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CD40配体诱导小鼠B淋巴瘤细胞Id3下调表达的研究

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CD40配体诱导小鼠B淋巴瘤细胞Id3下调表达的研究

Id3启动子/荧光素酶报道基因载体的构建及其活性表达

第十届全军检验医学学术会议

作者：李晓军 Kikumi Hata 秦浚川 junichiro Mizuguchi 南京军区南京总医院全军医学检验中心东京医科大学免疫系南京大学医药生物技术国家重点实验室东京医科大学免疫系

目的研究CD40配体（CD40L）对小鼠WEHI-231 B淋巴瘤细胞分化抑制因子3（Id3）表达的影响。方法用RT-PCR技术从WEHI-231细胞总RNA中扩增小鼠Id3（mId3）cDNA,将其亚克隆至p3FLAG-CMV-10载体;以p3FLAG-Id3-CMV-10为模板,用PCR扩增3FLAG-Id3融合基因,将其亚克隆至逆转录病毒载体pMX-CITE/IRES-EGFP中;通过脂质体转染技术将重组逆转录病毒载体（pMX-3FLAG-Id3-EGFP）转染Phoenix-ecotropic包装细胞系;将pMX-3FLAG-Id3-EGFP逆转录病毒转导WEHI-231细胞,转导48 h后的WEHI-231细胞与CD40L/NIH3T3和NIH3T3细胞共培养24-48 h。转导细胞经有限稀释法建立mld3基因稳定转染细胞系。mId3基因稳定转染细胞与CD40L/NIH3T3和NIH3T3细胞共培养24h后用Western blot法检测3FLAG-mId3融合蛋白的表达。结果pMX-3FLAG-Id3-EGFP转导WEHI-231细胞后,EGFP阳性细胞比例随时间呈下降趋势;单独用培养基培养或与NIH3T3细胞共培养的pMX-3FLAG-Id3-EGFP/WEHI-231细胞,24 h-48 h后,EGFP阳性细胞率呈逐渐下降趋势;而与CD40L/NIH3T3细胞共培养的pMX-3FLAG-Id3-EGFP/WEHI 231细胞,EGFP阳性细胞率基本保持不变。稳定表达3FLAG-Id3融合蛋白的WEHI-231细胞与CD40L/NIH3T3和NIH3T3细胞共培养24 h后,Western blot结果显示,CD40L刺激可明显抑制3FLAG-Id3-EGFP/WEHI-231中Id3的表达。结论CD40L可能通过对Id3的降解而缓解Id3诱导的细胞生长抑制作用。

关键词：分化抑制因子(Id) CD40 CD40配体 WEHI-231细胞逆转录病毒

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Id3启动子/荧光素酶报道基因载体的构建及其活性表达

Id3启动子/荧光素酶基因载体的构建及其在WEHI-231细胞中的活性表达

第十届全军检验医学学术会议

目的构建含小鼠Id3（mId3）基因启动子片段的荧光素酶（Luc）报道基因重组载体,研究抗IgM抗体刺激下,小鼠WEHI-231 B淋巴瘤细胞内Id3启动子活性的改变。方法用PCR法从WEHI-231细胞基因组DNA扩增mId3基因5’端含启动子序列的DNA片段（mId...

目的构建含小鼠Id3（mId3）基因启动子片段的荧光素酶（Luc）报道基因重组载体,研究抗IgM抗体刺激下,小鼠WEHI-231 B淋巴瘤细胞内Id3启动子活性的改变。方法用PCR法从WEHI-231细胞基因组DNA扩增mId3基因5’端含启动子序列的DNA片段（mId3-pf）,将其亚克隆至Luc报道基因载体pGV-B2,构建Luc报道基因重组载体mId3-pf/pBV-B2。用电穿孔术将mId3-pf/pBV-B2导入WEHI-231细胞,抗小鼠IgM抗体刺激转染后的WEHI-231细胞,24 h后测定胞内Luc活性。结果4种Luc报道基因重组载体转染细胞均表现较高的mId3启动子活性,与空载体转染细胞相比,启动子活性分别升高25～60倍。抗IgM抗体刺激细胞后,Id3启动子活性较未刺激细胞均呈明显增高趋势,增高幅度可达2倍左右。结论mId3启动子/Luc报道基因载体的构建及其在WEHI-231细胞中的表达,为研究Id3的表达调控作用提供了有效的工具,抗IgM抗体诱导WEHI-231细胞Id3的上调表达与Id3转录调控活性的升高有关。

关键词：

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南京大学学报（自然科学版） 2006年第2期42卷 176-183页

作者：李晓军秦喜九美水口纯一郎南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院全军医学检验中心南京210002 东京医科大学免疫系

用PCR法从WEHI-231细胞基因组DNA扩增小鼠Ida（mId3）基因5’端含启动子序列的不同长度的DNA片段（mId3-pf）亚克隆至荧光索酶（Luc）报道基因载体PGV-B2，构建由mid3基因启动子片段控制的Luc报道基因重组载体mid3-pf／PGV—B2．用电穿... 详细信息

用PCR法从WEHI-231细胞基因组DNA扩增小鼠Ida（mId3）基因5’端含启动子序列的不同长度的DNA片段（mId3-pf）亚克隆至荧光索酶（Luc）报道基因载体PGV-B2，构建由mid3基因启动子片段控制的Luc报道基因重组载体mid3-pf／PGV—B2．用电穿孔术将mId3-pf／PGV-B2导人培养的WEHI-231细胞，用抗小鼠IgM抗体刺激转染后的WEHI-231细胞，24h后测定胞内Luc活性．结果表明，4种Luc报道基因重组载体转染细胞均表现较高的mId3启动子活性，与空载体转染细胞相比，启动子活性分别升高25-60倍．抗IgM抗体刺激细胞后，Id3启动子活性较未刺激细胞均呈明显增高趋势，增高幅度可达2倍左右．表明抗IgM抗体诱导WEHI231细胞Id3的上调表达与Id3转录活性的升高有关．

关键词：分化抑制因子(Id) B细胞抗原受体(BCR) WEHI-231细胞抗IgM抗体

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三菱重工地面燃气轮机热障涂层研究进展

热喷涂技术 2014年第3期6卷 56-62页

作者： Yoshifumi Okajima Daisuke Kudo Naotoshi Okaya Taiji Torigoe Hideaki Kaneko Masahiko Mega Eisaku Ito junichiro Masada Keizo Tsukagoshi 吴琼

燃气轮机联合循环热效率的提高,要求涡轮进口温度不断增加。目前,三菱重工(MHI)已经积极参与日本国家项目,通过发展1700℃级燃气轮机,以使联合循环热效率实现达到62%指标。在此国家项目中开发的部分组件技术适用于1600℃级燃气轮机M501J... 详细信息

燃气轮机联合循环热效率的提高,要求涡轮进口温度不断增加。目前,三菱重工(MHI)已经积极参与日本国家项目,通过发展1700℃级燃气轮机,以使联合循环热效率实现达到62%指标。在此国家项目中开发的部分组件技术适用于1600℃级燃气轮机M501J,它具有世界上最高的涡轮进口温度。而热障涂层(TBC)是实现此目标的最关键技术之一。在发展先进的热障涂层中,在MHI工厂中建立名为T点的试验电厂是有必要的。在真实热部件中制备的先进TBC可以在工厂中进行验证,并且运行后的效果可以得到反馈。本文讨论了TBC的开发以及在三菱重工实际电厂中的验证。

关键词：燃气轮机热障涂层电厂

1930年代中国留日学生的演剧活动再考——关于中华戏剧座谈会及其第一次公演果戈理的《视察专员》

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上海鲁迅研究 2018年第1期 221-242页

作者：小谷一郎王建华(译) 不详

一~①相较其他留日学生演出团体,中华戏剧座谈会还保留着一些史料,但目前还不知道该会的成立时间与地点。《日文研究》第3号刊载的中华戏剧座谈会第一次的'公演广告'。《日文研究》第3号发行时间是1935年10月15日。由此可以推断,在1935... 详细信息

一~①相较其他留日学生演出团体,中华戏剧座谈会还保留着一些史料,但目前还不知道该会的成立时间与地点。《日文研究》第3号刊载的中华戏剧座谈会第一次的'公演广告'。《日文研究》第3号发行时间是1935年10月15日。由此可以推断,在1935年10月15日前中华戏剧座谈会已经组成,甚至公演的内容也定了。

关键词：戏剧座谈会广告单果戈理秋田雨雀陈学书留日学生张天虚演剧活动

小鼠TRAF6特异性shRNA慢病毒质粒的构建及活性

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生物技术 2011年第6期21卷 20-24页

作者：谢琪璇罗峰秋山泰身井上纯一郎秦俊文暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所广东广州510632 东京大学医科学研究所分子发癌分野暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒。方法:设计、合成小鼠TRAF6基因特异性shRNA核苷酸,将其链接入pENTR/U6载体,基因测序;通过LR克隆酶将pENTR/U6中的TRAF6特异性shRNA核苷酸插入CS-RfA-EG慢病毒载体,KpnⅠ限制酶切分析;通... 详细信息

目的:构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒。方法:设计、合成小鼠TRAF6基因特异性shRNA核苷酸,将其链接入pENTR/U6载体,基因测序;通过LR克隆酶将pENTR/U6中的TRAF6特异性shRNA核苷酸插入CS-RfA-EG慢病毒载体,KpnⅠ限制酶切分析;通过慢病毒将TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒导入MEF13细胞中,FACS分析质粒导入率,同时利用Western blot技术检测MEF13细胞中TRAF6的表达以及磷酸化IκBα的表达。以LacZ基因特异性shRNA慢病毒质粒为对照。结果:构建的小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒与设计相符;MEF13细胞中慢病毒质粒的导入率为95%以上;与对照组比较,TRAF6基因特异性shRNA可长期、完全抑制MEF13细胞中TRAF6的表达及TRAF6介导的IκBα的磷酸化。结论:成功构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒。

关键词： TRAF6 慢病毒质粒 shRNA RNAi

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焦炭过滤床电炉粉尘捕集特性的模拟研究

中国冶金 2008年第7期18卷 5-9页

作者：孟繁明宫下重人八木顺一郎东北大学材料与冶金学院辽宁沈阳110004 东北大学多元物质科学研究所

以超细二氧化硅微粒为模拟粉尘,研究了在冷态焦炭过滤床条件下的电炉粉尘捕集特性:即在固定床的实验条件下,当气流速度一定时,平衡状态下静态捕集量在过滤床纵轴方向上的分布状态变化较小;当焦炭颗粒以一定速度下移时,随粉尘供给速率的... 详细信息

以超细二氧化硅微粒为模拟粉尘,研究了在冷态焦炭过滤床条件下的电炉粉尘捕集特性:即在固定床的实验条件下,当气流速度一定时,平衡状态下静态捕集量在过滤床纵轴方向上的分布状态变化较小;当焦炭颗粒以一定速度下移时,随粉尘供给速率的增大,整体的静态捕集量也随之增加,从上部到下部静态捕集量呈渐增趋势。本实验条件下,在综合考虑捕集量、捕集速率和捕集效率的基础上,气流速度应小于0.65m/s。

关键词：电炉粉尘捕集冷态模拟焦炭过滤床

用固体碳及CO/CO_2还原电炉粉尘中氧化锌的研究

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中国冶金 2007年第2期17卷 43-46,55页

作者：孟繁明王文忠八木顺一郎东北大学材料与冶金学院辽宁沈阳110004 东北大学多元物质科学研究所

用化学试剂和实际电炉粉尘作试样，考察了利用固体碳和CO／CO2进行氧化锌还原的各种影响因素。研究发现，与固-固还原反应相比，气-固还原反应较快，但前者易受温度的影响。在CO／CO2—10，温度控制在1000-1100℃时，可保证电炉粉尘中... 详细信息

用化学试剂和实际电炉粉尘作试样，考察了利用固体碳和CO／CO2进行氧化锌还原的各种影响因素。研究发现，与固-固还原反应相比，气-固还原反应较快，但前者易受温度的影响。在CO／CO2—10，温度控制在1000-1100℃时，可保证电炉粉尘中氧化锌的顺利还原与气化分离。本研究为开发利用移动焦炭层的电炉粉尘处理新工艺提供了理论依据。

关键词：电炉粉尘氧化锌还原气化分离固-固还原反应气-固还原反应

Correction to: Orbit insertion strategy of Hayabusa2’s rover with large release uncertainty around the asteroid Ryugu

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Astrodynamics 2021年第2期5卷 183-183页

作者： Yusuke Oki Kent Yoshikawa Hiroshi Takeuchi Shota Kikuchi Hitosi Ikeda Daniel J.Scheeres Jay W.McMahon junichiro Kawaguchi Yuto Takei Yuya Mimasu Naoko Ogawa Go Ono Fuyuto Terui Manabu Yamada Toru Kouyama Shingo Kameda Kazuya Yoshida Kenji Nagaoka Tetsuo Yoshimitsu Takanao Saiki Yuichi Tsuda Japan Aerospace Exploration Agency Tsukuba305-8505Japan Japan Aerospace Exploration Agency Sagamihara252-5210Japan University of Colorado BoulderCO80309USA Planetary Exploration Research Center Chiba Institute of TechnologyNarashino275-0016Japan National Institute of Advanced Industrial Science and Technology Koto-ku135-0064Japan Rikkyo University Toshima-ku171-8501Japan Department of Aerospace Engineering Tohoku UniversitySendai980-8579Japan Kyushu Institute of Technology Kitakyusyu804-8550Japan

Correction to:Oki,Y.,Yoshikawa,K.,Takeuchi,*** *** insertion strategy of Hayabusa2's rover with large release uncertainty around the asteroid *** 2020,4(4):309-329 https://***/10.1007/s42064-020-0080-y The article“Orbit insertion strategy of Hayabusa2’s rover with large release uncertainty around the asteroid Ryugu”written by Yusuke Oki,Kent Yoshikawa,Hiroshi Takeuchi et al.,was originally published electronically on the publisher’s internet portal(currently SpringerLink)on 05 November 2020 without open *** publication in Volume 4,Issue 4,page 309–329,the author(s)decided to opt for Open Choice and to make the article an open access publication.

关键词： asteroid insertion release