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HepG2 cells support vira. replica.ion a.d gene expression of hepa.itis C virus genotype 4 in vitro

World Journa. of Ga.troenterology 2006年第30期12卷 4836-4842页

作者： Mosta.a.K El-a.a.y a.hra. a.Ta.ll Ya.mine S El-a.d Ma.moud M Ba.ga. hussein a.Shoeb Sa.a. S Youssef Noha.G Ba.er El Din El-Ra.hdy M Redwa. Ma.a.El-Demella.y Moa.a.a.H Omra. Wa.l T El-Ga.f Sa.d a.Goueli Depa.tment of Biomedica. Technology National Research Center Tahrir Street PO 12622 Dokki Cairo Egypt Depa.tment of medicina. Chemistry Na- tional Research Center Tahrir Street PO 12622 Dokki Cairo Egypt Depa.tment of Microbiology a.d Immunology Fa.ulty of Pha.ma.y Ca.ro University Cairo Egypt Genetic Engineering a.d Biotechnology Resea.ch Institute New Borg El-Arab City Alexandria Egypt Depa.tment of Pa.hology School of medicine University of Wisconsin Madison WI United States

a.M： TO esta.lish a.cell culture system with longterm replica.ion of hepa.itis C virus （HCV） genome a.d expression of vira. a.tigens in vitro. METHODS： HepG2 cell line wa. tested for its susceptibility to HCV by incuba.ion with a.serum from a.pa.ient with chronic hepa.itis C. Cells a.d superna.a.t were ha.vested a. va.ious time points during the culture. Culture superna.a.t wa. tested for its a.ility to infect na.ive cells. The presence of minus （a.tisense） RNa.stra.d, a.d the detection of core a.d E1 a.tigens in cells were exa.ined by RT-PCR a.d immunologica. techniques （flow cytometry a.d Western blot） respectively. RESULTS： The intra.ellula. HCV RNa.wa. first detected on d 3 a.ter infection a.d then could be consistently detected in both cells a.d superna.a.t over a.period of a. lea.t three months. The fresh cells could be infected with superna.a.t from cultured infected cells. Flow cytometric a.a.ysis showed surfa.e a.d intra.ellula. HCV a.tigen expression using in house ma.e polyclona. a.tibodies （a.ti-core, a.d a.ti-E1）. Western blot a.a.ysis showed the expression of a.cluster of immunogenic peptides a. molecula. weights extended between 31 a.d 45 kDa.in a. one month old culture of infected cells wherea. this cluster wa. undetecta.le in uninfected HepG2 cells. CONCLUSION： HepG2 cell line is not only susceptible to HCV infection but a.so supports its replica.ion in vitro. Expression of HCV structura. proteins ca. be detected in infected HepG2 cells. These cells a.e a.so ca.a.le of shedding vira. pa.ticles into culture media.which in turn become infectious to uninfected cells.

关键词： Hepa.itis C virus In vitro propa.a.ion Genomic replica.ion Gene expression HepG2 cells

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