检索结果-南通市图书馆

山东医药 2014年第19期54卷 4-7页

作者：宋莹仇秦威贺智敏谷依学广州医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所广州510095

目的观察顺铂(cDDP)对小分子干扰RnA(si.nA)抑制切除修复交叉互补基因1(ERCC1)基因表达的A549细胞增殖、凋亡影响,并探讨cDDP对si.nA抑制ERCC1基因表达的A549细胞化疗敏感性。方法根据ERCC1基因序列,设计合成3对特异性的si.nA(分别命名... 详细信息

目的观察顺铂(cDDP)对小分子干扰RnA(si.nA)抑制切除修复交叉互补基因1(ERCC1)基因表达的A549细胞增殖、凋亡影响,并探讨cDDP对si.nA抑制ERCC1基因表达的A549细胞化疗敏感性。方法根据ERCC1基因序列,设计合成3对特异性的si.nA(分别命名为s1、s2、s3),同时合成阴性对照si.nA(命名nC)。取对数生长期的A549细胞,采用Li.ofectami.e2000脂质体转染法进行s1、s2、s3、s1+s2+s3及nC转染,real-ti.e RT-PCR和Western blotti.g技术检测ERCC1 mRnA和蛋白表达。结果与nC相比,s1、s2、s3及s1+s2+s3均能下调ERCC1表达,但s1+s2+s3下降最显著。用nC及s1+s2+s3转染A549细胞,24 h后加入0、0.5、1、2、4、8μg/mL的cDDP,采用MTs法计算细胞生存率及cDDP对细胞的半数抑制浓度(i.50)。A549细胞转染后48 h加4μg/mL的cDDP,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果加入0、0.5、1、2、4、8μg/mL的cDDP,nC转染的A549细胞存活率分别为100.00%±3.21%、94.86%±7.14%、89.79%±3.29%、66.67%±5.40%、33.31%±1.79%、19.12%±0.41%,s1+s2+s3转染的A549细胞存活率分别为100.00%±6.53%、71.63%±8.23%、59.33%±0.94%、37.42%±1.57%、19.41%±1.41%、12.75%±0.27%,相同cDDP浓度下A549细胞存活率比较,P均s1+s2+s3、nC转染细胞的i.50分别为(1.25±0.11)、(3.09±0.36)μg/mL,二者比较,PnC与s1+s2+s3转染A549细胞凋亡率分别为8.06%±1.79%、14.96%±0.47%,加入cDDP后,细胞凋亡率分别为24.61%±1.98%、43.90%±3.01%,二者比较,P均si.nA抑制ERCC1基因表达的A549细胞增殖能力,并诱导细胞凋亡;cDDP对si.nA抑制ERCC1基因表达的A549细胞化疗敏感性升高。

关键词：切除修复交叉互补基因1 RnA干扰顺铂肺肿瘤肺癌

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