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Fast Determination of Vitamin B<sub>2</sub>Based on Molecularly Imprinted Electrochemical Sensor

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Engineering（科研） 2012年第10期4卷 129-134页

作者： Peidong Xu Changsheng Qiao Shufeng Yang Lijuan Liu Mingwei Wang juankun zhang Key Laboratory of Industrial Microbiology Ministry of Education College of Bioengineering Tianjin Key Laboratory of Industry Microbiology College of Bioengineering Tianjin University of Science & Technology TUST Tianjin P.R.China

Under the condition of weak acidity of pH 5.2, a sensitive vitamin B2 electrochemical sensor based on molecularly imprinted nonconducting polymer of o-aminophenol by potentiostatic polymerization in the presence of template(vitamin B2) on a glassy carbon electrode was prepared, and its performance was studied. The sensor exhibited good sensitivity and selectivity to VB2. The detection limit went down to 2.3851nM, and a linear relationship between the current incremental and the concentration was found in the range of 10~120nM. And the sensor could use in detection of VB2 real sample for a long time and show good reproducibility. The average recovery rate to VB2 was 98.41%.

关键词： Vitamin B2 Molecularly Imprinted Technique Potentiostatic Polymerization O-aminophenol Drug Determination

Formaldehyde Biosensor with Formaldehyde Dehydrogenase Adsorped on Carbon Electrode Modified with Polypyrrole and Carbon Nanotube

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Engineering（科研） 2012年第10期4卷 135-138页

作者： Mingwei Wang Shuhai Jiang Yi Chen Xiang Chen Li Zhao juankun zhang Jinfeng Xu Key Laboratory of Industrial Microbiology Ministry of Education College of Biotechnology Tianjin Key Laboratory of Industry Microbiology College of Biotechnology Tianjin University of Science&Technology Tianjin 300457 China

In this study, a carbon electrode electroless polymerization of polypyrrole, which formed a layer of conductive film interface,then absorped a layer of carbon nanotube particles by the way of self-assembled, is studied. The modified electrode is used to electrostatic adherence of formaldehyde dehydrogenase, with Nafion solution capped. Moreover this paper discusses the work of electrode position,? PH value and scanning speed on the influence of the electrode response, the response potential is -1.2v, the optimal PH value is 7.5, and we also review the linear range of this electrode, we discovered taht this biosensor have a good linear relationship with the concentration of 1ug/ml-360ug/ml, the Correlation coefficient is 0.9983. In addition,with the stability of this electrode tested, it can be stored 15d at4°C.

关键词： Formaldehyde Dehydrogenase Eletrostatic Self-assembly Biosensor

表面改性的纳米Fe3O4颗粒用于抗血清快速分离纯化

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生物工程学报 2008年第1期24卷 106-110页

作者：毛占伟王慧张娟琨天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457

采用硅烷化试剂Si(OC_2H_5)_3C_3H_6NH_2(APTES)对纳米Fe_3O_4颗粒表面进行氨基化改性后,考察了不同浓度偶联剂戊二醛对于颗粒表面固定牛血清白蛋白(BSA)量的影响。此超顺磁性免疫铁颗粒(SPIO)加入兔抗BSA血清中特异性结合BSA抗体后,用G... 详细信息

采用硅烷化试剂Si(OC_2H_5)_3C_3H_6NH_2(APTES)对纳米Fe_3O_4颗粒表面进行氨基化改性后,考察了不同浓度偶联剂戊二醛对于颗粒表面固定牛血清白蛋白(BSA)量的影响。此超顺磁性免疫铁颗粒(SPIO)加入兔抗BSA血清中特异性结合BSA抗体后,用Gly-HCl缓冲液洗脱得到IgG。结果表明当戊二醛浓度大于10%时,单位颗粒固定蛋白的量达到最大值约140μg/mg,10 min,15 mg的SPIO即可将1 mL抗血清完全分离,经过两次快速洗脱,颗粒表面吸附的抗体即可得到纯化;琼脂扩散实验表明分离后的抗体仍保持较高活性,SDS-PAGE电泳结果表明用此方法纯化后的兔抗BSA IgG纯度大于99%,比传统的(NH_4)_2SO_4法有了较大提高,但纯化量并没有减少;SPIO在经过五次重复利用后仍能保持78%以上的分离效果。

关键词：纳米Fe3O4颗粒兔抗血清 IgG,戊二醛磁性分离

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B型流感病毒血凝素的表达及免疫原性测定

生物工程学报 2022年第3期38卷 1112-1123页

作者：杨晨耿小宇原恺张娟琨校海霞天津科技大学生物工程学院天津300457 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308 山西高等创新研究院山西太原030032

B型流感病毒是引起季节性流感的原因之一,严重时会造成重大疾病或死亡。为了检测B型流感病毒2个疫苗候选毒株的血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白胞外段在哺乳动物细胞中的表达及在小鼠体内的免疫原性,本研究将带有三聚体标签的HA胞外段(HA-... 详细信息

B型流感病毒是引起季节性流感的原因之一,严重时会造成重大疾病或死亡。为了检测B型流感病毒2个疫苗候选毒株的血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白胞外段在哺乳动物细胞中的表达及在小鼠体内的免疫原性,本研究将带有三聚体标签的HA胞外段(HA-ectodomain,HA-ecto)序列及神经氨酸酶(neuraminidase,NA)全长编码框经密码子优化后构建至pCAGGS载体中,通过线性聚乙烯亚胺将pCAGGS-HA-ecto与pCAGGS-NA共转染293T细胞。收集转染后96h的上清,通过镍离子亲和层析及分子筛层析获得三聚体形式的HA-ecto蛋白,然后将HA-ecto三聚体蛋白免疫小鼠,进行酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HAI)检测HA-ecto蛋白诱导小鼠后产生的抗体水平。纯化结果显示,通过哺乳动物细胞表达系统能够得到分泌型表达的三聚体HA-ecto蛋白。ELISA及HAI结果显示,三聚体HA-ecto蛋白二次免疫小鼠后,能诱导小鼠产生较高水平的同源和异源交叉抗体。以上结果表明,哺乳动物细胞表达的B型流感病毒HA蛋白可作为亚单位重组流感疫苗的候选。

关键词： B型流感病毒血凝素蛋白哺乳动物细胞表达系统疫苗候选毒株

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重叠基因在异源蛋白表达中的新应用

生物学杂志 2022年第6期39卷 101-107页

作者：彭凯逯晓云卢丽娜张娟琨江会锋天津科技大学生物工程学院天津300457 中国科学院天津工业生物技术研究所系统微生物工程重点实验室天津300308

大肠杆菌在调控异源蛋白的表达量和可溶性方面仍然存在困难。研究开发一种融合重叠基因结构和mRNA 5′-端序列优化的蛋白表达调控方法。在表达基因起始密码子前引入两个碱基TG,利用pET-28a质粒载体表达框的5′-端标签,与其形成TGATG的... 详细信息

大肠杆菌在调控异源蛋白的表达量和可溶性方面仍然存在困难。研究开发一种融合重叠基因结构和mRNA 5′-端序列优化的蛋白表达调控方法。在表达基因起始密码子前引入两个碱基TG,利用pET-28a质粒载体表达框的5′-端标签,与其形成TGATG的重叠基因类型的表达结构。再通过设计简并引物对异源基因mRNA的5′-端连续14个密码子区域进行同义密码子突变,改变mRNA的二级结构,实现重叠基因结构强度筛选。利用这种方法,在不改变质粒组成和外界条件的情况下就能影响异源蛋白的表达量,并通过影响翻译过程速率来调控蛋白可溶性。通过对多个异源基因表达优化实例,证明重叠基因结构在调控蛋白可溶性表达中的作用。为大肠杆菌中异源蛋白在表达量和可溶性问题的优化方面提供一种简单的调控策略。

关键词：大肠杆菌异源表达同义密码子 mRNA结构重叠基因

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分子印迹传感器对标本中塑化剂直接快速检测

天津科技大学学报 2016年第5期31卷 14-18页

作者：陶强张娟琨刘英姿鞠小翠左娟娟工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457

本文构建了能够快速检测邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)的分子印迹电化学传感器.首先利用分子印迹技术以热聚合的方法制备了分子印迹聚合物颗粒(MIPs);然后将优化的MIPs与琼脂糖溶液混匀固定在玻碳电极表面制备成DINP分子印迹电化学传感器;... 详细信息

本文构建了能够快速检测邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)的分子印迹电化学传感器.首先利用分子印迹技术以热聚合的方法制备了分子印迹聚合物颗粒(MIPs);然后将优化的MIPs与琼脂糖溶液混匀固定在玻碳电极表面制备成DINP分子印迹电化学传感器;传感器可以特异性结合模板分子DINP且其电化学信号与DINP的浓度相关.再利用传感器检测样品中DINP的含量,检测过程不需要样本前处理,可以用于现场直接检测.该方法的线性方程为ΔI=0.03c+3.07,相关系数R^2=0.998,线性范围5×10^(-8)~1×10^(-6),mol/L,检测限为2.7×10^(-8),mol/L,在实际样品中的加标回收率为105.3%,~115.7%,.

关键词：邻苯二甲酸二异壬酯分子印迹聚合物颗粒电化学传感器检测循环伏安

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心肌肌钙蛋白I的分子印迹电化学生物传感器

生物加工过程 2012年第3期10卷 61-66页

作者：李成学张娟琨蒋树海张艺周浩宋可天津科技大学生物工程学院教育部工业微生物重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津300457

应用分子印迹技术,以邻苯二胺和对苯二酚为功能单体,心肌肌钙蛋白I(cTnI)为模板分子,在pH 7.0磷酸盐缓冲液中,利用循环伏安法在玻碳电极表面聚合形成了分子印迹膜。该分子膜对cTnI有特异性识别作用,在0.01～2.00μg/mL的范围内,cTnI的... 详细信息

应用分子印迹技术,以邻苯二胺和对苯二酚为功能单体,心肌肌钙蛋白I(cTnI)为模板分子,在pH 7.0磷酸盐缓冲液中,利用循环伏安法在玻碳电极表面聚合形成了分子印迹膜。该分子膜对cTnI有特异性识别作用,在0.01～2.00μg/mL的范围内,cTnI的浓度与氧化峰电流的变化呈线性关系,检测下限为2 ng/mL,响应时间为15 min。该分子印迹传感器具有制备简单、特异性及稳定性好等优点。

关键词：生物传感器心肌肌钙蛋白I 循环伏安法分子印迹

新型分子印迹敏感膜传感器直接快速检测饮料中的柠檬黄

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天津科技大学学报 2016年第6期31卷 21-26,33页

作者：刘英姿张娟琨万雪陶强左娟娟鞠晓翠工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457

构建了一种能够直接在样品中快速检测柠檬黄(tartrazine,TZ)的分子印迹电化学传感器(MIP-Pm DB/Po PDGCE).以间苯二酚(m-DB)和邻苯二胺(o-PD)为功能单体,柠檬黄为印迹分子,通过电聚合的方法在玻碳电极表面修饰了一层柠檬黄分子印迹敏感... 详细信息

构建了一种能够直接在样品中快速检测柠檬黄(tartrazine,TZ)的分子印迹电化学传感器(MIP-Pm DB/Po PDGCE).以间苯二酚(m-DB)和邻苯二胺(o-PD)为功能单体,柠檬黄为印迹分子,通过电聚合的方法在玻碳电极表面修饰了一层柠檬黄分子印迹敏感膜,通过循环伏安法(CV)和交流阻抗技术(EIS)对分子印迹敏感膜的分子印迹效应进行了表征.应用差分脉冲伏安法(DPV)研究了传感器对柠檬黄的响应性能,结果表明:响应电流与柠檬黄浓度在5.0×10^(-9)~1.1×10^(-6) mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为3.5×10^(-9) mol/L(S/N=3),检测时间为5,min.将该传感器应用于实际样品中柠檬黄的分析,加标回收率为96.35%,~101.32%,.

关键词：柠檬黄电聚合分子印迹电化学传感器直接快速检测

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分子印迹技术应用于血清中地高辛的快速检测

生物加工过程 2011年第2期9卷 64-67页

作者：李敏张娟琨张子怡张彬彬范婷吴萍天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室天津300457 天津体育学院运动人体科学系天津300381

应用分子印迹的方法制备对地高辛有特异性吸附性能的印迹聚合物颗粒,再将颗粒与琼脂糖混合并固定于玻碳电极上制备成地高辛分子印迹聚合膜传感器,传感器可以特异性地结合模板分子地高辛且其电化学信号与模板浓度相关,再用它来检测血清... 详细信息

应用分子印迹的方法制备对地高辛有特异性吸附性能的印迹聚合物颗粒,再将颗粒与琼脂糖混合并固定于玻碳电极上制备成地高辛分子印迹聚合膜传感器,传感器可以特异性地结合模板分子地高辛且其电化学信号与模板浓度相关,再用它来检测血清中地高辛的含量。结果表明:分子印迹传感器具有制作简便、成本低、检测快速、特异性高、稳定性好等优点,检测下限为1.28 nmol/L,检测时间为5 min。

关键词：分子印迹传感器地高辛聚合物血清快速检测