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Preparation and Performance of Ternary Early Strength Agent and Quercetin Composite Cement Sealing Material

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Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science) 2025年第1期40卷 130-140页

作者： LIU jian CHEN Meiting ji Xiaoli XU chao WANG Chunmei Department of Safety Science and Engineering Anhui University of Science and TechnologyHuainan 232001China Key Laboratory of Mine Safety and High Efficient Mining Jointly Built by Province and Education Ministry Anhui University of Science and TechnologyHuainan 232001China Department of Chemical Engineering and Explosives Anhui University of Science and TechnologyHuainan 232001China

A ternary early-strengthening agent consisting of calcium formate+triethanolamine+lithium sulfate was compounded with quercetin to shorten the setting time of cementitious materials while ensuring their early *** optimum ratio of the three early-strengthening agents was determined as 0.5%calcium formate+0.04%triethanolamine+0.4%lithium sulfate by response surface *** effects of the ternary early-strengthening agent composed of calcium formate+triethanolamine(TEA)+lithium sulfate on cementitious pore sealing materials under the synergistic effect of quercetin were studied by means of the performance tests of compressive strength,fluidity,and setting time,and the microstructural characterizations of X-ray powder diffractometer(XRD),thermogravimetry(TG-DSC)and scanning electron microscopy(SEM).The study shows that the synergistic effect of ternary early-strengthening agent and quercetin forms a multi-performance composite admixture for cementitious *** best performance was obtained with the compounding scheme of 0.5%calcium formate+0.04%triethanolamine+0.4%lithium sulfate ternary early-strengthening agent and 0.05%*** compressive strength of 1,3,7,and 28 d are 94.8%,39.8%,42%,and 28%higher than those of the blank group,*** initial time and final setting time are 41 and 57 minutes,*** to the microscopic analysis,the network and fibrous C-S-H gels generated by ternary early-strengthening agents are attached to the surface promoted by quercetin,which forms skeleton support while thickening and solidifying the cement slurry,which enhances the early compressive strength of the cement-based materials.

关键词： sealing material ternary early-strengthening agent quercetin synergetic effect response surface methodology

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人红细胞带3蛋白胞质段的克隆及其表达

生物化学与生物物理进展 1999年第5期26卷 492-494页

作者：李至彭锋季朝能宦春雷张志鸿复旦大学生命科学学院立人实验室上海200433

人红细胞带３蛋白胞质段（ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｄｏｍａｉｎｏｆｂａｎｄ３，ｃｄｂ３）起着将膜与膜骨架、细胞内环境相联系的重要作用．以带３蛋白全长基因为模板，用ＰＣＲ方法扩增出ｃｄｂ３片段，克隆至ｐＲＳＥＴ表... 详细信息

人红细胞带３蛋白胞质段（ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｄｏｍａｉｎｏｆｂａｎｄ３，ｃｄｂ３）起着将膜与膜骨架、细胞内环境相联系的重要作用．以带３蛋白全长基因为模板，用ＰＣＲ方法扩增出ｃｄｂ３片段，克隆至ｐＲＳＥＴ表达质粒上，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）．转化菌经诱导表达出较高含量的ｃｄｂ３蛋白，纯化后，

关键词：带3蛋白胞质段质粒表达红细胞

通过定点诱变法研究耐热碱性磷酸酯酶的活性位点、耐热性和亲热性

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Acta Genetica Sinica 2000年第12期27卷 1100-1107页

作者：季朝能张冰姜涛盛小禹毛裕民复旦大学生命科学院遗传所

通过对耐热碱性磷酸酯酶TAPND27活性位点S（69）两侧的E（68）和S（70）的定点突变，得到了3个突变子E68S、S70A和E68SS70A。在蛋白纯化的基础上测定了3个变体的一些酶学性质，与TAPND27相比，E68S的比活力上升了8倍，Tm下降了3℃，最... 详细信息

通过对耐热碱性磷酸酯酶TAPND27活性位点S（69）两侧的E（68）和S（70）的定点突变，得到了3个突变子E68S、S70A和E68SS70A。在蛋白纯化的基础上测定了3个变体的一些酶学性质，与TAPND27相比，E68S的比活力上升了8倍，Tm下降了3℃，最适反应温度上升了20℃；S70A的比活力上升了1部，Tm下降了2℃，最适反应温度上升了5℃；E68SS70A的比活力下降了50%，Tm下降了19℃，最适反应温度上升了5℃。说明活性位点S（69）两侧的氨基酸残基不仅和酶蛋白的催化能力，而且与酶的热稳定性和亲热性有很大的关系。为提高该酶的比活力和研究其热稳定性及亲热性提供了突变方向。

关键词：耐热碱性磷酸酯酶定点诱变热稳定性亲热性

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人类新基因SEC15L3 cDNA的鉴定

复旦学报（自然科学版） 2008年第3期47卷 341-346,353页

作者：方伟群刘凡郑丹顾少华季朝能复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200433

从人胎脑cDNA文库中克隆到1条新的Sec15基因SEC15L3 cDNA,比已报道的SEC15L1(NM-019053)少4个外显子,并已提交GenBank,登录号为***-PCR和荧光定量PCR实验显示该基因在胰腺、脾脏、胸腺、前列腺和睾丸几个组织中表达量较高,而且与SEC15L... 详细信息

从人胎脑cDNA文库中克隆到1条新的Sec15基因SEC15L3 cDNA,比已报道的SEC15L1(NM-019053)少4个外显子,并已提交GenBank,登录号为***-PCR和荧光定量PCR实验显示该基因在胰腺、脾脏、胸腺、前列腺和睾丸几个组织中表达量较高,而且与SEC15L1的组织表达谱有明显差异.生物信息学方法模拟SEC15L3蛋白,并与SEC15L1比较,结果显示两者有不同的高级结构,已推测出两者可能是不同ex-ocyst的成分,并且在不同组织中行使不同功能.

关键词： Sec15 Sec15样蛋白3 exocyst 胞吐作用

耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)的表达、纯化和性质测定

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复旦学报（自然科学版） 2000年第3期39卷 297-301,307页

作者：季朝能盛小禹白晓阳姜涛毛裕民复旦大学遗传学研究所上海200433 复旦大学生命科学学院复旦大学遗传工程国家重点实验室

通过分离纯化和酶学性质测定 ,确定耐热碱性磷酸酯酶 (TAPND2 7)为八聚体 ,最适反应温度为 6 5℃ .在 99℃保温 30min仍保留 49 4%的活性 ,在质量分数为 5 %的SDS和Tween2 0体系中 ,依然有 70 %以上的酶活性 ,并且有很宽的pH稳定范围 .... 详细信息

通过分离纯化和酶学性质测定 ,确定耐热碱性磷酸酯酶 (TAPND2 7)为八聚体 ,最适反应温度为 6 5℃ .在 99℃保温 30min仍保留 49 4%的活性 ,在质量分数为 5 %的SDS和Tween2 0体系中 ,依然有 70 %以上的酶活性 ,并且有很宽的pH稳定范围 .这表明TAPND2 7适合在高温条件和高浓度去污剂的体系中应用 .

关键词：热稳定性表达纯化 TAPND27 蛋白质

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假激酶结构域的结构与功能

生命的化学 2005年第4期25卷 294-296页

作者：邹先琼陈春靖季朝能毛裕民复旦大学生命科学学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

近年来在多种蛋白质结构中发现一个特定的结构域,假激酶结构域。假激酶结构域由于缺少一些对于激酶催化活性绝对必要的氨基酸残基而不具有激酶催化活性。以往同源建模的结果表明,一些假激酶结构域与激酶催化结构域的结构相似。已有的研... 详细信息

近年来在多种蛋白质结构中发现一个特定的结构域,假激酶结构域。假激酶结构域由于缺少一些对于激酶催化活性绝对必要的氨基酸残基而不具有激酶催化活性。以往同源建模的结果表明,一些假激酶结构域与激酶催化结构域的结构相似。已有的研究表明,蛋白质假激酶结构域一般可通过与激酶催化结构域相互作用而调节激酶的活性。

关键词：蛋白激酶假激酶结构域

信号肽去除的耐热碱性磷酸酯酶FD-TAP在大肠杆菌中的亚克隆和高表达

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生物工程学报 2000年第6期16卷 690-694页

作者：季朝能白晓阳盛小禹张冰毛裕民复旦大学生命科学院遗传工程国家重点实验室上海200433

通过计算机辅助分析 ,发现在耐热碱性磷酸酯酶 (简称FD TAP)的N端存在 2 6个氨基酸的信号肽序列。但一般信号肽切点并非是完全专一的 ,所以利用基因工程手段将FD TAP的N端分别缺失 2 4、2 5、2 6和 2 7个氨基酸 ,得到了N端分别缺失 2 4... 详细信息

通过计算机辅助分析 ,发现在耐热碱性磷酸酯酶 (简称FD TAP)的N端存在 2 6个氨基酸的信号肽序列。但一般信号肽切点并非是完全专一的 ,所以利用基因工程手段将FD TAP的N端分别缺失 2 4、2 5、2 6和 2 7个氨基酸 ,得到了N端分别缺失 2 4、2 5、2 6和 2 7个氨基酸的克隆子 pTAPND2 4、pTAPND2 5、pTAPND2 6和 pTAPND2 7。考虑到这样的克隆子其翻译起始区所形成的能量较低结构稳定的二级结构可能阻碍基因的表达 ,所以在保证氨基酸序列不变的前提下另外设计了 4个引物 ,得到了二级结构能量大大提高的 4个克隆子pTAPND2 4C、pTAP ND2 5C、pTAPND2 6C和 pTAPND2 7C。结果表明pTAPND2 4、pTAPND2 5和 pTAPND2 7没有表达 ;pTAPND2 6和pTAPND2 4C的表达量较低 ,pTAPND2 5C、pTAPND2 6C和pTAPND2 7C的表达量较高。通过测定 pTAPND2 5C、pTAPND2 6C和pTAPND2 7C的表达蛋白TAPND2 5、TAPND2 6和TAPND2 7的比活和热稳定性 ,发现无论比活和热稳定性TAPND2 7明显比TAPND2 5和TAPND2 6高且比野生型FD TAP略高。

关键词：耐热碱性磷酸酯酶信号肽表达

FHC和Bim相互作用抵抗细胞凋亡(英文)

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生物化学与生物物理进展 2011年第9期38卷 859-865页

作者：邹冠玉季朝能沈琪薛京伦陈金中复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433

FHC和Bim参与细胞铁代谢和由ROS引起的细胞凋亡过程.但是其具体的分子机制还未阐明.用pLexA-Bim L作为诱饵,筛选了一个基于pBD42AD的胎脑cDNA文库,发现FHC是一个新的Bim相互作用蛋白.酵母杂交实验发现Bim的相互作用片段为BH3功能域.上... 详细信息

FHC和Bim参与细胞铁代谢和由ROS引起的细胞凋亡过程.但是其具体的分子机制还未阐明.用pLexA-Bim L作为诱饵,筛选了一个基于pBD42AD的胎脑cDNA文库,发现FHC是一个新的Bim相互作用蛋白.酵母杂交实验发现Bim的相互作用片段为BH3功能域.上述相互作用进一步用免疫共沉淀和荧光共定位得以证实.在HEK293细胞过表达FHC可以减轻由Bim过表达或ROS所引起的细胞凋亡,而用FHC特异性siRNA调低FHC表达,则增加Bim过表达或ROS引起的细胞凋亡.研究首次报道了Bim和FHC的相互作用以及对细胞凋亡和氧化应激的影响,为进一步阐明FHC和Bim参与凋亡和ROS反应提供了新的线索.

关键词：铁蛋白重链FHC Bim 氧化应激细胞凋亡

金黄色葡萄球菌低分子质量双特异性磷酸酶sL MWDSP的表达、纯化及性质

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复旦学报（自然科学版） 2006年第3期45卷 293-297页

作者：郭伟伟倪晓华李继喜郑眉顾星季朝能华东师范大学生命科学学院生物化学及分子生物学实验室上海200062 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

双特异性磷酸酶是酪氨酸磷酸酶家族中的一员,它参与生物体内信号转导、生长调控、新陈代谢等许多基本的生理活动.金黄色葡萄球菌的低分子质量双特异性磷酸酶sLMWDSP(low molecular weight dual-specificityphosphatase,Staphylococcus a... 详细信息

双特异性磷酸酶是酪氨酸磷酸酶家族中的一员,它参与生物体内信号转导、生长调控、新陈代谢等许多基本的生理活动.金黄色葡萄球菌的低分子质量双特异性磷酸酶sLMWDSP(low molecular weight dual-specificityphosphatase,Staphylococcus aureus)基因从金黄色葡萄球菌cDNA库中克隆,并在大肠杆菌中表达.高纯度的sLMWDSP用亲和层析的方法纯化得到.酶学性质研究表明:sLMWDSP催化对硝基苯磷酸(-pnitrophenyl phos-phate,pNPP)水解反应的最适pH值为6.7,最适温度为35℃,且该酶的活性不依赖于金属离子.磷酸酶通用抑制剂岗田酸(Okadaic acid)、EDTA对sLMWDSP几乎没有抑制作用,但钒酸钠能明显地抑制该酶的活性.sLMWDSP对pSer/Thr以及pTyr的寡肽均有去磷酸化作用,这说明sLMWDSP是一个新的双特异性磷酸酶.

关键词：双特异性磷酸酶对硝基苯磷酸金黄色葡萄球菌磷酸酶活性