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High-quality Development Path of Graduate Education in Aquaculture Discipline:A Case Study of Guangdong Ocean University

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Asian Agricultural Research 2024年第9期16卷 41-44页

作者： Huanying PANG Miao XIE Shuanghu CAI Yucong HUANG jichang jian College of Fisheries Guangdong Ocean UniversityZhanjiang 524088China National Experimental Teaching Demonstration Center for Aquatic Science and Technology Zhanjiang 524088China

Aquaculture is a discipline system that focuses on exploring the growth,development,reproduction,aquaculture,and resources of aquatic animals and plants,and their complex *** the tide of the"high-quality development"strategy,the aquaculture discipline is also facing new opportunities and challenges for transformation,upgrading,and deepening ***,exploring and practicing an effective path for the high-quality development of graduate education in aquaculture is not only the key to promoting the transformation of graduate education in aquaculture from scale expansion to quality improvement,but also has immeasurable value for implementing the strategy on developing a quality workforce and the strategy of scientific and technological *** high-quality development of graduate education in aquaculture can be promoted from the following aspects:optimizing and improving the construction of the graduate education system,focusing on enhancing the quality of high-level talent cultivation,strengthening the overall strength of the graduate supervisor team,actively promoting the adjustment and upgrading of the disciplinary and professional structure,strengthening the construction of resource platforms and deepening the implementation of collaborative education mechanisms,and continuously expanding and deepening the new pattern of international exchange and *** the comprehensive promotion of the above paths,the aim is to fully build a model for the improvement and governance of graduate education quality.

关键词： Aquaculture Graduate education High-quality development

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Construction of Molecular Biology and Experiment Case Library for Graduate Students

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Asian Agricultural Research 2024年第8期16卷 47-49页

作者： Huanying PANG Miao XIE Shuanghu CAI Yu HUANG Yucong HUANG jichang jian Fisheries College Guangdong Ocean UniversityZhanjiang 524088China National Fisheries Science and Technology Experimental Teaching Demonstration Center Zhanjiang 524088China

Molecular Biology and Experiment is considered fundamental for graduate students specializing in aquaculture at Guangdong Ocean *** discipline focuses on the examination of the structure and function of macromolecules,including proteins and nucleic ***,it elucidates biological phenomena and principles at the molecular level,making it an essential foundational course for students pursuing various biology *** a foundational course for the basic application of aquaculture,Molecular Biology and Experiment requires guidance through numerous examples and ***,there are several challenges to address in developing the case ***,a case library has been established to meet the course requirements of Molecular Biology and Experiment for modern graduate students,with the central goal of reforming the educational model of higher education institutions and enhancing the effectiveness and quality of talent *** strategy is designed to nurture highly skilled professionals who can address the current needs of the industry.

关键词： Case library Molecular biology and experiment Aquaculture major

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单细胞转录组测序技术在水产养殖领域的应用

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广东海洋大学学报 2024年第2期44卷 130-138页

作者：张志强简纪常广东海洋大学水产学院/广东省水产动物病害防控及健康养殖重点实验室广东湛江524088

单细胞转录组测序技术可揭示不同组织细胞间和同一组织不同细胞间的异质性,已大量用于模式物种研究,但在水产养殖物种中的应用则处于起步阶段。综述单细胞转录组测序技术在水产养殖物种的人工繁殖、良种选育和病害防控相关研究中的应用... 详细信息

单细胞转录组测序技术可揭示不同组织细胞间和同一组织不同细胞间的异质性,已大量用于模式物种研究,但在水产养殖物种中的应用则处于起步阶段。综述单细胞转录组测序技术在水产养殖物种的人工繁殖、良种选育和病害防控相关研究中的应用,指出其在应用过程中存在样本采集、单细胞分离、数据分析方面的困难,并提出相应的解决举措,展望其在水产养殖领域内应用的发展前景,为促进单细胞转录组测序技术在水产养殖领域的广泛应用提供参考。

关键词：单细胞转录组测序技术水产养殖应用进展

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红笛鲷免疫器官发育组织学观察

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广东海洋大学学报 2024年第2期44卷 124-129页

作者：赖钰秋李珠蔡双虎简纪常广东海洋大学水产学院/广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室广东湛江524088

【目的】研究红笛鲷(Lutjanus sanguineus)免疫器官发育,为其健康养殖和疾病预防提供理论基础。【方法】从红笛鲷卵出膜开始取样,至出膜62 d,通过石蜡连续切片,H-E染色,进行红笛鲷3个主要免疫器官胸腺、头肾、脾脏发育的组织学研究。【... 详细信息

【目的】研究红笛鲷(Lutjanus sanguineus)免疫器官发育,为其健康养殖和疾病预防提供理论基础。【方法】从红笛鲷卵出膜开始取样,至出膜62 d,通过石蜡连续切片,H-E染色,进行红笛鲷3个主要免疫器官胸腺、头肾、脾脏发育的组织学研究。【结果与结论】红笛鲷出膜1 d时出现前肾,3 d肾管之间可见造血干细胞;出膜18 d,胸腺和头肾间出现细胞桥,头肾淋巴化;出膜62 d,肾小球仍存在于头肾中,表明头肾既是淋巴器官也是泌尿器官。红笛鲷出膜8 d时出现脾脏原基和红细胞发育;出膜22 d时观察到淋巴细胞;出膜24 d时淋巴细胞显著变多。胸腺是最后一个出现的器官,红笛鲷出膜12 d时出现胸腺原基;15 d时发现胸腺淋巴化。

关键词：红笛鲷胸腺头肾脾脏组织学

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多纹钱蝶鱼溃疡病病原的分离鉴定及药敏试验

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大连海洋大学学报 2024年第3期39卷 392-401页

作者：阙莉文杨林狄涂祖豪蔡双虎黄郁葱简纪常广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088

为研究2023年广西壮族自治区钦州湾网箱养殖多纹钱蝶鱼(Selenotoca multifasciata)发生溃疡病的原因,从患病多纹钱蝶鱼的肝、脾和肾组织中分离纯化出优势菌株,并对其进行形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rRNA与dnaJ基因序列测序分析... 详细信息

为研究2023年广西壮族自治区钦州湾网箱养殖多纹钱蝶鱼(Selenotoca multifasciata)发生溃疡病的原因,从患病多纹钱蝶鱼的肝、脾和肾组织中分离纯化出优势菌株,并对其进行形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rRNA与dnaJ基因序列测序分析、毒力基因检测、人工感染试验及药敏试验。结果表明:分离获得的优势菌在TCBS平板上形成黄色、圆形的光滑菌落,在TSA平板上形成乳白色微凸圆润菌落;生理生化特征分析显示,菌株为β溶血的革兰氏阴性菌,可发酵葡萄糖、蔗糖、甘露糖和阿拉伯糖,V-P试验呈阳性;基于16S rRNA和dnaJ基因序列构建的系统发育树显示,3株优势菌均与鳗弧菌(Vibrio anguillarum)聚为一支,综合鉴定表明菌株QZ991、QZ992和QZ993均为鳗弧菌;毒力基因检测显示,3株优势菌均携带virA、vah1、virC、empA、angM、flaA和ompU 7种毒力基因;人工感染试验显示,QZ991、QZ992和QZ993对多纹钱蝶鱼的半致死浓度(LD_(50))分别为5.10×10^(5)、4.33×10^(5)、2.45×10^(6)CFU/mL;药敏试验显示,3株优势菌均对多粘菌素B、庆大霉素、四环素类、喹诺酮类和多数头孢烯类等多种抗菌药物敏感;组织病理切片观察发现,患病多纹钱蝶鱼多脏器发生了不同程度的损伤,主要表现为充血、出血、坏死和炎性细胞浸润等。研究表明,鳗弧菌为广西钦州湾地区多纹钱蝶鱼溃疡病的病原,对多纹钱蝶鱼具有较强的致病性,并具有一定的耐药性,建议交替使用水产用多西环素和恩诺沙星进行治疗。

关键词：多纹钱蝶鱼鳗弧菌分离鉴定毒力基因药敏试验

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草鱼miR-1260对鱼淋巴囊肿病毒中国株复制的调控作用

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广东海洋大学学报 2024年第3期44卷 25-33页

作者：马嘉霖战盈瑾周杰黄鉴涛闫秀英简纪常广东海洋大学水产学院/广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室/水产经济动物病害控制广东普通高校重点实验室广东湛江524088

【目的】鉴定草鱼(Ctenopharyngodon idella)miR-1260(cid-miR-1260),分析cid-miR-1260在鱼淋巴囊肿病毒中国株(Lymphocystis disease virus China,LCDV-cn)感染草鱼卵巢细胞系(Grass carp ovary cells,GCO)过程中的时序表达特性,揭示cid-miR-1260对其靶基因znf574和LCDV-cn复制的调控作用。【方法】制备LCDV-cn感染的GCO细胞,通过茎环RT-PCR和测序鉴定cid-miR-1260;采用定量PCR检测cid-miR-1260在LCDV-cn感染GCO过程中的时序表达;应用生物信息学方法预测cid-miR-1260的靶基因,并用双荧光素酶报告基因系统验证靶基因;通过转染cid-miR-1260 mimic和cid-miR-1260 inhibitor使cid-miR-1260过表达和抑制表达,并用定量PCR检测cid-miR-1260、靶基因znf574、LCDV-cn mcp基因的表达;应用Reed-Muench法测定LCDV-cn在GCO细胞中的滴度。【结果】cid-miR-1260与其他已知miR-1260仅有一个碱基差异,且cid-miR-1260在LCDV-cn感染GCO过程中呈先上升后下降的表达变化,72 h时表达量最高(P<0.05);生物信息学分析表明,znf574为cid-miR-1260的靶基因;重组质粒pmirGLO-znf574-WT与cid-miR-1260 mimic共转染后,荧光素酶活性显著降低(P<0.05),证实znf574为cid-miR-1260的靶基因;cid-miR-1260过表达后,靶基因znf574的表达显著下降(P<0.05),LCDV-cn mcp的表达和LCDV-cn在GCO细胞中的滴度显著上升(P<0.05);抑制cid-miR-1260表达后,靶基因znf574的表达量显著上升(P<0.05),LCDV-cn mcp的表达量和LCDV-cn在GCO细胞中的滴度显著下降(P<0.05)。【结论】LCDV-cn感染GCO细胞后,cid-miR-1260的表达显著上调;在LCDV-cn感染中,cid-miR-1260对其靶基因znf574的表达起负调控作用,且cid-miR-1260表达与LCDV-cn的复制呈正相关,起促LCDV-cn感染作用,而锌指蛋白ZNF574具有抗LCDV-cn作用。本研究为淋巴囊肿病的防治提供新的依据和思路。

关键词：鱼淋巴囊肿病毒中国株草鱼卵巢细胞系 cid-miR-1260 锌指蛋白基因znf574 病毒复制

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一株卵形鲳鲹肠道源粪肠球菌的分离鉴定与生物学特性研究

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广东农业科学 2024年第7期51卷 47-56页

作者：张霄李一喻大鹏黄瑜王蓓简纪常蔡佳广东海洋大学水产学院/广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室/广东省水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088 广西科学院/广西水产生物技术与现代生态养殖重点实验室广西南宁530007

【目的】近年来鱼源益生菌在水产养殖中的应用越来越广泛,然而卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)源的益生菌鲜有报道。从卵形鲳鲹中分离潜在益生菌并对其生物学特性进行分析,为该菌株在卵形鲳鲹中的应用提供理论基础。【方法】无菌采集健康... 详细信息

【目的】近年来鱼源益生菌在水产养殖中的应用越来越广泛,然而卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)源的益生菌鲜有报道。从卵形鲳鲹中分离潜在益生菌并对其生物学特性进行分析,为该菌株在卵形鲳鲹中的应用提供理论基础。【方法】无菌采集健康卵形鲳鲹肠道内容物,进行细菌分离与鉴定;对典型菌落做形态观察、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因序列分析、药敏试验、耐盐能力试验、产酸能力及生长曲线测定和毒力基因鉴定。【结果】根据分离菌株的形态特征、革兰染色、生化特性和16S rRNA基因测序结果比对,分离菌株与粪肠球菌(Enterococcus faecalis)相似度达100%,确定其为粪肠球菌。该菌株菌落呈淡灰白色,为革兰氏阳性球菌,七叶苷、纤维二塘、麦芽糖、甘露醇、水杨苷等生化检测结果均显示阳性。药敏试验结果表明,分离菌株对哌拉西林、多粘菌素B、青霉素、复方新诺明、苯唑西林等药物呈现出不同程度的耐药性;对环丙沙星、麦迪霉素、头孢曲松呈中等敏感,对万古霉素、头孢哌酮、氧氟沙星等11种药物敏感。分离菌株可在0%~8%NaCl浓度下生长,具有一定耐盐性。产酸能力和生长曲线测定结果表明,随着菌株大量繁殖,菌液pH值快速下降,其产酸能力增强。毒力基因鉴定结果表明,分离菌株包含efaA、agg、as、fsrA 4种毒力基因。【结论】该研究成功从卵形鲳鲹肠道内分离到一株潜在益生菌菌株,鉴定为粪肠球菌。该菌株具有良好的耐盐和产酸能力,并含有与肠道黏附相关的毒力基因,可为该菌株的后续应用奠定基础。

关键词：卵形鲳鲹粪肠球菌益生菌生化特性毒力基因耐盐产酸能力

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The Streptococcus agalactiae Ribose Binding Protein B (RbsB) Mediates Quorum Sensing Signal Uptake via Interaction with Autoinducer-2 Signals

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Journal of Ocean University of China 2021年第5期20卷 1285-1295页

作者： FAN Bolin PAN Lixia WANG Zhongliang WANGKAHART Eakapol HUANG Yuchong YANG Dengfeng jian jichang HUANG Yu WANG Bei College of Fishery Guangdong Ocean UniversityGuangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic AnimalKey Laboratory of Control for Disease of Aquatic Animals of Guangdong Higher Education InstitutesZhanjiang 524088China National Engineering Research Center for Non-Food Biorefinery State Key Laboratory of Non-Food Biomass and Enzyme TechnologyGuangxi Academy of SciencesNanning 536000China Key Laboratory of Experimental Marine Biology Institute of OceanologyChinese Academy of SciencesQingdao 266071China Laboratory for Marine Biology and Biotechnology Qingdao National Laboratory for Marine Science and Techno-logyQingdao 266237China Research Unit of Excellence for Tropical Fisheries and Technology Division of FisheriesDepartment of Agricultural TechnologyFaculty of TechnologyMahasarakham UniversityKantarawichaiMahasarakhamThailand Guangxi Key Laboratory of Marine Natural Products and Combinatorial Biosynthesis Chemistry Guangxi Beibu Gulf Marine Research CenterGuangxi Academy of SciencesNanning 536000China

Understanding aquatic pathogen in sediments or aquacultural water is crucial to protect public health from soilborne and waterborne *** sensing(QS)was increasingly reported in biological wastewater treatment processes because of their inherent roles in biofilm development,bacterial aggregation and so *** widely QS signals was Antoinducer-2(AI-2),primarily involved to allow the possibility of interspecies ***,the cellular components that mediate the response of Streptococcus agalactiae to AI-2 have not been fully *** of the complete genome sequence of *** indi-cated that its RbsB protein has similarity to Escherichia coli LsrB and Aggregatibacter actinomycetemcomitans RbsB proteins that bind *** hypothesized that RbsB protein mediates quorum sensing signal uptake via interaction with *** evaluate the regulatory effect of RbsB on QS system,the recombinant plasmid pGEX-6p-1-RbsB was constructed and RbsB protein was purified with *** further elucidate the role of RbsB protein binding to DPD(AI-2 precursor dihydroxypentanedione),the systemati-cally throughput circular dichroism(CD)spectroscopy,isothermal titration calorimetry200(ITC200)and molecular docking methods were *** high expression of soluble RbsB protein with molecular weight of 33 kDa was *** thermodynamics results(ΔH<0,ΔS<0,ΔG<0)with ITC determination indicated that the binding process between DPD and RbsB was exothermic and spontaneous,with hydrogen bonds and van der Waals forces as the main binding ***,DPD can be more easily combined with RbsB in a dose-dependent manner,suggesting that RbsB was changed in the microenvironment of DPD when the DPD concentration was between 0.8-1.0mmolL−1 and reaching the maximum binding *** to molecular docking,3 hydrophobic residues involved in DPD and RbsB protein stable binding were be found,and also hydrogen bonding plays a key role in the formation of th

关键词： Streptococcus agalactiae RbsB protein circular dichroism(CD)spectroscopy isothermal titration calorimetry200(ITC200) molecular docking

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斜带石斑鱼源致病溶藻弧菌的分离鉴定及病理性分析

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广东农业科学 2024年第7期51卷 91-104页

作者：史磊罗伟杰黄瑜雷美华喻大鹏简纪常黄浦江广东海洋大学水产学院/广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室/广东省水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088 深圳市渔业发展研究中心广东深圳518067 广东海洋大学深圳研究院广东深圳518120

【目的】2023年10月,深圳市某养殖基地斜带石斑鱼出现皮肤溃烂、皮下出血及肠炎等症状,明确引发本次斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)突发性死亡的致病菌种类及其生物学特性,以筛选出有效抑制病原菌的消毒剂,为溶藻弧菌(Vibrio alginol... 详细信息

【目的】2023年10月,深圳市某养殖基地斜带石斑鱼出现皮肤溃烂、皮下出血及肠炎等症状,明确引发本次斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)突发性死亡的致病菌种类及其生物学特性,以筛选出有效抑制病原菌的消毒剂,为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)感染斜带石斑鱼的科学防治提供理论指导。【方法】利用平板划线法,从患病濒死斜带石斑鱼的病灶组织中分离病原菌,对病原菌形态特征、生理生化特性、系统进化树、毒力基因和耐药基因及药物敏感性进行研究,并对其进行回归感染试验。【结果】从患病斜带石斑鱼组织中分离得到一株溶藻弧菌,命名为菌株SZGP226;系统进化树分析结果显示,该菌与溶藻弧菌HH101307、IB1、Xmb015聚为一支,序列相似性达99.72%;菌株SZGP226可以分解蔗糖、甘露醇、葡萄糖、尿素,氧化酶活性及V-P等生理生化指标鉴定为阳性;同时携带tlh、toxR、ctsA、sto和vpi 5种毒力基因。药敏结果显示,菌株SZGP226耐受氨苄西林、苯唑西林等9种抗生素耐药,并携带qnrB、fl oR、tetC、tetM、qnrD、gyrA、Sul1、SHV和Oxa-24等9种耐药基因。消毒剂筛选结果显示,氢氧化钠对菌株SZGP226的杀菌效果最好、最小抑菌浓度(MIC)为8 mg/mL。回归感染试验表明,菌株SZGP226对斜带石斑鱼具有强致病性,半致死浓度(LC_(50))为1.63×10^(7)CFU/mL,可引起斜带石斑鱼肝脏、肾脏和脾脏发生明显病理性损伤。【结论】溶藻弧菌是引起本次斜带石斑鱼突发性死亡的病原菌,其致病基因包括tlh、toxR、ctsA、sto和vpi,LC_(50)为1.63×10^(7)CFU/mL。氢氧化钠对菌株SZGP226的杀菌效果最好,在养殖开展前可选择氢氧化钠(3 mg/mL)对养殖环境进行消杀清理。

关键词：斜带石斑鱼溶藻弧菌 16S rRNA 药敏试验基因检测

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大口黑鲈源豚鼠气单胞菌的分离鉴定及病理性分析

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广东农业科学 2024年第7期51卷 66-78页

作者：罗伟杰史磊黄瑜雷美华喻大鹏简纪常黄浦江广东海洋大学水产学院/广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室/广东省水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524088 深圳市渔业发展研究中心广东深圳518067 广东海洋大学深圳研究院广东深圳518120

【目的】分析深汕特别合作区某鲈鱼养殖基地大口黑鲈(Micropterus salmoides)突发性死亡原因,探究其病原菌生物学特性,为大口黑鲈养殖中的疾病防控与诊治提供理论参考。【方法】从患病大口黑鲈肝脏、脾、肠等病灶组织中分离得到一株优势... 详细信息

【目的】分析深汕特别合作区某鲈鱼养殖基地大口黑鲈(Micropterus salmoides)突发性死亡原因,探究其病原菌生物学特性,为大口黑鲈养殖中的疾病防控与诊治提供理论参考。【方法】从患病大口黑鲈肝脏、脾、肠等病灶组织中分离得到一株优势菌,命名为SZNH-S20230817;开展形态学特征观察,生理生化特性鉴定,人工感染试验,药物敏感性测试,最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)测定,16S rRNA序列、耐药基因及毒力基因的鉴定,分析其耐药性和病理。【结果】菌株SZNH-S20230817的序列与豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)AP019195具有99.38%同源性;同时携带aer、act、lip和fl a 4个毒力基因;生化鉴定结果显示,该菌的吲哚、氧化酶、苯丙氨酸、甘露醇、木糖、精氨酸双水解酶和葡萄糖产酸等结果为阳性,确定菌株SZNH-S20230817为豚鼠气单胞菌。回归感染试验发现菌株SZNH-S20230817具有较强致病性,对大口黑鲈的半致死浓度(LC_(50))为1.39×10^(7)CFU/mL。药敏试验结果显示,该菌对头孢唑林、卡那霉素、四环素、万古霉素、氨苄西林和克林霉素等12种抗生素耐药,同时携带qnrS、catI、emrB、Sul1、rmtB等13种耐药基因。组织病理学分析表明,菌株SZNH-S20230817感染可引起鱼体脾脏细胞肿胀、游离、肠黏膜断裂破损、绒毛脱落、肾脏细胞坏死、炎症细胞浸润、肝脏细胞呈空泡化等。体外抑菌试验结果显示大黄和五倍子对该菌的MIC和MBC较低,其余7种中草药对该菌的抑菌能力较弱。【结论】豚鼠气单胞菌是引起本次大口黑鲈突发性死亡的病原菌,其同时携带aer、act、lip和fl a 4个毒力基因,对大口黑鲈的LC_(50)为1.39×10^(7)CFU/mL,对头孢唑林、卡那霉素、四环素等抗生素耐药。低剂量的大黄和五倍子能够有效抑制该菌生长,具备良好的预防和抑制效果。

关键词：大口黑鲈豚鼠气单胞菌 16S rRNA 药敏试验毒力基因组织病理

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