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MACS-annexin V cell sorting of semen samples with high TUNEL values decreases the concentration of cells with abnormal chromosomal content:a pilot study

引用

Asian Journal of Andrology 2022年第5期24卷 445-450页

作者： Sahar El Fekih Nadia Gueganic Corinne Tous Habib Ben Ali Mounir Ajina Nathalie Douet-Guilbert hortense drapier Damien Beauvillard Frédéric Morel Aurore Perrin University of Brest InsermUMR U1078Faculty of Medicine and Health SciencesBrest 29238France Laboratory of Human Cytogenetics Molecular Genetics and Reproductive BiologyFarhat Hached University HospitalSousse 4031Tunisia Departement of Medical Genetics and Reproductive Biology Brest University Regional HospitalBrest 29609France Department of Reproductive Medicine Farhat Hached Teaching HospitalSousse 4031Tunisia

We question whether,in men with an abnormal rate of sperm DNA fragmentation,the magnetic-activated cell sorting(MACS)could select spermatozoa with lower rates of DNA fragmentation as well as spermatozoa with unbalanced chromosome content.Cryopreserved spermatozoa from six males were separated into nonapoptotic and apoptotic populations.We determined the percentages of spermatozoa with(i)externalization of phosphatidylserine(EPS)by annexin V-Fluorescein isothiocyanate(FITC)labeling,(ii)DNA fragmentation by TdT-mediated-dUTP nick-end labeling(TUNEL),and(iii)numerical abnormalities for chromosomes X,Y,13,18,and 21 by fluorescence in situ hybridization(FISH),on the whole ejaculate and selected spermatozoa in the same patient.Compared to the nonapoptotic fraction,the apoptotic fraction statistically showed a higher number of spermatozoa with EPS,with DNA fragmentation,and with numerical chromosomal abnormalities.Compared to the whole ejaculate,we found a significant decrease in the percentage of spermatozoa with EPS and decrease tendencies of the DNA fragmentation rate and the sum of disomy levels in the nonapoptotic fraction.Conversely,we observed statistically significant higher rates of these three parameters in the apoptotic fraction.MACS may help to select spermatozoa with lower rates of DNA fragmentation and unbalanced chromosome content in men with abnormal rates of sperm DNA fragmentation.

关键词： chromosomal abnormalities DNA fragmentation externalization of phosphatidylserine magnetic-activated cell separation spermatozoa

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