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PGE2 activates EP4 in subchondral bone osteoclasts to regulate osteoarthritis

Bone Research 2022年第2期10卷 378-393页

作者： Wenhao Jiang Yunyun Jin Shiwei Zhang Yi Ding konglin huo Junjie Yang Lei Zhao Baoning Nian Tao PZhong Weiqiang Lu Hankun Zhang Xu Cao Karan Mehul Shah Ning Wang Mingyao Liu Jian Luo Yangzhi Rehabilitation Hospital(Sunshine Rehabilitation Centre) Tongji University School of MedicineShanghaiPR China Shanghai Key Laboratory of Regulatory Biology Institute of Biomedical Sciences and School of Life SciencesEast China Normal UniversityShanghaiPR China Departments of Orthopaedic Surgery and Biomedical Engineering and Institute of Cell Engineering The Johns Hopkins University School of MedicineBaltimoreMDUSA Department of Oncology and Metabolism The University of SheffieldSheffieldUK

Prostaglandin E2(PGE2), a major cyclooxygenase-2(COX-2) product, is highly secreted by the osteoblast lineage in the subchondral bone tissue of osteoarthritis(OA) patients. However, NSAIDs, including COX-2 inhibitors, have severe side effects during OA treatment. Therefore, the identification of novel drug targets of PGE2 signaling in OA progression is urgently needed. Osteoclasts play a critical role in subchondral bone homeostasis and OA-related pain. However, the mechanisms by which PGE2 regulates osteoclast function and subsequently subchondral bone homeostasis are largely unknown. Here, we show that PGE2 acts via EP4 receptors on osteoclasts during the progression of OA and OA-related pain. Our data show that while PGE2 mediates migration and osteoclastogenesis via its EP2 and EP4 receptors, tissue-specific knockout of only the EP4 receptor in osteoclasts(EP4 Lys M) reduced disease progression and osteophyte formation in a murine model of OA. Furthermore, OA-related pain was alleviated in the EP4 Lys M mice, with reduced Netrin-1 secretion and CGRP-positive sensory innervation of the subchondral bone. The expression of plateletderived growth factor-BB(PDGF-BB) was also lower in the EP4 Lys Mmice, which resulted in reduced type H blood vessel formation in subchondral bone. Importantly, we identified a novel potent EP4 antagonist, HL-43, which showed in vitro and in vivo effects consistent with those observed in the EP4 Lys Mmice. Finally, we showed that the Gαs/PI3 K/AKT/MAPK signaling pathway is downstream of EP4 activation via PGE2 in osteoclasts. Together, our data demonstrate that PGE2/EP4 signaling in osteoclasts mediates angiogenesis and sensory neuron innervation in subchondral bone, promoting OA progression and pain, and that inhibition of EP4 with HL-43 has therapeutic potential in OA.

关键词： osteoclast homeostasis PGE2

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Distribution and Localization of Gonadotropin-inhibitory Hormone( GnIH ) in the Central Nervous System of Male Luchuan Piglets

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Animal Husbandry and Feed Science 2016年第2期8卷 63-67,78页

作者： huo konglin Hu Hao Li Jianhua Luo Bo Wang Xiaoye Li Xun College of Animal Science and Technology Guangxi University

Immunohistochemistry （IHC） and semi-quantitative RT-PCR were used to detect the distribution of GnIH in the central nervous system of 30-day-old male Luchuan piglets, which laid a theoretical basis for in-depth research on physiological functions of Gn[H from the perspective of morphology and molecular lev- el. IHC results showed that in central nervous system, GnIH immunoreactive neurons distributed in cerebral cortex, cerebellum, hippocampus, olfactory bulb, ports, midbrain, medulla oblongata and spinal cord of Luchuan piglets, but GnIH-immunoreactive （GnIH-ir） cell bodies employed diversified morphologies with va- rying sizes. The results of semi-quantitative RT-PCR showed that the expression of GnIH mRNA in medulla obhingata was the highest, followed by midbrain, and the expression of GnIH mRNA in olfactory bulb was the lowest, while those in other tissues were medium. The results of IHC and semi-quantitative RT-PCR were coincident, which further confirmed wide distribution of GnIH in the central nervous system of male Luchuan piglets.

关键词： Luchuan piglet GnIH Immunohistochemistry Semi-quantitative RT-PCR

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GnIH通过p38MAPK信号通路对猪卵巢颗粒细胞自噬与凋亡的影响

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中国农业科学 2020年第9期53卷 1904-1912页

作者：张鑫霍孔林宋星星张多妮胡文胡传活李珣广西大学动物科学技术学院

【目的】细胞自噬和凋亡存在着相互制约,p38MAPK信号通路作为细胞凋亡的主要调控通路之一,也对细胞自噬存在促进和抑制的双重作用。已有研究表明,促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)对细胞自噬与凋亡均有影响,... 详细信息

【目的】细胞自噬和凋亡存在着相互制约,p38MAPK信号通路作为细胞凋亡的主要调控通路之一,也对细胞自噬存在促进和抑制的双重作用。已有研究表明,促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)对细胞自噬与凋亡均有影响,但作用机制尚不明确。故探究GnIH通过p38MAPK信号通路对猪卵巢颗粒细胞(pGCs)自噬与凋亡的影响及其机理,为解决母猪的产子率以及同期发情等问题提供参考。【方法】从猪卵巢中提取卵巢颗粒细胞,进行体外培养。1、探究GnIH对p38MAPK信号通路的最佳作用时间:按孵育GnIH时间梯度(0min、10 min、30 min、60 min、90 min)分组,用Western blot检测猪卵巢颗粒细胞p38与p-p38的蛋白表达量变化;2、验证GnIH对p38MAPK信号通路的影响:按(空白对照、GnIH、p38激活剂(U-46619)、U-46619+GnIH)分组,用Western blot检测p38与p-p38的蛋白表达量变化;3、探究不同浓度GnIH对自噬和凋亡的影响:按(空白对照、10-6 mol·L-1 GnIH、10-8 mol·L-1 GnIH、10-10 mol·L-1 GnIH、10-12 mol·L-1 GnIH)分组,用Western blot检测自噬与凋亡标志性蛋白的表达量变化;4、验证不同浓度GnIH通过p38信号通路对自噬和凋亡的影响:将细胞分成6组(空白对照、U-46619、U-46619+10-6 mol·L-1 GnIH、U-46619+10-8 mol·L-1 GnIH、U-46619+10-10 mol·L-1 GnIH、U-46619+10-12 mol·L-1 GnIH),用Western blot检测自噬与凋亡标志性蛋白的表达量变化。【结果】1. GnIH孵育10 min后,显著降低p38与p-p38的蛋白表达量(P<0.05),提示,GnIH对p38MAPK信号通路的最佳作用时间为10 min;2. U-46619显著促进pGCs的p38磷酸化水平(P<0.05),GnIH显著抑制pGCs的p38磷酸化水平(P<0.05),提示,U-46619使p38MAPK信号通路活化,GnIH对p38MAPK信号通路的活化有抑制作用;3.当GnIH的浓度为10-6 mol·L-1时,pGCs的自噬和凋亡水平显著升高(P<0.05),随着GnIH浓度的降低,pGCs的自噬水平逐渐升高(P<0.05),pGCs的凋亡水平逐渐降低(P<0.05),提示,高浓度GnIH可以促进自噬和凋亡,随着GnIH浓度的降低,自噬水平逐渐升高,而凋亡水平逐渐下降;4.加入U-46619后,GnIH使pGCs的自噬显著上调(P<0.05),并且使pGCs的凋亡显著下调(P<0.05),提示,不同浓度GnIH通过p38MAPK信号通路影响pGCs的自噬和凋亡。【结论】GnIH可能通过抑制p38MAPK信号通路的活化,上调pGCs的自噬,减少pGCs的凋亡。

关键词：自噬凋亡 GnIH p38MAPK 猪卵巢颗粒细胞

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GnIH在陆川仔公猪泌尿生殖系统及内分泌免疫系统中的分布

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2016年第12期44卷 16-20页

作者：霍孔林李昀王晓晔胡浩李建华李珣广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 广西理工科学实验中心广西南宁530004

【目的】从形态学水平和分子水平探究促性腺激素抑制激素(GnIH)在陆川仔公猪泌尿生殖系统和内分泌免疫系统中的分布情况。【方法】采集30日龄健康陆川仔公猪的睾丸、附睾、附睾管、肾、肾上腺、甲状腺、腭扁桃体、脾、淋巴结、胸腺,采... 详细信息

【目的】从形态学水平和分子水平探究促性腺激素抑制激素(GnIH)在陆川仔公猪泌尿生殖系统和内分泌免疫系统中的分布情况。【方法】采集30日龄健康陆川仔公猪的睾丸、附睾、附睾管、肾、肾上腺、甲状腺、腭扁桃体、脾、淋巴结、胸腺,采用免疫组织化学和半定量RT-PCR的方法检测GnIH在其泌尿生殖系统和内分泌免疫系统的分布情况。【结果】免疫组织化学分析结果显示,在睾丸、附睾、附睾管、肾、肾上腺、甲状腺、腭扁桃体、脾、淋巴结、胸腺均有不同数量的GnIH免疫阳性细胞分布。半定量RT-PCR的检测显示,GnIH mRNA除了在甲状腺、脾和淋巴结无表达外,在其余组织均有不同程度的表达。【结论】GnIH在泌尿生殖系统和内分泌免疫系统分布广泛,提示GnIH在生殖、免疫和内分泌等生理过程中可能有重要作用。

关键词： GnIH 陆川仔公猪免疫组织化学半定量RT-PCR

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Investigating Müller glia reprogramming in mice: a retrospective of the last decade, and a look to the future

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Neural Regeneration Research 2025年第4期20卷 946-959页

作者： Zhiyuan Yin Jiahui Kang Xuan Cheng Hui Gao Shujia huo Haiwei Xu Key Lab of Visual Damage and Regeneration&Restoration of Chongqing Southwest Eye HospitalSouthwest HospitalThird Military Medical University(Army Medical University)ChongqingChina

Müller glia,as prominent glial cells within the retina,plays a significant role in maintaining retinal homeostasis in both healthy and diseased *** lower vertebrates like zebrafish,these cells assume responsibility for spontaneous retinal regeneration,wherein endogenous Müller glia undergo proliferation,transform into Müller glia-derived progenitor cells,and subsequently regenerate the entire retina with restored ***,Müller glia in the mouse and human retina exhibit limited neural reprogramming.Müller glia reprogramming is thus a promising strategy for treating neurodegenerative ocular disorders.Müller glia reprogramming in mice has been accomplished with remarkable success,through various *** in molecular,genetic,epigenetic,morphological,and physiological evaluations have made it easier to document and investigate the Müller glia programming process in ***,there remain issues that hinder improving reprogramming efficiency and ***,understanding the reprogramming mechanism is crucial toward exploring factors that will improve Müller glia reprogramming efficiency,and for developing novel Müller glia reprogramming *** review describes recent progress in relatively successful Müller glia reprogramming *** also provides a basis for developing new Müller glia reprogramming strategies in mice,including epigenetic remodeling,metabolic modulation,immune regulation,chemical small-molecules regulation,extracellular matrix remodeling,and cell-cell fusion,to achieve Müller glia reprogramming in mice.

关键词： cell fusion chemical small-molecules epigenetic extracellular matrix immune metabolic mice Müller glia neurodegenerative diseases reprogramming retina regeneration

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促性腺激素抑制激素对SD大鼠性腺生殖功能与糖代谢的影响

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中国畜牧兽医 2022年第6期49卷 2239-2249页

作者：胡文霍孔林宋星星张鑫张多妮罗荣荣徐文镐李珣广西大学动物科学技术学院南宁530004

【目的】探究促性腺激素抑制激素(GnIH)对SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢的影响,以及SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢之间的相关性。【方法】将36只SD大鼠随机均分为对照组(0.9%生理盐水)、1μg/100μL GnIH组(Ⅰ组)、10μg/100μL GnIH(Ⅱ组)... 详细信息

【目的】探究促性腺激素抑制激素(GnIH)对SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢的影响,以及SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢之间的相关性。【方法】将36只SD大鼠随机均分为对照组(0.9%生理盐水)、1μg/100μL GnIH组(Ⅰ组)、10μg/100μL GnIH(Ⅱ组),每组12只(雌雄各半)。每天07:00和19:00注射生理盐水或GnIH(200μL/次),连续注射14 d后测量大鼠体重,计算肥胖程度,麻醉处死后采集卵巢和睾丸,称重并计算卵体比和睾体比;运用阴道涂片法观察雌性大鼠发情周期的变化;显微镜下观察并计算雄性大鼠精子活力;HE染色观察卵巢和睾丸组织变化;用实时荧光定量PCR法检测卵巢和睾丸中糖代谢基因胰岛素受体(IR)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和炎症相关因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的表达水平,并用SPSS 22.0软件分析生殖功能和糖代谢之间的相关性。【结果】与对照组相比,Ⅰ组雌性SD大鼠和Ⅱ组雄性SD大鼠肥胖程度均显著升高(P<0.05);Ⅱ组卵巢大小/重量、卵体比显著升高,睾丸重量、睾体比显著下降(P<0.05)。HE染色结果显示,与对照组相比,Ⅱ组雌性大鼠卵泡呈囊性扩张,颗粒细胞层减少,卵泡腔变大;Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠的生精小管均出现空泡样改变,生精细胞排列紊乱、层次减少。与对照组相比,Ⅱ组大鼠发情前期的持续时间显著延长(P<0.05)、精子活力显著下降(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,Ⅰ、Ⅱ组雌性大鼠GLUT4基因的表达量极显著下降(P<0.01)、Ⅱ组中IR基因的表达量显著降低(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠GLUT4基因的表达量均极显著降低(P<0.01);Ⅰ组雌性大鼠TNF-α、IL-1β基因和雄性大鼠IL-1β基因的表达量均显著升高(P<0.05),Ⅱ组雌、雄大鼠TNF-α基因的表达量均极显著升高(P<0.01)。相关性分析结果显示,腹腔注射GnIH后,雌性大鼠的卵体比与GLUT4基因表达水平呈极显著正相关(P<0.01),与IR基因的表达水平呈显著正相关(P<0.05);雌性大鼠的发情周期与GLUT4基因表达水平呈极显著负相关(P<0.01);雄性大鼠睾体比与GLUT4基因表达水平均呈显著正相关(P<0.05),而精子活力与GLUT4基因表达水平均呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】腹腔注射GnIH能够抑制大鼠的生殖功能和导致糖代谢功能紊乱,而且GnIH可能参与性腺能量代谢与生殖功能的交叉对话,是能量代谢与生殖功能的新型联络因子。

关键词：大鼠促性腺激素抑制激素糖代谢卵巢睾丸相关性分析

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Advancements and Challenges in Organic–Inorganic Composite Solid Electrolytes for All‑Solid‑State Lithium Batteries

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Nano-Micro Letters 2025年第1期17卷 46-97页

作者： Xueyan Zhang Shichao Cheng Chuankai Fu Geping Yin Liguang Wang Yongmin Wu Hua huo State Key Laboratory of Space Power‑Sources School of Chemistry and Chemical EngineeringHarbin Institute of TechnologyHarbin 150001People’s Republic of China College of Chemical and Biological Engineering Zhejiang UniversityHangzhou 310058People’s Republic of China State Key Laboratory of Space Power-Sources 2965 Dongchuan RoadMinhang DistrictShanghai 200240People’s Republic of China

To address the limitations of contemporary lithium-ion batteries,particularly their low energy density and safety concerns,all-solid-state lithium batteries equipped with solid-state electrolytes have been identified as an up-and-coming *** the various SEs,organic–inorganic composite solid electrolytes(OICSEs)that combine the advantages of both polymer and inorganic materials demonstrate promising potential for large-scale ***,OICSEs still face many challenges in practical applications,such as low ionic conductivity and poor interfacial stability,which severely limit their *** review provides a comprehensive overview of recent research advancements in ***,the influence of inorganic fillers on the main functional parameters of OICSEs,including ionic conductivity,Li+transfer number,mechanical strength,electrochemical stability,electronic conductivity,and thermal stability are systematically *** lithium-ion conduction mechanism of OICSE is thoroughly analyzed and concluded from the microscopic ***,the classic inorganic filler types,including both inert and active fillers,are categorized with special emphasis on the relationship between inorganic filler structure design and the electrochemical performance of ***,the advanced characterization techniques relevant to OICSEs are summarized,and the challenges and perspectives on the future development of OICSEs are also highlighted for constructing superior ASSLBs.

关键词： Composite solid electrolytes Inorganic filler Interfacial stability Li-ion conduction mechanism Characterization techniques

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抗猪瘟病毒单链抗体的原核表达及活性鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2020年第11期 14-18,165页

作者：刘金凤覃绍敏姜佳佳白安斌陈凤莲秦树英任鹏飞霍孔林吴健敏广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 南宁市动物疫病预防控制中心南宁530001

为了制备抗猪瘟病毒(CSFV)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学活性,试验以编码特异性抗CSFV scFv基因序列为基础,按照大肠杆菌密码子偏爱性优化并合成scFv基因,将其克隆入pCzn1表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)PlysS感受态细胞,经IPTG诱导表... 详细信息

为了制备抗猪瘟病毒(CSFV)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学活性,试验以编码特异性抗CSFV scFv基因序列为基础,按照大肠杆菌密码子偏爱性优化并合成scFv基因,将其克隆入pCzn1表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)PlysS感受态细胞,经IPTG诱导表达后进行Ni-IDA亲和层析纯化、SDS-PAGE检测和Western-blot鉴定,通过间接免疫荧光(IFA)和间接ELISA验证蛋白抗原的活性。结果表明:密码子优化合成的抗CSFV scFv基因全长768 bp,在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,其分子质量约28.0 ku,Western-blot检测显示纯化后的目的蛋白能被抗His标签单克隆抗体特异性识别,IFA和ELISA检测证实纯化复性后的蛋白可与CSFV发生特异性结合反应,且存在明显的浓度依赖性。说明应用原核表达系统可高效制备抗CSFV scFv。

关键词：猪瘟病毒密码子优化单链抗体原核表达蛋白纯化活性鉴定

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1例红颊竹鼠化脓性肺炎病原菌的分离鉴定

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畜牧与兽医 2017年第8期49卷 107-110页

作者：唐海波陈凤莲白安斌杨磊刘金凤霍孔林陆晨阳吴健敏广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

为确定南宁金陵镇某竹鼠养殖场发生竹鼠化脓性肺炎的原因,从发病竹鼠肺中分离得到可疑细菌,经形态观察、生理生化特性测定及16S rRNA序列分析,鉴定该分离菌为大肠杆菌,经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。该菌16S rRNA与大肠杆菌(DQ... 详细信息

为确定南宁金陵镇某竹鼠养殖场发生竹鼠化脓性肺炎的原因,从发病竹鼠肺中分离得到可疑细菌,经形态观察、生理生化特性测定及16S rRNA序列分析,鉴定该分离菌为大肠杆菌,经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。该菌16S rRNA与大肠杆菌(DQ337503,FJ418574,KR189581)同源性高达100%。药敏试验显示对头孢克肟、卡那霉素、大观霉素、奈替米星、氟苯尼考和米诺环素等药物高度敏感,对氨苄西林、阿莫西林、亚胺培南、头孢唑啉、头孢氨苄、四环素、红霉素和克拉霉素等药物有抗性。结果表明:大肠杆菌是南宁金陵镇某竹鼠养殖竹鼠致死的病原菌。该菌的分离鉴定为其感染引起的传染病防治提供了试验依据。

关键词：红颊竹鼠化脓性肺炎大肠杆菌分离鉴定

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RF酰胺相关肽3对大鼠脾脏形态结构及免疫功能的影响

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中国畜牧兽医 2020年第4期47卷 1225-1232页

作者：张多妮霍孔林李长乐张鑫宋星星胡文罗荣荣徐文镐陈磊陈欣仪李珣王晓晔广西大学动物科学技术学院南宁530004 德州市农业农村发展中心德州253000

试验旨在探究RF酰胺相关肽3(RFamide-relatedpeptide,RFRP-3)对大鼠脾脏形态结构及免疫功能的影响。试验由两部分组成,一部分选取SD大鼠10只,用于RFRP-3及其G-蛋白偶联受体147(G-protein coupled receptor,GPR147)的分布定位研究;另一... 详细信息

试验旨在探究RF酰胺相关肽3(RFamide-relatedpeptide,RFRP-3)对大鼠脾脏形态结构及免疫功能的影响。试验由两部分组成,一部分选取SD大鼠10只,用于RFRP-3及其G-蛋白偶联受体147(G-protein coupled receptor,GPR147)的分布定位研究;另一部分选取SD大鼠30只,随机分为3组,雌雄各半,分别为对照组(0.9%氯化钠)、RFRP-3低剂量组和高剂量组(1和10μg/100μL,共注射200μL),连续腹腔注射14 d。采用半定量RT-PCR、Western blotting方法检测大鼠脾脏中RFRP-3及GPR147的表达;运用免疫组织化学的方法确定其分布与定位;大鼠麻醉后心脏采血并分离血清,用抗体芯片检测相关细胞因子的含量;大鼠解剖后取脾脏,测量脾脏长度并计算脾脏指数;采用HE染色方法检测腹腔注射RFRP-3对脾脏形态学变化的影响;采用实时荧光定量PCR检测脾脏中IL-1β和TNF-αmRNA的表达。结果表明,RFRP-3 mRNA在SD大鼠脾脏中无表达,GPR147 mRNA呈中等程度表达。Western blotting结果显示,在SD大鼠脾脏中均有RFRP-3及其受体GPR147的表达;RFRP-3主要分布于脾脏的红髓,GPR147主要分布于白髓;腹腔注射不同浓度的RFRP-3均可使血清IL-1α、IL-1β、TNF-α及MCP-1升高,脾脏长度增加、脾脏指数升高。HE染色结果显示,脾脏白髓面积增大、脾小结增多;红髓内脾索增粗、红细胞明显增多。实时荧光定量PCR结果显示,脾脏中IL-1β和TNF-αmRNA表达量极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。上述结果表明,RFRP-3可能通过旁分泌方式到达大鼠脾脏上的GPR147受体进而发挥其增强脾脏免疫功能的作用。

关键词： RFRP-3 大鼠脾脏免疫反应细胞因子

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