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野生及笼养猕猴SV40T抗原基因检测方法的建立

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中国比较医学杂志 2008年第3期18卷 59-63页

作者：唐东红任英黄璋琼陈谨叶尤松匡德宣高家红代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 云南省中医学院昆明650200

目的建立猴外周血单核细胞SV40 DNA的PCR检测方法,对猕猴SV40 T抗原基因进行检测。方法使用PCR方法对分别来自野外(云南宁蒗71只、景东60只)及笼养猕猴(64只)的SV40大T抗原基因进行检测,同时对扩增出的阳性结果进行测序。结果在195份样... 详细信息

目的建立猴外周血单核细胞SV40 DNA的PCR检测方法,对猕猴SV40 T抗原基因进行检测。方法使用PCR方法对分别来自野外(云南宁蒗71只、景东60只)及笼养猕猴(64只)的SV40大T抗原基因进行检测,同时对扩增出的阳性结果进行测序。结果在195份样本中,有4只来自野生猴样本扩增出SV40大T抗原基因(3.1%,4/131),1只来自笼养猴样本扩增出SV40大T抗原基因(1.6%,1/64)。测序结果显示:猴血样本扩增片段序列与genBank中的SV40大T抗原C-末端的基因序列片段有15个核苷酸不同(3.3%差异),与SV40-776标准株的序列基本一致,但SV40-776在nt3020处有一缺口。结论云南野生及笼养猕猴猴群均能检出SV40 T抗原基因。因此建立SV40病毒的DNA检测技术,对用于科研及疫苗生产的实验猕猴的病毒学质量控制具有重要意义。

关键词：猕猴猴肉瘤病毒 T抗原基因 PCR扩增

大鼠肝再生中1个表达上调新基因的克隆表达及分析

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新乡医学院学报 2005年第2期22卷 90-93页

作者：张会勇周爽林俊堂李玉昌丰慧根徐存拴新乡医学院细胞生物学教研室河南新乡453003 河南师范大学生命科学学院河南新乡453007

目的　克隆肝再生相关新基因。方法　以抑制性消减杂交得到的1个EST为模板制备探针,运用Southern印迹方法,从构建的再生肝76 h c DNA文库中调取了它的c DNA全长,并利用基因原核表达技术,表达并纯化出它的蛋白产物,制作了该蛋白的兔源多... 详细信息

目的　克隆肝再生相关新基因。方法　以抑制性消减杂交得到的1个EST为模板制备探针,运用Southern印迹方法,从构建的再生肝76 h c DNA文库中调取了它的c DNA全长,并利用基因原核表达技术,表达并纯化出它的蛋白产物,制作了该蛋白的兔源多抗,分别用所制该基因的探针,采用点杂交技术检测了0～76 h的再生肝材料。结果　获得了1个新基因全长,BL AST检索结果为1未知功能基因,暂时命名为liver regeneration relatedprotein(L RRP) ,大鼠基因组数据库中检索结果证实L RRP位于19q12且由4个外显子和3个内含子组成,递交gen Bank获登录号为AY0 98917。表达纯化出了它的融合蛋白产物,并得到了它的多克隆抗体。点杂交结果也证实了基因在肝切除后76 h明显上调。结论　L RRP基因全长的克隆和它的高效多克隆抗体的获得为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词：大鼠肝再生克隆表达

金雀异黄素与5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞的抑制作用

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中国普外基础与临床杂志 2008年第1期15卷 17-22页

作者：王正文朱明才汤为学龚军范维珂魏锦来崔海宁海南医学院附属医院海口570102 重庆医科大学附属第一医院普外科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理教研室重庆400016 四川省广安市人民医院普外科广安638000

目的研究金雀异黄素（genistein，gen）与5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用。方法采用MTT法检测gen和5-FU对SGC-7901细胞的抑制作用，流式细胞术检测细胞周期分布，并在透射电镜下观察细胞超微结构改... 详细信息

目的研究金雀异黄素（genistein，gen）与5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用。方法采用MTT法检测gen和5-FU对SGC-7901细胞的抑制作用，流式细胞术检测细胞周期分布，并在透射电镜下观察细胞超微结构改变。结果gen和5-Fu单用或联合应用对胃癌SGC-7901细胞的生长均有显著的增殖抑制作用，且呈剂量和时间依赖性。两药联合应用时，当药物效应在0．2～0．8时，具有协同或相加作用（CI≤1）；18．8btmol／L的gen作用后，62．97％的SGC-7901细胞阻滞在G2／M期；8．84μmol／L的5-FU作用后，63．76％的SGC-7901细胞阻滞在s期；3．06μmol／L的gen与7．96μmol／L的5-Fu联合应用后，67．46％的SGC-7901细胞阻滞在G0／G1期。gen和5-FU均可诱导SGC-7901细胞凋亡。结论gen与5-FU通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制胃癌细胞的生长，对胃癌细胞的增殖抑制具有协同作用。

关键词：胃癌 SGC-7901细胞金雀异黄素 5-氟尿嘧啶抑制作用

Fungal diversity notes 253-366:taxonomic and phylogenetic contributions to fungal taxa

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Fungal Diversity 2016年第3期78卷 1-237页

作者： Guo Jie Li Kevin D.Hyde Rui Lin Zhao Sinang Hongsanan Faten Awad Abdel-Aziz Mohamed A.Abdel-Wahab Pablo Alvarado genivaldo Alves-Silva Joseph F.Ammirati Hiran A.Ariyawansa Abhishek Baghela Ali Hassan Bahkali Michael Beug D.Jayarama Bhat Dimitar Bojantchev Thitiya Boonpratuang Timur S.Bulgakov Erio Camporesi Marcela CBoro Oldriska Ceska Dyutiparna Chakraborty Jia Jia Chen K.W.Thilini Chethana Putarak Chomnunti Giovanni Consiglio Bao Kai Cui Dong Qin Dai Yu Cheng Dai Dinushani A.Daranagama Kanad Das Monika C.Dayarathne Eske De Crop Rafael J.V.De Oliveira Carlos Alberto Fragoso de Souza JoséIde Souza Bryn T.M.Dentinger Asha J.Dissanayake Mingkwan Doilom E.Ricardo Drechsler-Santos Masoomeh Ghobad-Nejhad Sean P.Gilmore Aristóteles Góes-Neto MichałGorczak Charles H.Haitjema Kalani Kanchana Hapuarachchi Akira Hashimoto Mao Qiang He John K.Henske Kazuyuki Hirayama Maria J.Iribarren Subashini C.Jayasiri Ruvishika S.Jayawardena Sun Jeong Jeon Gustavo H.Jerônimo Ana L.Jesus E.B.Gareth Jones Ji Chuan Kang Samantha C.Karunarathna Paul M.Kirk Sirinapa Konta Eric Kuhnert Ewald Langer Haeng Sub Lee Hyang Burm Lee Wen Jing Li Xing Hong Li Kare Liimatainen Diogo Xavier Lima Chuan gen Lin Jian Kui Liu Xings Zhong Liu Zuo Yi Liu J.Jennifer Luangsa-ard Robert Lücking H.Thorsten Lumbsch Saisamorn Lumyong Eduardo M.Leaño Agostina V.Marano Misato Matsumura Eric H.C.McKenzie Suchada Mongkolsamrit Peter E.Mortimer Thi Thuong Thuong Nguyen Tuula Niskanen Chada Norphanphoun Michelle A.O’Malley Sittiporn Parnmen Julia Pawłowska Rekhani H.Perera Rungtiwa Phookamsak Chayanard Phukhamsakda Carmen L.A.Pires-Zottarelli Olivier Raspé Mateus A.Reck Sarah C.O.Rocha AndréL.C.M.Ade Santiago Indunil C.Senanayake Ledo Setti Qiu Ju Shang Sanjay K.Singh Esteban B.Sir Kevin V.Solomon Jie Song Prasert Srikitikulchai Marc Stadler Satinee Suetrong Hayato Takahashi Takumasa Takahashi Kazuaki Tanaka Li Ping tang Kasun M.Thambugala Donnaya Thanakitpipattana Michael K.Theodorou Benjarong Thongbai Tuksaporn Thummarukcharoen Qing Tian Saowaluck Tibpromma Annemieke State Key Laboratory of Mycology Institute of MicrobiologyChinese Academy of SciencesNo 31st West Beichen RoadChaoyang DistrictBeijing 100101People’s Republic of China Centre of Excellence in Fungal Research and School of Science Mae Fah Luang UniversityChiang Rai 57100Thailand Key Laboratory for Plant Diversity and Biogeography of East Asia Kunming Institute of BotanyChinese Academy of ScienceKunming 650201YunnanPeople’s Republic of China Department of Botany and Microbiology College of ScienceKing Saud UniversityP.O.Box:2455Riyadh 1145Saudi Arabia Department of Botany and Microbiology Faculty of ScienceSohag UniversitySohag 82524Egypt ALVALAB C/La Rochela nº47E-39012 SantanderSpain Micolab Programa de Pós-Graduação em Biologia de FungosAlgas e PlantasDepartamento de BotânicaUniversidade Federal de Santa CatarinaCampus Universitário TrindadeCEP:88040-900 FlorianópolisSanta CatarinaBrazil Department of Biology University of WashingtonBox 351800SeattleWA 98195-1800USA Guizhou Key Laboratory of Agricultural Biotechnology Guizhou Academy of Agricultural SciencesGuiyang 550006GuizhouPeople’s Republic of China National Fungal Culture Collection of India(NFCCI) Biodiversity and Palaeobiology GroupMACS’Agharkar Research InstituteG.G.Agarkar RoadPune 411004India PO Box 116 HusumWA 98623-0116USA Formerly Department of BotanyGoa UniversityGoaIndia No.128/1-J Azad Housing SocietyCurcaP.O.Goa Velha 403108India *** 345 Shipwatch LaneHerculesCA 94547USA Microbe Interaction Laboratory(BMIT) BIOTECNational Science and Technology Development Agency(NSTDA)113 Thailand Science ParkThanon PhahonyothinTombon Khlong NuengAmphoeKhlong LuangPathum Thani 12120Thailand Academy of Biology and Biotechnology Southern Federal UniversityRostov-on-Don 344090Rostov regionRussia A.M.B.Gruppo Micologico Forlivese BAntonio“Cicognani” Via Roma Forlì Italy 18 A.M.B.Circolo Micologico“Giovanni Carini”C.P.314BresciaItaly Societàper gli Studi Naturalistici della Romagna C.P.144Bagnacavallo

Notes on 113 fungal taxa are compiled in this paper,including 11 new genera,89 new species,one new subspecies,three new combinations and seven reference *** geographic and taxonomic range of fungal taxa are *** the Ascomycota the new genera Angustospora(Testudinaceae),Camporesia(Xylariaceae),Clematidis,Crassiparies(Pleosporales genera incertae sedis),Farasanispora,Longiostiolum(Pleosporales genera incertae sedis),Multilocularia(Parabambusicolaceae),Neophaeocryptopus(Dothideaceae),Parameliola(Pleosporales genera incertae sedis),and Towyspora(Lentitheciaceae)are *** introduced species are Angustospora nilensis,Aniptodera aquibella,Annulohypoxylon albidiscum,Astrocystis thailandica,Camporesia sambuci,Clematidis italica,Colletotrichum menispermi,***,Comoclathris pimpinellae,Crassiparies quadrisporus,Cytospora salicicola,Diatrype thailandica,Dothiorella rhamni,Durotheca macrostroma,Farasanispora avicenniae,Halorosellinia rhizophorae,Humicola koreana,Hypoxylon lilloi,Kirschsteiniothelia tectonae,Lindgomyces okinawaensis,Longiostiolum tectonae,Lophiostoma pseudoarmatisporum,Moelleriella phukhiaoensis,***,Mucoharknessia anthoxanthi,Multilocularia bambusae,Multiseptospora thysanolaenae,Neophaeocryptopus cytisi,Ocellularia arachchigei,***,Ochronectria thailandica,Ophiocordyceps karstii,Parameliola acaciae,***,Parastagonospora cumpignensis,Pseudodidymosphaeria phlei,Polyplosphaeria thailandica,Pseudolachnella brevifusiformis,Psiloglonium macrosporum,Rhabdodiscus albodenticulatus,Rosellinia chiangmaiensis,Saccothecium rubi,Seimatosporium pseudocornii,***,Sigarispora ononidis and Towyspora *** combinations are provided for Eutiarosporella dactylidis(sexual morph described and illus trated)and Pseudocamarosporium ***,illustrations and/or reference specimens are designated for Aposphaeria corallinolutea,Cryptovalsa ampelina,Dothiorella vidmadera,Ophiocordyceps formosana,P

关键词： Ascomycota Basidiomycota Neocallimastigomycota Oomycota.Zygomycota Phylogeny Taxonomy New genus New species

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悬铃叶苎麻基因组DNA的六种提取方法比较

中国麻业科学 2015年第5期37卷 233-238页

作者：董志雪唐蜻程超华信鹏飞高春生李育君臧巩固赵立宁中国农业科学院麻类研究所长沙410205

悬铃叶苎麻(Boehmeria tricuspis(Hance)Makino)是一种多年生草本植物,含有较多的多酚、多糖等次生代谢物质,这些次生代谢物质能够与基因组DNA结合从而影响其DNA的提取。本文以悬铃叶苎麻幼嫩叶片为试材,采用6种方法提取基因组DNA,并比... 详细信息

悬铃叶苎麻(Boehmeria tricuspis(Hance)Makino)是一种多年生草本植物,含有较多的多酚、多糖等次生代谢物质,这些次生代谢物质能够与基因组DNA结合从而影响其DNA的提取。本文以悬铃叶苎麻幼嫩叶片为试材,采用6种方法提取基因组DNA,并比较其提取效果,以期寻找到正确的、快速的、能够得到高质量的基因组DNA的方法。琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度仪、SSR-PCR扩增和限制性内切酶酶切等方法检测不同方法提取的全基因组DNA的质量和纯度。结果显示:采用方法 1(Tian gen试剂盒)提取的溶液中含有杂质,DNA含量较少;方法 2(常规CTAB法)提取的DNA含有较多杂质;方法 3(硅胶-CTAB法)和方法 4(酚抽提-CTAB法)没有提取到DNA;方法 5(高盐预先去杂-CTAB法)得到的基因组DNA溶液含有较多的蛋白质或盐;方法 6(葡萄糖预先去杂-CTAB法)是唯一能获得高质量的基因组DNA,能够满足PCR、限制性内切酶酶切等分子实验对DNA的要求。本研究找到了一种通用、简单易行,成本低且安全的去除植物DNA提取过程中多糖等杂质的方法,为悬铃叶苎麻后续的其他分子生物学的研究奠定了基础。

关键词：悬铃叶苎麻多糖改良CTAB法 DNA提取

^(60)Co γ射线辐照紫花苜蓿种子的细胞生物学效应

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核农学报 2007年第2期21卷 136-140页

作者：杨茹冰张月学徐香玲李集临张弘强王继华韩微波唐凤兰刘杰淋李道明蒿若超申忠宝哈尔滨师范大学生命与环境科学学院生物系黑龙江哈尔滨150080 黑龙江省农业科学院草业研究所黑龙江哈尔滨150086

分别利用0、1000、1500和2000Gy60Coγ射线处理3个品种的紫花苜蓿种子,对同一剂量不同品种或同一品种不同剂量间辐照情况相比较,研究苜蓿根尖细胞的生物学效应。实验结果表明,γ射线辐照苜蓿种子可以抑制根尖细胞有丝分裂,并诱发根尖细... 详细信息

分别利用0、1000、1500和2000Gy60Coγ射线处理3个品种的紫花苜蓿种子,对同一剂量不同品种或同一品种不同剂量间辐照情况相比较,研究苜蓿根尖细胞的生物学效应。实验结果表明,γ射线辐照苜蓿种子可以抑制根尖细胞有丝分裂,并诱发根尖细胞产生单微核、双微核、多微核、小核、染色体断片、染色体粘连、单桥、双桥、多桥、游离染色体、落后染色体等多种畸变。同一辐照剂量下,龙牧803苜蓿对γ射线辐照敏感性最强。在0~2000Gy范围内,随剂量的增加各种畸变率不断提高,至2000Gy辐照剂量时,各种畸变率达到最高。

关键词：紫花苜蓿 γ射线细胞分裂指数核畸变染色体畸变

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一株昆虫病原性真菌莱氏野村菌的分离与鉴定

广东农业科学 2015年第15期42卷 53-56页

作者：吕思行郑常格江敏华徐树兰杨思佳汤历刘吉平广州市生物防治站广东广州510460 华南农业大学动物科学学院广东广州510642

利用PDA培养基,对收集自广东化州的家蚕病原真菌(编号为Ma1菌株)进行分离培养。首先对菌落特征、菌丝、分生孢子梗及分生孢子形态特征进行观察。再利用真菌核糖体基因ITS区域设计合成的引物对Ma1菌株进行PCR扩增得到558 bp大小的目的条... 详细信息

利用PDA培养基,对收集自广东化州的家蚕病原真菌(编号为Ma1菌株)进行分离培养。首先对菌落特征、菌丝、分生孢子梗及分生孢子形态特征进行观察。再利用真菌核糖体基因ITS区域设计合成的引物对Ma1菌株进行PCR扩增得到558 bp大小的目的条带。目的条带采用Blast方法将测序结果在gen Bank中进行同源搜索,依据邻接法构建获得与其相关菌株的ITS序列系统发育树。通过形态学和ITS基因序列分析,最终判定来自家蚕的病原真菌Ma1菌株为莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)。

关键词：昆虫病原真菌莱氏野村菌分离鉴定

4种鼢鼠线粒体DNA D-loop区全序列分析

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草原与草坪 2008年第2期28卷 52-55页

作者：杨路存刘荣堂张三亮杨红善张向东苏军虎甘肃农业大学草业学院甘肃兰州730070

采用PCR测序技术对采自甘肃境内的4种鼢鼠22个个体的线粒体DAN D-loop区全序列进行了测定。结果表明:鼢鼠线粒体DNA D-loop序列长度为893、894、895、896或899 bp,核苷酸位点突变类型有5种,即转换、颠换、插入、缺失及转换与颠换共存。... 详细信息

采用PCR测序技术对采自甘肃境内的4种鼢鼠22个个体的线粒体DAN D-loop区全序列进行了测定。结果表明:鼢鼠线粒体DNA D-loop序列长度为893、894、895、896或899 bp,核苷酸位点突变类型有5种,即转换、颠换、插入、缺失及转换与颠换共存。碱基转换以TC形式为主。其中T、C、A、G 4种核苷酸的平均比例分别为34.1%、24.3%、30.1%、11.5%,A+T含量(64.2%)明显高于G+C含量(35.8%)。这4种鼢鼠22条线粒体DNA D-loop区发现20种单倍型,单倍型比例为81.82%,说明中国鼢鼠mtDNA遗传多态性很丰富。从系统发育树分析,4种鼢鼠明显聚为两类,推测鼢鼠可能有两个起源。

关键词：鼢鼠线粒体DNA D-loop区序列分析

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猪博卡病毒的基因分型

中国动物检疫 2015年第2期32卷 63-68页

作者：周宇唐连飞朱事康朱中武佟铁铸禹思宇林志雄刘星陈燕忠罗卓军惠州出入境检验检疫局技术中心广东惠州516006 湖南出入境检验检疫局湖南长沙410004 广东出入境检验检疫局广东广州510623

为了解猪博卡病毒(PBoV)的遗传进化规律,研究可行的PBoV基因分型方法,本研究利用gen Bank中登录的29条PBoV和2条本实验室测得的全基因组序列信息,采用生物信息学软件进行基因组序列分析。结果显示,分别以NS1基因、NP1基因和VP1基因编码... 详细信息

为了解猪博卡病毒(PBoV)的遗传进化规律,研究可行的PBoV基因分型方法,本研究利用gen Bank中登录的29条PBoV和2条本实验室测得的全基因组序列信息,采用生物信息学软件进行基因组序列分析。结果显示,分别以NS1基因、NP1基因和VP1基因编码氨基酸构建的系统进化树,PBoV均被划分为3个基因群,但三种氨基酸序列绘制的进化树存在差异;基因群内各病毒株的氨基酸序列同源性较高,而各基因群之间病毒株的氨基酸序列同源性非常低,基因组结构差异较大。

关键词：猪博卡病毒遗传进化分析基因分型