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大鼠Ⅱ型胶原蛋白的提取及关节炎动物模型的诱导

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西安交通大学学报（医学版） 2020年第4期41卷 603-605,616页

作者：陶培朱文华韩燕宁启兰张富军孟列素吕社民西安交通大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学系陕西西安710061 环境与疾病相关基因教育部重点实验室陕西西安710061

目的拟建立一种简单易行且经济的大鼠软骨Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,CⅡ)提取方法,并以此构建CⅡ诱导的关节炎动物模型(collagenⅡ-induced arthritis,CIA)。方法将大鼠软骨通过机械法破碎,再结合盐酸胍除去蛋白多糖,胃蛋白酶消化,0.9 m... 详细信息

目的拟建立一种简单易行且经济的大鼠软骨Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,CⅡ)提取方法,并以此构建CⅡ诱导的关节炎动物模型(collagenⅡ-induced arthritis,CIA)。方法将大鼠软骨通过机械法破碎,再结合盐酸胍除去蛋白多糖,胃蛋白酶消化,0.9 mol/L氯化钠盐析,透析冻干等步骤,最终获得纯化CⅡ。经SDS-PAGE电泳鉴定后,诱导大鼠CIA模型。结果SDS-PAGE结果显示可见约130 ku明显条带,无杂带。使用该CⅡ可成功诱导DA大鼠CIA模型,造模成功率100%,在CIA大鼠血浆中可检测到显著升高的抗CⅡ抗体。结论使用本方法可获得纯度较高的CⅡ,可用于CIA模型构建,为类风湿性关节炎的研究提供研究工具。

关键词： Ⅱ型胶原大鼠软骨蛋白提取胶原诱导的关节炎动物模型

苹果磷脂酰乙醇胺结合蛋白PEBP家族基因的鉴定与比较分析

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植物生理学报 2021年第10期57卷 1996-2010页

作者：王寻高凝张富军韩月彭王小非由春香郝玉金山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心山东泰安271018 中国科学院武汉植物园中国科学院植物种质创新与特色农业重点实验室武汉430074

磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)控制植物开花转变和营养生长。本研究在GDDH13苹果参考基因组中鉴定了9个苹果PEBP基因。通过序列比较和进化分析,苹果(Malus domestica) PEBP蛋白由1个MFT-like蛋白、1个FT-like蛋白、6个TFL1-like蛋白和另外... 详细信息

磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)控制植物开花转变和营养生长。本研究在GDDH13苹果参考基因组中鉴定了9个苹果PEBP基因。通过序列比较和进化分析,苹果(Malus domestica) PEBP蛋白由1个MFT-like蛋白、1个FT-like蛋白、6个TFL1-like蛋白和另外的1个PEBP-like成员构成。在保守位点的位置和组成方面,这四组PEBP蛋白具有一定的相似性,且在组内也有独特性。9个苹果PEBP成员具有相似的结构域分布和蛋白质结构, Motif 4、Motif 3、Motif 1和Motif 2共同构成了PEBP结构域,无规卷曲在二级结构中占有较大比例。苹果PEBP启动子区含有多种调控元件,如响应光照的G-box、响应低温的LTR、响应脱落酸的ABRE元件等。通过表达分析,发现不同的MdPEBP基因具有多样化的表达模式,部分成员可能参与低温过程、脱落酸和水杨酸响应。

关键词：苹果 PEBP基因序列比较氨基酸位点结构域分析表达特征

长期摄入ω-3多不饱和脂肪酸对POCD小鼠海马小胶质细胞活化的影响

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中华麻醉学杂志 2022年第1期42卷 44-49页

作者：韩玉强董瑞刘帅张富俊王子沫夏天娇顾小萍徐州医科大学鼓楼临床学院南京210009 南京大学医学院附属鼓楼医院麻醉科南京210008 南京大学医学院南京210093

目的评价长期摄入ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFAs)对术后认知功能障碍(POCD)小鼠海马小胶质细胞活化的影响。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠96只,8周龄,体重18~24 g,按照体重分层,采用随机数字表法分为4组(n=24):对照饲料组(C组)、ω-3 ... 详细信息

目的评价长期摄入ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFAs)对术后认知功能障碍(POCD)小鼠海马小胶质细胞活化的影响。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠96只,8周龄,体重18~24 g,按照体重分层,采用随机数字表法分为4组(n=24):对照饲料组(C组)、ω-3 PUFAs组(ω组)、对照饲料+POCD组(C+P组)和ω-3 PUFAs+POCD组(ω+P组)。ω组和ω+P组给予特制ω-3 PUFAs饲料[二十二碳六烯酸(DHA)0.14 g/100 g,二十碳五烯酸(EPA)0.03 g/100 g]喂养12周,C组和C+P组给予对照饲料喂养12周。12周喂养结束后,采用异氟烷麻醉下行胫骨骨折手术的方法制备小鼠POCD模型。造模后第1和3天进行条件恐惧实验和Y迷宫实验。在行为学测试结束后处死小鼠取海马组织,采用气相色谱-质谱联用法测定DHA和EPA含量,免疫荧光染色法测定Iba-1阳性小胶质细胞密度,Western blot法检测成熟脑源性神经营养因子(mBDNF)和前体脑源性神经营养因子(pro-BDNF)的表达,ELISA法测定IL-1β和IL-6含量。结果与C组比较,ω组海马DHA和EPA含量升高,场景恐惧测试僵直时间百分比增加,mBDNF/pro-BDNF比值升高(P0.05),C+P组小鼠DHA与EPA含量差异无统计学意义(P>0.05),术后第1和3天场景恐惧测试僵直时间百分比和轮替正确率减少,海马Iba-1阳性小胶质细胞密度增加,IL-1β和IL-6含量升高,mBDNF/pro-BDNF比值降低(P<0.05);与C+P组比较,ω+P组海马DHA和EPA含量升高,术后第1和3天场景恐惧测试僵直时间百分比和轮替正确率升高,海马Iba-1阳性小胶质细胞密度减少,海马IL-1β和IL-6含量降低,mBDNF/pro-BDNF比值增加(P<0.05)。结论长期摄入ω-3 PUFAs可改善POCD小鼠认知功能,其机制可能与抑制海马小胶质细胞活化,减轻炎症反应,从而升高mBDNF/pro-BDNF比值有关。

关键词：脂肪酸类,ω3 认知功能障碍海马小神经胶质细胞

LMO2蛋白在前列腺基质细胞中介导的IL-11、FGF-9旁分泌促进前列腺癌细胞增殖与侵袭

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中国癌症杂志 2016年第11期26卷 894-901页

作者：姜辰一俞俊杰阮渊赵炜韩邦旻夏术阶赵福军上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科上海200080 扬州大学医学院附属苏北人民医院泌尿外科江苏扬州225001

背景与目的:前列腺癌多发生于前列腺外周带,前列腺增生多发于前列腺移行带。前列腺疾病的带性差异机制可能与前列腺组织微环境有关。该研究的前期研究提示,不同区带来源的前列腺基质细胞对上皮细胞的作用存在明显差异,基因芯片筛查发现L... 详细信息

背景与目的:前列腺癌多发生于前列腺外周带,前列腺增生多发于前列腺移行带。前列腺疾病的带性差异机制可能与前列腺组织微环境有关。该研究的前期研究提示,不同区带来源的前列腺基质细胞对上皮细胞的作用存在明显差异,基因芯片筛查发现LMO2蛋白在前列腺外周带基质细胞高表达与前列腺癌发生、发展密切相关。该研究旨在分析前列腺基质细胞LMO2基因的表达对前列腺癌细胞系增殖、侵袭能力的影响及其机制。方法:分别应用慢病毒过表达载体和短发卡RNA(sh RNA)建立过表达和低表达LMO2的前列基质细胞,利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测LMO2 m RNA和蛋白的表达;将不同处理的前列腺基质细胞分别同PC-3细胞共培养,利用CCK-8检测PC-3的增殖能力,利用基质胶侵袭实验检测PC-3的侵袭能力;利用生物素标记的人蛋白抗体芯片检测过表达LMO2的前列腺基质细胞条件培养基中蛋白因子表达变化。结果:成功建立过表达及低表达LMO2的前列腺基质细胞;CCK-8实验及基质胶实验提示,与过表达LMO2的前列腺WPMY-1基质细胞共培养后,PC-3细胞的增殖和侵袭能力增强;与低表达LMO2的CAFs细胞共培养后,PC-3细胞的增殖和侵袭能力降低;蛋白芯片检测发现过表达LMO2后,前列腺外周带基质细胞分泌白介素-11(interleukin-11,IL-11)和成纤维细胞生长因子-9(fibroblast grouth factor-9,FGF-9)增多。结论:LMO2基因在前列腺外周基质细胞中的高表达可能与前列腺癌的发生、发展有关;过表达LMO2的前列腺基质细胞通过旁分泌IL-11、FGF-9等细胞因子促进前列腺癌细胞增殖与侵袭。

关键词：前列腺肿瘤基质细胞 LMO2基因旁分泌

不同剂量脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的凋亡机制

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上海医学 2012年第8期35卷 678-682,F0002页

作者：贾丽洁陆菡张富军薛庆生罗艳于布为上海交通大学医学院附属瑞金医院麻醉科上海200025

目的研究不同剂量脂多糖(LPS)诱导的不同程度急性肺损伤(ALI)的细胞凋亡机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠20只,随机分为4组,每组5只,分别在七氟烷麻醉下经尾静脉注射1 mL 0.9%氯化钠溶液(对照组)或LPS 5、10、20 mg/kg(分别为LPS5组、L... 详细信息

目的研究不同剂量脂多糖(LPS)诱导的不同程度急性肺损伤(ALI)的细胞凋亡机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠20只,随机分为4组,每组5只,分别在七氟烷麻醉下经尾静脉注射1 mL 0.9%氯化钠溶液(对照组)或LPS 5、10、20 mg/kg(分别为LPS5组、LPS10组和LPS20组)。6 h后处死大鼠,通过苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织形态学改变,肺组织湿/干比值(W/D值)评估肺组织水肿,脱氧核苷酸末端转移酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)染色法检测肺组织细胞凋亡,Western印迹法检测肺组织中天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和凋亡诱导因子(AIF)的表达水平。结果光学显微镜下可见对照组大鼠肺组织无明显损伤,LPS5组大鼠肺组织结构轻微破坏,LPS10组和LPS20组大鼠肺组织损伤严重。LPS5组、LPS10组、LPS20组的W/D值均显著高于对照组(P值均0.05)。LPS5组大鼠肺组织中活化AIF的相对表达量较对照组有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),但LPS10组和LPS20组活化AIF的相对表达量均显著高于对照组(P值均<0.05)。结论不同剂量LPS诱导的ALI中,5 mg/kgLPS诱导的较轻的ALI主要激活了Caspase-3凋亡途径,而10和20 mg/kg LPS诱导的较严重的ALI则主要活化AIF凋亡信号,这为ALI的抗凋亡治疗提供了潜在的靶点。

关键词：细胞凋亡天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3 凋亡诱导因子脂多糖急性肺损伤

世界地质公园方山两宜亭景点落石灾害成因及其防治对策研究

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工程地质学报 2019年第6期27卷 1339-1349页

作者：杨志法魏雪云孙亚丽韩振华张善福郑卫包涵黄富君中国科学院地质与地球物理研究所北京100029 衢州学院衢州324000 温岭旅游局温岭317500 温岭市方山景区温岭317500

浙江省温岭市大溪镇的世界地质公园方山景区位于早白垩世磨石山群九里坪组的火山岩地层上。方山所具有的火山岩台地地貌景观的形成与构成方山台地的较坚硬且不易风化的流纹岩有关。据现场考察,方山景区的岩体具有层状结构,工程地质条件... 详细信息

浙江省温岭市大溪镇的世界地质公园方山景区位于早白垩世磨石山群九里坪组的火山岩地层上。方山所具有的火山岩台地地貌景观的形成与构成方山台地的较坚硬且不易风化的流纹岩有关。据现场考察,方山景区的岩体具有层状结构,工程地质条件评价为良,但与游路相关的高陡反坡却存在着较多的落石,并在台风来临时还可能发生水带泥石落下的问题。它们在某些游客出现的部位有可能形成地质灾害的严重隐患。例如方山景区两宜亭景点就曾在2013年台风来临的季节发生了一次两宜亭被从上述高陡反坡顶部水冲下来的泥石砸坏。此外,作者还在两宜亭景点发现了散落在地面上的大量落石。显然,两宜亭景点存在严重威胁旅游安全的地质灾害隐患问题。在两宜亭景点地质灾害的防治方面,作者提出了基于工程地质学与旅游规划学相结合所形成的山地旅游规划工程地质方法来调整景区的游路,以达到既确保旅游安全又可维护方山景区原状的目的。

关键词：山地旅游地质灾害

黔产大接骨丹药材不同用药部位中紫丁香苷和总黄酮含量的经时变化特征分析

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中国药房 2020年第17期31卷 2124-2128页

作者：韩忠耀宋伟李燕张涛唐文双周福军黔南民族医学高等专科学校药学系贵州558000 天津药物研究院中药和健康产品研究中心天津300193

目的:研究黔产大接骨丹药材不同用药部位(根皮、树皮、叶)中紫丁香苷和总黄酮含量的经时变化特征,为该药材的开发和应用提供参考。方法:分别以不同采收期(1-12月)大接骨丹药材的根皮、树皮和叶部位为样品。采用高效液相色谱法测定其中... 详细信息

目的:研究黔产大接骨丹药材不同用药部位(根皮、树皮、叶)中紫丁香苷和总黄酮含量的经时变化特征,为该药材的开发和应用提供参考。方法:分别以不同采收期(1-12月)大接骨丹药材的根皮、树皮和叶部位为样品。采用高效液相色谱法测定其中紫丁香苷含量,色谱柱为Agela Promosil C18、流动相为0.5%磷酸溶液-乙腈(梯度洗脱)、流速为1.0 mL/min、检测波长为210 nm、柱温为35℃、进样量为5μL。采用紫外-可见分光光度法测定其中总黄酮含量,检测波长为510 nm。结果:紫丁香苷、总黄酮的质量浓度线性范围分别为0.0959~1.1508 mg/mL(r=0.9996)、0.0722~1.0830 mg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%(n=6);平均加样回收率分别为101.74%(RSD=2.36%,n=6)、99.63%(RSD=2.19%,n=6)。不同采收期内,大接骨丹药材根皮、树皮、叶中紫丁香苷含量分别在8、5、9月最高,总黄酮含量分别在2、12、9月最高。紫丁香苷含量在3个药用部位的大小依次为树皮>根皮>叶,其中树皮部位中紫丁香苷含量普遍较高;总黄酮含量在3个药用部位的大小依次为根皮>树皮>叶,且3个用药部位中总黄酮含量均普遍较低。根皮部位中总黄酮含量在当年2月最高,且当月根皮部位中紫丁香苷含量仅次于当年8月;树皮部位中紫丁香苷含量在5月最高,且当月树皮部位中总黄酮含量仅次于当年10、12月;叶部位中总黄酮含量与紫丁香苷含量均在当年9月最高。结论:建议大接骨丹药材根皮部位在2月采收为宜,树皮部位在5月采收为宜,叶部位在9月采收为宜。

关键词：大接骨丹药用部位高效液相色谱法经时变化紫丁香苷总黄酮

基于HPLC-HESI-HRMS的水冬瓜根皮化学成分分析

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食品工业科技 2021年第17期42卷 16-23页

作者：韩忠耀胡恩明邓先扩李燕张林甦曹芳陈建宇周福军黔南民族医学高等专科学校贵州都匀558000 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014 南开大学农药国家工程研究中心天津300071 天津药物研究院天津300301

为探究水冬瓜根皮中的化学成分,本文基于HPLC-HESI-HRMS方法对水冬瓜根皮中化学成分进行了分析与推测。采用ThermoFisher Hypersil GOLD aQ C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水-乙腈(0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,体积流量... 详细信息

为探究水冬瓜根皮中的化学成分,本文基于HPLC-HESI-HRMS方法对水冬瓜根皮中化学成分进行了分析与推测。采用ThermoFisher Hypersil GOLD aQ C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水-乙腈(0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,柱温:40℃;质谱使用HESI离子源,正离子和负离子模式下采集数据,质量扫描范围m/z:100~1500 Da,结合Compound Discoverer 3.0数据库及相关文献数据分析水冬瓜根皮的主要化学成分。结果表明,通过高分辨质谱正、负离子质谱信息及相关文献数据对照,共推断出36个化合物,包括10个有机酸类化合物,4个生物碱类化合物,1个氨基酸类化合物,2个苯丙素类化合物,2个酯类化合物,2个萜类化合物,2个芳香含氧衍生物类化合物,4个酰胺类化合物,9个其他类化合物。HPLCHESI-HRMS方法为水冬瓜根皮药材的质量控制提供技术支持,为阐明水冬瓜根皮药材的药效物质基础提供了有力的数据依据。

关键词：水冬瓜根皮化学成分 HPLC-HESI-HRMS 高分辨质谱

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邯钢新区汽运铁水“一罐制”技术特点

炼铁 2024年第4期43卷 32-36页

作者：任福军于鹏飞韩春勇程子波王宗德河钢集团邯钢公司生产制造部河北邯郸056403

从运输方式、铁水运输车、界面布置、运输流程、运行罐数管理、新技术的支持及安全管控等方面,阐述了邯钢新区汽运铁水“一罐制”技术的应用状况。实践表明:在1号高炉日产量8600/d的情况下,在线铁水运输车数量为9台,铁水罐数量为10~12个... 详细信息

从运输方式、铁水运输车、界面布置、运输流程、运行罐数管理、新技术的支持及安全管控等方面,阐述了邯钢新区汽运铁水“一罐制”技术的应用状况。实践表明:在1号高炉日产量8600/d的情况下,在线铁水运输车数量为9台,铁水罐数量为10~12个,铁水罐周转率平均达到6.0次/d左右,铁水温降减小到95℃左右;铁水运输车铁水装入偏差控制在+0.5t以内,炼钢直兑比例可达到99.5%,炼钢平均提高人炉铁水温度60~70℃。认为汽运铁水“一罐制”技术具有布局紧凑、投资低、生产效率高、铁水罐周转率高、铁水温降低及节能环保等特点,有着较好的应用前景。

关键词：高炉铁钢界面一罐制铁水运输车铁水温度