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Novel ATP7B gene mutations in Chinese Han patients with hepatolenticular degeneration

Neural Regeneration Research 2010年第12期5卷 933-937页

作者： Yuancheng Bao Lijuan Chen Yuanxun Yu huaizhou jiang Ting Guan Changshui Fang Department of Neurology FirstAffiliated Hospital of Anhui Traditional Chinese Medical College Hefei 230031 Anhui Province China Anhui Center for Medical Genetics Hefei 230061 Anhui Province China

BACKGROUND： ATP7B gene exon 8 Arg778Leu and exon 12 Arg952Lys are gene mutation hot spots in Chinese Han patients with hepatolenticular degeneration, or Wilson＇s disease （WD）. However, the gene fragments are too short for detection and the mutation detection rate remains low. OBJECTIVE： To analyze DNA sequences of ATP7B gene exon 8-exon 9 and exon 10-exon 12 sections. DESIGN, TIME AND SE＇I-rlNG： A concurrent, non-randomized, controlled, genetic polymorphism study was performed at the Anhui Medical Genetics Center, Anhui, China from March to July in 2009. PARTICIPANTS： Fifty patients, who were admitted to the Department of Neurology at the First Affiliated Hospital of Anhui Traditional Chinese Medical College between March and July in 2009, were diagnosed with WD. The WD group comprised 32 males and 18 females, with an average age of （18.8 ± 8.3） years. WD was confirmed by clinical observation, as well as physical, imaging, and biochemical examinations, including testing for serum copper, ceruloplasmin, and copper oxidase. The control group comprised 20 normal subjects, who underwent physical examination at the First Affiliated Hospital of Anhui Traditional Chinese Medical College, and included 13 males and 7 females, with an average age of （27.9 ± 2.4） years. All subjects were Chinese Han population. METHODS： Genomic DNA was extracted from 50 WD patients and 20 normal controls. Polymerase chain reaction amplification of ATP7B gene exon 8-exon 9 （about 1 100 bp） and exon 10-exon 12 （about 850 bp） segments was performed. DNA exon-intron amplification products from all subjects were processed through direct bidirectional sequencing, and sequencing results were analyzed. MAIN OUTCOME MEASURES： Sequence changes of ATPTB gene exon 8-exon 9 and exon 10-exon 12 segments. RESULTS： In the 50 included WD patients, ATP7B gene intron 8 nt53592A → G with nt53671G→ A homozygous mutation was detected between exon 8-exon 9 in seven cases; exon 8 Arg778Leu mutations with Leu770Leu sy

关键词： hepatolenticular degeneration Wilson's disease gene DNA mutation copper metabolism genetics neural regeneration

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Polymorphism analysis of PARK2 gene mutations in Han Chinese patients with early-onset Parkinson's disease

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Neural Regeneration Research 2010年第20期5卷 1578-1582页

作者： Yuancheng Bao Ting Guan Yuanxun Yu huaizhou jiang Changshui Fang Lijuan Chen Department of Neurology First Affiliated Hospital of Anhui Traditional Chinese Medical College Hefei 230031 A nhui Province China Anhui Center for Medical Genetics Hefei 230061 Anhui Province China School of International Education & Exchange Anhui Traditional Chinese Medical College Hefei 230031 Anhui Province China

The PARK2 gene is a common disease gene in Han Chinese patients with Parkinson＇s *** detection of mutations in the PARK2 gene remains *** investigate the role PARK2 gene mutations play in the pathogenesis of Parkinson＇s disease,30 Han Chinese patients with early-onset Parkinson＇s disease and 38 normal controls were studied to determine the sequence changes of 1,4,6 and 7 exon *** the 30 patients with Parkinson＇s disease,a heterozygous intron mutation（nt 119,G→G/A）in exon 1 was detected in one case;a homozygous intron mutation（nt 526500,T→C）between intron 3 and exon 4 in fourteen cases was found;a heterozygous intron mutation（nt 526607,G→G/A）between intron 3 and exon 4 was observed in eight cases;an exon 6missense mutation（nt 754317,C→C/T;codon 193,CGG→CGG/TGG;aa 193,Arg→Arg/Trp）in three cases was seen;and an exon 7 missense mutation（nt 941943,C→A/C;codon 272,CTC→CTC/ATC;aa 272,Leu→Leu/lle）was found in one *** changes were not found in the normal *** results indicated that the PARK2 exons 6 and 7 mutations are possibly pathogenic mutations,along with the intron 3-exert 4 and exon 1 ***2 gene mutations are possible factors leading to the onset of Parkinson＇s disease.

关键词： Parkinson's disease PARK2 gene DNA mutation oxen intron

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肝豆灵片对铜负荷大鼠肝细胞凋亡的影响

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甘肃中医学院学报 2016年第4期33卷 6-10页

作者：蒋怀周吴生兵沈斌安徽中医药大学中医临床学院安徽合肥230038 安徽中医药大学针灸基础与技术安徽省重点实验室安徽合肥230038 盐城市中医院康复科江苏盐城224000

目的通过观察肝豆灵片对铜负荷大鼠肝细胞凋亡及肝组织核转录因子kappa B(NF-κB)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,分析肝豆灵片对铜负荷大鼠肝损伤治疗的作用机制。方法18只Wistar大鼠被随机分为对照组、模型组和肝... 详细信息

目的通过观察肝豆灵片对铜负荷大鼠肝细胞凋亡及肝组织核转录因子kappa B(NF-κB)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,分析肝豆灵片对铜负荷大鼠肝损伤治疗的作用机制。方法18只Wistar大鼠被随机分为对照组、模型组和肝豆灵组,每组6只。对照组自由饮食,模型组和肝豆灵组连续12周以铜负荷法复制大鼠模型,自第7周开始,肝豆灵组大鼠以肝豆灵片混悬液灌胃,直至造模结束。采用HE染色法观察大鼠肝组织病理变化,TUNEL法检测大鼠肝细胞凋亡,免疫组化技术检测大鼠肝组织NF-κB和Caspase-3的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肝组织病理损伤严重,肝细胞凋亡指数显著升高(P<0.05),NF-κB和Caspase-3表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,肝豆灵组大鼠肝组织病理损伤减轻,肝细胞凋亡指数及NF-κB,Caspase-3表达显著降低(P<0.05)。结论肝豆灵片可减轻铜负荷大鼠肝损伤,其机制可能与其下调肝组织NF-κB和Caspase-3的表达、抑制肝细胞凋亡相关。

关键词：铜负荷肝豆灵片肝损伤肝组织核转录因子kappa B 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 细胞凋亡实验研究

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Wilson病铜过量负荷大鼠肝损伤的代谢组学研究

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山西医科大学学报 2016年第3期47卷 199-204页

作者：蒋怀周王键许晶晶董继扬安徽中医药大学中医临床学院中医基础理论教研室合肥230031 厦门大学电子科学系、福建省等离子体与磁共振研究重点实验室

目的利用代谢组学技术研究铜负荷大鼠肝组织的小分子变化,探讨铜过量对肝脏小分子代谢的影响。方法 16只Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,以铜负荷法造模,通过核磁共振氢谱技术采集大鼠肝组织的代谢轮廓,以PLS-DA方法分析铜中毒后,大... 详细信息

目的利用代谢组学技术研究铜负荷大鼠肝组织的小分子变化,探讨铜过量对肝脏小分子代谢的影响。方法 16只Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,以铜负荷法造模,通过核磁共振氢谱技术采集大鼠肝组织的代谢轮廓,以PLS-DA方法分析铜中毒后,大鼠肝组织代谢物的变化。结果与正常组对比,模型组大鼠肝组织中尿素囊、牛磺酸、肌醇、赖氨酸、尼克酰胺、乙醇胺、乙酸、谷氨酸、酪氨酸、尿苷、甲硫氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、3-羟基丁酸、缬氨酸、乳酸、亮氨酸、苯丙氨酸、N-乙酰天冬氨酸、延胡索酸和腺苷/肌苷的含量升高(P<0.05),肌酸、天冬酰胺、天冬氨酸、磷酸胆碱和甘露醇的含量降低(P<0.05)。结论铜对大鼠肝组织的损伤可能涉及鸟氨酸和三羧酸循环、磷脂、氨基酸、能量、核苷酸和糖的代谢。

关键词： Wilson病肝豆状核变性代谢组学铜负荷核磁共振氢谱肝损伤

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肝豆灵干预Wilson病模型大鼠NMR代谢组学研究

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辽宁中医药大学学报 2014年第9期16卷 37-40页

作者：蒋怀周危阳洋蒋昭雨董继扬蒋雨晨安徽中医药大学安徽合肥230031 厦门大学福建厦门361005 亳州市人民医院安徽亳州236800 安徽中医药高等专科学校安徽芜湖241000

目的:以基于核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)的代谢组学方法对肝豆灵干预Wilson病(Wilson's disease,WD)模型大鼠进行研究,分析肝豆灵干预后,WD模型大鼠尿液中代谢物的变化,从小分子层面探讨肝豆灵对WD的治疗作用机制。方法:4... 详细信息

目的:以基于核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)的代谢组学方法对肝豆灵干预Wilson病(Wilson's disease,WD)模型大鼠进行研究,分析肝豆灵干预后,WD模型大鼠尿液中代谢物的变化,从小分子层面探讨肝豆灵对WD的治疗作用机制。方法:42只雄性Wistar大鼠,体重(180±20)g,随机被分为健康对照组(n=14)、模型组(n=14)和肝豆灵组(n=14)。采用铜负荷法制作Wilson病大鼠模型,以NMR技术对大鼠尿液进行检测,经MestRe-C 2.3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐。对样品进行分段积分,将积分数据归一化后构成数据矩阵,并利用PCA方法对数据矩阵进行统计分析。结果:相对于模型组,肝豆灵组大鼠尿液色氨酸(tryptophan)、马尿酸盐(hippurate)、苯基丙氨酸(phenylalanine)、甘氨酸(glycine)、苯乙酰甘氨酸(PAG)含量有显著升高;乳酸(lactate)、甜菜碱(TMAO/betaine)、甲酸盐(formate)、二甲基甘氨酸(DMG)含量有所升高;柠檬酸盐(citrate)、肌氨酸酐(creatinine)、谷氨酰胺(glutamine)含量显著降低;丙酮酸盐(pyruvate)甲基胍(methylguanidine)、丙酮(acetone)、牛磺酸(taurine)含量有所降低。这些发生改变的代谢物可为进一步研究肝豆灵干预WD的作用机制提供参考。

关键词： Wilson病代谢组学核磁共振尿液小分子代谢物肝豆灵

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Jagged/Notch信号通路在铜负荷大鼠肝纤维化发生过程中的作用

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济宁医学院学报 2018年第4期41卷 229-234页

作者：吴鹏王亚东李茂涛蒋怀周安徽中医药大学中西结合学院安徽中医药大学针灸推拿学院安徽中医药大学中医学院合肥230012

目的探讨Jagged/Notch信号通路在铜负荷大鼠肝纤维化发生发展中的作用。方法雄性SD大鼠36只随机分为对照组、模型组,模型组按造模后不同时间分为8、12、16、20、24周5个亚组,每组6只。模型组喂饲含1.5g/kg硫酸铜的粉状饲料和0.185%硫酸... 详细信息

目的探讨Jagged/Notch信号通路在铜负荷大鼠肝纤维化发生发展中的作用。方法雄性SD大鼠36只随机分为对照组、模型组,模型组按造模后不同时间分为8、12、16、20、24周5个亚组,每组6只。模型组喂饲含1.5g/kg硫酸铜的粉状饲料和0.185%硫酸铜去离子水,观察大鼠一般情况,全自动生化分析仪测定各组大鼠肝组织血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平;比色法测定大鼠肝脏羟脯氨酸(Hyp)水平;HE、Masson染色法观察大鼠肝脏病理学改变;实时荧光定量PCR法检测TGF-β1、Notch1、Notch3、Hes1、Hes5mRNA表达情况;Western blot检测Jagged1、Notch3、Hes1蛋白表达情况,免疫组化方法检测Hes1、a-SMA表达情况。结果与正常组相比,模型组大鼠肝组织ALT、AST、HA水平自造模第8周开始升高,PCⅢ、LN、Hyp水平自第12周开始升高,差异有统计学意义(P<0.05),肝组织炎症及纤维化程度进行性加重,TGF-β1、Notch3、Hes1mRNA及Jagged1、Notch3、Hes1蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);Hes1蛋白在模型组纤维化区域大量表达,与肌成纤维细胞标志蛋白a-SMA表达区域高度重合,两者表达量呈同步增加关系(r=0.952,P<0.05)。结论 Jagged1/Notch3/Hes1信号通路可能参与铜负荷大鼠肝纤维化的发生与发展,并与肝纤维化的严重程度密切相关。

关键词： Jagged/Notch信号通路铜负荷大鼠肝纤维化动态表达

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肝豆灵对铜负荷大鼠肝细胞Bax、Bcl-2表达的影响

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中医药临床杂志 2016年第1期28卷 94-97页

作者：蒋怀周吴生兵沈斌刘磊安徽中医药大学安徽合肥230031 泰州市中医院江苏泰州225300 亳州市人民医院安徽亳州236800

目的:观测肝豆灵对铜负荷大鼠肝细胞Bax和Bcl-2表达的影响,分析该方对铜负荷大鼠肝损伤的治疗作用机制。方法:采用铜负荷法制作大鼠模型,造模和药物干预结束后,以免疫组化技术测大鼠肝细胞Bax和Bcl-2表达。结果:与对照组相比,模型组肝细... 详细信息

目的:观测肝豆灵对铜负荷大鼠肝细胞Bax和Bcl-2表达的影响,分析该方对铜负荷大鼠肝损伤的治疗作用机制。方法:采用铜负荷法制作大鼠模型,造模和药物干预结束后,以免疫组化技术测大鼠肝细胞Bax和Bcl-2表达。结果:与对照组相比,模型组肝细胞Bax和Bcl-2表达升高(P<0.05)。与模型组相比,肝豆灵组肝细胞Bax表达降低(P<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05)。结论:肝豆灵对铜负荷大鼠肝损伤具有一定的干预作用,机制可能与下调Bax,上调Bcl-2的表达有关。

关键词：肝细胞凋亡肝豆灵铜负荷

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磁共振与多层螺旋CT诊断肝脏局灶性病变的比较

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中国现代医生 2012年第5期50卷 94-95,F0003页

作者：王建军程广河姜怀洲山西省大同市同煤集团总医院影像科山西大同037003 山西省大同市解放军第三二二医院放射科山西大同037006

目的比较磁共振与多层螺旋CT诊断肝脏局灶性病变的准确率,探讨两者诊断的价值。方法收集我科初诊的45例肝脏疾病患者,回顾性分析其病例资料,比较磁共振和多层螺旋CT对肝脏局灶性病变诊断的准确率和准确性。结果两种方法诊断肝脏恶性肿... 详细信息

目的比较磁共振与多层螺旋CT诊断肝脏局灶性病变的准确率,探讨两者诊断的价值。方法收集我科初诊的45例肝脏疾病患者,回顾性分析其病例资料,比较磁共振和多层螺旋CT对肝脏局灶性病变诊断的准确率和准确性。结果两种方法诊断肝脏恶性肿瘤与良性肿瘤的诊断例数比较存在统计学意义。对于几种典型疾病的检出,两种方法的检出准确率分别为61.2%(30/49),87.5%(49/56)。结论磁共振对肝脏局灶性病变的定性诊断能力优于多层螺旋CT。患者在临床诊断肝脏病变性质时应首先选择磁共振。

关键词：肝脏局灶性病变磁共振成像多层螺旋CT

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肝豆灵干预铜负荷大鼠肾损伤的代谢组学研究

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云南中医学院学报 2015年第6期38卷 8-12,16页

作者：蒋怀周王键许晶晶董继扬安徽中医药大学中医临床学院安徽合肥230031 厦门大学电子科学系福建省等离子体与磁共振研究重点实验室福建厦门361005

目的分析肝豆灵对铜负荷大鼠肾损伤的代谢组学影响,探讨肝豆灵的肾脏排铜机制。方法实验大鼠被随机分为正常组、模型组和肝豆灵组。造模结束后,以TUNEL法测肾小管上皮细胞凋亡,核磁共振技术结合偏最小二乘判别分析法分析大鼠肾组织小分... 详细信息

目的分析肝豆灵对铜负荷大鼠肾损伤的代谢组学影响,探讨肝豆灵的肾脏排铜机制。方法实验大鼠被随机分为正常组、模型组和肝豆灵组。造模结束后,以TUNEL法测肾小管上皮细胞凋亡,核磁共振技术结合偏最小二乘判别分析法分析大鼠肾组织小分子代谢物。结果与正常组比较,模型组肾小管上皮细胞凋亡指数升高(P<0.01);苯丙氨酸、丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、赖氨酸、缬氨酸、亮氨酸、肌苷、天冬氨酸含量降低。与模型组相比,肝豆灵组肾小管上皮细胞凋亡指数降低(P<0.01);苯丙氨酸、丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、赖氨酸、缬氨酸、亮氨酸、肌苷、天冬氨酸含量升高。结论肝豆灵对铜负荷大鼠肾损伤具有一定的干预作用,其机制可能涉及对芳香族氨基酸(苯丙氨酸、酪氨酸)、支链氨基酸(亮氨酸、缬氨酸)的调节;抑制肾小管上皮细胞凋亡、调节肾脏氨的代谢。

关键词：代谢组学铜中毒肾损伤肝豆灵

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岛津SCT-3000TE高压故障检修

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CT理论与应用研究（中英文） 2001年第2期10卷 19-20页

作者：王关姜怀州廉威解放军322医院大同市037006

本文介绍一例岛律ＳＣＴ－３０００ＴＥ高压检修特殊故障的方法，说明ＫＶ波纹大对Ｘ线量影响较大，使图象质量变差。原则上ｍＡ越高，Ｘ线量越大，接收信号越强，但是，ＫＶ波纹大，低能光子数量增加，到达探测器的高能光子数减少，对... 详细信息

本文介绍一例岛律ＳＣＴ－３０００ＴＥ高压检修特殊故障的方法，说明ＫＶ波纹大对Ｘ线量影响较大，使图象质量变差。原则上ｍＡ越高，Ｘ线量越大，接收信号越强，但是，ＫＶ波纹大，低能光子数量增加，到达探测器的高能光子数减少，对Ｘ线量影响更大。我们测得故障时的ＫＶ波纹，虽然峰值正常，但波纹大，变化范围６０％，正常时应小于１０％，所以探测器测得的线量严重不足，引起图象质量变差。

关键词：高压故障光子 SCT-3000TECT机 X线量 KV波纹检修

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