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6-姜烯酚通过调控微小RNA-26a-5p/DAPK1减轻脑缺血/再灌注损伤的机制研究

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中华危重病急救医学 2024年第6期36卷 616-623页

作者：李世欣饶欧阳朱宁周航向陶浚泠李叶红刘颖贵州医科大学贵阳550004 贵州医科大学附属医院重症医学科贵阳550004

目的探讨6-姜烯酚(6-sh)是否通过促进微小RNA-26a-5p(miR-26a-5p)表达并抑制死亡相关蛋白激酶1(DAPK1),减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)神经细胞自噬及神经细胞钙超载,并探究其潜在机制。方法取体外培养的对数生长期小鼠海马神经元HT22细胞,... 详细信息

目的探讨6-姜烯酚(6-sh)是否通过促进微小RNA-26a-5p(miR-26a-5p)表达并抑制死亡相关蛋白激酶1(DAPK1),减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)神经细胞自噬及神经细胞钙超载,并探究其潜在机制。方法取体外培养的对数生长期小鼠海马神经元HT22细胞,用细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,寻找Na2S2O4的最佳制模浓度。将HT22细胞分为空白对照组(NC组)、OGD/R组(无糖培养基+10 mmol/L Na2S2O4处理1.5 h后换正常培养基培养4 h)、6-sh干预组(OGD后用10μmol/L 6-sh培养4 h)、阴性对照抑制剂预处理组(阴性对照抑制剂转染48 h后行OGD,再用6-sh培养4 h)、miR-26a-5p抑制剂预处理组(miR-26a-5p抑制剂转染48 h后行OGD,再用6-sh培养4 h)。采用CCK-8法检测各组细胞活性;透射电镜下观察细胞超微结构;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测DAPK1、miR-26a-5p基因表达;分子对接验证6-sh与miR-26a-5p的相互作用;双荧光素酶验证DAPK1与miR-26a-5p的靶向关系;流式细胞仪测定细胞内Ca2+水平;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测磷酸化谷氨酸受体2B(p-NMDAR2B)Ser1303、DAPK1、自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p-DAPK1 Ser308蛋白表达;免疫荧光法检测LC3和Beclin1的表达。结果CCK-8法检测结果显示,6-sh干预组细胞活性较OGD/R组明显升高,miR-26a-5p抑制剂预处理组细胞活性较6-sh干预组明显降低。透射电镜下显示,6-sh干预组自噬小体较OGD/R组明显减少,miR-26a-5p抑制剂预处理组自噬小体较6-sh干预组明显增多。RT-qPCR检测结果显示,与OGD/R组比较,6-sh干预组miR-26a-5p表达明显上调,DAPK1 mRNA表达明显下调;与6-sh干预组比较,miR-26a-5p抑制剂预处理组miR-26a-5p表达明显下调,DAPK1 mRNA表达明显上调。分子对接验证6-sh与miR-26a-5p可互相作用。双荧光素酶报告基因检测显示,与阴性对照组比较,mmu-miR-26a-5p显著下调m-DAPK1-3UTR-WT的荧光素酶表达,说明两者之间存在结合作用。流式细胞仪检测结果显示,与OGD/R组比较,6-sh干预组细胞内Ca2+水平明显降低;与6-sh干预组比较,miR-26a-5p抑制剂预处理组Ca2+水平明显升高。Western blotting检测结果显示,与OGD/R组比较,6-sh干预组p-NMDAR2B Ser1303、DAPK1、Beclin1、LC3蛋白表达均明显降低(p-NMDAR2B Ser1303/β-actin:2.34±0.27比4.78±0.39,DAPK1/β-actin:1.40±0.13比2.37±0.21,Beclin1/β-actin:2.61±0.32比4.32±0.29,LC3/β-actin:2.52±0.45比5.09±0.18,均Psh干预组比较,miR-26a-5p抑制剂预处理组p-NMDAR2B Ser1303、DAPK1、Beclin1、LC3蛋白表达明显升高(p-NMDAR2B Ser1303/β-actin:4.08±0.14比2.34±0.27,DAPK1/β-actin:1.96±0.15比1.40±0.13,Beclin1/β-actin:3.92±0.31比2.61±0.32,LC3/β-actin:4.33±0.33比2.52±0.45,均Psh干预组LC3、Beclin1荧光强度明显降低;与6-sh干预组比较,miR-26a-5p抑制剂预处理组LC3、Beclin1荧光强度明显升高。结论6-sh可通过调控miR-26a-5p/DAPK1减轻细胞自噬及钙超载,从而减轻神经细胞损伤。

关键词：自噬脑缺血/再灌注损伤钙超载 6-姜烯酚微小RNA-26a-5p/死亡相关蛋白激酶1

玉树地震震前甘孜—玉树断裂局部应力场时空偏转特征的离散元模拟研究

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地球学报 2024年第2期45卷 203-216页

作者：张涛苏占东孙进忠张建勇唐磊周剑王磊张明磊防灾科技学院地质工程学院河北三河065201 河北省地震灾害防御与风险评价重点实验室河北三河065201 中国地质大学(北京)工程技术学院北京100083 中国地震台网中心北京100045 北京工业大学城市与工程安全减灾教育部重点实验室北京100124

区域地质构造活动会改变地壳的应力状态,构造地震是区域地质构造活动的极端方式,了解震前发震断裂局部应力场的变化规律对断裂活动性的表征具有重要意义。为此,利用颗粒离散元软件PFC~(2D),以玉树地震台站YRY-4钻孔应变仪的监测数据为依... 详细信息

区域地质构造活动会改变地壳的应力状态,构造地震是区域地质构造活动的极端方式,了解震前发震断裂局部应力场的变化规律对断裂活动性的表征具有重要意义。为此,利用颗粒离散元软件PFC~(2D),以玉树地震台站YRY-4钻孔应变仪的监测数据为依据,模拟2010年4月14日玉树M_S 7.1级地震发震断裂,甘孜—玉树走滑断裂,震前局部应力场最大主应力方向的时空偏转特征。研究表明,震前玉树台站位置的模拟最大水平主应力sh方向出现逆时针偏转,在积累了一定应变能后偏转逐步恢复,模拟局部应力方向的变化趋势与现场实际观测结果基本一致。断裂处不同位置sh变化规律不同,距离断裂构造越近,局部应力受到的扰动越明显;位于拉应力集中区的shT和压应力集中区的shP同时向两者所在区域的分界方向旋转,且偏转角随时步的增加逐步增大;不同区域的应力积累程度不同,且随着加载时间的推移而增强,并在不同时刻发生破裂,具有明显的时空异步效应。

关键词：玉树地震甘孜—玉树断裂离散元局部应力场偏转角

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Effect of vertical electromagnetic stirring on solute distribution in billet continuous casting process

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Journal of Iron and Steel Research International 2022年第1期29卷 132-143页

作者： tao Wang En-gang Wang Yves Delannoy Yves Fautrelle Olga Budenkova Key Laboratory of Electromagnetic Processing of Materials(Ministry of Education) Northeastern UniversityShenyang 110004LiaoningChina CNRS Grenoble INPSIMAPUniversité Grenoble AlpesGrenoble 38000France School of Metallurgy Northeastern UniversityShenyang 110004LiaoningChina CNRS Grenoble INPLEGIUniversité Grenoble AlpesGrenoble 38000France

A volume averaged columnar solidification model,which couples the flow,temperature and solute concentration fields,is applied to simulate experimental continuous casting cases with and without vertical electromagnetic stirring(V-EMS).The calculated distribution of magnetic induction intensity and final macrosegregation maps are consistent with the experimental *** results reveal that the V-EMS promotes longitudinal melt flow,accelerates heat dissipation and solidification and finally reduces the central segregation of ***,when V-EMS is applied,the solute distribution becomes asymmetric because the melt flow shows opposite directions between the near and far sides from *** obvious positive segregation band is observed at about 1/4 width of the billet near the stirrer in both calculated and experimental *** position and degree of such positive segregation could be affected by installation height of stirrer,as demonstrated by additional simulation cases.

关键词： Vertical electromagnetic stirring Macrosegregation Volume averaged method Continuous casting

CD36与肝细胞癌细胞增殖和迁移的关系及其对人肝癌细胞异种移植裸鼠模型的影响

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肿瘤研究与临床 2024年第2期36卷 98-104页

作者：张立洪吴巍胥广才张培建陶立德扬州大学附属医院肝胆外科扬州225012

目的观察CD36在肝细胞癌组织和细胞株中的表达水平,探讨CD36对人肝细胞癌细胞株增殖、迁移能力及人肝癌细胞异种移植裸鼠模型的影响。方法基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库相关信息分析371份肝细胞癌及癌旁组织中CD36转录本表达水平差异... 详细信息

目的观察CD36在肝细胞癌组织和细胞株中的表达水平,探讨CD36对人肝细胞癌细胞株增殖、迁移能力及人肝癌细胞异种移植裸鼠模型的影响。方法基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库相关信息分析371份肝细胞癌及癌旁组织中CD36转录本表达水平差异。前瞻性收集2019年1月至2021年2月就诊于扬州大学附属医院行手术治疗的48例肝细胞癌患者癌组织及相应的癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织中CD36 mRNA水平。采用蛋白质印迹法检测人肝癌细胞株Huh7、HCCLM3及人正常肝细胞株LO2中CD36蛋白水平。将载有CD36干扰序列的质粒和空质粒转染到Huh7细胞或HCCLM3细胞,分别为sh-CD36组和对照组;采用CCK-8法检测培养0、12、24、36、48、60 h各组细胞的增殖能力(以吸光度值表示),采用划痕愈合实验、Transwell实验检测各组细胞迁移能力。将sh-CD36组或对照组Huh7细胞注射于BALB/c裸鼠腋窝皮下,每组4只,构建人肝癌异种移植裸鼠模型;接种1周后每周测量肿瘤长径、短径并计算肿瘤体积,接种5周后处死裸鼠,收集肿瘤标本并称量质量;显微镜下观察肿瘤组织细胞形态,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD36、Ki-67蛋白表达情况。结果对TCGA数据库数据分析显示,肝癌组织中CD36转录本水平较癌旁组织高(4.2±1.8比3.2±1.5,t=2.28,P=0.035)。qRT-PCR法对48例肝细胞癌患者组织检测显示,肝癌组织中CD36 mRNA相对表达量高于癌旁组织(0.76±0.26比0.48±0.23,t=3.52,Psh-CD36组Huh7和HCCLM3细胞CD36均低于对应的对照组(均Psh-CD36组Huh7细胞和HCCLM3细胞分别于培养36 h和24 h开始增殖能力均低于对应的对照组(均Psh-CD36组Huh7细胞[(12±3)%比(30±5)%,t=4.01,Psh-CD36组Huh7细胞[(46±6)个/视野比(88±6)个/视野,t=5.56,Psh-CD36组Huh7细胞的裸鼠肿瘤体积[(682±268)mm3比(1375±512)mm3,t=4.73,P=0.006]和肿瘤质量[(432±95)mg/只比(871±109)mg/只,t=6.57,Psh-CD36组Huh7细胞的裸鼠移植瘤标本中肿瘤细胞密度低于注射对照组Huh7细胞的裸鼠,CD36和Ki-67蛋白的表达水平亦均低。结论CD36在肝细胞癌患者癌组织及人肝癌Huh7、HCCLM3细胞株中表达均上调,其可能与肝癌细胞增殖和迁移相关。敲低CD36表达体外可明显抑制肝癌细胞增殖和迁移能力,对人肝癌细胞异种移植裸鼠模型肿瘤有抑制作用。

关键词：癌,肝细胞抗原,CD36 细胞增殖细胞运动

β淀粉样蛋白42寡聚体诱导神经元毒性和阿尔茨海默病病理形成

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第5期26卷 562-566页

作者：邓佳君陶倩刘斌罗衍愈朱仪岳峰海南大学生物医学工程学院海南省生物医学工程重点实验室海口570228 昆明理工大学灵长类转化医学研究院

目的探究β淀粉样蛋白(Aβ)42寡聚体对神经元毒性的作用及诱导产生类似阿尔茨海默病(AD)病理的机制。方法采用Western blot检测和透射电子显微镜对合成的Aβ_(42)寡聚体进行鉴定。为评估Aβ_(42)寡聚体的影响,使用2,5-二苯基四氮唑溴盐... 详细信息

目的探究β淀粉样蛋白(Aβ)42寡聚体对神经元毒性的作用及诱导产生类似阿尔茨海默病(AD)病理的机制。方法采用Western blot检测和透射电子显微镜对合成的Aβ_(42)寡聚体进行鉴定。为评估Aβ_(42)寡聚体的影响,使用2,5-二苯基四氮唑溴盐检测细胞活性,将10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与人神经母细胞瘤系(sh-SY5Y)细胞共孵育12h和24h,与人胚胎干细胞(heSC)衍生的谷氨酸能神经元共孵育24h、48h和96h,同时设立相应对照组。原位末端标记法检测谷氨酸能神经元凋亡情况;免疫荧光染色法检测AD相关病理Aβ斑块及p-tau病理变化。结果Western blot显示,Aβ_(42)寡聚体样品中观察到单体和小分子量聚集体(sh-SY5Y细胞共孵育12h、24h,细胞存活率显著低于其对照组[(70.89±2.54)%vs(100.00±2.02)%,(52.63±3.37)%vs(100.00±2.80)%,Psh-SY5Y细胞和谷氨酸能神经元均具有毒性,可以诱导谷氨酸能神经元产生AD样病理。

关键词：阿尔茨海默病淀粉样β肽类神经元细胞凋亡 β淀粉样蛋白(Aβ)42寡聚体

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河冰数学模型

北京水利科技 1990年第2期 66-69页

作者： tao,sh 李善征

Functionalized nanographene oxide/PEG/rhodamine B/gold nanocomposite for electrochemical determination of glucose

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Journal of Materials Science & Technology 2022年第27期122卷 141-147页

作者： Wenhao Qian tao Song Mao Ye Xiaoyu Huang Yongjun Li Bingjie Hao Department of Stomatology shanghai Xuhui District Dental Center 500 Fenglin RoadShanghai 200032China Key Laboratory of Synthetic and Self-Assembly Chemistry for Organic Functional Molecules Center for Excellence in Molecular SynthesisChinese Academy of SciencesShanghai Institute of Organic ChemistryUniversity of Chinese Academy of SciencesShanghai 200032China

Diabetes,one of the most serious metabolism diseases,has continually plagued human beings so that timely monitored blood glucose level is very *** nanoparticles(Au NPs)have been considered as potential substitutes for non-enzymatic sensors,due to their unusual physicochemical property and efficient catalytic ***,we prepared a facial platform for Au NPs to maintain good dispersity and inherent physicochemical *** this special platform(sh-n GO-PEG-Rh B),nanographene oxide(n GO)was employed as an ideal base,which provided adequate carboxyls for conjugating with poly(ethylene glycol)(PEG),and enough epoxy groups for thiol active site.A functional dye(rhodamine B)with preferable fluorescence properties was also introduced into this *** NPs were then aptly in situ grown on the platform via reduction of HAuCl_(4) under mild conditions,providing Au NPs@shn GO-PEG-Rh *** nanocomposite was cast on a glassy carbon electrode(GCE)conveniently,yielding GCE/Au NPs@sh-n GO-PEG-Rh ***,as shown by cyclic voltammetry(CV)and ready-state amperometry,GCE/Au NPs@sh-n GO-PEG-Rh B was capable of electrochemical determination of glucose so as to provide an efficient sensor for glucose determination with dye tracer.

关键词： Nano-graphene oxide Gold nanoparticles Glucose Biosensor Rhodamine B

Fabrication of porous TiZrNbTa high-entropy alloys/Ti composite with high strength and low Young’s modulus using a novel MgO space holder

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Journal of Materials Science & Technology 2023年第36期167卷 59-73页

作者： tao Xiang Jie Chen Weizong Bao shuyan Zhong Peng Du Guoqiang Xie School of Materials Science and Engineering Harbin Institute of Technology(Shenzhen)Shenzhen 518055China State Key Laboratory of Advanced Welding and Joining Harbin Institute of TechnologyHarbin 150001China

Stress shielding is caused by the mismatch of stiffness between bone and implant materials,which may give rise to bone resorption and loosening,thereby causing implantation *** is a huge gap between Young’s modulus of human bone and low Young’s modulusβTi alloys.A porous structure design can achieve the target of low Young’s modulus,and thus achieve the matching between human bone and implant ***,a suitable space holder(sh)that can be applied at high temperatures and sintering pressure has not been *** this study,the TiZrNbTa/Ti titanium matrix composite(TMC)with high strength and large ductility was used as scaffold materials and combined the sh technique with the spark plasma sintering(SPS)technique to obtain a porous structure.A novel space holder,i.e.,MgO particles was adopted,which can withstand high-temperature sintering accompanied by a sintering *** porous TiZrNbTa/Ti with 40 vol.%MgO added exhibits a maximum strength of 345.9±10.4 MPa and Young’s modulus of 24.72±0.20 GPa,*** possesses higher strength compared with human bone and matches Young’s modulus of human bone,which exhibits great potential for clinical application.

关键词： TiZrNbTa/Ti titanium matrix composite MgO space holder Low Young’s modulus High strength

考虑时间效应的钢渣填料动力特性与微观结构研究

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防灾减灾工程学报 2024年第4期44卷 940-951页

作者：蒋飞王丽艳刘涛余曜宏王炳辉农珍珍江苏科技大学土木工程与建筑学院江苏镇江212003

钢渣是冶金行业的第二大废弃物,充分利用废弃钢渣代替部分砂石料作为新型的土工填料,符合“绿色经济”与“可持续发展”战略。因钢渣材料有别于砂石料,化学成分复杂,而力学特征具有时效特性,采用共振柱试验研究考虑水化期影响的钢渣动... 详细信息

钢渣是冶金行业的第二大废弃物,充分利用废弃钢渣代替部分砂石料作为新型的土工填料,符合“绿色经济”与“可持续发展”战略。因钢渣材料有别于砂石料,化学成分复杂,而力学特征具有时效特性,采用共振柱试验研究考虑水化期影响的钢渣动力特性,分析动剪切模量和阻尼比等动力特性变化规律;基于Hardin-Drnevich双曲线模型描述考虑时间效应的钢渣动力特性,采用Boltzman函数描述最大动剪切模量随水化期变化的关系,给出最大阻尼比范围;并与传统砂土的动力特性对比,得出水化前钢渣动剪切模量略高于传统细砂,水化90 d后可达到标准砂的最大动剪切模量,工程中可以用钢渣作为一种填料代替砂土。最后,通过微观电子显微镜方法分析不同水化期下的钢渣微观结构,发现水化产物Aft相较于其他水化产物生成时间较晚,Aft和C-S-H所组成的胶凝结构是影响钢渣动力特性时效特征的主要因素。

关键词：钢渣水化期共振柱试验动剪切模量阻尼比微观结构