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sequential disruption of alv host receptor genes reveals no sharing of receptors between alv.subgroups A, B, and J

journal of Animal science and Biotechnology 2019年第2期10卷 410-423页

作者： Hong jo Lee Kyung Je Park Kyung Youn Lee Yongxiu Yao Venugopal Nair Jae Yong Han sciences and Research Institute of Agriculture and Life SciencesSeoul National UniversitySeoul 08826Korea The Pirbright Institute WokingSurrey GU24 0NFUK.

Background: Previously, we showed that targeted disruption of viral receptor genes in avian leukosis virus(alv.subgroups using clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRIsPR)/CRIsPR-associated protein 9(Cas9))-based genome editing confers resistance to alv.subgroups B and J. Here, we used the same strategy to target the receptor expressed by alv.subgroup A(TVA) and generate chicken cells resistant to infection by this ***: CRIsPR/Cas9-based disruption of exon 2 within the tva gene of DF-1 fibroblasts conferred resistance to infection by alv.subgroup A regardless of whether frameshift mutations were introduced during editing. Conversely,overexpression of the wild-type TVA receptor(wtTVA) by tva-modified DF-1 clones restored susceptibility to alv.subgroup A. The results confirm that exon 2, which contains the low-density lipoprotein receptor class A domain of TVA, is critical for virus entry. Furthermore, we sequentially modified DF-1 cells by editing the tva, tvb, and Na^+/H^+ exchange 1(chNHE1) genes, which are the specific receptors for alv.subgroups A, B, and J, ***: simultaneous editing of multiple receptors to block infection by different subgroups of alv confirmed that alv.subgroups A, B, and J do not share host receptors. This strategy could be used to generate cells resistant to multiple viral pathogens that use distinct receptors for cell entry.

关键词： Avian leukosis virus CRIsPR/Cas9 Genome editing Host receptor TVA

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