目的:探讨精子冷冻保存剂(TEST-YOLK-Buffer,TYB)及快速冷冻法和液氮缓慢冷冻法两种不同的冷冻方法对人精子活力的影响。方法:健康男性的新鲜精液与TYB等比例混匀后,室温下分别放置5、15、30、60min,计数与TYB作用不同时间有活力的精子数;每个时间段的标本分别采用快速冷冻法和液氮缓慢冷冻法冷冻,冷冻保存时间大于24 h,解冻复温后计数精子活力指数与平均精子活力指数。结果:TYB作用5、15、306、0 min 4个时间段后平均精子活力指数均下降,与初始精液相比差异均有统计学意义(P<0.05),其中15、60 min下降更明显(P<0.01);经过液氮缓慢冷冻的精子平均精子活力指数明显高于快速冷冻法(P<0.01)。结论:TYB对精子活力有影响,与TYB作用时间越长,精子活力下降越明显;液氮缓慢冷冻法优于快速冷冻法。
目的:评价人精子活力试验作为体外授精-胚胎移植(IVF)实验室质量控制方法的敏感性及应用价值。方法:实验1实验组HTF培养液中加入0.25%、0.75%的甲醛,对照组不加甲醛;所有HTF培养液均加入0.3%牛血清白蛋白、矿物油或者两者都有,了解人精子活力在这些培养条件下的变化。实验2采用人精子活力试验检测3种组织培养管的胚胎毒性。在HTF培养液中加入牛血清白蛋白、矿物油或两者都加,对照组不加任何附加物,了解这些附加物对精子有无保护作用。结果:实验1人精子在含0.25%甲醛的HTF培养液中培养24 h,活力指数为0.594±0.331,高于含0.75%甲醛培养液的0.450±0.284,差异有统计学意义(P<0.01);在含0.25%和0.75%甲醛的胚胎培养液中加入0.3%牛血清蛋白、矿物油,精子活力指数分别为0.683±0.334、0.527±0.345,高于不含牛血清白蛋白及矿物油的0.394±0.311、0.424±0.311,差异有统计学意义(P<0.01)。实验2同样的培养时间与培养条件,丹麦Nunc lom公司7 m l组织培养管中的精子活力指数为0.677±0.335,高于美国Falcon公司的14 m l培养管的0.596±0.327和美国Corn ing公司15 m l组织培养管的0.551±0.317,差异有统计学意义(P<0.01);在培养液中加入0.3%牛血清白蛋白、矿物油,精子活力指数为0.821±0.259、0.645±0.335,高于不含牛血清白蛋白及矿物油的0.571±0.321与0.395±0.245,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:精子对培养环境中的微量毒性成分十分敏感,其活力在短时间内明显下降。人精子活力生物试验是一种敏感的生物测试方法;丹麦Nunc lom公司7 m l组织培养管对精子活力影响最小,适合于人胚胎的培养;培养液中加入牛血清白蛋白及矿物油可以减少培养环境中的毒素影响,对精子及其活力有保护作用。
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