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Diazepam reduces synaptic GABA type areceptor availability via multiple trafficking mechanisms

中国药理学与毒理学杂志 2017年第10期31卷 952-952页

作者： joshua m lorenz-guertin Sabyasachi DAS Tija C JACOB Department of Pharmacology & Chemical Biology University of Pittsburgh

OBJECTIVE Investigate the effects of diazepam(DZP) on γ2 subunit containing GABA type A receptor(GABA A R) *** Immunofluorescence microscopy measured surface GABA A Rs and gephyrin in rat cortical neurons after 24 h exposure of 1.0 μmol·L^(-1) *** studies of mice injected with 10 mg·kg^(-1) DZP vs vehicle were assessed for γ2 subunit and total gephyrin cortical levels 12 h *** of the γ2 subunit was studied by immunoprecipitation after 12 h of 1.0 μmol·L^(-1) DZP exposure.A γ2 subunit encoding an N terminal fluorogen-activating peptide and pH-sensitive green fluorescent protein(γ2 pH FAP) measured lysosomal targeting of γ2 containing GABA A ***-gephyrin and γ2 pH FAP synaptic diffusion rates were examined using fluorescence recovery after photobleaching(FRAP).RESULTS Extrasynaptic levels of γ2 GABA A Rs decreased by 12.2%,while synaptic gephyrin S270 phosphorylation increased by 18.3% in DZP-treated neurons after 24 h compared to control(Pmice 12 h post-DZP injection demonstrated a 12.7% and 26.1% decrease in total γ2 and gephyrin levels,respectively(Pment enhanced γ2 subunit ubiquitination 1.13-fold relative to control(Pmes was 8.0% higher in neurons treated with 12-16 h DZP compared to *** FRAP experiments suggest gephyrin and γ2 have increased mobility and turnover at synapses following *** DZP treatment decreases γ2 GABA A R levels and gephyrin scaffolding function after one day of exposure,which may contribute to the formation of DZP tolerance.

关键词： GABA type A receptor gephyrin trafficking diazepam

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