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GhWRKY44在干旱胁迫下的功能鉴定

棉花学报 2024年第4期36卷 275-284页

作者：王怡于月华万会娜倪志勇新疆农业大学生命科学学院/新疆极端环境生物生态适应与进化自治区重点实验室乌鲁木齐830052

【目的】解析GhWRKY44基因在干旱胁迫下的功能,为棉花抗旱育种提供候选基因资源。【方法】以陆地棉(Gossypium hirsutum L.)CQJ-5叶片cDNA为模板进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),获得GhWRKY44基因编码序列,并进行生... 详细信息

【目的】解析GhWRKY44基因在干旱胁迫下的功能,为棉花抗旱育种提供候选基因资源。【方法】以陆地棉(Gossypium hirsutum L.)CQJ-5叶片cDNA为模板进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),获得GhWRKY44基因编码序列,并进行生物信息学分析。利用实时荧光PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析GhWRKY44基因在脱落酸(abscisic acid,ABA)和聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)6000处理下的表达模式。利用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术研究GhWRKY44基因在干旱胁迫下的功能。【结果】GhWRKY44编码的蛋白属于Ⅰa类WRKY成员,与GbWRKY44亲缘关系较近。GhWRKY44受PEG 6000和ABA诱导表达。干旱胁迫下,与对照棉株相比,GhWRKY44沉默棉株的叶片萎蔫程度更重,植株存活率和叶片叶绿素含量(soil and plant analyzer development,SPAD值)显著降低。脱水处理6 h和7 h,GhWRKY44基因沉默棉株的叶片失水率显著高于对照。【结论】沉默GhWRKY44基因降低棉花抗旱性,GhWRKY44是棉花抗旱性的正调控因子。

关键词：陆地棉 GhWRKY44 病毒诱导的基因沉默干旱胁迫存活率

大豆Glyma08g11030基因结构及原核表达分析

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华北农学报 2019年第3期34卷 82-88页

作者：王萍于月华白玉翠万会娜倪志勇新疆农业大学农学院

为了进一步明确Glyma08g11030基因的功能,利用生物信息学和PCR的方法,对Glyma08g11030进行序列分析及蛋白结构域分析。生物信息学分析表明,该基因cDNA全长1419bp,开放阅读框长1362bp,编码453个氨基酸,蛋白质分子质量约为51.288ku,等电点... 详细信息

为了进一步明确Glyma08g11030基因的功能,利用生物信息学和PCR的方法,对Glyma08g11030进行序列分析及蛋白结构域分析。生物信息学分析表明,该基因cDNA全长1419bp,开放阅读框长1362bp,编码453个氨基酸,蛋白质分子质量约为51.288ku,等电点为8.14。序列分析表明,Glyma08g11030基因组包含2个外显子和1个内含子。多序列比对结果表明,Glyma08g11030蛋白含有1个F-BOX保守域。进化树分析表明,该蛋白与木豆、菜豆、花生、豇豆、红小豆具有同源关系。为了获得纯化的Glyma08g11030蛋白,将扩增片段克隆至原核表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-Glyma08g11030,经过SDS-PAGE电泳检测获得了目的蛋白,结果表明,该蛋白主要以包涵体形式存在。为进一步纯化和鉴定Glyma08g11030蛋白及研究其功能奠定了基础。

关键词：大豆 Glyma08g11030 原核表达

大豆sHSP基因Glyma.07G141700.1表达载体的构建及表达模式分析

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分子植物育种 2024年第18期22卷 5966-5972页

作者：唐洁万会娜刘灿于月华倪志勇新疆农业大学生命科学学院乌鲁木齐830052 新疆农业大学农学院乌鲁木齐830052

为了研究大豆小热激蛋白相关基因Glyma.07G141700.1的功能,本研究构建了Glyma.07G141700.1植物表达载体。RT-qPCR方法检测Glyma.07G141700.1基因在大豆不同组织及250 mmol/L NaCl胁迫0、2、6、12、24 h大豆根部的相对表达量,结果表明Gly... 详细信息

为了研究大豆小热激蛋白相关基因Glyma.07G141700.1的功能,本研究构建了Glyma.07G141700.1植物表达载体。RT-qPCR方法检测Glyma.07G141700.1基因在大豆不同组织及250 mmol/L NaCl胁迫0、2、6、12、24 h大豆根部的相对表达量,结果表明Glyma.07G141700.1在茎中表达量最高,250 mmol/L NaCl胁迫下Glyma.07G141700.1在2 h表达量最高,12 h表达量最低。利用生物信息学方法对Glyma.07G141700.1进行分析,结果表明Glyma.07G141700.1编码区长471 bp,编码156个氨基酸。功能结构域预测发现其具有一个小热激蛋白s HSP结构域,位于第36~153个氨基酸。多序列比对和系统发育树分析结果显示目的基因与野大豆(KHN05131.1, Glycine soja)、大豆(XP_003552209.1, Glycine max)、大豆(KAG4922021.1, Glycine max)等亲缘关系较近,本试验为进一步研究大豆s HSPs基因Glyma.07G141700.1生物学功能提供了基础。

关键词：大豆 Glyma.07G141700.1 表达载体表达模式生物信息学分析

陆地棉GhMYB4基因沉默载体构建及转基因棉花的鉴定

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分子植物育种 2021年第13期19卷 4386-4391页

作者：王怡于月华刘晨万会娜王萍唐洁倪志勇新疆农业大学农学院乌鲁木齐830052

MYB转录因子是植物中最大的转录家族之一,广泛参与植物逆境胁迫应答、生长发育及细胞形态的建成等生理活动。为了研究GhMYB4基因在棉花中的生物学功能,本研究利用重叠PCR方法替换拟南芥At-MIR319的成熟链和互补链序列,构建含有amiRMYB4... 详细信息

MYB转录因子是植物中最大的转录家族之一,广泛参与植物逆境胁迫应答、生长发育及细胞形态的建成等生理活动。为了研究GhMYB4基因在棉花中的生物学功能,本研究利用重叠PCR方法替换拟南芥At-MIR319的成熟链和互补链序列,构建含有amiRMYB4前体的植物表达载体amiRGhMYB4-pCAMBIA3301,通过农杆菌介导喷花法转化棉花植株。Bar基因PCR检测获得19株阳性植株,319-3301引物PCR检测获得16株阳性植株,3301通用引物PCR检测获得7株阳性植株,综合3组引物检测结果共获得7株阳性植株,以上结果表明,已获得GhMYB4转基因棉花。本研究结果为进一步研究陆地棉GhMYB4基因棉花纤维发育机制提供材料基础。

关键词：陆地棉(Gossypium hirsutum) 重叠PCR 棉花转化

GbTCP5与GbGL3启动子中TCP顺式作用元件的结合特性分析

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分子植物育种 2022年第3期20卷 847-851页

作者：王怡于月华万会娜蔡永生倪志勇新疆农业大学农学院乌鲁木齐830052

TCP转录因子是参与植物生长发育的特异性家族蛋白,但是棉花TCP转录因子家族中的大多数成员功能尚不清楚。为了定位GbTCP5转录因子调控的靶基因,本研究通过Plant CARE在线网站分析棉花纤维发育基因GbGL3上游3 000 bp启动子中的顺式作用元... 详细信息

TCP转录因子是参与植物生长发育的特异性家族蛋白,但是棉花TCP转录因子家族中的大多数成员功能尚不清楚。为了定位GbTCP5转录因子调控的靶基因,本研究通过Plant CARE在线网站分析棉花纤维发育基因GbGL3上游3 000 bp启动子中的顺式作用元件,构建含有TCP顺式作用元件的载体PHISII-GbGL3和酵母表达载体p GADT7-GbTCP5,通过酵母单杂交分析GbTCP5与GbGL3启动子中TCP顺式作用元件的结合特性。结果表明:GbGL3上游3 000 bp启动子中包含TCP顺式用作元件和功能各异的顺式作用元件,酵母单杂交实验结果表明GbTCP5能够与GbGL3启动子中含有的TCP顺式用作元件结合。本研究为进一步了解GbTCP5转录因子的功能提供依据。

关键词：海岛棉(Gossypium barbadense) GbTCP5 TCP顺式作用元件酵母单杂交

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甲状腺癌术后中西医治疗

中医药学报 2022年第2期50卷 5-9页

作者：万会娜张国玉段飞符宇燕树勋河南中医药大学河南郑州450000 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000 国家中医药管理局湖北陈氏瘿病学术流派传承工作室河南工作站河南郑州450000

甲状腺恶性肿瘤中最常见的是甲状腺癌,首选方案为手术切除。近几年对于甲状腺癌术后的治疗方法多种多样,经查阅相关文献后,从中医药治疗、中西医联合治疗、中成药、其他中医疗法等方面进行论述,为临床应用提供新的思路与依据。

关键词：甲状腺癌术后中西医治疗

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燕树勋教授辨证调治痤疮经验

西部中医药 2021年第9期34卷 41-43页

作者：郭盼盼陈玲万会娜张国玉涂玉洁燕树勋河南中医药大学河南郑州450000 河南中医药大学第一附属医院

燕树勋教授提出“辨证调治,调治并重”治疗痤疮的学术思想,坚持“脏腑辨证-因人制宜-健康教育”的诊疗模式;临床运用面部分候法及经络循行部位,佐以四诊信息进行脏腑辨证,并将痤疮分为肺经风热、脾胃湿热、肝经郁热、痰瘀互结4个证型;... 详细信息

燕树勋教授提出“辨证调治,调治并重”治疗痤疮的学术思想,坚持“脏腑辨证-因人制宜-健康教育”的诊疗模式;临床运用面部分候法及经络循行部位,佐以四诊信息进行脏腑辨证,并将痤疮分为肺经风热、脾胃湿热、肝经郁热、痰瘀互结4个证型;根据年龄、性别、疾病阶段不同,在脏腑辨证的基础上“因人制宜”;在药物治疗的基础上加强健康教育,强调规律均衡膳食、适度体育运动、合理生活方式以及必要的心理疏导。

关键词：痤疮辨证调治经验燕树勋

吕久省教授舌诊辨治亚临床甲状腺功能减退症经验

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西部中医药 2022年第1期35卷 54-56页

作者：张国玉万会娜郭盼盼陈玲涂玉洁吕久省燕树勋河南中医药大学河南郑州450000 河南中医药大学第一附属医院

吕久省授根据多年经验总结出亚临床甲状腺功能减退症(简称亚临床甲减)的舌诊特点,并根据舌诊特点分为肝郁脾虚证,患者舌质暗淡,苔薄少,用逍遥散加减治疗;脾虚痰湿证,患者舌质淡,苔白腻,可伴有齿痕,用逍遥散合二陈汤加减治疗。舌诊可作... 详细信息

吕久省授根据多年经验总结出亚临床甲状腺功能减退症(简称亚临床甲减)的舌诊特点,并根据舌诊特点分为肝郁脾虚证,患者舌质暗淡,苔薄少,用逍遥散加减治疗;脾虚痰湿证,患者舌质淡,苔白腻,可伴有齿痕,用逍遥散合二陈汤加减治疗。舌诊可作为诊疗亚临床甲减的一种思路,但不可绝对化、盲目化,要四诊合参,方可知犯何逆,随证治之。

关键词：亚临床甲状腺功能减退症舌诊名医经验吕久省

Box-Behnken设计-响应面法优化桔梗醇提工艺及醇提物美白活性分析

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食品工业科技 2023年第20期44卷 189-196页

作者：蔡铁全庞会娜黄意情万志强严铭铭国家市场监督管理总局食品审评中心北京100070 长春中医药大学东北亚中医药研究院吉林长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

利用响应面法优化桔梗醇提工艺,并考察其美白活性。以提取时间、提取次数、溶媒量为影响因素,采用单因素考察和Box-Behnken响应面设计试验,优化桔梗醇提工艺;以酶抑制活性和抗氧化为指标考察提取物的美白活性。结果表明,桔梗的最佳乙醇... 详细信息

利用响应面法优化桔梗醇提工艺,并考察其美白活性。以提取时间、提取次数、溶媒量为影响因素,采用单因素考察和Box-Behnken响应面设计试验,优化桔梗醇提工艺;以酶抑制活性和抗氧化为指标考察提取物的美白活性。结果表明,桔梗的最佳乙醇提取工艺为提取次数3次,提取时间1 h,溶媒量8倍,该条件下制备的桔梗醇提物中桔梗皂苷D、熊果苷、桔梗总皂苷的提取率分别为0.122%±0.003%、0.128%±0.005%、0.582%±0.007%,且具有良好的酪氨酸酶抑制活性(92.39%)、透明质酸酶抑制活性(88.26%)、细胞黑色素抑制效果及自由基DPPH(90.19%)和ABTS^(+)(80.57%)清除活性。优化的桔梗醇提工艺稳定可靠,可操作性好,该工艺提取的桔梗醇提物具有良好的美白和抗氧化活性,为进一步研究桔梗生物活性及美白机制提供科学依据。

关键词：桔梗醇提物提取工艺酪氨酸酶透明质酸酶黑色素

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