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Conditional reprogramming:next generation cell culture

Acta Pharmaceutica Sinica B 2020年第8期10卷 1360-1381页

作者： Xiaoxiao Wu Shengpeng Wang Mingxing Li Jing Li Jing Shen Yueshui Zhao Jun Pang Qinglian Wen Meijuan Chen Bin Wei Parham Jabbarzadeh Kaboli fukuan du Qijie Zhao Chi Hin Cho Yitao Wang Zhangang Xiao Xu Wu Laboratory of Molecular Pharmacology Department of PharmacologySchool of PharmacySouthwest Medical UniversityLuzhou 646000China South Sichuan Institute of Translational Medicine Luzhou 646000China State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine Institute of Chinese Medical SciencesUniversity of MacaoMacaoChina Department of Oncology and Hematology Hospital(T.C.M)Affiliated to Southwest Medical UniversityLuzhou 646000China Center of Radiation Oncology Hospital(T.C.M)Affiliated to Southwest Medical UniversityLuzhou 646000China Department of Oncology the Affiliated Hospital of Southwest Medical UniversitySouthwest Medical UniversityLuzhou 646000China College of Pharmaceutical Science&Collaborative Innovation Center of Yangtze River Delta Region Green Pharmaceuticals Zhejiang University of TechnologyHangzhou 310014China School of Biomedical Sciences Faculty of Medicinethe Chinese University of Hong KongHong KongChina

Long-term primary culture of mammalian cells has been always difficult due to unavoidable senescence. Conventional methods for generating immortalized cell lines usually require manipulation of genome which leads to change of important biological and genetic characteristics. Recently, conditional reprogramming(CR) emerges as a novel next generation tool for long-term culture of primary epithelium cells derived from almost all origins without alteration of genetic background of primary cells. CR cocultures primary cells with inactivated mouse 3T3-J2 fibroblasts in the presence of RHO-related protein kinase(ROCK) inhibitor Y-27632, enabling primary cells to acquire stem-like characteristics while retain their ability to fully differentiate. With only a few years’ development, CR shows broad prospects in applications in varied areas including disease modeling, regenerative medicine, drug evaluation, drug discovery as well as precision medicine. This review is thus to comprehensively summarize and assess current progress in understanding mechanism of CR and its wide applications, highlighting the value of CR in both basic and translational researches and discussing the challenges faced with CR.

关键词： culture epithelium programming

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Small molecule inhibitors of RORγt for Th17 regulation in inflammatory and autoimmune diseases

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Journal of Pharmaceutical Analysis 2023年第6期13卷 545-562页

作者： Jiuping Zeng Mingxing Li Qianyun Zhao Meijuan Chen Long Zhao Shulin Wei Huan Yang Yueshui Zhao Anqi Wang Jing Shen fukuan du Yu Chen Shuai Deng Fang Wang Zhuo Zhang Zhi Li Tiangang Wang Shengpeng Wang Zhangang Xiao Xu Wu Laboratory of Molecular Pharmacology Department of PharmacologySchool of PharmacySouthwest Medical UniversityLuzhouSichuan646000China Cell Therapy&Cell Drugs of Luzhou Key Laboratory LuzhouSichuan646000China South Sichuan Institute of Translational Medicine LuzhouSichuan646000China Department of Spleen and Stomach Diseases The Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital of Southwest Medical UniversityLuzhouSichuan646000China School of Medicine Chengdu UniversityChengdu610106China State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine Institute of Chinese Medical SciencesUniversity of MacaoMacao999078China Department of Oncology The Affiliated Hospital of Southwest Medical UniversityLuzhouSichuan646000China

As a ligand-dependent transcription factor,retinoid-associated orphan receptor gt(RORγt)that controls T helper(Th)17 cell differentiation and interleukin(IL)-17 expression plays a critical role in the progression of several inflammatory and autoimmune *** emerging novel approach to the therapy of these diseases thus involves controlling the transcriptional capacity of RORγt to decrease Th17 cell development and IL-17 *** RORγt inhibitors including both antagonists and inverse agonists have been discovered to regulate the transcriptional activity of RORγt by binding to orthosteric-or allosteric-binding sites in the ligand-binding *** of small-molecule inhibitors have entered clinical ***,in current review,the role of RORγt in Th17 regulation and Th17-related inflammatory and autoimmune diseases was ***,the recently developed RORγt inhibitors were summarized,with an emphasis on their optimization from lead compounds,efficacy,toxicity,mechanisms of action,and clinical *** limitations of current development in this area were also discussed to facilitate future research.

关键词： T helper 17 RORγt Small-molecule inhibitor Inflammatory disease Autoimmune disease

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Chinese herbal medicines for treating ulcerative colitis via regulating gut microbiota-intestinal immunity axis

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Chinese Herbal Medicines 2023年第2期15卷 181-200页

作者： Yifei Yang Yi Wang Long Zhao Fang Wang Mingxing Li Qin Wang Haoming Luo Qianyun Zhao Jiuping Zeng Yueshui Zhao fukuan du Yu Chen Jing Shen Shulin Wei Zhangang Xiao Xu Wu Laboratory of Molecular Pharmacology Department of PharmacologySchool of PharmacySouthwest Medical UniversityLuzhou 646000China Luzhou Key Laboratory of Cell Therapy&Cell Drugs Luzhou 646000China Sichuan Fifth People’s Hospital Chengdu 610015China Department of Spleen and Stomach Diseases The Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital of Southwest Medical UniversityLuzhou 646000China South Sichuan Institute of Translational Medicine Luzhou 646000China State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine University of MacaoMacao 999078China

Ulcerative colitis(UC)is one of types of inflammatory bowel disease with high *** studies have highlighted that microbial dysbiosis as well as abnormal gut immunity are crucial factors that initiate a series of inflammatory responses in the *** the gut microbiota-intestinal immunity loop has been suggested as one of key strategies for relieving *** Chinese herbal medicines including some of single herb,herbal formulas and the derived constituents have been reported with protective effect against UC through modulating gut microbiome and intestinal *** clinical trials have shown promising *** review thus focused on the current knowledge on using Chinese herbal medicines for treating UC from the mechanism aspects of regulating intestinal homeostasis involving microbiota and gut *** existing clinical trials are also summarized.

关键词： Chinese herbal medicines gut microbiota inflammation inflammatory bowel disease intestinal immunity ulcerative colitis

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注射LHRH-A2对刀鲚的催产效果及其雌鱼血液生化指标的影响

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水产学报 2016年第8期40卷 1186-1194页

作者：徐钢春杜富宽黎燕张勇徐跑南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

为了丰富刀鲚人工繁殖理论,探明LHRH-A2对刀鲚的催产效果及其雌鱼血液生化指标的影响,本研究以2冬龄人工养殖刀鲚为研究对象,通过注射LHRH-A2进行人工催产,并分析催产效果;同时应用放射性免疫、化学发光等方法,对人工催产过程中刀鲚雌... 详细信息

为了丰富刀鲚人工繁殖理论,探明LHRH-A2对刀鲚的催产效果及其雌鱼血液生化指标的影响,本研究以2冬龄人工养殖刀鲚为研究对象,通过注射LHRH-A2进行人工催产,并分析催产效果;同时应用放射性免疫、化学发光等方法,对人工催产过程中刀鲚雌鱼的血液生化指标进行了系统研究。结果显示,按照雌鱼30μg/kg、雄鱼减半的剂量注射LHRH-A2,刀鲚亲鱼死亡率为16.67%±3.34%;存活刀鲚亲鱼群体中,效应时间为21～24 h,催产率为83.33%±3.34%,受精率为75.06%±6.19%。注射催产素21 h内,血浆中17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)、催乳素(prolactin)、甲状腺素(thyroxine,T4)、皮质醇(cortisol)、总蛋白(total protein,TP)、乳酸(lactate)在人工催产过程中表现出先上升后下降的规律;三碘甲腺原氨酸(three iodine thyroid,T3)、甘油三酯(triglyceride,TG)、Cl–呈现持续下降趋势;谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、渗透压(osmotic pressure)、K+、Na+呈现持续上升的趋势。比较以上血浆指标在产卵组和未产卵组的实验结果,产卵组形成高皮质醇、TP、TG、渗透压、Na+、K+的血浆环境和低E2、催乳素、乳酸、T4、T3、Cl-、ALT、AST的血浆环境,而未产卵组的这些指标与产卵组相反。结果表明,人工催产过程对肝脏、肾脏等正常功能造成了影响,从而抑制催产素LHRH-A2对卵子的正向调控作用。本研究初步揭示了人工催产应激对刀鲚雌鱼成功排卵的影响机制,为进一步优化刀鲚的规模化人工繁殖提供科学依据。

关键词：刀鲚 LHRH-A2 催产效果催产应激血液生化指标雌鱼

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刀鲚PPARγ基因的cDNA克隆及其应激应答

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中国水产科学 2019年第2期26卷 242-250页

作者：高俊徐钢春杜富宽聂志娟顾若波南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

旨在研究刀鲚(Coilia nasus)过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor, PPARγ)基因的应激调控表达,克隆并获得了刀鲚PPARγ基因的cDNA全长。刀鲚PPARγ基因的cDNA全长1951 bp,开放阅读框1470 bp,预... 详细信息

旨在研究刀鲚(Coilia nasus)过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor, PPARγ)基因的应激调控表达,克隆并获得了刀鲚PPARγ基因的cDNA全长。刀鲚PPARγ基因的cDNA全长1951 bp,开放阅读框1470 bp,预测编码489个氨基酸。刀鲚PPARγ包括4个功能结构域,即A/B区, DNA结合区(DNA binding domain, DBD区),铰链区,配体结合区(ligand binding domain, LBD区)。运用荧光定量PCR (real time quantitative PCR, RT-qPCR)检测刀鲚PPARγ基因在不同组织、运输胁迫和胚胎发育时期的表达。结果显示,刀鲚PPARγ在各组织中均有表达,其中在肝中表达量最高,在脑、肠、心脏、肾、头肾、肌肉中相对高表达,在鳃和脾中微量表达。运输胁迫过程中, PPARγ基因表达显著上调(P<0.05),在4 h达到峰值,随后显著降低,但仍高于对照组。PPARγ在胚胎发育时期各时期均表达,其中在受精卵时期高表达,随后表达量急剧降低,并在此后的时期一直处于较低的表达水平。PPARγ基因在应激过程中发挥重要作用,也是胚胎发育过程中重要的基因。本研究为刀鲚的人工繁育和应激调控提供了理论基础。

关键词：刀鲚 PPARγ 应激应答运输应激胚胎表达

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刀鲚Δ6脂肪酸去饱和酶cDNA的克隆与组织表达检测

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南京农业大学学报 2014年第3期37卷 138-144页

作者：魏广莲徐钢春顾若波杜富宽徐跑南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

利用RT-PCR和RACE技术获得刀鲚（Coilia nasus）Δ6脂肪酸去饱和酶（Δ6 fatty acyl desaturase,FAD6）的全长cDNA序列2 032 bp,开放阅读框（ORF）为1 338 bp,编码445个氨基酸。其具有3个保守的组氨酸簇（HDXGH、HXXHH和QXXHH）、2个跨... 详细信息

利用RT-PCR和RACE技术获得刀鲚（Coilia nasus）Δ6脂肪酸去饱和酶（Δ6 fatty acyl desaturase,FAD6）的全长cDNA序列2 032 bp,开放阅读框（ORF）为1 338 bp,编码445个氨基酸。其具有3个保守的组氨酸簇（HDXGH、HXXHH和QXXHH）、2个跨膜区和含亚铁血红素结合基序（HPGG）的细胞色素b5结构域等典型的Δ6脂肪酸去饱和酶结构特点。氨基酸同源性分析显示,刀鲚FAD6与海鳗（Muraenesox cinereus）和军曹鱼（Rachycentron canadum）等海水鱼类的相似性达75%～79%,而与淡水鱼类的相似性较低。系统进化分析也显示,其与海水鱼类的亲缘关系较近。荧光定量PCR检测发现该基因在刀鲚脑和肠中高表达,肌肉和肝脏相对高表达,心脏、肾脏和鳃低表达。

关键词：刀鲚 Δ6脂肪酸去饱和酶基因克隆基因表达

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运输应激对刀鲚生理生化指标和HPI轴基因表达影响及甘草甜素的作用

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上海海洋大学学报 2015年第6期24卷 817-825页

作者：高金伟杜富宽顾若波徐钢春南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214128 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214128

以刀鲚(Coilia nasus)为研究对象,运用荧光定量和相关生化测定方法,研究运输应激对下丘脑-垂体-肾间组织轴(HPI)基因表达和肝脏氧化指标的影响;同时采用浸泡的方式研究甘草甜素(glycyrrhizin,GL)对以上指标的调控作用。结果显示:运输后... 详细信息

以刀鲚(Coilia nasus)为研究对象,运用荧光定量和相关生化测定方法,研究运输应激对下丘脑-垂体-肾间组织轴(HPI)基因表达和肝脏氧化指标的影响;同时采用浸泡的方式研究甘草甜素(glycyrrhizin,GL)对以上指标的调控作用。结果显示:运输后,脑中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)基因、阿黑皮素原(POMC)基因和硬骨鱼紧张肽(UI)基因的表达水平显著降低;头肾中皮质醇受体(GR)基因的表达水平运输2 h明显下降,4 h时表达水平最低,8 h显著升高。运输应激可以明显降低肝脏过氧化氢酶(CAT)的活性,显著提高肝脏丙二醛(MDA)的水平,而对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和脂质过氧化物(LPO)无显著影响。添加甘草甜素6 h后头肾GR基因的表达水平降低,脑中CRH和POMC基因的表达水平显著升高,但是脑中UI基因的表达水平无明显变化。此外,添加甘草甜素对肝脏CAT、MDA、GSH-PX和LPO无显著影响。以上结果表明,运输应激调控HPI轴的基因表达发生了不同程度的变化,而且降低了机体的抗氧化能力,使刀鲚处于氧化应激状态中。GL也可以影响HPI轴的基因表达,但不能有效缓解刀鲚的运输应激引发的氧化应激。

关键词：刀鲚运输应激甘草甜素 HPI

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刀鲚MSTN基因的克隆及其组织表达

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中国水产科学 2014年第4期21卷 684-692页

作者：杜富宽聂志娟徐钢春徐跑顾若波中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

运用同源克隆的方法和RACE技术,从刀鲚(Coilia nasus)肌肉组织中克隆了肌肉生成抑制素基因(Myostatin,MSTN)的cDNA全长并分析了肌肉生长抑制素基因在刀鲚不同组织的表达情况。结果表明,刀鲚MSTN基因的cDNA全长2 252 bp,编码区1 125 bp,... 详细信息

运用同源克隆的方法和RACE技术,从刀鲚(Coilia nasus)肌肉组织中克隆了肌肉生成抑制素基因(Myostatin,MSTN)的cDNA全长并分析了肌肉生长抑制素基因在刀鲚不同组织的表达情况。结果表明,刀鲚MSTN基因的cDNA全长2 252 bp,编码区1 125 bp,编码374氨基酸。二级结构预测显示,刀鲚MSTN具有MSTN家族的典型结构域,包含Pfam和TGFB结构域。运用荧光定量的方法检测了该基因在刀鲚不同组织中的表达。结果显示,MSTN基因在健康刀鲚肌肉和脑中呈高表达,鳃、肝、脾、肠、肾和头肾中微量表达。根据以上研究结果认为,刀鲚MSTN基因的序列具有高度保守性,组织表达模式相似,推测该基因的功能也具有高度保守性。本研究旨为MSTN基因在刀鲚后续育种工作提供基础依据。

关键词：刀鲚 MSTN基因克隆组织表达

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新型钢-UHPC组合桥面连续构造性能研究

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公路交通科技 2025年第1期42卷 156-165页

作者：周尚猛崔冰郭福宽桥梁智能与绿色建造全国重点实验室湖北武汉430034 中铁大桥科学研究院有限公司湖北武汉430034

[目标]为了解决传统桥面连续构造易开裂、耐久性差的难题,充分发挥组合结构的受力特点及超高性能混凝土(UHPC)强度高、耐久性优异的力学性能优势。[方法]提出了钢-UHPC组合桥面连续构造形式。基于有限元法建立桥面系节段模型,分析了传... 详细信息

[目标]为了解决传统桥面连续构造易开裂、耐久性差的难题,充分发挥组合结构的受力特点及超高性能混凝土(UHPC)强度高、耐久性优异的力学性能优势。[方法]提出了钢-UHPC组合桥面连续构造形式。基于有限元法建立桥面系节段模型,分析了传统桥面连续构造的病害机理,对比了新型钢-UHPC组合桥面连续构造和传统桥面连续构造在设计车辆荷载及温度效应作用下的位移及应力响应。[数据]采用钢-UHPC组合桥面连续构造后,桥面连续处转角变得相对平缓,混凝土层最大拉应力从21.0 MPa大幅降低至7.6 MPa,且低于UHPC120材料的弯曲抗拉强度。[结论]分横梁的挠曲变形是桥面连续构造病害的主要原因之一,传统桥面连续构造在轮载作用下,连续缝处顶、底面拉应力较大,极易产生开裂病害。钢-UHPC组合桥面连续构造由于具有较高的弯曲变形能力,UHPC层拉应力能满足抗裂性能要求,且具有较高的强度储备,UHPC层与旧混凝土界面之间的抗剪强度满足规范要求。[应用]桥面连续构造维修完成并运营5 a后,现场实地勘查结果表明维修部位未产生任何病害,维修效果良好。钢-UHPC组合桥面连续构造简单合理、施工便利、无需完全中断交通、全寿命周期成本低廉、高效绿色,具有可观的市场应用前景及重要的社会、经济效益。

关键词：桥梁工程桥面连续构造有限元法钢-UHPC组合桥面连续病害维修

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Strategies of selective electroreduction of aqueous nitrate to N_(2) in chloride-free system:A critical review

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Green Energy & Environment 2024年第2期9卷 198-216页

作者： fukuan Li Weizhe Zhang Peng Zhang Ao Gong Kexun Li College of Environmental Science and Engineering Nankai UniversityTianjin300350China MOE Key Laboratory of Pollution Processes and Environmental Criteria Tianjin Key Laboratory of Environmental Remediation and Pollution ControlTianjin Key Laboratory of Environmental Technology for Complex Trans-Media PollutionNankai UniversityTianjin300350China

Electroreduction of nitrate has been gaining wide attention in recent years owing to it's beneficial for converting nitrate into benign N_(2) from the perspective of electrocatalytic denitrification or into value-added ammonia from the perspective of electrocatalytic NH_(3) *** reason of the undesired formation of ammonia is dominant during electroreduction of nitrate-containing wastewater,chloride has been widely used to improve N_(2) ***,selective electroreduction of nitrate to N2 gas in chloride-containing system poses several *** this review,we focus on the key strategies for efficiently enhancing N_(2) selectivity of electroreduction of nitrate in chloride-free system,including optimal selection of elements,combining an active metal catalyst with another metal,manipulating the crystalline morphology and facet orientation,constructing core–shell structure catalysts,*** summarizing the strategies,four possible reaction pathways of electro-reduction of nitrate to N_(2) are ***,this review attempts to provide practical strategies for enhancing N2 selectivity without the aid of electrochlorination and highlight directions for future research for designing appropriate electrocatalyst for final electrocatalytic denitrifi-cation.

关键词： Nitrate Chloride Electroreduction Selectivity Nitrogen

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