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癫痫大鼠模型中miR-134-5p和神经元迁移蛋白双皮质素(DCX)的异常表达

癫痫大鼠模型中miR-134-5p和神经元迁移蛋白双皮质素(DCX)的异常...

引用

作者： krivoshapkina liubov 大连医科大学

学位级别：硕士

2.1.背景及目的:目前,癫痫的诊断主要依据临床表现、脑电图及影像学检查。据世界卫生组织统计,癫痫是最目前常见的疾病之一。截至到2016年,全球范围内约有5千万癫痫患者,发病率约为0.85%。因此目前研究尝试从形态学,神经化学,神经生理学... 详细信息

2.1.背景及目的:目前,癫痫的诊断主要依据临床表现、脑电图及影像学检查。据世界卫生组织统计,癫痫是最目前常见的疾病之一。截至到2016年,全球范围内约有5千万癫痫患者,发病率约为0.85%。因此目前研究尝试从形态学,神经化学,神经生理学,神经药理学等多方面去探索癫痫疾病的机制及治疗(Scharfman.,2002,Harvey.B.D et al.,2003,Kalinichenko S.G et al.,2004)。目前研究发现脑组织可以分泌数种miRNA,进而影响树突的形态,神经元的迁移和胶质细胞的功能(***-Mateos,***,2013),并可以通过影响基因及蛋白的表达水平参与癫痫疾病的病理生理过程。miRNA是一类由20-24个核苷酸组成的,非编码小分子RNA,其主要的生物学功能是抑制靶基因的表达。有研究发现miR-134的功能与神经触突的可塑性有关,并且参与神经细胞的迁移与分化(E.M.J-Mateos,2012)。目前研究发现,miRNA-134-5p(miRNA-134)的靶基因有PUM2(Fiore et al.2009),CREB(Gao et al.2010)and DCX(Gaughwin et al.2011)等。而双皮质素(DCX)参与皮质发育过程中的神经细胞的迁移。DCX基因的突变可以引起神经元迁移的异常导致癫痫。DCX可以用测量作齿状回成熟神经元的标志物,与无脑回畸形和灰质异位症的致病机制有关(Rayner et al.2006)。故本文采用PCR、Western blot等方法研究miR-134及DCX在癫痫动物模型中的异常表达,探讨其在癫痫中的作用。2.2.材料与方法:采用匹罗卡品-氯化锂点燃模型作为大鼠的癫痫发作模型,将实验大鼠分为对照组、急性期(发作后24小时)组、亚急性期(发作3周)组,慢性期(发作后2个月)组。采集模型大鼠脑组织中的海马标本,采用q PT-PCR检测miRNA-134的表达,Western blot等检测DCX的表达,探寻其异常表达及关系。2.3.结果:qPT-PCR检测发现大鼠癫痫模型的海马组织中的miRNA-134在发作24小时后升高明显,而三周及两个月组则无明显升高。Western blot发现大鼠癫痫模型的海马组织中的DCX在各个时期的表达均下降明显。2.4.结论:癫痫大鼠模型海马组织中miR-134在急性发作时升高明显,此后在亚急性期及慢性期又逐渐下降至正常,而DCX在癫痫大鼠模型海马组织中发作后各个时期均程下降。二者可能参与癫痫的致病机制及发作后的神经元损伤与修复过程。

关键词：癫痫 miRNA-134 双皮质素神经发育

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