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猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立

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广东畜牧兽医科技 2024年第2期49卷 30-36页

作者：李艳卞志标翟少伦李春玲广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广东广州510640 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000

为建立一种快速、灵敏的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)早期痕量检测方法,该研究以PEDV的M基因为靶基因,设计了特异性引物和锁核酸(locked Nucleic Acid,lNA)-TaqMan探针,经过条件优化,建立了基于lNA-TaqMan... 详细信息

为建立一种快速、灵敏的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)早期痕量检测方法,该研究以PEDV的M基因为靶基因,设计了特异性引物和锁核酸(locked Nucleic Acid,lNA)-TaqMan探针,经过条件优化,建立了基于lNA-TaqMan探针的PEDV荧光定量PCR方法,并与常规TaqMan探针法进行了比对。结果显示,所建立的PEDV的lNA-Taq-Man探针荧光定量PCR方法最低检测限为3.2拷贝/微升,较常规TaqMan探针法提高了10倍;与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒和猪德尔塔冠状病毒等多种病原不存在交叉反应,特异性良好;批内和批间重复性结果的变异系数均小于1%,重复性较好。应用该方法对103份临床样品进行检测,结果显示,共检出PEDV阳性样品47份,阳性率45.63%,与常规TaqMan探针法检测结果的阳性符合率为90.38%。本研究建立的基于lNA-TaqMan探针的荧光定量PCR方法为PEDV的精准检测和流行病学调查提供了一种新的技术选择。

关键词：猪流行性腹泻病毒 M基因 lNA-TaqMan探针荧光定量PCR

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乳酸菌固态发酵过程中麦麸组分的动态变化

食品与生物技术学报 2024年第2期43卷 30-37页

作者：陈蒙慧江迪关二旗李萌萌刘远晓张凯歌卞科河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

麦麸是小麦加工的主要副产物,营养丰富且产量大,采用乳酸菌处理麦麸可提高其附加值。为明确乳酸菌发酵对麦麸各组分的影响,作者采用植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、戊糖片球菌和布氏乳杆菌分别对麦麸进行固态发酵,在48 h内每隔8 h取样,分析... 详细信息

麦麸是小麦加工的主要副产物,营养丰富且产量大,采用乳酸菌处理麦麸可提高其附加值。为明确乳酸菌发酵对麦麸各组分的影响,作者采用植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、戊糖片球菌和布氏乳杆菌分别对麦麸进行固态发酵,在48 h内每隔8 h取样,分析可溶性膳食纤维、粗蛋白质、淀粉、总酚、植酸等成分的质量分数及DPPH自由基清除能力的动态变化。结果表明,在麦麸基质中,4株乳酸菌在24 h内生长较为迅速;麦麸经乳酸菌发酵后可溶性膳食纤维质量分数显著提高,其中布氏乳杆菌发酵48 h后可溶性膳食纤维质量分数由4.72%增加至6.58%;随着发酵时间的增加,麦麸中淀粉质量分数逐渐降低,粗蛋白质量分数先增加后降低最后趋于稳定;植物乳杆菌在提高麦麸多酚质量分数方面有更好的效果,多酚质量分数由1.34 mg/g增加至3.86 mg/g,麦麸抗氧化活性显著增加;此外,乳酸菌发酵麦麸可显著降低其植酸质量分数。综合而言,植物乳杆菌和布氏乳杆菌在提高麦麸的营养特性方面具有较好的效果,可有效改善麦麸的综合利用价值。

关键词：麦麸乳酸菌固态发酵可溶性膳食纤维抗氧化活性

不同金属离子条件下微生物对聚合物溶液黏度的影响及作用机制

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大庆石油地质与开发 2024年第2期43卷 108-114页

作者：卞立红曲丽娜高清河任国领胡敏张奕婷王超黑龙江省油田应用化学与技术重点实验室黑龙江大庆163712 大庆师范学院生物工程学院黑龙江大庆163712

为了减少采油过程中因为金属离子导致的聚合物黏损,从而提高原油采收率,利用从大庆油田腐蚀管道筛选出的降黏菌S,通过向聚合物培养基中添加不同种类及浓度的金属离子,将降黏菌S对聚合物黏度的影响及作用机制进行了研究。结果表明:在2 00... 详细信息

为了减少采油过程中因为金属离子导致的聚合物黏损,从而提高原油采收率,利用从大庆油田腐蚀管道筛选出的降黏菌S,通过向聚合物培养基中添加不同种类及浓度的金属离子,将降黏菌S对聚合物黏度的影响及作用机制进行了研究。结果表明:在2 000 mg/l的聚合物质量浓度下,向基础降黏培养基中加入10~50 mg/l的金属离子,Mn^(2+)、Fe^(2+)和Fe^(3+)的加入可以很大程度地提高降黏菌S的降黏率,最高黏损率分别为38.3%、35.6%、34.7%;K~+的加入对降黏菌S的降黏率影响不大;Cu^(2+)、Zn^(2+)的加入会降低菌S所引起的黏损;因此要控制采油体系中Mn^(2+)、Fe^(2+)和Fe^(3+)的含量,从而降低聚合物黏损;K~+离子含量也不宜太多。适当增加采油体系中Zn^(2+)、Cu^(2+),减少聚合物黏损,或者将6种离子均以质量浓度30 mg/l混合加入会降低聚合物黏损。研究成果对油田减少聚合物黏损,提高原油采收率提供了一定的方法和理论支撑。

关键词：聚合物溶液降黏菌金属离子黏损作用机制

培养条件及外源添加物对香菇菌丝体及子实体镉含量的影响

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华中农业大学学报 2024年第2期43卷 109-113页

作者：吴阳乔鑫张俊青胡磊姜兰兰王星边银丙华中农业大学应用真菌研究所武汉430070 农业农村部微生物产品质量检验测试中心(武汉) 武汉430070 武汉商学院食品学院武汉430056

为探求抑制香菇镉富集的方法,开发镉污染防控技术,设置实验室菌丝培养和大棚袋式栽培2个阶段试验,分析培养条件及外源添加物对香菇菌丝及子实体中镉含量的影响。结果显示,在温度10~30℃范围内随着培养温度升高,菌丝镉含量呈现先上升后... 详细信息

为探求抑制香菇镉富集的方法,开发镉污染防控技术,设置实验室菌丝培养和大棚袋式栽培2个阶段试验,分析培养条件及外源添加物对香菇菌丝及子实体中镉含量的影响。结果显示,在温度10~30℃范围内随着培养温度升高,菌丝镉含量呈现先上升后平稳的趋势;在pH 4~8范围内随着培养基pH值升高,菌丝镉含量呈现先上升后下降的趋势;在含镉的液体培养基中分别添加5 mmol/l Ca(NO_(3))_(2)、KNO_(3)和Mg(NO_(3))_(2),发现Mg^(2+)能明显抑制菌丝对镉的富集;随着香菇子实体发育成熟,镉含量逐渐降低,不同部位镉含量呈现菌褶>菌盖>菌柄;在培养料中分别添加硫酸镁、硫酸锌、活性炭和沸石,发现添加50 mg/kg硫酸镁、60 mg/kg硝酸锌和2.5%活性炭,能使子实体镉含量下降42.8%、46.9%和50.3%。上述研究表明,培养条件和外源添加物对香菇菌丝体和子实体镉含量具有一定的影响,可通过外源添加物抑制香菇对镉的富集作用。

关键词：香菇镉温度金属阳离子

压电型机械门控离子通道组件1在大鼠压力性损伤中的作用机制

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中国组织工程研究 2025年第8期29卷 1578-1584页

作者：孙家琪卞璐史文涛吴学潮鲁晓杰江南大学附属中心医院神经外科江苏省无锡市214026 无锡市神经外科研究所江苏省无锡市214026

背景:压力性损伤的发生机制复杂,哪些因素在其发生中起到核心作用,这些因素具体又是如何发生的尚不完全清楚。目的:探讨压电型机械门控离子通道组件1(piezo-type mechanosensitive ion channel component 1,PIEZO1)与压力性损伤发生的... 详细信息

背景:压力性损伤的发生机制复杂,哪些因素在其发生中起到核心作用,这些因素具体又是如何发生的尚不完全清楚。目的:探讨压电型机械门控离子通道组件1(piezo-type mechanosensitive ion channel component 1,PIEZO1)与压力性损伤发生的关系。方法:①细胞实验:采用不同浓度的PIEZO1激动剂Yoda1干预人永生化角质形成细胞(HaCaT),检测细胞活性、钙离子内流及PIEZO1、凋亡相关蛋白的表达。②动物实验:采用随机数字表法将12只SD大鼠随机分为4组,每组3只:对照组大鼠不进行任何处理,1,2,3 mm组分别采用厚度1,2,3 mm的磁铁在大鼠背部两侧压迫1 h,建立压力性损伤模型,造模后切除全部创面组织,分别进行苏木精-伊红、Masson、免疫荧光染色及Western blot检测。结果与结论:①细胞实验:活/死细胞染色结果显示,随着Yoda1浓度(0,2.5,5,10μmol/l)的升高,HaCaT细胞凋亡增加;随着Yoda1浓度(0,5,10μmol/l)的升高,HaCaT细胞钙离子内流增加,并且随着处理时间的延长,钙离子内流增多;Western blot检测结果显示,与对照组(0μmol/l Yoda1干预)比较,5,10μmol/l Yoda1干预可提升HaCaT细胞中BAX、TG2、PIEZO1蛋白的表达,降低Bcl-2蛋白的表达;②动物实验:苏木精-伊红与Masson染色结果显示,3个实验组压迫部位皮肤结构被破坏,皮下脂肪液化坏死,胶原蛋白稀疏且排列紊乱,并且随着磁铁厚度(压力)的增加,压迫部位皮肤组织结构破坏程度加重;免疫荧光染色与Western blot检测结果显示,与对照组比较,3个实验组大鼠BAX、TG2、Yap1与PIEZO1蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,并且随着磁铁厚度(压力)的增加,相关蛋白表达值改变更加明显;③结果表明:皮肤受压会激活PIEZO1使钙离子大量内流,随着所受压力的不断增加,最终导致钙超载后的细胞凋亡。

关键词：压力性损伤压电型机械门控离子通道组件1 PIEZO1 钙超载 HaCaT细胞

肾活检在成人急性肾脏病患者诊断和治疗中的价值

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中华肾脏病杂志 2024年第3期40卷 193-200页

作者：吕梦茹邬步云卞奥张波吴琳朱敬凤孙彬邢昌赢毛慧娟南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院)肾内科南京210029

目的分析成人急性肾脏病(acute kidney disease,AKD)患者接受肾活检前后诊断和治疗方案的变化,探讨肾活检在AKD患者诊断和治疗中的价值。方法该研究为单中心回顾性观察性研究,纳入2017年1月1日至2021年12月31日在南京医科大学第一附属... 详细信息

目的分析成人急性肾脏病(acute kidney disease,AKD)患者接受肾活检前后诊断和治疗方案的变化,探讨肾活检在AKD患者诊断和治疗中的价值。方法该研究为单中心回顾性观察性研究,纳入2017年1月1日至2021年12月31日在南京医科大学第一附属医院肾内科接受肾活检的成人AKD患者,收集患者人口学、一般临床、实验室检查、肾活检前后诊断和治疗资料,分析肾活检前临床诊断与肾活检后病理诊断的诊断一致率、肾活检后治疗方案的改变及出血并发症情况。结果该研究纳入575例经肾活检诊断的AKD患者,年龄51(36,63)岁,男性359例(62.4%)。其中,急性肾损伤293例(51.0%),合并高血压348例(60.5%),合并糖尿病124例(21.6%)。峰值血肌酐272(190,477)μmol/l,血红蛋白106(86,126)g/l,24 h尿蛋白量2.15(0.79,4.82)g。575例AKD患者中,急性肾小球疾病347例(60.3%),急性间质性肾炎136例(23.7%),血栓性微血管病47例(8.2%),急性肾小管坏死45例(7.8%)。急性肾小球疾病中最常见的是IgA肾病(22.3%,128/575)和抗中性粒细胞胞质抗体相关性肾小球肾炎(12.2%,70/575)。454例(79.0%)患者肾活检前的临床诊断与肾活检后病理诊断相符。肾活检后394例(68.5%)患者调整了激素或免疫抑制剂治疗方案。15例(2.6%)患者发生显著的肾活检后出血,其中12例需输血治疗,1例需手术干预。结论21.0%的成人AKD患者的临床诊断与病理诊断不符,68.5%的患者肾活检后改变了治疗方案,2.6%的患者肾活检后出现显著的出血并发症。临床需充分权衡肾活检利弊,作出个体化的决策。

关键词：活组织检查诊断临床方案急性肾脏病

电针夹脊穴对腰椎间盘退变兔髓核细胞Cav-1和p38 MAPK蛋白表达的影响

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联勤军事医学 2024年第4期38卷 271-276页

作者：边清灵邹璟黄国付湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北武汉430065 武汉市中西医结合医院针灸科深圳市龙岗区妇幼保健院中医科

目的通过观察电针夹脊穴对腰椎间盘退变(intervertebral disc degeneration, IDD)兔髓核细胞中小窝蛋白1(caveolin 1,Cav-1)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38 MAPK)蛋白表达的影响,探讨电针延缓IDD髓核细胞衰老的作用机制。方法采用随机数字表法将25只雄性新西兰大白兔随机分为正常组、假模型组、模型组、模型+电针组及模型+假电针组,每组各5只。造模方式采用加压器对l_4~l_5椎间盘进行200 N压力持续轴向加压28天,通过磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)判断是否造模成功。正常组兔予以自然喂养,不予任何干预;模型组兔使用加压器对l_4~l_5椎间盘加压28天,造模成功后不作任何治疗;假模型组兔同模型组造模方法,保留加压装置及克氏针但不完成椎体加压及干预治疗;模型+电针组兔在模型组的基础上,自造模成功后第1天起予以双侧l_4~l_5夹脊穴电针治疗,电针强度为1~2mA,每次20 min, 1次/天,6天为1疗程,每个疗程间隔1天,共4个疗程;模型+假电针组兔同模型+电针组方法,但在针刺夹脊穴时仅接上电针不接通电流。实验周期结束后,观察各组兔一般情况、MRI下椎间盘信号强度并进行Pfirrmann分级,并采用Western blot法检测椎间盘髓核细胞中Cav-1及p38 MAPK蛋白表达。结果与正常组兔比较,假模型组兔的一般情况无明显变化,MRI下椎间盘信号差异较小;模型组兔一般情况变差,MRI下椎间盘信号为黑色低信号表现;模型+电针组兔一般情况明显缓解改善,MRI下椎间盘信号增强呈灰-白信号表现,质地更均匀;模型+假电针组兔一般情况较差,无明显改善,MRI下椎间盘呈灰黑色信号,未见明显信号改善。同正常组兔比较,假模型组兔椎间盘Pfirrmann评分、椎间盘髓核细胞Cav-1蛋白表达、p38 MAPK蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),模型组兔椎间盘Pfirrmann评分、椎间盘髓核细胞Cav-1蛋白表达、p38 MAPK蛋白表达显著升高(P均<0.05);与模型组、模型+假电针组兔比较,模型+电针组兔椎间盘Pfirrmann评分、椎间盘髓核细胞Cav-1蛋白表达、p38 MAPK蛋白表达明显降低(P均<0.05)。结论电针可能通过下调椎间盘髓核细胞中Cav-1及p38 MAPK蛋白表达以延缓髓核细胞衰老所致的IDD。

关键词：电针夹脊穴小窝蛋白1 p38丝裂原活化蛋白激酶椎间盘退变细胞衰老

全面供光策略调控废水培养光合细菌产单细胞蛋白

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农业工程学报 2024年第11期40卷 227-237页

作者：王晓丹卢海凤张光明司哺春卞含笑唐帅蒋伟忠李保明中国农业大学三亚研究院三亚572025 中国农业大学水利与土木工程学院北京100083 农业农村部设施农业工程重点实验室北京100083 河北工业大学能源与环境学院天津300401

为拓展蛋白质来源,缓解中国饲料蛋白资源短缺现状,该研究通过供光策略调控强化了沼泽红假单胞菌(R.palustris)从废水中回收菌体资源及单细胞蛋白(single cell protein, SCP)的效果,并解析了不同供光策略下物质合成与污染物降解之间的相... 详细信息

为拓展蛋白质来源,缓解中国饲料蛋白资源短缺现状,该研究通过供光策略调控强化了沼泽红假单胞菌(R.palustris)从废水中回收菌体资源及单细胞蛋白(single cell protein, SCP)的效果,并解析了不同供光策略下物质合成与污染物降解之间的相关性。结果表明:在白炽灯、120μmol/(m^(2)·s)的光强及18 h光/6 h暗(l/D)的光周期条件下菌体的生物量及日产量可达(1 140.56±19.72) mg/l及(0.32±0.02) g/(l·d),相较于24 l/0 D、 3 l/21 D及9 l/15 D组分别提高了17.06%~93.21%、54.43%~299.93%(Pl/(m^(2)·s)的光强及3 h光/21 h暗的光周期条件下,菌体的蛋白质质量分数最高,为67.47%,相较于其他所有试验组提高了21.96%~44.54%(Pl oxygen demand, COD)和氨氮(ammonia nitrogen, NH_(4)^(+)-N)去除率在白炽灯、120 μmol/(m^(2)·s)的光强及18 h光/6 h暗的光周期条件下可达72.03%~78.40%。相关性分析表明,光强、光质分别与蛋白质含量及浓度呈显著负相关;而光周期与蛋白质浓度呈显著正相关,因此,光周期是R. palustris从废水体系中提升SCP产量的有效调控方法。该研究为提高废水体系中光合细菌合成SCP提供了新的方法与思路。

关键词：光质光强光周期光合细菌单细胞蛋白污染物降解

基于蓝藻生物炭粒子电极的3维电化学系统对磺胺甲恶唑的降解

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工程科学与技术 2024年第4期56卷 24-34页

作者：张晴赵丽娜蒋欣边博杨维本赵俭波杨朕南京师范大学材料与化学科学学院江苏南京210023 南京师范大学环境学院江苏南京210023 塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300

遵循“以废治废”理念,以机械打捞后的太湖蓝藻这一典型固废为原料,采用高温热解和酸/碱处理的方法制备了环境友好的蓝藻基生物炭,并将其作为3维电化学系统(3DES)中的粒子电极,用于高效催化氧化降解去除水中的典型抗生素磺胺甲恶唑(SMX... 详细信息

遵循“以废治废”理念,以机械打捞后的太湖蓝藻这一典型固废为原料,采用高温热解和酸/碱处理的方法制备了环境友好的蓝藻基生物炭,并将其作为3维电化学系统(3DES)中的粒子电极,用于高效催化氧化降解去除水中的典型抗生素磺胺甲恶唑(SMX)。经过热解及酸/碱改性后,生物炭更大的比表面积和更丰富的孔道结构提高了SMX在粒子电极表面的富集能力;而蓝藻中原有的铁、氮等元素掺杂在热解生物炭中有效提高了体系中活性氧物种的产生量,使得体系对SMX的去除率和矿化率均显著提高。在最佳制备和运行条件下(粒子电极制备条件:700℃热解和碱改性;3DES运行条件:电流600mA、溶液pH为6、粒子电极用量1.00g/l、水流速300 ml/min、电解质Na_(2)SO_(4)浓度50mmol/l),SMX在120min内去除率可达96%以上;6h后,水体总有机碳(TOC)去除率可达94%。机理研究表明,3DES中,SMX降解的间接氧化作用(占比84.32%)大于直接氧化作用(占比15.68%);间接氧化中,HO^(·)和SO_(4)^(·-)在体系中均被检出,但是,未检测出超氧自由基和单线态氧;而相较于SO_(4)^(·-),HO^(·)对SMX的降解占主导地位(间接氧化中HO占比87.31%)。在连续循环使用6次后,3DES对SMX的去除效率仍能保持在85%以上。研究结果为基于蓝藻生物炭粒子电极的3DES在水处理领域的应用提供了技术支撑和理论依据。

关键词：蓝藻基粒子电极 3维电化学系统抗生素降解生物炭