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The coxsackievirus A16 infection suppresses MAVS-induced apoptosis and type Ⅰ interferon activation

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The coxsackievirus A16 infection suppresses MAVS-induced apo...

alloantigen- and nominal antigen-induced CD8+ T-cell responses in vitro with similar peptide-specificity

第十一届全国免疫学学术大会

作者： Shi Yingying Tu Huilin Qiu Wenhong Huang Lixia gong yeli He Xiaohua Liu Wanhong Department of Immunology School of MedicineJianghan University Pathogenic Organism and Infectious Diseases Research Institute School of Basic Medical SciencesWuhan University

Background: Coxsackievirus A16(CA16) is one of the major causative agents of hand, foot and mouth disease(HFMD), which is characterized by herpetic lesions on the hands, feet and oral mucosa in children less than 5 years old. The mitochondrial antiviral signaling protein(MAVS) plays important roles in host defense against viral infection by inducing type I interferon. However, the relationship between CA16 infection and MAVS still remain ***: The aim of this study was to investigate the relationship between CA16 infection and ***: Quantitative real time PCR(qRT-PCR) and western blot were adopted to study the effect of CA16 infection on MAVS expression. Both overexpression and silencing of MAVS expression were employed to detect the effect of MAVS on CA16 replication. In addition, the plasmids over-expressing each viral nonstructural proteins were constructed and transfected into RD cells to investigate the influence of CA16 proteins on the functions of ***: CA16 infection inhibited MAVS expression. MAVS in turn suppressed CA16 replication by both apoptosis induction depending on JNK and ERK signals and type I interferon activation. We further demonstrated that viral protein 2C, 3D downregulated MAVS-induced apoptosis. Meanwhile, 2A and 3C greatly blocked the MAVS mediated activation of IFN-β. Furthermore, MAVS can be cleaved by 3C which is a vital ***: These data provide direct and compelling evidence that CA16 has evolved new strategies by which CA16 evades the host immune system and regulates apoptosis by targeting MAVS, which suggest new targets for anti-HFMD strategies.

关键词： Coxsackievirus A16(CA16) viral protein apoptosis type I interferon

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alloantigen- and nominal antigen-induced CD8+ T-cell respons...

人MR1/IgG1Fc二聚体融合蛋白的构建、表达及功能检测

第八届全国免疫学学术大会

作者： Qian Yu Li Zhang Lichen Ouyang yeli gong Zhihui Liang Xiufang Weng Xiongwen Wu Department of Immunology Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Department of Microbiology and Immunology Xuzhou Medical College

Backgroud:Raising tumor-specific allo-restricted T cells in vitro for adoptive transfusion is expected to circumvent host ***, it has been assumed that allo-reactive T cell clones activated and expanded in vitro ranges from peptide-specific with high avidity to peptide-degenerate with low ***:This study may help to develop strategies to raise allo-reactive T cells with high-avidity TCRs specific for tumor or virus ***:In this study, we examined the peptide specificity and cross-reactivity of T cell responses in vitro toan allogeneic epitope and a nominal epitope with a modified co-culture of lymphocytes and autologous *** binding to the monocyte via the interaction of its Fc part and the cell surface Ig G Fc receptor type I(Fcγ RI), a fusion protein consisting of the extracellular domains of HLA-A2 molecule and the Fc region of Ig G1(the dimer) introduced a single epitope into the ***:The dimer-coated monocytes stimulated the proliferation of autologous CD8+ T cells after *** CD8+ T cell responses were self-HLA-restricted for HLA-A2 positive(HLA-A2+ve) samples and allo-HLA-restricted for HLA-A2 negative(HLA-A2-ve) samples, since the co-cultural bulks stained with HLA-A2 tetramers and IFN-γ production of the sorted CD8+ T cells in response to TCR ligands exhibited peptide-specific *** HLA-A2-restricted peptides with sequence homology were included, allowing the comparison of peptide cross-reactivity between allo-antigen- and nominal antigen-induced CD8+ T cell ***, the allo-HLA-restricted and self-HLA-restricted CD8+ T-cell responses were similar in the peptide cross-reactivity, although the allo-response seemed overall more ***:Our findings indicated the allo-reactive T cells raised by the co-culture in vitro were as peptide specific and cross-reactive as the self-HLA restricted T cells.

关键词： allo-antigen nominal antigen peptide-specificity cross-reactivity HLA-A2 dimer

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华中科技大学学报:医学版 2023年第5期52卷 649-655页

作者：赵桂华龚业莉翁秀芳江汉大学医学部免疫学教研室武汉430056 华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系武汉430030

目的构建MR1/IgG1Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1Fc二聚体,制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业... 详细信息

目的构建MR1/IgG1Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1Fc二聚体,制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业化合成MR1胞外段和IgG1Fc融合基因的全序列基因MR1/IgG1Fc,与β2m基因重组构建pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]表达载体;利用Bac-to-Bac昆虫表达系统表达MR1/IgG1Fc二聚体融合蛋白,并通过双抗体夹心ELISA、Western blot及流式细胞术进行检测。建立MR1/IgG1Fc二聚体加载的人工抗原提呈细胞(artificial antigen presenting cells,aAPCs),即MR1aAPCs,提呈大肠埃希菌(DH5α)来源的代谢物,与人外周血单个核细胞共培养,检测MAIT细胞的活化和增殖水平。结果经PCR及测序鉴定证实pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]载体中MR1/IgG1Fc与β2m具有正确序列。ELISA、Western blot及流式细胞术检测结果表明MR1/IgG1Fc二聚体在重组杆粒感染的Sf9细胞培养上清富集,具有正确构象。加载DH5α来源代谢物的MR1aAPCs能够促进MAIT细胞活化和增殖。结论成功构建pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]重组质粒,并在Sf9细胞中表达MR1/IgG1Fc二聚体,制备获得MR1aAPCs,为研究MAIT细胞反应性代谢物及MAIT细胞功能提供了新的工具。

关键词：黏膜相关恒定T细胞 MR1/IgG1Fc二聚体人工抗原提呈细胞反应性代谢物

CD4^+CD25^+调节性T细胞移植对自身免疫性脑脊髓膜炎大鼠的保护作用

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免疫学杂志 2016年第9期32卷 772-776页

作者：龚业莉何峰容李佳楠黄丽霞江汉大学医学院武汉430056 武汉云克隆科技股份有限公司 430056 江汉大学生命科学学院武汉430056

目的观察输注CD4^+CD25^+调节性T细胞对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)模型大鼠后脑和脊髓组织的保护作用及相关机制。方法取SD大鼠30只,随机均分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(CD4^+CD25^+调节性T细... 详细信息

目的观察输注CD4^+CD25^+调节性T细胞对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)模型大鼠后脑和脊髓组织的保护作用及相关机制。方法取SD大鼠30只,随机均分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(CD4^+CD25^+调节性T细胞输注),对EAE大鼠进行神经功能评分及体质量测量,通过病理学HE染色和免疫组化观察脑和脊髓炎症浸润,实时荧光定量PCR(qPCR)检测鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 m RNA水平表达。结果实验组SD大鼠神经功能评分明显改善,体质量明显增加;与模型组比较,实验组神经症状和病理改变减轻,鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23 mRNA表达下降,而Foxp3 mRNA表达增加(P<0.05)。结论 CD4^+CD25^+调节性T细胞通过调节免疫系统的脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 mRNA水平的表达对EAE起保护作用。

关键词： CD4^+CD25^+调节性T细胞白介素-17 自身免疫性脑脊髓膜炎白介素-23

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高校教师学术道德失范成因及治理策略

科教导刊 2019年第4期 84-85页

作者：欧阳礼辰龚业莉江汉大学医学院湖北武汉430056

近年来,高校教师学术道德失范现象层出不穷,极大损害了高校教师的良好形象。其背后的原因是多元化的,既有教师自身的原因也有外界环境及体制原因等。本文分析了高校教师学术道德失范现象背后的原因,提出从树立高校教师正确的学术价值观... 详细信息

近年来,高校教师学术道德失范现象层出不穷,极大损害了高校教师的良好形象。其背后的原因是多元化的,既有教师自身的原因也有外界环境及体制原因等。本文分析了高校教师学术道德失范现象背后的原因,提出从树立高校教师正确的学术价值观、加大惩罚力度、加强社会媒体及同业监督及改革学术评价体系这四个方面来杜绝高校教师学术不端行为。

关键词：高校教师学术道德失范治理策略

白藜芦醇诱导人胶质瘤细胞U251增殖抑制与凋亡的作用研究

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中华中医药学刊 2017年第5期35卷 1094-1096页

作者：郭培中杨小梅龚业莉袁发浒黄丽霞武汉市中西医结合医院肿瘤科湖北武汉430022 江汉大学医学院湖北武汉430056

目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链反... 详细信息

目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链反应法检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax mRNA水平。采用Western blotting检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:白藜芦醇抑制U251细胞的增殖和Wnt、β-catenin、p53、p21和Bcl-2的表达,且呈浓度依赖性;促进U251细胞凋亡和Bax的表达。结论:白藜芦醇诱导U251细胞增殖抑制和凋亡与抑制Wnt/β-actin/p53信号通路激活相关。

关键词：白藜芦醇 U251 增殖凋亡 Wnt/β-catenin/p53

MAIT细胞在肝炎发生发展中的作用研究进展

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江汉大学学报（自然科学版） 2023年第3期51卷 68-74页

作者：赵桂华夏雯雯龚业莉江汉大学医学部湖北武汉430056

黏膜相关恒定T(MAIT)细胞是一种非传统的固有免疫样T细胞,其激活方式不同于传统T细胞,其TCR主要识别主要组织相容性复合物相关蛋白1(MR1)提呈的抗原,其激活也可通过识别腺病毒载体及IL-12、IL-18等细胞因子完成。活化后的MAIT细胞可释... 详细信息

黏膜相关恒定T(MAIT)细胞是一种非传统的固有免疫样T细胞,其激活方式不同于传统T细胞,其TCR主要识别主要组织相容性复合物相关蛋白1(MR1)提呈的抗原,其激活也可通过识别腺病毒载体及IL-12、IL-18等细胞因子完成。活化后的MAIT细胞可释放多种细胞因子,直接或间接参与机体免疫应答。MAIT细胞主要分布于黏膜组织和肝脏中,在肝脏中占T细胞的比例可高达50%。MAIT细胞在治疗肝脏疾病过程中发挥着重要作用。肝炎是许多肝脏疾病的早期诱导因素,早期的肝炎得不到及时治疗就会发展为慢性肝炎甚至肝癌。就MAIT细胞应对肝炎所发挥的免疫作用展开综述。

关键词：黏膜相关恒定T淋巴细胞肝炎疾病发展免疫效应

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临床免疫学教学中形成性评价的实践与思考

基础医学教育 2017年第1期19卷 11-13页

作者：龚业莉刘玲王永平江汉大学医学院免疫学教研室武汉430056 普爱医院科研教学部江汉大学医学院党委办公室

形成性评价通过多元化方式对学生的学习态度、学习能力及学习效果等方面进行综合评估,评价结果更加客观真实,同时促进教师教学能力的提高。形成性评价不仅能充分调动学生的学习积极性,还能帮助教师优化教案结构,从而提高临床免疫学教学... 详细信息

形成性评价通过多元化方式对学生的学习态度、学习能力及学习效果等方面进行综合评估,评价结果更加客观真实,同时促进教师教学能力的提高。形成性评价不仅能充分调动学生的学习积极性,还能帮助教师优化教案结构,从而提高临床免疫学教学质量。

关键词：临床免疫学 PBL教学形成性评价

EGCG对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的保护作用

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免疫学杂志 2017年第5期33卷 376-382页

作者：龚业莉张雯柳威许想宁赵丹熊哲宋文剑舒细记江汉大学医学院免疫学教研室武汉430056 江汉大学护理与医学技术学院武汉430056

目的观察绿茶提取物EGCG对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的治疗作用及相关机制。方法取C57BL/6小鼠,随机分为对照组、EAE模型组和EGCG治疗组,对各组小鼠进行神经功能评分,并对中枢神经系统炎性浸润情况进行观察;流式细胞技术检测Th... 详细信息

目的观察绿茶提取物EGCG对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的治疗作用及相关机制。方法取C57BL/6小鼠,随机分为对照组、EAE模型组和EGCG治疗组,对各组小鼠进行神经功能评分,并对中枢神经系统炎性浸润情况进行观察;流式细胞技术检测Th1、Th17细胞在中枢神经系统中频率变化;免疫组化观察25 d脑组织IFN-γ、IL-17和TGF-β的表达情况;ELISA检测血清中IFN-γ、、IL-17、TGF-β、IL-10、IL-4的质量浓度。结果 EGCG治疗明显缓解EAE小鼠疾病症状和中枢神经系统炎症,抑制Th1与Th17细胞向中枢神经系统浸润。与EAE模型组相比,EGCG治疗组脑IFN-γ及IL-17表达上调,而TGF-β表达下调;外周血中可溶性上述细胞因子表达情况与脑一致。结论 EGCG可能通过影响中枢神经系统及外周血中IFN-γ、IL-17、TGF-β的表达,调控T细胞亚群的分化对EAE发挥保护作用。

关键词： EGCG 实验性自身免疫性脑脊髓炎 TGF-β IFN-γ IL-17