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非洲猪瘟新型疫苗研究进展

中国动物检疫 2020年第12期37卷 81-85页

作者：杨思成高瞻邵军军常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室OIE/国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)已存在约一个世纪,给世界养猪业带来巨大损失和威胁。为此国内外科学家一直致力于ASF疫苗研究,从早期的灭活疫苗、弱毒活疫苗到目前的新型疫苗,包括基因缺失减毒活疫苗、亚单位疫苗、病毒活载体疫苗、... 详细信息

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)已存在约一个世纪,给世界养猪业带来巨大损失和威胁。为此国内外科学家一直致力于ASF疫苗研究,从早期的灭活疫苗、弱毒活疫苗到目前的新型疫苗,包括基因缺失减毒活疫苗、亚单位疫苗、病毒活载体疫苗、DNA疫苗、单周期病毒疫苗等。但直到现在,世界上仍未制造出切实有效并投入生产的ASF疫苗。研究发现:灭活疫苗不具有保护性或仅具有部分保护性;亚单位疫苗具有部分保护性;基因缺失减毒活疫苗被证实具有同源保护性,但其安全问题仍未得到解决;病毒活载体疫苗虽会产生特异性抗体,但仍需要进一步研究;DNA疫苗虽然能够诱导产生体液免疫和细胞免疫,但不能提供保护。目前,一种新型的单周期病毒疫苗正被研究,也为ASF新型疫苗研制提供了新选择。随着基因工程技术与分子生物学技术的不断发展以及对ASF病毒基因组研究的不断深入,ASF疫苗有望研制成功。

关键词：非洲猪瘟病毒基因常规疫苗新型疫苗

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动物肠道菌群的研究进展

中国微生态学杂志 2017年第11期29卷 1354-1361页

作者：李世芳赵付荣常惠芸张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730048 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

肠道微生物是由存在于肠道部位的细菌、古菌、真菌、原生动物以及病毒所组成的群体。人们通过对细菌16SrRNA序列进行测序与分析,对动物及其在特定条件下的肠道菌群进行了相关方面的研究并取得了很大的进展。此外,由微生态原理发展而成... 详细信息

肠道微生物是由存在于肠道部位的细菌、古菌、真菌、原生动物以及病毒所组成的群体。人们通过对细菌16SrRNA序列进行测序与分析,对动物及其在特定条件下的肠道菌群进行了相关方面的研究并取得了很大的进展。此外,由微生态原理发展而成的益生菌、益生元和合生元等微生态制剂,可维持机体肠道微生物的平衡、提高肠道屏障功能、增强机体免疫力。因此越来越多的微生态制剂应用于畜牧业、水产业中。论文综述了小鼠、犬、猪这三种动物的肠道菌群及其应用的研究进展,旨在为进一步深入了解动物肠道菌群的结构、功能以及促进微生态制剂的应用提供参考。

关键词：肠道菌群小鼠犬猪微生态制剂

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基因工程抗体研究进展

生物技术通报 2009年第10期25卷 40-44页

作者：李菁林彤宋帅高闪电邵军军丛国政独军政常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,... 详细信息

随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,可保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性,去除或减少无关结构,从而可克服单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。

关键词：基因工程抗体人源化抗体小分子抗体核糖体展示

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荔枝中20种登记农药残留分析方法研究

中国农学通报 2024年第13期40卷 129-139页

作者：王思威刘艳萍张树飞张惠云何强王潇楠常虹广东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640 深圳职业技术大学食品药品学院深圳518000 云南省农业科学院热带亚热带经济作物研究所云南保山678000 广东省农产品质量安全中心广州525000

为解决荔枝中20种登记农药多残留的同时快速检测问题,建立并优化基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测荔枝中7种杀虫剂和13种杀菌剂的分析方法。荔枝全果样品经80%乙腈水溶液提取后,用石墨化碳黑(GCB)净化,流动相为乙腈和水... 详细信息

为解决荔枝中20种登记农药多残留的同时快速检测问题,建立并优化基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测荔枝中7种杀虫剂和13种杀菌剂的分析方法。荔枝全果样品经80%乙腈水溶液提取后,用石墨化碳黑(GCB)净化,流动相为乙腈和水,梯度洗脱,采用Extend C18色谱柱进行分离。电喷雾正负离子交替模式采集,多反应监测(MRM),外标法定量。20种供试农药的质量浓度与其对应的峰面积之间呈现良好线性关系,相关系数均大于0.9990;20种农药在荔枝基质中的平均回收率为71%~106%,相对标准偏差(RSD)在0.9%~9.8%之间,满足残留分析的要求。该方法简便、高效,可用于荔枝样品中20种农药残留的快速检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱荔枝杀虫剂杀菌剂残留

不同储存条件和反复冻融次数对口蹄疫病毒滴度的影响

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延边大学农学学报 2019年第4期41卷 73-77,98页

作者：孔洁李亭玉李太元常惠芸延边大学农学院吉林延吉133002 中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

为研究不同生物学条件下,口蹄疫病毒感染BHK-21细胞后病毒滴度的影响,试验将收集O、A 2种亚型的口蹄疫病毒液,经过不同次数的反复冻融(0、1、2、3、4、5、6次),设定不同的温度条件(20、-4、-20、-80℃),间隔不同的保存时间(0、7、14、21... 详细信息

为研究不同生物学条件下,口蹄疫病毒感染BHK-21细胞后病毒滴度的影响,试验将收集O、A 2种亚型的口蹄疫病毒液,经过不同次数的反复冻融(0、1、2、3、4、5、6次),设定不同的温度条件(20、-4、-20、-80℃),间隔不同的保存时间(0、7、14、21、28 d),测定其半数组织细胞感染量(TCID 50),以计算病毒滴度。结果表明:O型、A型口蹄疫病毒的细胞培养液分别反复冻融4次、3次后,其病毒滴度最高;相同存放温度下,随着保存时间的不断延长,病毒滴度表现略微下降的趋势;在一定保存时间内,随着存放温度不断降低,病毒滴度有所改变,其最适存放温度为-20℃和-80℃。因此,适宜的冻融次数、保存温度及存放时间对保存2种亚型的口蹄疫病毒具有一定的实际意义,为病毒的实验室应用提供参考依据。

关键词：口蹄疫病毒反复冻融温度时间病毒滴度

口蹄疫病毒重组蛋白表达及其亚单位疫苗研究进展

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生物技术通报 2007年第4期23卷 1-4页

作者：王光华独军政薛慧文常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃农业大学动物医学院兰州730070 甘肃农业大学动物医学院

口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产新型口蹄疫疫苗是防制该病爆发的有效措施之一。目前,基因工程疫苗成为该领域的研究热点。就口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白和非结构蛋白在大肠杆菌、昆... 详细信息

口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产新型口蹄疫疫苗是防制该病爆发的有效措施之一。目前,基因工程疫苗成为该领域的研究热点。就口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白和非结构蛋白在大肠杆菌、昆虫细胞、酵母菌、哺乳动物细胞和转基因植物等系统中的表达现状及其基因工程亚单位疫苗研究进展进行综述。

关键词：口蹄疫结构蛋白表达亚单位疫苗

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RNAi及其抑制口蹄疫病毒复制的研究进展

生物技术通报 2006年第6期22卷 34-37页

作者：独军政常惠芸才学鹏谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指由双链RNA(double strand RNA,dsRNA)介导的序列特异的RNA降解过程。已经证明,在植物和昆虫细胞中RNAi是其主要的抗病毒免疫机制,至今为止几乎没有发现在病毒感染哺乳动物细胞过程中诱发有效的抗病毒... 详细信息

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指由双链RNA(double strand RNA,dsRNA)介导的序列特异的RNA降解过程。已经证明,在植物和昆虫细胞中RNAi是其主要的抗病毒免疫机制,至今为止几乎没有发现在病毒感染哺乳动物细胞过程中诱发有效的抗病毒RNAi反应。因此,人们希望能够利用人工方法在哺乳动物细胞中建立有效的抗病毒RNAi防御策略。迄今为止,对多种哺乳动物病毒的研究结果令人振奋。主要围绕RNAi的分子基础、基本策略及其在抑制口蹄疫病毒复制中的研究现状作了综述。

关键词： KNAi 口蹄疫病毒抗病毒

2015-2018年石家庄市大气PM_(2.5)与儿童神经系统疾病门诊量的时间序列分析

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环境卫生学杂志 2021年第6期11卷 506-512页

作者：常会云赵川蔡建宁陈凤格张莹关茗洋石家庄市疾病预防控制中心环境卫生所 050011 华北理工大学公共卫生学院中国疾病预防控制中心环境与健康研究基地(石家庄)

目的探讨石家庄市大气PM_(2.5)质量浓度与儿童神经系统疾病日门诊量的关系。方法收集2015—2018年石家庄市的空气污染物日均质量浓度、日均温度、日均相对湿度以及每日儿童神经系统疾病门诊个案数据并进行统计描述,采用基于Poisson分布... 详细信息

目的探讨石家庄市大气PM_(2.5)质量浓度与儿童神经系统疾病日门诊量的关系。方法收集2015—2018年石家庄市的空气污染物日均质量浓度、日均温度、日均相对湿度以及每日儿童神经系统疾病门诊个案数据并进行统计描述,采用基于Poisson分布的广义相加时间序列模型,定量评估PM_(2.5)质量浓度与儿童神经系统疾病门诊量的关系,并进行性别、年龄和疾病种类分层分析。结果2015—2018年石家庄市PM_(2.5)日均质量浓度的中位数为63.50μg/m^(3),儿童神经系统疾病日门诊量的中位数为74人次。时间序列分析显示:PM_(2.5)质量浓度(lag7 d)每升高10μg/m^(3),儿童神经系统疾病的门诊量(95%CI)增加0.20%(0.02%,0.39%);分层分析发现,PM_(2.5)质量浓度与女性、(0~6)岁、中枢炎性和脑损伤性儿童神经系统疾病门诊量存在关联,超额就诊风险(95%CI)分别为0.30%(0.08%,0.52%)、0.23%(0.04%,0.43%)、0.43%(0.08%,0.79%)、0.44%(0.10%,0.77%)。结论石家庄市PM_(2.5)质量浓度的升高可能增加儿童神经系统疾病的患病风险,且女性、(0~6)岁儿童更敏感,中枢炎性和脑损伤性神经系统疾病可能为PM_(2.5)的敏感性疾病。

关键词：细颗粒物神经系统疾病日门诊量儿童时间序列分析

甘肃、青海和宁夏地区牛病毒性腹泻病毒E^(rns)基因的变异分析

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畜牧兽医学报 2021年第11期52卷 3157-3164页

作者：高闪电王锦明田占成独军政王建东常惠芸关贵全李有全殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009 宁夏农林科学院动物科学研究所银川750002

分析2013—2019年中国西北部分省区不同基因亚型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原基因E^(rns)的分子特征,了解其遗传演化规律。从甘肃、青海、宁夏规模化牛场送检的疑似牛病毒性腹泻发病牛150份EDTA抗凝血提取总RNA,利用RT-PCR扩增病毒基因组... 详细信息

分析2013—2019年中国西北部分省区不同基因亚型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原基因E^(rns)的分子特征,了解其遗传演化规律。从甘肃、青海、宁夏规模化牛场送检的疑似牛病毒性腹泻发病牛150份EDTA抗凝血提取总RNA,利用RT-PCR扩增病毒基因组E^(rns)-E1区,克隆测序后比对,构建系统进化树进行遗传演化关系分析。利用牛肾细胞MDBK对检出的不同基因亚型BVDV进行分离,并鉴定其生物型。RT-PCR扩增结果表明,BVDV总体阳性率为37.33%,其中甘肃省、青海省、宁夏回族自治区BVDV阳性率分别为37.68%、35.71%、40.00%。获得56份E^(rns)-E1 DNA,克隆测序获得33条不同的E^(rns)序列,长度均为681 bp,分析表明流行株分属10个BVDV基因亚型:BVDV-1a(2株)、BVDV-1b(5株)、BVDV-1c(1株)、BVDV-1d(3株)、BVDV-1m(11株)、BVDV-1o(1株)、BVDV-1p(4株)、BVDV-1q(4株)、BVDV-1v(1株)、BVDV-2a(1株)。分离获得BVDV-1a亚型、BVDV-1b亚型、BVDV-1v亚型、BVDV-2a亚型分离株各1株,BVDV-1 d亚型分离株2株,均为非致细胞病变型。各亚型株间E^(rns)基因核苷酸相似性以BVDV-1a~1d经典亚型株(79.8%~85.9%)或1m~1q及1v新亚型株(81.0%~87.3%)较高,以BVDV-1 m和BVDV-1p流行株亚型间相似性最高(87.3%)。各亚型株E^(rns)基因编码蛋白的RNA酶活性位点以及双链RNA作用基序(139KKGK142)保守,但Erns第26位糖基化位点(26 NRSL)在1m~1q、1v亚型株移位(24 NVSR)。首次以E^(rns)核苷酸序列构建系统进化树,结果显示1m~1q及1v等亚型BVDV株在进化上关系较为密切。本研究首次选用Erns靶标基因对甘肃、青海、宁夏部分省区牛源BVDV株进行同源性及系统进化分析,发现10个基因亚型流行株,以1m亚型株最为普遍,1m~1q及1v等亚型株亲缘关系密切。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 E^(rns)基因遗传演化