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基于德尔菲法的甲状腺癌围手术期护理质量敏感指标体系的建立与应用效果

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中西医结合护理（中英文） 2022年第4期8卷 154-156页

作者：何艳华陈渝诚潘燕卿福建中医药大学附属人民医院甲状腺乳腺外科福建福州350004 福建中医药大学附属人民医院手术室福建福州350004

目的建立基于德尔菲法的甲状腺癌围手术期护理质量敏感指标体系,并分析其应用效果。方法在文献调研的基础上,编制《甲状腺癌围术期护理质量敏感指标专家问卷调查表》,运用德尔菲法对全国20名专家进行2轮问卷调查及统计分析,构建护理质... 详细信息

目的建立基于德尔菲法的甲状腺癌围手术期护理质量敏感指标体系,并分析其应用效果。方法在文献调研的基础上,编制《甲状腺癌围术期护理质量敏感指标专家问卷调查表》,运用德尔菲法对全国20名专家进行2轮问卷调查及统计分析,构建护理质量敏感指标。选择福建中医药大学附属人民医院2019年7月至2021年7月收治的112例甲状腺癌患者为研究对象,以随机数字表法分为观察组、对照组,每组56例,评价其使用效果。结果经2轮德尔菲法专家函询,所有指标均纳入甲状腺癌围手术期护理治疗敏感指标体系,包括3项一级指标、6项二级指标和24项三级指标。观察组的护理质量各项评分均高于对照组(P均<0.05)。观察组患者护理期间的不良事件总发生率为3.57%,低于对照组的14.29%(P<0.05)。结论本研究基于德尔菲法成功建立甲状腺癌围手术期护理质量敏感指标体系,且将该体系应用于护理质量管理,可提高护理质量和减少不良事件的发生。

关键词：甲状腺癌德尔菲法护理质量指标体系

牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白的生物信息学分析及多表位筛选

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中国畜牧兽医 2019年第12期46卷 3475-3485页

作者：何金科杨亚军邓肖玉何延华张超马忠臣王勇陈创夫石河子大学生命科学学院石河子832000 石河子大学动物科技学院石河子832000

本研究旨在对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3蛋白进行生物信息学分析及T细胞和B细胞表位的筛选。从GenBank数据库中找到NS3蛋白的氨基酸序列,用Expasy ProtParam在线服务器分析所得序列理化性质。使用TMHMM Server分析跨膜结构域,使用DNASta... 详细信息

本研究旨在对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3蛋白进行生物信息学分析及T细胞和B细胞表位的筛选。从GenBank数据库中找到NS3蛋白的氨基酸序列,用Expasy ProtParam在线服务器分析所得序列理化性质。使用TMHMM Server分析跨膜结构域,使用DNAStar软件预测NS3蛋白的二级结构,为了更准确地预测蛋白质的二级结构,使用SOPMA分析软件进行了二次预测。使用Phyre2在线服务器预测NS3蛋白的三级结构,并用Raswin软件标出各个元素所处的位置。使用4种预测软件(BCPREDS、ABCpred、BepiPred和SVMTriP)分析NS3蛋白的线性B细胞表位,使用NetMHCⅡpan预测CD4+T细胞表位,使用NetBoLApan和IEDB预测CD8+T细胞表位,将所得到的结果进行T细胞和B细胞表位筛选。结果表明,NS3蛋白质由683个氨基酸组成,分子质量为75 ku,理论等电点(pI)为8.31,化学式为C 3347 H 5346 N 916 O 1009 S 28,不稳定系数为35.93,平均亲水性(GRAVY)值为-0.267,表明NS3为稳定性亲水蛋白质。TMHMM结果显示,NS3蛋白不具有跨膜结构域。SOPMA结果表明,在NS3蛋白的二级结构中,α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲分别约占30.75%、22.55%、8.35%和38.35%,用DNAStar软件分别标出了α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲所处的位置。运用4种不同的B细胞预测软件筛选出8个线性表位:12-16、289-298、349-360、394-407、421-432、489-498、515-525和665-679位氨基酸。用NetMHCⅡpan筛选出4个T细胞表位:248-262、315-320、400-414和482-496位氨基酸。本研究为BVDV NS3蛋白优势抗原的筛选提供了理论依据。

关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV) NS3蛋白生物信息学分析 B细胞 T细胞表位筛选

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埃索美拉唑镁肠溶片体外释放度的研究

今日药学 2016年第9期26卷 642-645页

作者：易建勇林茜何燕华浙江普洛得邦家园药物研究院浙江杭州310000 浙江巨泰药业有限公司浙江衢州324000

目的建立埃索美拉唑镁肠溶片体外释放度测定方法,并考察其体外释药特性。方法用反相高效液相色谱法(RPHPLC)等度洗脱法测定埃索美拉唑镁肠溶片中的埃索美拉唑镁的溶出量;并比较自制制剂与原研制剂在模拟人体胃肠释放介质中释药一致性。... 详细信息

目的建立埃索美拉唑镁肠溶片体外释放度测定方法,并考察其体外释药特性。方法用反相高效液相色谱法(RPHPLC)等度洗脱法测定埃索美拉唑镁肠溶片中的埃索美拉唑镁的溶出量;并比较自制制剂与原研制剂在模拟人体胃肠释放介质中释药一致性。结果埃索美拉唑镁在5.025~50.25μg·m L^(-1)内与峰面积具有良好的线性关系,r值为0.999 9,其低、中、高浓度平均回收率分别为99.5%,99.6%,99.1%,RSD均<2.0%(n=3)、最低定量限为0.06μg·m L^(-1);自制制剂与原研制剂体外释放度相似。结论埃索美拉唑镁肠溶片在体外与原研制剂具有相似的释药特性,可为后期生物等效性试验提供保障。

关键词：埃索美拉唑镁肠溶微丸释放度反相高效液相色谱法

结缔组织生长因子重组干扰载体慢病毒颗粒的构建及其对视网膜血管内皮细胞内源性结缔组织生长因子表达的抑制作用

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中华眼底病杂志 2018年第6期34卷 580-585页

作者：牛瑞东莉洁马腾杜雪利何燕华崔伟娜胡博杰天津医科大学眼科医院、天津医科大学眼视光学院、天津医科大学眼科研究所 300384

目的构建结缔组织生长因子（CTGF）重组干扰载体（shRNA），观察其对视网膜血管内皮细胞内源性CTGF表达的抑制作用。方法构建人源CTGF shRNA，应用三质粒包装系统获得高滴度的CTGF shRNA慢病毒颗粒。感染视网膜血管内皮细胞，利用干扰... 详细信息

目的构建结缔组织生长因子（CTGF）重组干扰载体（shRNA），观察其对视网膜血管内皮细胞内源性CTGF表达的抑制作用。方法构建人源CTGF shRNA，应用三质粒包装系统获得高滴度的CTGF shRNA慢病毒颗粒。感染视网膜血管内皮细胞，利用干扰载体中的红色荧光标记示踪并筛选慢病毒的最佳感染复数及起效时间。将细胞分为空白对照组（正常培养）、感染对照组（Scramble shRNA病毒感染）及CTGF敲低组（CTGF shRNA病毒感染）。通过Transwell细胞迁移实验观察3组细胞的迁移能力；实时定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测3组细胞的结缔组织生长因子（CTGF）、纤连蛋白（FN）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）的mRNA和蛋白表达。3组间数据比较采用方差分析。结果CTGF shRNA的最佳感染复数为20，最佳起效时间是72 h。Transwell细胞迁移实验结果显示，CTGF敲低组穿过小孔细胞数较空白对照组及感染对照组明显降低，差异均有统计学意义（F=20.64，P=0.002）。实时定量PCR及Western blot检测结果显示，CTGF敲低组CTGF、FN、α-SMA、ColⅠ mRNA（F=128.83、124.44、144.76、1 374.44，P=0.000、0.000、0.000、0.000）和蛋白表达（F=22.55、41.60、25.73、161.68，P=0.002、0.000、0.001、0.000）较空白对照组、感染对照组明显降低，差异均有统计学意义。结论成功构建的CTGF shRNA慢病毒颗粒可有效抑制视网膜血管内皮细胞迁移并下调内源性CTGF的表达。

关键词：结缔组织生长因子慢病毒感染视网膜血管/细胞学内皮细胞

抗血管内皮生长因子药物治疗后视网膜血管内皮细胞基因表达谱的RNA—Seq分析

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中华眼底病杂志 2018年第3期34卷 275-280页

作者：牛瑞东莉洁马腾杜雪利何燕华崔伟娜胡博杰天津医科大学眼科医院天津医科大学眼科研究所天津医科大学眼视光学院 300384

目的观察抗血管内皮生长因子（VEGF）药物治疗后视网膜血管内皮细胞基因表达谱的RNA-Seq分析结果.方法体外培养视网膜血管内皮细胞,取对数生长期细胞用于实验.将细胞分为VEGF组、VEGF联合抗VEGF药物组.VEGF组细胞采用50 ng/ml VEGF持... 详细信息

目的观察抗血管内皮生长因子（VEGF）药物治疗后视网膜血管内皮细胞基因表达谱的RNA-Seq分析结果.方法体外培养视网膜血管内皮细胞,取对数生长期细胞用于实验.将细胞分为VEGF组、VEGF联合抗VEGF药物组.VEGF组细胞采用50 ng/ml VEGF持续作用72 h,以模拟糖尿病视网膜病变中血管内皮细胞的高VEGF生存环境.VEGF联合抗VEGF药物组细胞采用50 ng/ml VEGF＋2.5 μg/ml抗VEGF药物持续作用72 h,以仿效抗VEGF药物治疗后细胞所处的微环境.应用RNA-Seq技术对两组细胞进行全转录组测序,获得生物学大数据,并在此基础上分析差异表达基因;通过GO功能、Pathway显著性富集分析对差异基因的功能及所在的信号通路进行解释说明.结果分别获得两组细胞的基因表达谱信息.两组细胞之间共存在328个差异表达基因,包括194个上调基因和133个下调基因.差异基因功能涉及分子生物学过程调控以及细胞的能量代谢、蛋白合成等诸多方面,其中SI、PRX、HPGD与蛋白合成相关,BIRC7与细胞凋亡相关,而ABLIM1、CRB2与视网膜发育相关,ABCG1、ABCA9、ABCA12与巨噬细胞胆固醇和磷脂转运相关.GO功能显著性富集分析结果显示,差异基因的功能主要可以划分为生物学行为调控、细胞组分形成以及分子功能三大板块.Pathway显著性富集分析结果显示,Notch信号通路、细胞外基质受体通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、转化生长因子-β（TGF-β）信号通路、Wnt信号通路表达在两组细胞间存在差异,而其中又以与纤维化进程调控密切相关的TGF-β信号通路中钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱβ（CAMK2B）、胶原蛋白Ⅲ型α1链（COL3A1）、细胞球蛋白（CYGB）、前列腺素E受体2（PTGER2）、硫酸乙酰肝素6-O-磺基转移酶2等基因的差异表达最为引人关注.结论抗VEGF药物治疗后可能导致CAMK2B、COL3A1、CYGB、PTGER2等TGF-β通路相关基因的表达上调进而加剧视网膜纤维化进程.

关键词：视网膜血管/细胞学内皮细胞基因表达谱血管生成抑制剂/治疗应用

碳青霉烯类抗菌药物及替加环素的临床应用管理分析

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当代医学 2022年第2期28卷 156-158页

作者：张细红何燕华邱卫璠抚州市第一人民医院药剂科江西抚州344000

目的探讨碳青霉烯类抗菌药物及替加环素的临床应用管理。方法选取2017年1月至2020年5月本院收治的60例使用碳青霉烯类抗菌药物及替加环素患者作为研究对象,管理前组30例,管理后组30例,比较两组用药后费用、药物使用率、微生物送检率及... 详细信息

目的探讨碳青霉烯类抗菌药物及替加环素的临床应用管理。方法选取2017年1月至2020年5月本院收治的60例使用碳青霉烯类抗菌药物及替加环素患者作为研究对象,管理前组30例,管理后组30例,比较两组用药后费用、药物使用率、微生物送检率及恢复时间和平均住院时间。结果管理后组患者使用碳青霉烯类抗菌药物及替加环素药物平均费用占比明显低于管理前组,差异有统计学意义(P<0.05);管理后组患者对碳青霉烯类抗菌药物及替加环素药物使用率明显低于管理前组,差异有统计学意义(P<0.05);管理后组碳青霉烯类抗菌药物及替加环素药物送检率明显高于管理前组,差异有统计学意义(P<0.05);管理后组患者住院时间及恢复时间均明显短于管理前组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论碳青霉烯类抗菌药物及替加环素的临床应用管理具有重要意义,能降低患者平均药物费用,降低药物使用率,提高药物送检率,缩短患者平均住院时间及恢复时间,值得临床推广应用。

关键词：临床应用管理碳青霉烯类抗菌药物替加环素

慢病毒介导稳定表达Cas9蛋白的鸡成纤维细胞系构建及其活性验证

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广东农业科学 2023年第2期50卷 125-135页

作者：李晓娇朱新宇邹娴严霞何燕华罗成龙仲恺农业工程学院动物科技学院广东广州510225 广东省农业科学院动物科学研究所/畜禽育种国家重点实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东广州510640

【目的】筛选稳定表达Cas9蛋白的鸡成纤维细胞系(DF-1),并基于单链退火修复机制(Single Strand Annealing, SSA)的报告载体系统,检测DF-1细胞系中的Cas9核酸酶活性。【方法】将携带Cas9蛋白的慢病毒载体质粒与辅助质粒一起转染293T细胞... 详细信息

【目的】筛选稳定表达Cas9蛋白的鸡成纤维细胞系(DF-1),并基于单链退火修复机制(Single Strand Annealing, SSA)的报告载体系统,检测DF-1细胞系中的Cas9核酸酶活性。【方法】将携带Cas9蛋白的慢病毒载体质粒与辅助质粒一起转染293T细胞包装慢病毒,收集慢病毒Cas9上清液感染DF-1细胞,经抗生素筛选得到稳定表达Cas9蛋白的DF-1细胞,分别用PCR和Western blot验证阳性DF-1细胞表达Cas9蛋白的情况;选择鸡卵清白蛋白(OVA)基因的sgRNA序列,将sgRNA退火产物克隆至pYP152构建sgRNA表达载体,并在sgRNA靶位点两端设计引物扩增OVA基因靶片段,将靶片段克隆至报告载体pCMV-SSA-mCherry-HindⅢ,以破坏mCherry蛋白的表达,之后再将sgRNA表达载体与SSA报告载体共同转染稳定表达Cas9蛋白的DF-1细胞,最后在荧光显微镜下分析不同稳转株对mCherry蛋白表达的修复情况。【结果】经抗生素筛选得到27株稳定表达Cas9蛋白的DF-1细胞系,采用PCR扩增稳转细胞基因组,结果显示这些细胞具有Cas9蛋白基因序列,Western blots试验结果显示上述稳转细胞株均表达Cas9蛋白;sgRNA表达载体与mCherry-SSA报告载体共转后,通过荧光显微镜观察发现筛选到的稳转细胞株均可恢复报告载体中mCherry蛋白的表达。【结论】成功构建了具有切割活性的稳定表达Cas9蛋白的DF-1细胞系,可为后续在稳定表达Cas9蛋白的DF-1细胞系上开展鸡相关功能基因研究提供基础材料。

关键词：稳定表达慢病毒 CRISPR/Cas9 SSA修复载体构建 DF-1

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2010年以来我国口蹄疫流行情况及现状分析

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黑龙江畜牧兽医 2018年第6期 80-83,240页

作者：黄新韩猛立张星星吴桐忠何延华钟发刚新疆农垦科学院省部共建新疆绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室

口蹄疫是影响世界畜牧业发展的重要疫病之一。除一些养殖业较发达国家已消灭了该病外,其他大多数国家,尤其发展中国家,仍不断发生和流行该病。近些年来我国在口蹄疫防控方面取得了较大进展,尤其在病原诊断监测和疫苗生产技术等方面已达... 详细信息

口蹄疫是影响世界畜牧业发展的重要疫病之一。除一些养殖业较发达国家已消灭了该病外,其他大多数国家,尤其发展中国家,仍不断发生和流行该病。近些年来我国在口蹄疫防控方面取得了较大进展,尤其在病原诊断监测和疫苗生产技术等方面已达到了世界水平,口蹄疫整体防控进入了一个新阶段。2010年以来我国公开报道各类口蹄疫疫情64起,其中西藏地区22起、新疆地区11起,占疫情报道数的51.56%。虽然疫情数量逐年递减,但口蹄疫疫情的发生流行存在很多不确定因素。笔者就我国2010年以来口蹄疫发生流行数据及资料,结合我国主要疫情流行区域实际防控现状,分析了我国口蹄疫流行可能存在的风险,以期为更有效地防控口蹄疫提供参考。

关键词：中国口蹄疫流行情况现状分析

城市群-开发区-产业集群互动研究的理论思考

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地理科学 2018年第1期38卷 49-57页

作者：唐承丽吴佳敏贺艳华周国华马保文陈伟杨湖南师范大学资源与环境科学学院湖南长沙410081 湖南师范大学地理空间大数据挖掘与应用湖南省重点实验室湖南长沙410081

以相互作用理论为指导,系统解析了城市群-开发区-产业集群互动研究的总体思路、研究内容与研究方法。基于理论分析,提出城市群-开发区-产业集群是相互耦合的复杂网络系统,三者的互动研究应遵循互动影响因素分析、互动方式识别、互动机... 详细信息

以相互作用理论为指导,系统解析了城市群-开发区-产业集群互动研究的总体思路、研究内容与研究方法。基于理论分析,提出城市群-开发区-产业集群是相互耦合的复杂网络系统,三者的互动研究应遵循互动影响因素分析、互动方式识别、互动机制揭示、互动强度与协调度测度、互动模式探讨和互动路径设计的分析框架,并采用多学科融贯的综合研究、大数据分析、GIS空间分析、多智能体和元胞自动机建模等方法进行研究。

关键词：城市群开发区产业集群元胞自动机建模