兰州交通大学土木工程学院兰州730070

建立了一种识别山区铁路工程水土流失关键要素的模型。首先确定易引发水土流失的铁路重点专业,分析“铁路工程-水土流失”的交互影响关系,识别“铁路工程-水土流失”要素,并构建其指标体系。然后基于复杂网络模型,结合熵权法、层次分析... 详细信息

建立了一种识别山区铁路工程水土流失关键要素的模型。首先确定易引发水土流失的铁路重点专业,分析“铁路工程-水土流失”的交互影响关系,识别“铁路工程-水土流失”要素,并构建其指标体系。然后基于复杂网络模型,结合熵权法、层次分析法(IGAHP)法、DWNodeRank算法构建一种多层网络关键要素识别模型。最后以山区某铁路工程为例,该山区铁路工程关键要素有弃渣处置、路基边坡防护、路基截排水沟布设等,水土保持性能关键要素有大型临时土地扰动、渣土弃置等,水土流失关键要素有水文、地表植被、流失物质。在山区铁路工程水土流失控制时需重点针对以上关键要素进行水土保持措施和工程结构的设计,以期有效地控制区域水土流失,改善和恢复破坏的生态环境。

关键词：铁路工程水土流失复杂网络关键要素指标体系

livelihood changes and evolution of upland ethnic communities driven by tourism:a case study in Guizhou Province,southwest China

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Journal of Mountain Science 2016年第7期13卷 1313-1332页

作者： li ya-juan VV Hu CHEN Tian HU Jing CUI Hai-yang The College of Urban&Environmental Sciences Central China Normal UniversityWuhan 430079China Wuhan Branch of China Tourism Academy Wuhan 430079China Institute of Geographic Sciences and Natural Resources Research University of Chinese Academy of SciencesBeijing 100101China ASEAN(Association of Southeast Asian Nations)Research Center Guizhou UniversityGuiyang 550025China

As an effective livelihood approach to alleviate poverty without rural population migration, ethnic tourism has become the primary choice of economic development in ethnic areas worldwide in addition to traditional livelihood approaches. This article applies the theories of livelihood to study the community evolution driven by tourism livelihood and examine three mountainous tourism communities in different stages of tourist area life cycle. Drawing on the methods of GIS spatial analysis, semi-structured interviews and questionnaires, this article proposes a sustainable livelihood framework for ethnic tourism to explore the evolution of ethnic tourism communities by identifying changes in livelihood assets(natural, financial, social, cultural and human capitals) in the process of tourism development. The results show that the development of ethnic tourism has led to changes in the increase of building land, and the diversification of land use functions with a trend of shifting from meeting local villagers' living needs to satisfying tourists, income composition and uneven distribution of tourism income spatially. Ethnic tourism also led to the deterioration of traditional social management structure, collapse of neighboring relationship, the over- commercialization and staged authenticity of ethnic culture, as well as the gradual vanish of agricultural knowledge with a trend of increasing modern business knowledge and higher education. In addition, these changes, involving livelihood assets from natural, economic, human, social and cultural aspects are interrelated and interactive, which form new evolution characters of ethnic community. This study reveals the conflicts over livelihood approaches which have formed new vulnerabilities to impact on sustainable evolution of ethnic communities. This research provides implications for achieving the sustainable development of ethnic communities with the driving force of tourism livelihood.

关键词： Community evolution Tourism livelihood livelihood assets Ethnic tourism Guizhou

Tourism dependence and poverty alleviation thresholds in Chinese ethnic tourism

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Journal of Mountain Science 2022年第10期19卷 3026-3036页

作者： li ya-juan OUyaNG Chen-xing ZHOU Sheng-yu YU Hu KNIGHT W David Wuhan Branch of China Tourism Academy Central China Normal UniversityWuhan 430079China College of Urban and Environmental Science Central China Normal UniversityWuhan 430079China Institute of Geographic Sciences and Natural Resources Research Chinese Academy of SciencesBeijing 100101China Department of Human Dimensions of Natural Resources Colorado State UniversityFort Collins 80523USA

Questions persist on the relationship between tourism dependence and economic growth in ethnic tourism *** study addresses such gaps by constructing a threshold regression model based on socio-economic data from 2006 to 2019 for nine sites in Enshi Prefecture of central *** GIS and other open-source data were also used to visualize changing tourism resources in the *** suggest that tourism dependence(the ratio of tourism-based GDP to overall GDP)significantly promotes economic growth in ethnic minority ***,the positive influence of tourism dependence on economic growth appears dynamic and non-linear–rising at first before falling when tourism dependence exceeded a threshold of 34%,with effects varying by site and *** and findings make crucial theoretical contributions to understanding tourism dependence and poverty alleviation *** paper also highlights the importance of political support and balanced investment in diverse industries to minimize decreasing returns beyond tourism dependence thresholds in destinations worldwide.

关键词： Ethnic tourism Tourism dependence Economic growth Threshold effects Poverty alleviation Threshold regression model

马链球菌兽疫亚种表面蛋白FIPP的免疫效力评价

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南方农业学报 2024年第1期55卷 263-271页

作者：郭政李亚娟林永进黄坚仪巫兆如黄云飞李舜付强佛山科学技术学院广东佛山528225 佛山佛科院动物医院有限公司广东佛山528225

【目的】评价马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp. zooepidemicus,SEZ)表面蛋白FIPP(纤维蛋白原和Ig结合蛋白前体)的免疫效力,为预防SEZ感染提供新的候选疫苗抗原。【方法】根据NCBI数据库公布的FIPP基因序列设计引物进行PCR扩增... 详细信息

【目的】评价马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp. zooepidemicus,SEZ)表面蛋白FIPP(纤维蛋白原和Ig结合蛋白前体)的免疫效力,为预防SEZ感染提供新的候选疫苗抗原。【方法】根据NCBI数据库公布的FIPP基因序列设计引物进行PCR扩增,将扩增片段克隆到原核表达载体pColdⅠ,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,FIPP蛋白通过IPTG诱导在大肠杆菌中表达及纯化,以SDS-PAGE进行鉴定。纯化后的重组蛋白FIPP(rFIPP)对BALB/c小鼠进行免疫,二免14 d后对小鼠进行免疫保护试验并采集血清;解剖感染SEZ小鼠的肝脏、脾脏和肺脏进行病理组织学观察。以酶联免疫吸附试验(EliSA)方法检测小鼠血清中的特异性抗体IgG水平,以蛋白质印迹(Western blotting)方法检测重组蛋白的反应原性,通过全血杀菌试验检测血清的杀菌活性。【结果】通过SDS-PAGE电泳可观察到约96 k D的蛋白片段,与FIPP蛋白的理论分子量相符。重组蛋白rFIPP免疫小鼠后对SEZ攻击的保护率达70.0%。EliSA方法检测结果表明,重组蛋白rFIPP免疫小鼠后可诱导产生特异性抗体免疫球蛋白G(IgG),且极显著高于阴性对照(P<0.01,下同),通过IgG亚型分析,发现IgG1的抗体水平显著高于IgG2a(P<0.05),说明重组蛋白rFIPP免疫后产生的抗体亚型以IgG1为主。全血杀菌试验结果表明,重组蛋白rFIPP超免血清对SEZ具有极显著杀灭作用。组织病理学观察结果显示,重组蛋白rFIPP免疫后能有效减弱小鼠各类器官的病理损伤。【结论】经表达纯化的重组蛋白rFIPP在小鼠感染SEZ模型中具有良好的免疫保护效力,可用作制备SEZ亚单位疫苗的有效候选抗原。

关键词：马链球菌兽疫亚种 FIPP蛋白免疫保护评价