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Initial detection of the quorum sensing autoinducer activity in the rumen of goats in vivo and in vitro

Journal of Integrative Agriculture 2016年第10期15卷 2343-2352页

作者： RAN Tao ZHOU Chuan-she XU Li-wei geng mei-mei TAN Zhi-liang TANG Shao-xun WANG Min HAN Xue-feng KANG Jin-he Key Laboratory for Agro-Ecological Processes in Subtropical Region/Hunan Research Center of Livestock & Poultry Sciences/ South-Central Experimental Station of Animal Nutrition and Feed Science Ministry of Agriculture/Institute of Subtropical Agriculture Chinese Academy of Sciences Changsha 410125 P.R.China University of the Chinese Academy of Sciences Beijing 100049 P.R.China Hunan Co-Innovation Center of Animal Production Safety CICAPS Changsha 410128 P.R. China Hunan Co-Innovation Center for Utilization of Botanical Functional Ingredients Changsha 410128 P.R. China

Quorum sensing（QS） is a type of microbe-microbe communication system that is widespread among the microbial world, particularly among microorganisms that are symbiotic with plants and animals. Thereby, the cell-cell signalling is likely to occur in an anaerobic rumen environment, which is a complex microbial ecosystem. In this study, using six ruminally fistulated Liuyang black goats as experimental animals, we aimed to detect the activity of quorum sensing autoinducers（AI） both in vivo and in vitro and to clone the lux S gene that encoded autoinducer-2（AI-2） synthase of microbial samples that were collected from the rumen of goats. Neutral detergent fiber（NDF） and soluble starch were the two types of substrates that were used for in vitro fermentation. The fermented fluid samples were collected at 0, 2, 4, 6, 8, 12, 24, 36, and 48 h of incubation. The acyl-homoserine lactones（AHLs） activity was determined using gas chromatography-mass spectrometer（GC-MS） analysis. However, none of the rumen fluid extracts that were collected from the goat rumen showed the same or similar fragmentation pattern to AHLs standards. Meanwhile, the AI-2 activity, assayed using a Vibrio harveyi BB170 bioassay, was negative in all samples that were collected from the goat rumen and from in vitro fermentation fluids. Our results indicated that the activities of AHLs and AI-2 were not detected in the ruminal contents from six goats and in ruminal fluids obtained from in vitro fermentation at different sampling time-points. However, the homologues of lux S in Prevotella ruminicola were cloned from in vivo and in vitro ruminal fluids. We concluded that AHLs and AI-2 could not be detected in in vivo and in vitro ruminal fluids of goats using the current detection techniques under current dietary conditions. However, the microbes that inhabited the goat rumen had the potential ability to secrete AI-2 signaling molecules and to communicate with each other via AI-2-mediated QS because of the prese

关键词： quorum sensing AHLs AI-2 lux S rumen bacteria goat

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样品粒径、制样方法对波长色散X射线荧光光谱法测定土壤样品中19种元素的影响

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中国土壤与肥料 2023年第6期 239-250页

作者：耿梅梅张丽萍王久荣李春勇中国科学院亚热带农业生态研究所湖南长沙410125

利用波长色散X射线荧光光谱仪建立了压片、熔融土壤样品中As、Co、Cr、Cu、Mn、Ni、P、Pb、S、Ti、V、Zn、Al_(2)O_(3)、CaO、Fe_(2)O_(3)、K_(2)O、MgO、Na_(2)O、SiO_(2)19种元素的分析方法。探讨了样品粒径、制样方法对19种元素检测... 详细信息

利用波长色散X射线荧光光谱仪建立了压片、熔融土壤样品中As、Co、Cr、Cu、Mn、Ni、P、Pb、S、Ti、V、Zn、Al_(2)O_(3)、CaO、Fe_(2)O_(3)、K_(2)O、MgO、Na_(2)O、SiO_(2)19种元素的分析方法。探讨了样品粒径、制样方法对19种元素检测的影响。方法精密度结果表明,样品中As、Co元素含量在10 mg/kg以上时,0.149 mm(100目)样品压片、0.075 mm(200目)样品压片及样品熔融制样的19种元素的相对标准偏差(RSD)值均小于10%,As、Co含量在10 mg/kg以下时,200目压片制样的19种元素RSD值小于10%。准确度结果表明,压片制样的标准物质含量在5 mg/kg以上的As、Co、Cu及其他16种元素准确度符合要求;熔融制样的标准物质中高含量的As、Co、Cu、Pb元素及其他15种元素准确度符合要求。不同粒径实验结果显示,元素含量在10 mg/kg以上时,100目、200目压片制样19种元素的RSD值小于10%。不同制样方法的实验结果表明,熔融制样不适用于低含量的As、Co、Cu、Pb元素分析,Cr、P、S、Mn、Ni、V、Zn、Ti、Al_(2)O_(3)、CaO、Fe_(2)O_(3)、K_(2)O、MgO、Na_(2)O、SiO_(2)熔融制样与压片制样RSD值小于10%。压片制样方法操作更简单,成本更低,更适用于大批量土壤样品中As、Co、Cr、Cu、Pb、P、S、Mn、Ni、V、Zn、Ti、Al_(2)O_(3)、CaO、Fe_(2)O_(3)、K_(2)O、MgO、Na_(2)O、SiO_(2)19种元素的分析;对于As、Co元素含量在10 mg/kg以上的样品,利用100目、200目样品压片制样均可获得准确、可靠的结果,对于As、Co含量在10 mg/kg以下的样品,建议使用200目样品压片制样。

关键词：波长色散X射线荧光光谱粉末压片熔融制样土壤粒径

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PreCon-IRMS测定土壤游离氨基酸态氮稳定同位素丰度

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质谱学报 2022年第2期43卷 220-227,I0005页

作者：贺珍袁红朝张丽萍耿梅梅许丽卫陈闻彭灿王久荣中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室湖南长沙410125

土壤氮大部分为有机氮,大分子类有机氮-蛋白质转化成可溶性氨基酸态氮是土壤氮循环的关键过程和土壤氮素有效性的主要限制因子,其中氨基酸态氮消耗速率在研究土壤肥力、生物机制等方面有着重要的指示作用。本研究建立了一种蒸馏结合化... 详细信息

土壤氮大部分为有机氮,大分子类有机氮-蛋白质转化成可溶性氨基酸态氮是土壤氮循环的关键过程和土壤氮素有效性的主要限制因子,其中氨基酸态氮消耗速率在研究土壤肥力、生物机制等方面有着重要的指示作用。本研究建立了一种蒸馏结合化学转化N_(2)O产生法的氨基酸态氮稳定同位素丰度测定前处理方法,并结合气体预浓缩装置与稳定同位素质谱仪(PreCon-IRMS)联用系统,分析了不同浓度和^(15)N丰度的氨基酸标准溶液和土壤游离氨基酸的氮稳定同位素丰度。结果表明,使用该分析系统测定各类型氨基酸标准溶液,在保证0.5μmol氨基酸含量的条件下,均能获得0.2%~0.8%的精度,且不产生同位素分馏效应,对土壤游离氨基酸中氮稳定同位素丰度的测定可获得较好的重现性(CV<1%),并可实现nmol级氨基酸浓度土壤样品的批量检测。

关键词：土壤游离氨基酸稳定同位素质谱氮同位素蒸馏化学转化N_(2)O法

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Flash HT和GasBench Ⅱ-IRMS分析水中氢氧同位素的方法比较

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质谱学报 2013年第6期34卷 347-352页

作者：袁红朝张丽萍耿梅梅许丽卫李春勇宋立芳王久荣中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室湖南长沙410125 华中农业大学湖北武汉430070

为了建立一种更准确、更快速的水中氢氧同位素比值检测分析方法,采用在线的连续流元素分析仪-稳定同位素质谱仪联用(Flash HT-IRMS),碳还原高温热转化法和多用途气体制备仪-稳定同位素质谱仪联用(GasBench II-IRMS)水平衡法分析了不同... 详细信息

为了建立一种更准确、更快速的水中氢氧同位素比值检测分析方法,采用在线的连续流元素分析仪-稳定同位素质谱仪联用(Flash HT-IRMS),碳还原高温热转化法和多用途气体制备仪-稳定同位素质谱仪联用(GasBench II-IRMS)水平衡法分析了不同来源水样中的氢氧同位素组成。结果显示,Flash HT和GasBench II-IRMS两种分析系统均能获得较好的氢氧同位素分析测试精密度,分别小于0.5‰(δD)和0.1‰(δ18 O)。对比两种分析系统,Flash HT-IRMS分析系统的重现性和精度均优于GasBench II-IRMS。另外,Flash HTIRMS分析系统可以实现在线单次分析过程中同时测定水中氢氧同位素组成,而且分析时间短、样品消耗量少,仅需0.1μL。因此,对于微量水样中氢氧同位素组成的分析,Flash HT-IRMS测定系统更具优势。

关键词：稳定同位素质谱氢同位素氧同位素水平衡碳还原

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高、低营养水平饲粮对环江香猪结肠菌群结构及代谢物的影响

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微生物学通报 2016年第7期43卷 1650-1659页

作者：姬玉娇祝倩耿梅梅陈闻印遇龙孔祥峰中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室湖南长沙410125 中国科学院环江喀斯特生态系统观测研究站香猪研究中心广西环江547100

【目的】研究两种饲粮对环江香猪结肠内容物菌群结构及其代谢物的影响。【方法】选用33.5±8.1 kg的环江香猪10头,随机分为两组,每组5头猪,单栏饲养,分别饲喂高营养水平饲粮(粗蛋白质含量为13.11%,消化能为14.73 MJ/kg)和低营养水平饲粮... 详细信息

【目的】研究两种饲粮对环江香猪结肠内容物菌群结构及其代谢物的影响。【方法】选用33.5±8.1 kg的环江香猪10头,随机分为两组,每组5头猪,单栏饲养,分别饲喂高营养水平饲粮(粗蛋白质含量为13.11%,消化能为14.73 MJ/kg)和低营养水平饲粮(粗蛋白质含量为9.77%,消化能为12.24 MJ/kg)。饲喂75 d后屠宰,每组选3头猪采集结肠内容物提取细菌总DNA,PCR扩增获得16S r RNA基因V4标签片段,用于Mi Seq高通量测序,基于QIIME平台比较结肠内容物菌群结构多样性;每组取5头猪的结肠内容物,利用气相色谱和液相色谱分析其中短链脂肪酸、氨氮、生物胺、吲哚和粪臭素的含量。【结果】硬壁菌门、拟杆菌门、螺旋体门和软壁菌门细菌为环江香猪结肠内容物中的优势菌门;饲粮组成不影响环江香猪结肠内容物菌群结构的多样性,高营养水平饲粮组结肠内容物中广古细菌含量显著低于、瘤胃球菌属和假丁酸弧菌属细菌含量显著高于低营养水平饲粮组;高营养水平饲粮组环江香猪结肠内容物中乙酸和丙酸含量显著低于、氨氮和尸胺含量显著高于低营养水平饲粮组。【结论】硬壁菌门、拟杆菌门、螺旋体门和软壁菌门细菌为环江香猪结肠内容物中的优势菌门,短期饲喂高营养水平饲粮可改变环江香猪结肠中的部分微生物含量及其代谢特性。

关键词：环江香猪饲粮组成结肠菌群代谢产物

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三元猪和宁乡猪血液学参数比较研究

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农业现代化研究 2009年第4期30卷 498-500,504页

作者：孔祥峰柏美娟印遇龙黄瑞林刘志强徐海军耿梅梅中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室农业生态工程重点实验室中国科学院研究生院北京100039

本研究分别采用全血细胞计数分析仪、全自动血液生化分析仪和γ-计数仪测定了三元肥育猪和宁乡肥育猪血常规、血清生化参数和激素含量常值,以供相关研究参考。结果表明,宁乡猪外周血白细胞总数、淋巴细胞计数、红细胞体积分布宽度和血... 详细信息

本研究分别采用全血细胞计数分析仪、全自动血液生化分析仪和γ-计数仪测定了三元肥育猪和宁乡肥育猪血常规、血清生化参数和激素含量常值,以供相关研究参考。结果表明,宁乡猪外周血白细胞总数、淋巴细胞计数、红细胞体积分布宽度和血小板分布宽度均显著低于三元猪(P<0.05),平均红细胞血红蛋白、平均红细胞血红蛋白浓度、血小板计数和血小板比积均显著高于三元猪(P<0.05);宁乡猪血清总蛋白、氨和葡萄糖含量显著低于三元猪(P<0.05),甘油三酯和甲状腺素T3含量显著高于三元猪(P<0.05)。上述结果表明,两个品系猪的多数血常规和血清生化参数及激素含量存在显著差异。

关键词：猪血常规血清生化参数激素

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三种昆虫的营养成分测定

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天然产物研究与开发 2013年第9期25卷 1229-1233页

作者：姬玉娇孔祥峰周笑犁耿梅梅印遇龙南昌大学生命科学与食品工程学院食品科学与技术国家重点实验室南昌330047 中国科学院亚热带农业生态研究所中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室长沙410125

黄粉虫、蝇蛆和大麦虫是市场上最常见的饲用昆虫。本试验采用或借鉴饲料营养成分测定的国家标准方法,测定了3种昆虫的常规营养成分、矿物元素、氨基酸和中长链脂肪酸的含量。结果表明,黄粉虫、蝇蛆和大麦虫的粗蛋白含量(%)依次为50.20、... 详细信息

黄粉虫、蝇蛆和大麦虫是市场上最常见的饲用昆虫。本试验采用或借鉴饲料营养成分测定的国家标准方法,测定了3种昆虫的常规营养成分、矿物元素、氨基酸和中长链脂肪酸的含量。结果表明,黄粉虫、蝇蛆和大麦虫的粗蛋白含量(%)依次为50.20、45.62和45.08,粗脂肪含量(%)依次为28.96、30.10和41.71,总能含量(KJ/g)依次为26.16、25.95和28.66;蝇蛆中钙、磷、铁和锰的含量(mg/100 g)最高,依次为500.0、885.7、1.17和3.06,黄粉虫中铜和锌的含量(mg/100 g)最高,分别为1.49和10.51;黄粉虫中支链氨基酸、直链氨基酸、必需氨基酸和总氨基酸的含量(%)均最高,依次为8.51、5.71、16.76和39.88,蝇蛆中苯丙氨酸、谷氨酸和赖氨酸的含量(%)较高,依次为2.71、6.29和3.19;黄粉虫中C14:0和顺C18:2的相对含量较高,分别为6.15%和33.17%,蝇蛆中C16:0和C16:1的相对含量较高,分别为39.62%和4.08%,大麦虫中C18:0和顺C18:1的相对含量较高,依次为23.33%和43.54%。上述结果表明,三种昆虫均具有较高的营养价值,可用于养殖业中蛋白质饲料原料的开发。

关键词：黄粉虫蝇蛆大麦虫营养成分

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精氨酸对环江香猪营养物质消化率和血液指标的影响

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华北农学报 2012年第4期27卷 234-238页

作者：周笑犁汤文杰孔祥峰印遇龙耿梅梅中国科学院亚热带农业生态研究所、中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室湖南长沙410125 南昌大学生命科学与食品工程学院、食品科学与技术国家重点实验室江西南昌330047 四川省畜牧科学研究院动物营养研究所四川成都610066

为了研究日粮添加L-精氨酸对环江香猪营养物质消化率、血浆生化参数及游离氨基酸浓度的影响,选取10头平均体重为18.9±2.4 kg的环江香猪,随机分为2组,每组5头,单笼饲养,分别饲喂添加0.83%精氨酸的基础日粮(试验组)和1.71%丙氨酸的基础日... 详细信息

为了研究日粮添加L-精氨酸对环江香猪营养物质消化率、血浆生化参数及游离氨基酸浓度的影响,选取10头平均体重为18.9±2.4 kg的环江香猪,随机分为2组,每组5头,单笼饲养,分别饲喂添加0.83%精氨酸的基础日粮(试验组)和1.71%丙氨酸的基础日粮(等氮对照组),试验期为7 d。每天记录试猪的采食量,并于试验开始和结束时分别称取空腹体重;试验第5～7 d收集粪样,用TiO2指示剂法测定常规营养成分的消化率;试验结束后空腹采集血液,肝素抗凝,离心分离血浆,测定其生化参数和游离氨基酸浓度。结果表明,与丙氨酸组相比,精氨酸组试猪平均日增重有升高趋势、料重比有降低趋势(P>0.05),干物质消化率显著增加(P0.05)。上述结果提示,在日粮中添加适量精氨酸可增强环江香猪对某些日粮营养素的消化吸收,提高机体中一些必需氨基酸的含量,有利于机体蛋白质的合成,保证了其健康生长。

关键词：精氨酸环江香猪生化参数氨基酸

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日粮添加精氨酸对肥育猪免疫功能的调节作用

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2009年第3期30卷 45-49页

作者：柏美娟孔祥峰印遇龙谭碧娥黄瑞林李铁军宋小燕耿梅梅中国科学院亚热带农业生态研究所湖南长沙410125 中国科学院研究生院北京100039

以杜×(大×长)三元杂种猪为研究对象,将其分为2组,分别饲喂基础日粮和添加1%精氨酸日粮,测定试验猪血液白细胞分类计数、血清免疫球蛋白和细胞因子水平、淋巴细胞增殖活性以及脾脏IL-2、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平,探讨日粮添加精... 详细信息

以杜×(大×长)三元杂种猪为研究对象,将其分为2组,分别饲喂基础日粮和添加1%精氨酸日粮,测定试验猪血液白细胞分类计数、血清免疫球蛋白和细胞因子水平、淋巴细胞增殖活性以及脾脏IL-2、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平,探讨日粮添加精氨酸对肥育猪免疫功能的调节作用。结果表明:日粮中添加1%精氨酸可显著增加单核细胞数和百分比、淋巴细胞百分比和增殖活性及血清IgG和IL-2水平,显著降低中性粒细胞数和百分比及血清TNF-α水平;明显增加脾脏IL-2和IFN-γ表达水平,降低TNF-α表达水平。结果提示,精氨酸可通过调节肥育猪的细胞和体液免疫水平,从而增强机体免疫功能。

关键词：肥育猪精氨酸免疫功能

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养殖业对环境的污染及其营养调控措施

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农业现代化研究 2008年第6期29卷 726-729页

作者：李丽立张彬唐志如印遇龙张复生耿梅梅中国科学院亚热带农业生态研究所湖南长沙410125 湖南农业大学动物科学技术学院湖南长沙410128

现代养殖业对环境的污染日趋严重,降低畜禽排泄物对环境的污染已成为现阶段生态环境保护的重要课题。本文综述了畜禽排泄物对环境污染问题的严重性,分析了养殖业对环境污染的的主要原因及其后果,并阐述了应对畜禽排泄物污染的营养调控... 详细信息

现代养殖业对环境的污染日趋严重,降低畜禽排泄物对环境的污染已成为现阶段生态环境保护的重要课题。本文综述了畜禽排泄物对环境污染问题的严重性,分析了养殖业对环境污染的的主要原因及其后果,并阐述了应对畜禽排泄物污染的营养调控措施。

关键词：畜禽污染环境调控措施

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