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Efficient production of pronuclear embryos in breeding and nonbreeding season for generating transgenic sheep overexpressing TLR4

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2017年第1期8卷 43-50页

作者： Yan Li Di Lian Shoulong Deng Xiaosheng Zhang Jinlong Zhang Wenting Li Hai Bai Zhixian Wang Hongping Wu juncai fu Hongbing Han Jianzhong Feng Guoshi Liu Ling Lian Zhengxing Lian Key Laboratory of Animal Genetics and Breeding of the Ministry of Agriculture Beijing Key Laboratory for Animal Genetic Improvement College of Animal Science and Technology China Agricultural University Beijing 100193 China Department of Public Health Benedictine University Lisle IL 60532 USA State Key Laboratory of Reproductive Biology institute of Zoology Chinese Academy of Sciences Beijing 100101 China Tianjin Institute of Animal Sciences Tianjin 300381 China

Background： Brucella is a zoonotic Gram-negative pathogen that causes abortion and infertility in ruminants and humans. TLR4 is the receptor for LPS which can recognize Brucella and initiate antigen-presenting cell activities that affect both innate and adaptive immunity. Consequently, transgenic sheep over-expressing TLR4 are an suitable model to investigate the effects of TLR4 on preventing Brucellosis. In this study, we generated transgenic sheep overexpressing TLR4 and aimed to evaluate the effects of different seasons（breeding and non-breeding season） on superovulation and the imported exogenous gene on ***： In total of 43 donor ewes and 166 recipient ewes in breeding season, 37 donor ewes and 144 recipient ewes in non-breeding season were selected for super-ovulation and injected embryo transfer to generate transgenic *** results indicated the no. of embryos recovered of donors and the rate of pronuclear embryos did not show any significant difference between breeding and non-breeding seasons（P 〉 0.05）. The positive rate of exogenous TLR4 tested were 21.21 % and 22.58 % in breeding and non-breeding season by Southern blot. The expression level of TLR4 in the transgenic sheep was 1.5 times higher than in the non-transgenic group（P 〈 0.05）. The lambs overexpressing TLR4 had similar growth performance with non-transgenic lambs, and the blood physiological parameters of transgenic and non-transgenic were both in the normal range and did not show any ***： Here we establish an efficient platform for the production of transgenic sheep by the microinjection of pronuclear embryos during the whole year. The over-expression of TLR4 had no adverse effect on the growth of the sheep.

关键词： Growth Microinjection Pronuclear embryos Sheep Superovulation

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单碱基水平上胞嘧啶碱基编辑器(CBE)的研究进展

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畜牧兽医学报 2020年第1期51卷 1-8页

作者：李广栋张鲁富俊才连正兴刘国世中国农业大学动物科学技术学院北京100193

尽管新一代基因编辑技术CRISPR/Cas9拥有众多优点,但在执行单个碱基水平的突变时其效率往往很低。由于DNA的双链断裂具有很多的不确定性,又加上基于供体模板的同源末端重组(homology directed repair,HDR)仅仅发生在分裂活跃的细胞中,... 详细信息

尽管新一代基因编辑技术CRISPR/Cas9拥有众多优点,但在执行单个碱基水平的突变时其效率往往很低。由于DNA的双链断裂具有很多的不确定性,又加上基于供体模板的同源末端重组(homology directed repair,HDR)仅仅发生在分裂活跃的细胞中,而非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)在整个细胞周期中都可以发生,因此,传统CRISPR/Cas9在单碱基分辨率上进行基因编辑时存在一定弊端。碱基编辑器(base editor,BE)的出现则在一定程度上弥补了这一缺陷。胞嘧啶碱基编辑器(cytosine base editor,CBE)或腺嘌呤碱基编辑器(adenine base editor,ABE)都能够在不引起双链断裂的情况下实现C·G到T·A或A·T到G·C的转换,极大地提高了单碱基编辑的应用价值。本文侧重对出现较早的CBE的原理、发展、应用及存在的问题进行综述,以期为高效单碱基突变工具在生物医学和畜牧业生产中的应用提供有益的参考和借鉴。

关键词：基因编辑单碱基突变胞嘧啶碱基编辑器

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对肉羊养殖的全混合日粮营养标准的初步研究

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动物营养学报 2019年第9期31卷 4092-4098页

作者：李德鹏王尚尚高月锋秦鲁蓬富俊才中国农业大学动物科学技术学院动物营养学国家重点实验室

本试验旨在研究不同粒度的全混合日粮(TMR)对肉羊生长性能、采食行为及消化代谢的影响,初步为规模化育肥肉羊养殖场建立合理的TMR生产标准。本研究分为2个试验,每个试验选择4月龄左右健康断奶绵羊公羔24只,体重为(35.4±5.1) kg,随机分... 详细信息

本试验旨在研究不同粒度的全混合日粮(TMR)对肉羊生长性能、采食行为及消化代谢的影响,初步为规模化育肥肉羊养殖场建立合理的TMR生产标准。本研究分为2个试验,每个试验选择4月龄左右健康断奶绵羊公羔24只,体重为(35.4±5.1) kg,随机分为4组,每组6只,单栏饲养。试验采用4×4拉丁方设计,饲喂4种不同粒度的TMR(对应的搅拌时间分别TMR1:羊草20 min、苜蓿16 min、花生秸12 min、玉米青贮5 min;TMR2:羊草30 min、苜蓿24 min、花生秸18 min、玉米青贮5 min;TMR3:羊草40 min、苜蓿32 min、花生秸24 min、玉米青贮5 min;TM R4:羊草50 min、苜蓿40 min、花生秸30 min、玉米青贮5 min)。每个试验分4期,每期15 d,共60 d。结果表明:1)随着搅拌时间的增加,宾州筛分层第1层干物质含量逐渐降低,第2、3、4层逐渐升高,TMR的粒度逐渐降低;物理有效纤维(peNDF) 8.0和peNDF1.18含量极显著降低(P0.05);TMR粒度对肉羊日总采食时间无显著影响(P>0.05);TMR粒度对肉羊日总反刍时间有显著影响(P0.05);对CP摄入量及每千克体重的粪CP、尿CP含量均无显著影响(P>0.05);随着TMR粒度减小,peNDF8.0的摄入量呈降低的趋势,但差异不显著(P>0.05)。综上,在本试验设定条件下,TMR4较适合育肥肉羊,对应的搅拌时间分别为羊草50 min,苜蓿40 min,花生秸30 min,玉米青贮5 min;对应的宾州筛分层中干物质含量分别为第1层6.00%,第2层30.23%,第3层44.62%,第4层19.15%,对应的peNDF含量分别为peNDF8.0 14.67%,peNDF1.18 32.79%。

关键词： TMR 肉羊生长性能消化代谢宾州筛

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羊尿结石研究进展

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现代畜牧兽医 2017年第3期 39-43页

作者：高月锋王陆潇武启繁孔德琳富俊才中国农业大学动物科技学院北京100193

舍饲已成为我国肉羊生产的发展趋势,但舍饲后羊的结石发病率提升,致死率升高,对畜牧业造成巨大的经济损失。本论文从尿结石的成因、主要症状、预防和治疗进行综述,以期为肉羊生产提供借鉴。

关键词：羊尿结石磷镁 pH

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葡萄籽原花青素对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响

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现代畜牧兽医 2019年第8期 1-11页

作者：李德鹏耿晓晖高月锋王尚尚富俊才中国农业大学动物科学技术学院动物营养学国家重点实验室

试验旨在研究葡萄籽原花青素(Grape Seed Proanthocyanidin Extract,GSPE)对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响.选择1月龄健康小尾寒羊公羔羊,屠宰后取腹股沟白色脂肪组织.分离绵羊前脂肪细胞,并进行原代体外培养.诱导分化后,进行油红O的... 详细信息

试验旨在研究葡萄籽原花青素(Grape Seed Proanthocyanidin Extract,GSPE)对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响.选择1月龄健康小尾寒羊公羔羊,屠宰后取腹股沟白色脂肪组织.分离绵羊前脂肪细胞,并进行原代体外培养.诱导分化后,进行油红O的染色鉴定.将传代培养后的绵羊前脂肪细胞随机分成6个处理组,每个处理组3个重复,培养基内添加不同浓度GSPE(0、6.25×10^1、1.25×10^2、2.5×10^2、5×10^2、1×10^3 ng/mL).培养结束后,用CCK-8法测定GSPE对绵羊前脂肪细胞增殖的影响.绵羊前脂肪细胞由诱导分化培养基和分化培养基处理后,再用含不同浓度GSPE(0、6.25×10^1、1.25×10^2、2.5×10^2、5×10^2、1×10^3 ng/mL)的培养基培养.培养结束后,测定甘油三磷酸脱氢酶(G3PDH)、脂肪酸合成酶(FAS)以及FASmRNA、激素敏感脂肪酶mRNA(HSLmRNA).结果表明:不同浓度的GSPE具有促前脂肪细胞增殖的作用,且有明显的时间和浓度效应;在分化试验中,与对照组相比,不同浓度的GSPE能明显抑制TG合成,但在诱导分化第8天,仅6.25×10^1、1.25×10^2 ng/mL的GSPE对TG的合成有抑制作用;在诱导分化后期,GSPE降低了脂肪沉积过程中关键酶G3PDH、FAS的活性,对FAS mRNA的表达无明显影响(P>0.05),显著降低HSL mRNA的表达(P<0.01),并且GSPE是通过同时作用脂类生成与脂解来抑制脂肪沉积.

关键词：葡萄籽原花青素绵羊前脂肪细胞增殖分化

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氦-氖激光照射山羊手术除皮创的试验

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中国激光 1984年第9期 573-574页

作者：钟俊才傅玲玉郑建勋汤辅彭秀堂张西铭莫汝定邹纯初湖南农学院乌鲁木齐军区军马研究所

近年来,激光技术在兽医上的应用也引起了重视,把激光和针灸相结合,用于家畜的麻醉,治疗家畜的外科疾病,以及对家畜某些生理指标的影响等等,取得了明显的效果。为研究氦-氖激光对创伤愈合过程的影响,我们进行了本试验。一、材料与方法 1... 详细信息

近年来,激光技术在兽医上的应用也引起了重视,把激光和针灸相结合,用于家畜的麻醉,治疗家畜的外科疾病,以及对家畜某些生理指标的影响等等,取得了明显的效果。为研究氦-氖激光对创伤愈合过程的影响,我们进行了本试验。一、材料与方法 1.动物:本地山羊12只,均为2岁以上成年羊。营养中下等,体重10～17.5公斤。饲养条件相同,专人管理。 2.分组:先人工造创,后随机分为A、B、C、D4个组。

关键词：皮肤修复平均氦-氖激光照射龙胆紫甲紫抗真菌药手术

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functions of Nitrogen,Phosphorus and Potassium in Energy Status and Their Influences on Rice Growth and Development

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Rice science 2022年第2期29卷 166-178页

作者： MA Jiaying CHEN Tingting LIN Jie fu Weimeng FENG Baohua LI Guangyan LI Hubo LI juncai WU Zhihai TAO Longxing fu Guanfu National Key Laboratory of Rice Biology China National Rice Research InstituteHangzhou 310006China Agronomy College Jilin Agricultural UniversityChangchun 130118China

Nitrogen(N),phosphorus(P)and potassium(K)are important essential nutrients for plant growth and development,but their functions in energy status remains ***,we grew Nipponbare rice seedlings in a growth chamber for 20 d at 30℃/24℃day/night)under natural sunlight conditions with different nutrient *** results showed that N had the strongest influence on the plant growth and development,followed by P and *** highest nonstructural carbohydrate content,dry matter weight,net photosynthetic rate(Pn),ATP content,as well as NADH dehydrogenase,cytochrome oxidase and ATPase activities were found in the plants that received sufficient N,P and *** lowest values of these parameters were detected in the N-deficient *** dry matter accumulation was observed in the K-deficient than in the P-deficient treatments,but there was no significant difference in the ratio of respiration rate to Pn between these two treatments,suggesting that differences in energy production efficiency may have accounted for this *** hypothesis was confirmed by higher ATP contents and activities of NADH dehydrogenase,cytochrome oxidase and ATPase in the K-deficient plants than in the P-deficient *** therefore inferred different abilities in energy production efficiency among N,P and K in rice seedlings,which determined rice plant growth and development.

关键词： rice nutrient element photosynthesis respiration plant growth and development energy production efficiency

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春秋冬三季东弗里升奶绵羊体内胚胎生产及移植效果

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黑龙江动物繁殖 2022年第1期30卷 1-6页

作者：马文奎李继成谭鑫星张金龙张效生吴昊姬鹏云李广栋宋玉坤杨海吕东颖杨明辉富俊才阿布力孜·吾斯曼朱士恩刘国世中国农业大学动物科技学院北京100193 新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052 北京奥鑫牧业有限公司北京101300 内蒙古草原宏宝食品股份有限公司内蒙古巴彦淖尔015000 天津市农业科学院畜牧兽医研究所天津300380

为探究春、秋、冬三季以东弗里升奶绵羊为供体进行体内胚胎生产及移植的效果,并为建立高效优质种羊扩繁体系提供理论依据,试验选用99只东弗里升奶绵羊为供体、934只乌珠穆沁羊为受体,在春、秋、冬季进行体内胚胎生产和移植,45d后进行B... 详细信息

为探究春、秋、冬三季以东弗里升奶绵羊为供体进行体内胚胎生产及移植的效果,并为建立高效优质种羊扩繁体系提供理论依据,试验选用99只东弗里升奶绵羊为供体、934只乌珠穆沁羊为受体,在春、秋、冬季进行体内胚胎生产和移植,45d后进行B超检测。结果表明:左侧子宫回收胚胎数为春季5.92枚,秋季7.76枚,冬季6.33枚,季节之间差异不显著(P>0.05);右侧子宫回收胚胎数秋季(8.53枚)显著高于春季(5.08枚)和冬季(5.69枚,P0.05);单胚移植妊娠率秋季(63.34%)和冬季(58.99%)显著高于春季(32.79%,P0.05);产羔率为春季(68.18%)略高于秋季(67.83%)、冬季(65.13%),季节之间差异不显著(P>0.05)。说明春、秋、冬三季东弗里升奶绵羊超排和胚胎移植效果相近,其中秋季进行东弗里升奶绵羊体内胚胎生产和移植效果最佳。

关键词：东弗里升奶绵羊季节胚胎生产超数排卵妊娠率

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基于倒塌延性的输电塔地震抗倒塌设计方法

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振动．测试与诊断 2024年第5期44卷 916-921,1037页

作者：田利罗贤超付朝阳刘俊才刘文棚山东大学土建与水利学院济南250061

调整结构抗侧刚度是提高地震下结构抗倒塌能力的常用方法,目前该方法多应用于建筑结构,而没有关于输电塔的抗倒塌研究。针对此问题,首先,依托实际输电线路工程,基于ABAQUS软件建立了输电塔有限元模型,采用静力推覆分析(Pushover)和增量... 详细信息

调整结构抗侧刚度是提高地震下结构抗倒塌能力的常用方法,目前该方法多应用于建筑结构,而没有关于输电塔的抗倒塌研究。针对此问题,首先,依托实际输电线路工程,基于ABAQUS软件建立了输电塔有限元模型,采用静力推覆分析(Pushover)和增量动力分析(incremental dynamic analysis,简称IDA)方法,获得了输电塔倒塌延性;其次,针对输电塔薄弱节间,提出了一种以杆件内外径之比为影响参数的输电塔地震抗倒塌优化设计方法;最后,通过有限元分析对优化效果进行了验证。结果表明,该优化方法能有效提高输电塔抗倒塌性能,优化后的输电塔薄弱节间抗震性能最高可达70%,非薄弱节间优化效果在10%左右,可为输电塔抗震设计提供指导。

关键词：输电塔有限元分析抗震性能结构延性结构优化

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“怀天下,求真知”——由精神激励到文化传承

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河北师范大学学报（教育科学版） 2022年第5期24卷 20-28页

作者：王俊才河北师范大学历史文化学院河北石家庄050024

“怀天下,求真知”是河北师范大学历经百年沧桑、多源一脉汇总提炼而成的校训。她是一道光阴,是一串符号,是一面旗帜,是一种信念,是一个灵魂,是精神的彰显,是文化的体现,有历史的积淀,有当今的承担。她有多源的丰富,又有一脉相承的执着... 详细信息

“怀天下,求真知”是河北师范大学历经百年沧桑、多源一脉汇总提炼而成的校训。她是一道光阴,是一串符号,是一面旗帜,是一种信念,是一个灵魂,是精神的彰显,是文化的体现,有历史的积淀,有当今的承担。她有多源的丰富,又有一脉相承的执着。从顺天府学堂、北洋女师范学堂到河北师范大学,梳理李端棻、傅增湘、吕兰清和齐国樑等创办者和管理者的艰辛以及梁漱溟等精英人才的成就,可以体悟到河北师范大学师生百年血汗浇铸“怀天下,求真知”的坎坷历程和灵魂升华。“怀天下,求真知”是精神激励,也是文化传承。绍续天下一家之道统,弘扬求真致用之学脉,尊师贵道,尚真创新,这是河北师范大学相传百年的精神文脉,在新的时代必将展示出自己独特的风采。

关键词：河北师范大学怀天下求真知现代大学校训

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