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Preparation of Polyclonal Antibody Against Swainsonine and Its Effects in Treatment of Oxytropis glabrapoisoned Rabbits

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Animal Husbandry and Feed Science 2014年第6期6卷 291-295,315页

作者： Chen Genyuan jia Qizhen Pan Yiwei jia shanling Wang Shuai Key Laboratory of Tarim Animal Husbandry Science and Technology Xin Jiang Production & Construction Corps College of Life Science Tarim University College of Animal Science Tarim University

This study was conducted to optimize immunization program to gain the serum against swainsonine （SW） with high titer and to analyze the effects of polychinal antibody in treatment of loco disease of rabbits. Eighteen rabbits were randomly separated into control group, poisoning group and curing group, with six rabbits in each group. Rabbits in poisoning group and curing group were fed 10 g/（kg ~ d） powder of Oxytropis glabra DC every morning for 70 d till the rabbits in poisoning group began to die. From the 21＇t to 24＇h d of O. glabra administration, each of the rabbits in curing group was injected with 1 mL of polyclonal anti- body against SW every day. Blood samples were collected before O. glabra challenge, and then once every 7 d for the serological and immunological evaluation of serum. The resuhs showed that the serum alkaline phosphatase （AKP） activity and SW content in poisoning groups were significantly higher than those in control group on the 7th d （P 〈0.05 ） ; the serum aspartate transaminase （AST） and lactate dehydrogenase （LDH） activity in poisoning groups were significantly higher than those in control group on the 14th d （P 〈 0.05 ）, while the serum ct - mannosidase （AMA） and rate of E-rosette formation in poisoning groups were signifi- cantly lower than those in control group （ P 〈 0.05 ） ; the serum blood urea nitrogen （BUN）, creatinine （ CRE ） and glucose （ GLU ） concentration in poisoning groups were significantly higher than those in control group on the 21＇t d （P 〈 0.05 ）. By injecting serum against swainsonine, the serum AKP, LDH, AST, alanine transaminase （ALT） activity and contents of BUN, CRE, GLU, SW were reduced and serum AMA and rate of E-rosette formation were increased in curing group, by comparing with those in poisoning group. These results in this experiment indicated that polyclonal antibody against SW had good value of preventing from O. glabra DC.

关键词： Oxytropis glabra DC Swainsonine Polyclonal antibody Treatment Rabbit

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家兔苦马豆素多克隆抗体的制备及其对小花棘豆中毒的治疗效果

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西北农业学报 2014年第1期23卷 23-29页

作者：陈根元贾琦珍潘伊微贾山岭王帅新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

采用合成的苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原免疫接种家兔,获得高效价的SW抗血清,分离纯化得到的家兔SW多克隆抗体,复制家兔小花棘豆中毒模型,用SW多克隆抗体治疗小花棘豆中毒家兔,通过检测血清生化指标和免疫学指标,评价SW多克隆抗体... 详细信息

采用合成的苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原免疫接种家兔,获得高效价的SW抗血清,分离纯化得到的家兔SW多克隆抗体,复制家兔小花棘豆中毒模型,用SW多克隆抗体治疗小花棘豆中毒家兔,通过检测血清生化指标和免疫学指标,评价SW多克隆抗体治疗家兔小花棘豆中毒的效果。将18只家兔随机分为对照组(6只)、攻毒组(6只)和攻毒治疗组(6只),攻毒组和攻毒治疗组按照10g/(kg·d)的剂量饲喂小花棘豆,攻毒组试验兔出现死亡时(第70天)停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW多克隆抗体,每只兔每天1mL,连续注射4d。以攻毒试验开始为第0天进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW质量浓度显著高于对照家兔(P<0.05);第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔(P<0.05),血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔(P<0.05);第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU浓度显著高于对照组家兔(P<0.05)。攻毒治疗组家兔注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性,BUN、CRE、GLU浓度和SW质量浓度较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E-玫瑰花环率显著上升。说明,SW多克隆抗体可有效治疗家兔小花棘豆中毒。

关键词：小花棘豆苦马豆素多克隆抗体治疗家兔

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新疆卡拉库尔羊Fas基因原核表达载体的构建及表达

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西北农业学报 2013年第6期22卷 6-9页

作者：贾山岭潘伊微潘辉贺艳艳李莲瑞塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

根据GenBank的羊Fas细胞凋亡因子序列设计1对特异性引物,将EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点引入到引物两端,同时加上保护性碱基。利用RT-PCR技术,从新疆卡拉库尔羊外周血淋巴细胞总RNA中扩增出特异性基因片段。将分离纯化后的PCR产物与pMD-18T载... 详细信息

根据GenBank的羊Fas细胞凋亡因子序列设计1对特异性引物,将EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点引入到引物两端,同时加上保护性碱基。利用RT-PCR技术,从新疆卡拉库尔羊外周血淋巴细胞总RNA中扩增出特异性基因片段。将分离纯化后的PCR产物与pMD-18T载体进行连接,利用双酶切反应与菌液PCR对阳性重组克隆进行鉴定筛选,然后进行序列测定。使用原核表达载体pET28a来完成Fas的定向克隆,成功构建重组融合表达质粒pET-28a-Fas,然后将质粒转化至*** BL21感受态,设置不同IPTG浓度和诱导温度,选择最佳的表达条件,然后初步纯化重组融合蛋白。结果表明,在pET28a表达载体中,Fas基因的插入方向和读码框均正确;同时Fas基因也完成在*** BL21融合表达的目的,融合蛋白分子质量为39.7ku。

关键词：卡拉库尔羊 Fas基因原核表达

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新疆卡拉库尔羊Fas基因重组蛋白包涵体的纯化及抗原性分析

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塔里木大学学报 2012年第4期24卷 48-52页

作者：潘伊微贾山岭潘辉贺艳艳李莲瑞塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

目的:为了探明Fas基因重组蛋白是否保留天然蛋白的抗原性,为下一步大量制备基础诊断、预防、控制、治疗试剂奠定基础。本实验将Fas基因与原核表达载体pET-28a成功构建了重组融合表达质粒pET-28a-Fas然后转化至***21(DE3)感受态当中,找... 详细信息

目的:为了探明Fas基因重组蛋白是否保留天然蛋白的抗原性,为下一步大量制备基础诊断、预防、控制、治疗试剂奠定基础。本实验将Fas基因与原核表达载体pET-28a成功构建了重组融合表达质粒pET-28a-Fas然后转化至***21(DE3)感受态当中,找到最佳表达条件,初步纯化了重组融合蛋白,通过对家兔免疫后的血清进行琼扩实验与蛋白质印迹实验分析其抗原性。结果表明,纯化后的包涵体有明显的条带,经测定融合蛋白分子量为39.7 KDa。结论:说明纯化效果好,优化融合蛋白表达量占菌体总蛋白的15.6%,并且证明Fas具有免疫原性和反应原性。

关键词：卡拉库尔羊 Fas基因包涵体抗原性分析

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红景天苷联合亚低温对大鼠脑缺血／再灌注损伤后神经细胞形态与功能的影响

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中国中西医结合急救杂志 2016年第1期23卷 66-70页

作者：杨文博董河刘陕岭蒋丽丽贾彦芳黄辉周赞宫青岛大学附属医院麻醉科山东青岛266003

目的探讨红景天苷联合亚低温对大鼠全脑缺血／再灌注（I／R）损伤后神经细胞形态和功能的影响及其作用机制。方法选择雄性Wistar大鼠150只，按随机数字表法分为假手术组、模型组、单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组、红景天苷联合... 详细信息

目的探讨红景天苷联合亚低温对大鼠全脑缺血／再灌注（I／R）损伤后神经细胞形态和功能的影响及其作用机制。方法选择雄性Wistar大鼠150只，按随机数字表法分为假手术组、模型组、单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组、红景天苷联合亚低温治疗组，每组30只。单纯红景天苷治疗组和红景天苷联合亚低温治疗组制模前7d于同一时间腹腔注射红景天苷10mg·kg-1·d-1，最后一次给药30rain后建立全脑缺血模型；假手术组、模型组、单纯亚低温治疗组制模前7d同一时间腹腔注射等量生理盐水。采用改良Pusinelli四动脉阻断法建立全脑缺血模型，缺血10min后实现再灌注；假手术组仅暴露双侧翼孔及游离颈总动脉，不凝闭椎动脉和夹闭颈总动脉。假手术组、模型组、单纯红景天苷治疗组保持肛温36．5℃；单纯亚低温治疗组和红景天苷联合亚低温治疗组大鼠迅速放入4℃环境使肛温降至32℃并维持2h。再灌注24h后观察各组大鼠神经功能缺损程度评分（NDS）、脑组织含水量及海马区脑组织细胞形态、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量。结果与假手术组比较，模型组NDS、SOD均明显降低[NDS（分）：50．70±1．64比76．70±1．34，SOD（U／mg）：55．14±9．07比122．10±10．16]，脑组织含水量、MDA均明显升高[脑含水量：（87．41±0．83）％比（78．30±0．75）％，MDA（nmol／mg）：5．96±0．28比3．59±0．20，均P〈0．05]。显微镜下观察到模型大鼠海马区细胞排列散乱，大量锥体细胞体积缩小，核固缩、深染及胞质嗜伊红，细胞间隙明显增大，胞质呈空泡样变，正常神经元数量显著减少；3个治疗组海马区细胞变性程度明显减轻。与模型组比较，单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组、红景天苷联合亚低温治疗组NDS、SOD均明显升高（NDS分别为59．00±1．72、60．40±1．51、66．40±1．51，SOD分别为84．22±8．88、83．58±8．39、104．16±8．81），脑组织含水量、MDA均明显降低[脑组织含水量分别为（84．56±0．42）％、（83．94±0．36）％、（80．78±0．31）％，MDA分别为5．03±0．22、4．99±0．28、4．58±0．25，均P〈0．05]，且以红景天苷联合亚低温治疗组变化程度较单纯红景天苷治疗组、单纯亚低温治疗组更显著[NDS（分）：66．40±1．51比59．00±1．72、60．40±1．51，脑组织含水量：（80．78±0．31）％比（84．56±0．42）％、（83．94±0.36）％，SOD（U／mg）：104．16±8．81比84．22±8．88、83．58±8．39，MDA（nmol／mg）：4．58±0．25比5．03±0．22、4．99±0．28，均P〈0．05]。结论红景天苷和亚低温对大鼠全脑I／R损伤均有保护作用，且二者联合保护作用更佳，其机制可能与抗自由基损伤有关。

关键词：缺血再灌注损伤,脑红景天苷亚低温氧化损伤氧自由基大鼠

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5例COVID-19危重病人应用无创呼吸机联合俯卧位通气治疗的护理

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护理研究 2020年第8期34卷 1469-1472页

作者：刘鑫徐珊玲贾政唐建华李成成董伟李波王朝虎万敏缪莎向明芳四川省肿瘤医院四川610041

总结5例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)危重病人应用无创呼吸机联合俯卧位通气治疗的护理。提示护理人员应加强俯卧位翻身前的准备、翻身过程中生命体征的观察、体位管理、并发症的预防、血气分析监测、无创通气护理等,护理过程中应注意防... 详细信息

总结5例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)危重病人应用无创呼吸机联合俯卧位通气治疗的护理。提示护理人员应加强俯卧位翻身前的准备、翻身过程中生命体征的观察、体位管理、并发症的预防、血气分析监测、无创通气护理等,护理过程中应注意防护,做好消毒隔离工作。

关键词：新型冠状病毒肺炎危重病人无创呼吸机俯卧位护理

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