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A CRISPR/Cas9-based single-stranded DNA recombineering system for genome editing of Rhodococcus opacus PD630

Synthetic and Systems Biotechnology 2021年第3期6卷 200-208页

作者： Youxiang Liang Yuwen Wei Song jiao Huimin Yu Department of Chemical Engineering Tsinghua UniversityBeijing100084China Key Laboratory of Industrial Biocatalysis(Tsinghua University) The Ministry of EducationBeijing100084China Center for Synthetic and Systems Biology Tsinghua UniversityBeijing100084China

Genome engineering of Rhodococcus opacus PD630,an important microorganism used for the bioconversion of lignin,is currently dependent on inefficient homologous *** a CRISPR interference procedure for gene repression has previously been developed for *** PD630,a CRISPR/Cas9 system for gene knockout has yet to be reported for the *** this study,we found that the cytotoxicity of Cas9 and the deficiency in pathways for repairing DNA double-strand breaks(DSBs)were the major causes of the failure of conventional CRISPR/Cas9 technologies in ***,even when augmented with the recombinases Che9c60 and *** successfully developed an efficient single-stranded DNA(ssDNA)recombineering system coupled with CRISPR/Cas9 counter-selection,which facilitated rapid and scarless editing of the *** genome.A two-plasmid system,comprising Cas9 driven by a weak Rhodococcus promoter Pniami,designed to prevent cytotoxicity,and a single-guide RNA(sgRNA)under the control of a strong constitutive promoter,was proven to be appropriate with respect to cleavage function.A novel recombinase,RrRecT derived from a Rhodococcus ruber prophage,was identified for the first time,which facilitated recombination of short ssDNA donors(40-80 nt)targeted to the lagging strand and enabled us to obtain a recombination efficiency up to 103-fold higher than that of endogenous ***,by incorporating RrRecT and Cas9 into a single plasmid and then co-transforming cells with sgRNA plasmids and short ssDNA donors,we efficiently achieved gene disruption and base mutation in ***,with editing efficiencies ranging from 22%to 100%.Simultaneous disruption of double genes was also confirmed,although at a lower *** effective genome editing tool will accelerate the engineering of *** metabolism.

关键词： Rhodococcus opacus CRISPR/Cas9 ssDNA recombineering Novel recombinase Genome editing

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耐磨球形Ni/Al_(2)O_(3)催化剂催化CO甲烷化反应的本征动力学

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过程工程学报 2024年第1期24卷 107-116页

作者：张烁关宇尤园江岳君容裴世红崔彦斌刘姣许光文沈阳化工大学化学工程学院辽宁沈阳110142 中国科学院过程工程研究所多相复杂系统国家重点实验室北京100190

一氧化碳和氢气在催化剂作用下合成甲烷,常应用于煤制合成天然气、焦炉煤气制液化天然气和生物质合成气等领域,有利于我国能源结构优化。针对CO甲烷化的快速表面反应、强放热特性,相比固定床,采用微球型催化剂的流化床甲烷化技术在移热... 详细信息

一氧化碳和氢气在催化剂作用下合成甲烷,常应用于煤制合成天然气、焦炉煤气制液化天然气和生物质合成气等领域,有利于我国能源结构优化。针对CO甲烷化的快速表面反应、强放热特性,相比固定床,采用微球型催化剂的流化床甲烷化技术在移热和催化性能方面具有明显的技术优势。在前期开发的耐磨球形Ni/Al_(2)O_(3)催化剂的基础上,采用常压微分固定床反应器对其催化CO甲烷化反应本征动力学进行了研究,以揭示反应机理和路径。在消除内外扩散的前提下,通过控制催化剂装填量和反应气体的量,将出口CO转化率控制在15%以下,从而获得不同CO/H_(2)比和不同反应温度下的CH_(4)生成速率,采用幂指数型动力学模型和双曲线型动力学模型分别进行数据拟合。基于幂指数型动力学模型计算的动力学参数结果表明,随着反应温度从260℃升高至350℃,CO甲烷化反应活化能从145.99 kJ/mol逐渐降至123.54 kJ/mol,CO的反应级数由-1.22增加至0.34,H_(2)的反应级数由0.31增加至2.28。为了进一步分析反应机理,根据不同温度下CO和H2浓度对反应速率影响程度不同,基于双曲线型动力学模型假设不同温度区间内的速控步骤并根据实验结果推导出相应的双曲线型反应速率方程,发现260~280℃下H_(2)的解离、280~310℃下CO的加氢解离、310~350℃下碳中间体的进一步加氢分别为速控步骤时,R2大于0.99,表明甲烷化反应速度控制步骤随温度变化而发生改变。

关键词： Ni基催化剂甲烷化本征动力学速控步骤流化床双曲动力学模型

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不同品种茶树修剪叶分解及碳氮磷释放动态特征

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农业环境科学学报 2024年第7期43卷 1657-1665页

作者：周靖超蒲勇焦银龙杨鎏璘杨佳杜磊张锡洲李廷轩四川农业大学资源学院成都611130 泸州市农业农村局四川泸州646000 德阳市土肥站四川德阳618000

为阐明不同品种茶树修剪叶初始化学组成对其分解和养分释放的影响,以川西低山丘陵区福鼎大白(***,Fuding Dabaicha)、川茶3号(Chuancha No.3)、川沐217(Chuanmu No.217)和川农黄芽早(Chuannong Huangyazao)4个典型品种茶树的修剪叶为研... 详细信息

为阐明不同品种茶树修剪叶初始化学组成对其分解和养分释放的影响,以川西低山丘陵区福鼎大白(***,Fuding Dabaicha)、川茶3号(Chuancha No.3)、川沐217(Chuanmu No.217)和川农黄芽早(Chuannong Huangyazao)4个典型品种茶树的修剪叶为研究对象,采用分解袋法进行为期360 d的室内模拟分解试验,探讨修剪叶分解动态及其碳(C)、氮(N)、磷(P)元素释放特征。结果表明:4个品种茶树修剪叶前期(0~120 d)分解较快、后期(121~360 d)分解较慢,分解半衰期在1.20~1.43 a。川沐217和福鼎大白茶树修剪叶分解较快,分解系数比川茶3号和川农黄芽早高11.7%~18.5%。初始化学组成的C含量、纤维素含量和木质素含量是影响茶树修剪叶分解速率的主要因素。4个品种茶树修剪叶的C、P元素均为直接释放模式;福鼎大白和川茶3号茶树修剪叶的N元素为直接释放模式,川沐217和川农黄芽早茶树修剪叶的N元素属于淋溶-积累-释放模式。茶树修剪叶的C、N、P元素释放因品种和分解时期的不同而不同,且受到初始化学组成N、P含量的影响。在分解过程中,福鼎大白和川农黄芽早修剪叶的C、N释放率较高,川茶3号和川沐217修剪叶的P释放率较高。4个品种茶树修剪叶C、N、P元素的释放率分别为36.1%~44.5%、53.8%~58.3%、65.4%~71.5%。因此,在茶树修剪叶归还过程中可考虑采用堆肥等方式以促进木质素和纤维素的降解,修剪过后适量施氮以抑制修剪叶N元素的释放,从而提升茶树对修剪叶的养分利用效率。

关键词：茶树品种茶树修剪叶分解动态养分释放

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儿童不明原因黄斑前膜的临床特点及手术治疗效果分析

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中华眼科杂志 2024年第1期60卷 43-48页

作者：刘敬花王倩李松峰邓光达李亮麻婧原铭贞焦永红卢海首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心、北京市眼科研究所、北京市眼科学与视觉科学重点实验室北京100730

目的探讨儿童不明原因黄斑前膜的临床特点和手术治疗效果。方法回顾性病例系列研究。收集2019年1月至2021年9月在首都医科大学附属北京同仁医院就诊、年龄14岁及以下、因无明显原因黄斑前膜行玻璃体切除手术并随访12个月及以上的14例(1... 详细信息

目的探讨儿童不明原因黄斑前膜的临床特点和手术治疗效果。方法回顾性病例系列研究。收集2019年1月至2021年9月在首都医科大学附属北京同仁医院就诊、年龄14岁及以下、因无明显原因黄斑前膜行玻璃体切除手术并随访12个月及以上的14例(17只眼)患者的临床资料,总结和分析患者的就诊年龄和主诉、彩色眼底图像、相干光层析成像术(OCT)特征、手术前和后的视功能、解剖结构预后和并发症。结果14例(17只眼)患者中,女性5例(6只眼),男性9例(11只眼);年龄为(6.31±2.91)岁。术后随访时间为(17.3±9.5)个月。8例(8/14)患者为学校体检发现视力低下;15只眼(15/17)彩色眼底图像示黄斑前膜呈玻璃膜样外观。OCT检查黄斑区视网膜内表面,10只眼(10/17)为Taco褶皱,7只眼(7/17)为Ripple褶皱;5只眼(5/17)黄斑区卵圆体带破坏,12只眼(12/17)黄斑区卵圆体带完整。最佳矫正视力(最小分辨角对数视力)术前为0.532±0.302,术后末次随访为0.340±0.298。术后17只眼黄斑区解剖结构改善,其中1只眼术后随访期间发生外伤性白内障和继发视网膜脱离,再次手术后视网膜复位。结论儿童不明原因黄斑前膜多于学龄期因发现视力低下就诊,多数患者为玻璃膜样外观伴视网膜内表面Taco褶皱改变;玻璃体切除手术有助于恢复患者黄斑解剖结构,并改善患者视功能。

关键词：视网膜前膜玻璃体切除术治疗结果儿童

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基于YOLOv5m的电机换向器缺陷检测

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山东交通学院学报 2024年第2期32卷 10-18页

作者：许云涛焦培刚刘家齐山东交通学院工程机械学院山东济南250357

为降低电机换向器缺陷的检测成本,提高检测效率,满足实际工程中对检测精度和检测速度的均衡要求,以YOLOv5m模型为基础提出优化改进的表面缺陷检测算法,将采集的数据集经Mosica数据增强,提高模型的鲁棒性;在其他层中采用双向特征金字塔网... 详细信息

为降低电机换向器缺陷的检测成本,提高检测效率,满足实际工程中对检测精度和检测速度的均衡要求,以YOLOv5m模型为基础提出优化改进的表面缺陷检测算法,将采集的数据集经Mosica数据增强,提高模型的鲁棒性;在其他层中采用双向特征金字塔网络(bidirectional feature pyramid network,BiFPN)层代替路径聚合网路(path aggregation network,PANet)层,引入双向连接和跨层特征融合机制,同时增加Criss-Cross注意力机制,更好地捕捉输入序列中的相关信息,增强网络在不同尺度下的反馈,并通过消融试验验证。结果表明:相较于传统YOLOv5m模型,优化改进后YOLOv5m模型的总体平均检测精度增大17%,准确率增大28.3%,召回率增大8.2%。在保证检测精度的同时,缩短缺陷检测时间,较好地满足缺陷检测工程中对检测精度与检测速度的均衡需求。

关键词：电机换向器表面缺陷 YOLOv5m 注意力机制特征融合

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基于表型性状的观赏桃种质遗传多样性分析

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河南农业科学 2024年第2期53卷 108-117页

作者：乔雨轩申潇潇焦雪辉周小娟岳长平史喜兵郑州市农业科技研究院河南郑州450005 鄢陵县林业科学研究所河南鄢陵461200 鄢陵县东华种植农民专业合作社河南鄢陵461200

以河南省许昌市鄢陵县林科所观赏桃资源圃收集的106份观赏桃种质资源为研究材料,通过计算变异系数和多样性指数,结合相关性、主成分及聚类分析,对30个表型性状(质量性状18个、数量性状12个)进行多样性分析。结果表明,106份观赏桃种质资... 详细信息

以河南省许昌市鄢陵县林科所观赏桃资源圃收集的106份观赏桃种质资源为研究材料,通过计算变异系数和多样性指数,结合相关性、主成分及聚类分析,对30个表型性状(质量性状18个、数量性状12个)进行多样性分析。结果表明,106份观赏桃种质资源性状差异显著且遗传多样性丰富。其中,数量性状的平均变异系数为33.80%,花瓣数量的变异系数最大,为68.17%,多样性指数的均值为1.82,花径和花瓣长的多样性指数最高,均为2.07;质量性状的多样性指数(0.85)低于数量性状,花瓣颜色的多样性指数最高,为1.87。相关性及主成分分析表明,呈极显著和显著相关的性状分别有111对和39对,9个主成分的累计贡献率达72.691%,矮型、花型、瓣型、萼片数量、花径、花瓣数量、花瓣宽等是影响观赏桃表型的主要性状。基于种质间性状的遗传差异,当遗传距离为6.5时将参试材料分为11个类群,其遗传聚类与株型、花型、瓣型、花瓣颜色、花药颜色、花枝颜色、叶片颜色等性状关系密切,根据聚类结果,筛选出18份优异种质资源。综上,106份观赏桃种质资源的主要表型性状表现出丰富的遗传多样性。

关键词：观赏桃表型性状遗传多样性主成分分析聚类分析优异种质

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绿色金融与重污染企业出口技术复杂度研究

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经济研究导刊 2024年第6期 66-70页

作者：胡丁言沙姣蔺应宝云南大学经济学院昆明650500

采用DID与PSM-DID的方法,以《绿色信贷指引》(以下简称《指引》)为政策评估对象研究发现,绿色金融对重污染企业出口技术复杂度有抑制作用。说明在《指引》实施后的一段时间内,重污染企业普遍出现了“逃避效应”,通过降低自身研发支出,... 详细信息

采用DID与PSM-DID的方法,以《绿色信贷指引》(以下简称《指引》)为政策评估对象研究发现,绿色金融对重污染企业出口技术复杂度有抑制作用。说明在《指引》实施后的一段时间内,重污染企业普遍出现了“逃避效应”,通过降低自身研发支出,将研发资金用以应对资金流问题。机制方面,企业绩效的降低是绿色金融作用于出口技术复杂度的机制之一;绿色金融对小规模企业、非国有企业出口技术复杂度影响更大;地区市场化程度越高,绿色金融对重污染企业出口技术复杂度的降低作用越小。

关键词：绿色金融出口技术复杂度 PSM-DID

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1例圣海伦军团菌合并肺炎克雷伯菌致肺脓肿治疗药学实践

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中国临床药学杂志 2024年第7期33卷 540-542页

作者：覃禹毛晓丽韦东晓黄姣柳州市人民医院药学部柳州545006 柳州市社会福利医院药学部柳州545005 柳州市柳江区中医医院药学部柳州545100

报道1例临床药师参与圣海伦军团菌合并肺炎克雷伯菌致肺脓肿的抗感染治疗过程,从临床药师角度出发,探讨社区获得性肺炎继发肺脓肿时的抗感染方案,以及治疗圣海伦军团菌合并肺炎克雷伯菌致肺脓肿抗菌药物的选择,为患者制定个体化治疗方案... 详细信息

报道1例临床药师参与圣海伦军团菌合并肺炎克雷伯菌致肺脓肿的抗感染治疗过程,从临床药师角度出发,探讨社区获得性肺炎继发肺脓肿时的抗感染方案,以及治疗圣海伦军团菌合并肺炎克雷伯菌致肺脓肿抗菌药物的选择,为患者制定个体化治疗方案,减少不必要的抗菌药物联合使用,最终取得满意的临床疗效。

关键词：圣海伦军团菌肺炎克雷伯菌肺脓肿

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导电聚苯胺纳米管制备及应用的研究进展

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胶体与聚合物 2024年第2期42卷 91-95页

作者：焦盛清王延敏张凯山东科技大学材料科学与工程学院高分子与材料化学系山东青岛266590

本文系统地综述了聚苯胺纳米管的研究进展,详细地梳理了聚苯胺纳米管的制备方法,包括硬模板法、软模板法、无模板法、界面聚合法、电化学聚合法、磁场诱导聚合法等,概述了聚苯胺纳米管在超级电容器、污水处理、生物医药、传感器等领域... 详细信息

本文系统地综述了聚苯胺纳米管的研究进展,详细地梳理了聚苯胺纳米管的制备方法,包括硬模板法、软模板法、无模板法、界面聚合法、电化学聚合法、磁场诱导聚合法等,概述了聚苯胺纳米管在超级电容器、污水处理、生物医药、传感器等领域的应用。

关键词：聚苯胺纳米管制备方法应用

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基于达标理论的阶段性护理联合认知能力干预在老年脑卒中患者中的应用效果

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河南医学研究 2024年第6期33卷 1146-1149页

作者：焦瑞娟肖铮铮刘益丽河南科技大学第一附属医院急诊重症监护室河南洛阳471003 河南科技大学第一附属医院神经外科河南洛阳471003

目的基于达标理论探讨阶段性护理联合认知能力干预在老年脑卒中患者中的应用效果。方法选取2020年5月至2022年12月在河南科技大学第一附属医院治疗的106例老年脑卒中患者作为研究对象。采取随机数字表法将患者分为两组,对照组接受常规护... 详细信息

目的基于达标理论探讨阶段性护理联合认知能力干预在老年脑卒中患者中的应用效果。方法选取2020年5月至2022年12月在河南科技大学第一附属医院治疗的106例老年脑卒中患者作为研究对象。采取随机数字表法将患者分为两组,对照组接受常规护理,研究组在常规护理基础上接受基于达标理论的阶段性护理联合认知能力干预。比较两组干预后的护理依从性、日常生活能力、吞咽功能及肺部感染情况。结果研究组的护理依从性(90.57%)高于对照组(69.81%)(P<0.05);两组护理后日常生活能力量表(ADL)评分均高于护理前(P<0.05),且研究组护理后ADL评分高于对照组(P<0.05);研究组吞咽功能的临床疗效(94.34%)高于对照组(81.13%)(P<0.05);研究组肺部感染率(5.66%)低于对照组(20.75%)(P<0.05)。结论基于达标理论的阶段性护理联合认知能力干预可有效提高老年脑卒中患者护理依从性、生活自理能力及吞咽功能,且降低患者的肺部感染率。

关键词：达标理论阶段性护理认知能力干预脑卒中

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