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高+Gx对猴肝细胞c-fos表达的影响

世界华人消化杂志 2006年第28期14卷 2793-2795页

作者：牛忠英张建中施生根吴斌李冬党平阚广捍中国人民解放军第306医院北京市100101 中国航天员科研训练中心北京市100094

目的:观察航天应急返回过程中高正加速度(+Gx)对肝脏细胞c-fos基因表达的影响．方法:选用♂猕猴(共9只)为对象,随机分为4组,对照组承受+1Gx,300 s的超重作用;实验组根据承受过载峰值的大小分为3个亚组,其承受过载峰值分别为+15Gx,200 s;... 详细信息

目的:观察航天应急返回过程中高正加速度(+Gx)对肝脏细胞c-fos基因表达的影响．方法:选用♂猕猴(共9只)为对象,随机分为4组,对照组承受+1Gx,300 s的超重作用;实验组根据承受过载峰值的大小分为3个亚组,其承受过载峰值分别为+15Gx,200 s;+18Gx, 165 s;+21Gx,140 s．观察高+Gx对猴肝脏细胞c-fos基因表达的影响．结果:实验组肝脏细胞胞质呈现不同程度的水肿及泡状变性,c-fos基因表达明显增强,呈弥漫性细胞质内棕黄色着色;肝细胞c-fos基因表达程度随超重剂量的增加有增强趋势．对照组肝脏组织病理学改变程度明显较实验组轻微,c-fos基因表达亦明显减弱．结论:+Gx可引起猴肝脏组织细胞c-fos基因表达增强,提示有早期肝脏组织损伤．

关键词：高正加速度恒河猴 c—fos表达肝损伤

静脉注射骨髓间充质干细胞在缺血鼠脑中的分布与转化

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第3期11卷 490-493,I0004页

作者：李高华张朝东王翠琴抚顺矿业集团总医院神经内科辽宁省抚顺市113008 中国医科大学附属第一医院神经内科辽宁省沈阳市110001

目的:观察经静脉输入骨髓源性骨髓间充质干细胞在缺血鼠脑中的分布与转化情况。方法:实验于2003-07/2004-08在中国医科大学完成。①取两周龄Wistar胎鼠1只制备骨髓间充质干细胞,将传至2,3代的细胞于移植前3d加入溴脱氧核苷尿嘧啶进行标... 详细信息

目的:观察经静脉输入骨髓源性骨髓间充质干细胞在缺血鼠脑中的分布与转化情况。方法:实验于2003-07/2004-08在中国医科大学完成。①取两周龄Wistar胎鼠1只制备骨髓间充质干细胞,将传至2,3代的细胞于移植前3d加入溴脱氧核苷尿嘧啶进行标记备用。②选取健康成年Wistar大鼠22只,随机数字表法分为缺血再灌注模型组12只、假手术组10只。缺血再灌注模型组大鼠建立大脑中动脉闭塞模型,假手术组手术步骤相同,但不阻塞大脑中动脉。术后大鼠提尾右前肢屈曲内收、向右侧转圈或向右侧倾倒为造模成功,缺血再灌注模型组12只大鼠均符合标准。③造模24h后,取2,3代经BrdU标记的骨髓间充质干细胞,消化离心后分别取3×106个细胞(总量大约1mL)静脉输入两组每只鼠尾。④造模后14d,两组大鼠断头后以前囟为中心前后1mm处取脑组织制作标本切片,苏木精-伊红染色。应用BrdU标记骨髓间充质干细胞,计数两组同一部位的10个冠状切片的所有BrdU反应阳性细胞。应用免疫荧光与免疫酶法双重染色,计数BrdU阳性细胞表达神经元特异性烯醇酶、神经胶质原纤维酸性蛋白的比例。结果:实验选取22只大鼠均进入结果分析。①神经元凋亡检测结果:缺血再灌注模型组大鼠缺血区脑组织均发现了暗红色神经元,神经细胞间隙增宽。假手术组均未检测到以上现象。②骨髓间充质干细胞BrdU免疫组化染色结果:骨髓间充质干细胞的胞核为圆形或椭圆形,暗棕色,胞浆少且形态不规则,BrdU标记出现在大脑中动脉闭塞范围的供体细胞胞核中。大多数BrdU标记的骨髓间充质干细胞定位于缺血中心和边缘区,平均阳性细胞数为(15002.75±4972.64);少量分布在对侧半球皮层,平均阳性细胞数为(999.58±655.41)。假手术组脑组织内未发现BrdU阳性细胞。③骨髓间充质干细胞双重免疫组化染色结果:缺血区BrdU阳性细胞表达神经元特异性烯醇酶和神经胶质原纤维酸性蛋白的比例分别是(4.53±1.80)%,(3.66±0.87)%。缺血区对侧的BrdU阳性细胞均未发现表达神经细胞标志。结论:骨髓间充质干细胞经静脉输注途径可以进入缺血后脑组织,存活且大多定位于缺血半球缺血区,表达神经细胞表型的蛋白标志。

关键词：骨髓细胞间质干细胞移植脑缺血

在罗马尼亚集体农庄先进工作者代表大会上的演说

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在罗马尼亚集体农庄先进工作者代表大会上的演说

1954年

作者：（罗马尼亚）乔治乌-德治（gh. gheorghiu-dej）阴士先译

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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应用表皮干细胞构建组织工程皮肤及移植实验

中国组织工程研究与临床康复 2007年第14期11卷 2661-2664页

作者：廖立新陈刚泉李国辉李剑南昌大学第一附属医院烧伤中心江西省南昌市330006 南昌大学第二附属医院血液研究所江西省南昌市330006

目的:探讨应用人表皮干细胞和猪脱细胞真皮构建组织工程皮肤修复全层皮肤缺损的可行性。方法:实验于2004-06/2005-12在南昌大学医学院烧伤研究所完成。①取环状切除后幼儿包皮(家属知情同意)用中性蛋白酶与胰蛋白酶混合消化液消化,收集... 详细信息

目的:探讨应用人表皮干细胞和猪脱细胞真皮构建组织工程皮肤修复全层皮肤缺损的可行性。方法:实验于2004-06/2005-12在南昌大学医学院烧伤研究所完成。①取环状切除后幼儿包皮(家属知情同意)用中性蛋白酶与胰蛋白酶混合消化液消化,收集细胞,接种在已包被Ⅳ型胶原的培养皿中,快速黏附,保留快速黏附细胞继续培养,培养体系为低钙高糖dMEM培养基,待融和状态时,再次消化,离心收集细胞,再次经过Ⅳ型胶原快速黏附,保留黏附细胞,培养20d左右,用作构建表皮干细胞并进行细胞鉴定。②将第2代细胞接种于铺好Ⅳ型胶原的猪无细胞真皮上,每3天换液。10d后将其转移至不锈钢网架上,行气液界面培养5d左右,构建复合皮。③取Sd大鼠20只,随机分2组。于动物背部尾侧正中作2.5cm×2.5cm的全层皮肤至肌筋膜的切除。实验组10只创面覆盖表皮干细胞构建的复合皮移植物,对照组10只覆盖无细胞真皮移植物。④移植后7,10,14,21和35d,两组动物均活检取材,进行创面大体观察、组织学观察及免疫组织化学、免疫荧光鉴定等。结果:①表皮干细胞的分离、扩增及鉴定:在扩增的细胞拟接种于无细胞真皮前,进行角蛋白19免疫组织化学鉴定、以流式细胞术进行α6、Cd71鉴定。经胶原Ⅳ黏附的细胞培养后形成较大集落,拟接种的种子细胞中α6briCd71dim细胞占总细胞的(39±7)%;鼠抗人角蛋白19阳性细胞率为(53±6)%。②组织工程皮肤的建立结果:表皮干细胞种植于无细胞真皮上1d后,细胞便贴壁并开始生长增殖,8d左右透过间隙见无细胞真皮上表皮干细胞渐增殖融合成片;2周时无细胞真皮表面可见菲薄皮片状生长的细胞膜片物。复合皮组织学检查可见无细胞真皮表面覆盖多层融合的表皮层细胞,无细胞真皮内细胞成分去除完全。③创面愈合情况:术后2周,实验组移植物成活,创面上已上皮化,移植物柔软,而对照组无细胞真皮表面未上皮化,较干燥,色暗、触之较硬,两组创面均未见明显收缩。4周,实验组创面愈合,未见明显排斥反应。对照组无细胞真皮干燥脱落而创面暴露,创面收缩明显,创面边缘因自体表皮细胞爬行而缩小创面。④组织学检查及免疫组织化学染色结果:实验组2周时创面已全部上皮化,但细胞分层少;3,4周表皮层分化良好,多层结构,真皮纤维内见成纤维细胞长入,见少许炎症细胞,大鼠自体正常皮肤见毛囊及毛发结构。对照组2周创面尚未上皮化,无细胞真皮干燥变性,3,4周后创面仍未愈合,可见大量炎症细胞。实验组愈合创面抗人人类白细胞抗原-Ⅰ型抗原直接免疫荧光染色呈阳性,证明新生表皮由移植的人表皮细胞形成。而对照组阴性。实验组愈合创面广谱角蛋白免疫组织化学染色见整个表皮层细胞胞浆染呈棕黄,为阳性反应。结论:利用体外纯化扩增的表皮干细胞及制备的猪脱细胞真皮可体外联合构建具有复层结构的组织工程皮肤,该组织工程皮肤可用于修复动物全层皮肤缺损。

关键词：干细胞组织工程皮肤移植

Reproduction and beyond,kisspeptin in ruminants

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2015年第3期6卷 264-268页

作者： Joseph A.daniel Chad d.Foradori Brian K.Whitlock James L.Sartin department of Animal Science Berry College department of Anatomy Physiology & PharmacologyAuburn University department of Large Animal Clinical Sciences University of Tennessee

Kisspeptin （Kp） is synthesized in the arcuate nucleus and preoptic area of the hypothalamus and is a regulator of gonadotropin releasing hormone in the hypothalamus. In addition, Kp may regulate additional functions such as increased neuropeptide Y gene expression and reduced proopiomelanocortin （POMC） gene expression in sheep. Other studies have found a role for Kp to release growth hormone （gh）, prolactin and luteinizing hormone （LH） from cattle, rat and monkey pituitary cells. Intravenous injection of Kp stimulated release LH, gh, prolactin and follicle stimulating hormone in some experiments in cattle and sheep, but other studies have failed to find an effect of peripheral injection of Kp on gh release. Recent studies indicate that Kp can stimulate gh release after intracerebroventricular injection in sheep at doses that do not release gh after intravenous injection. These studies suggest that Kp may have a role in regulation of both reproduction and metabolism in sheep. Since gh plays a role in luteal development, it is tempting to speculate that the ability of Kp to release gh and LH is related to normal control of reproduction.

关键词： Growth hormone Leptin Luteinizing Neuropeptide Y POMC

共同培养骨髓基质干细胞对髓核细胞增殖分化的影响

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第28期11卷 5548-5552页

作者：方忠李锋游洪波李光辉熊伟华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科湖北省武汉市430030

目的:针对椎间盘退行性变的组织修复目前集中于细胞移植治疗,实验在体外联合培养条件下观察骨髓基质干细胞对髓核细胞增殖分化的影响。方法:实验于2005-12/2006-09在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室和同济医院卫生部重点... 详细信息

目的:针对椎间盘退行性变的组织修复目前集中于细胞移植治疗,实验在体外联合培养条件下观察骨髓基质干细胞对髓核细胞增殖分化的影响。方法:实验于2005-12/2006-09在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室和同济医院卫生部重点实验室进行。①实验方法:4月龄健康新西兰大耳白兔3只,麻醉后于髂嵴处作骨髓腔穿刺,抽吸6mL骨髓,分离骨髓基质干细胞;相同实验兔抽取骨髓后立即处死,取腰骶部脊柱之椎间盘,切开纤维环,取出髓核组织,分离椎间盘髓核细胞,同时设立单独髓核细胞培养组。②实验评估:在相同的培养条件下,定期观察两组髓核细胞在光镜下形态学变化及电镜下细胞超微结构的改变;于诱导培养7,14d通过RT-PCR法、Western blot法和免疫组化法法检测两组髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖的表达。结果:①髓核细胞大体形态学及超微结构变化:髓核细胞与骨髓基质干细胞共同培养后,髓核细胞很快就呈现为圆形或多角形,且细胞形体变大、折光性好,贴壁时间早,数量增殖快,超微结构细胞表面可见许多短而粗的微绒毛突起,胞质内有大量扩张的粗面内质网、丰富的线粒体和高尔基体,细胞合成代谢旺盛。单独培养的髓核细胞胞体小,贴壁、增殖慢,细胞器不丰富。②髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白与聚集蛋白聚糖检测结果:RT-PCR和Western blot检测显示诱导培养7,14d骨髓基质干细胞与髓核细胞共同培养组的Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖条带均明显亮于单独髓核细胞培养组,吸光度值比较差异有显著性意义(P<0.01)。免疫组化检测显示骨髓基质干细胞与髓核细胞共同培养组中Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖在细胞胞浆中的表达随时间延长而逐渐增加,2周达到高峰,单独髓核细胞培养组中此两种蛋白表达很低,且培养第7,14天无明显变化。结论:骨髓基质干细胞在体外与髓核细胞共同培养时,能激活髓核细胞并促进其增殖分化,增加髓核细胞外基质的合成。提示骨髓基质干细胞与髓核细胞联合培养有利于退变椎间盘的髓核细胞修复、再生。

关键词：骨髓基质干细胞髓核细胞共同培养

Mechanical properties of gas hydrate-bearing sediments during hydrate dissociation

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Acta Mechanica Sinica 2018年第2期34卷 266-274页

作者： X.H.Zhang d.S.Luo X.B.Lu L.L.Liu C.L.Liu Institute of Mechanics Chinese Academy of SciencesBeijing 100190China College of Engineering University of Chinese Academy of SciencesBeijing 100049China Key Laboratory of Gas Hydrate Ministry of Land and ResourcesQingdao 266071China Qingdao Institute of Marine Geology Qingdao 266071China

The changes in the mechanical properties of gas hydrate-bearing sediments(ghBS) induced by gas hydrate(gh) dissociation are essential to the evaluation of gh exploration and stratum instabilities. Previous studies present substantial mechanical data and constitutive models for ghBS at a given gh saturation under the non-dissociated condition. In this paper, ghBS was formed by the gas saturated method, gh was dissociated by depressurization until the gh saturation reached different dissociation degrees. The stress–strain curves were measured using triaxial tests at a same pore gas pressure and different confining pressures. The results show that the shear strength decreases progressively by 30%–90% of the initial value with gh dissociation, and the modulus decreases by 50% –75%. Simplified relationships for the modulus, cohesion, and internal friction angle with gh dissociated saturation were presented.

关键词： Gas hydrate-bearing sediments dissociation Mechanical properties Shear strength Triaxial test

正常高值血压和高血压与体质量指数及腹型肥胖指标的相关性

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中华高血压杂志 2013年第5期 498-498页

作者： deng W W Wang J Liu M M Wang d Zhao Y Liu YQ Wang H dong gh 罗冬梅叶鹏

高血压患者中体质量指数(bodymassindex,BMI)和腰围究竟哪项是肥胖更好的评估指标一直存在争议。此外,有关BMI和腰围与正常高值血压相关性的研究也很少。方法:2009-2010年从中国东北地区3个城市中随机抽取33个社区进行横断面调查。入选... 详细信息

高血压患者中体质量指数(bodymassindex,BMI)和腰围究竟哪项是肥胖更好的评估指标一直存在争议。此外,有关BMI和腰围与正常高值血压相关性的研究也很少。方法:2009-2010年从中国东北地区3个城市中随机抽取33个社区进行横断面调查。入选人群25196人,年龄18～74岁,应答率87.4%。

关键词：正常高值血压腰围人体测量高血压体质量指数腹型肥胖相关性

银杏内酯和神经生长因子影响原代人胚肝细胞的增殖及分泌

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第33期11卷 6521-6524页

作者：徐芳芹田美玲胡丽新秦建兵金国华南通大学医学院传染病学教研室江苏省南通市226001 南通大学神经生物学研究所江苏省南通市226001 南通市妇幼保健院妇产科江苏省南通市226006

目的:如何培养足够的肝细胞以及应用一些物质、因子从而使其增加分裂、减少凋亡?观察银杏内酯和神经生长因子对体外原代培养的人胚肝细胞增殖、凋亡及相关分泌功能的影响具有临床实用性意义。方法:实验于2005-07/2006-10在南通大学神经... 详细信息

目的:如何培养足够的肝细胞以及应用一些物质、因子从而使其增加分裂、减少凋亡?观察银杏内酯和神经生长因子对体外原代培养的人胚肝细胞增殖、凋亡及相关分泌功能的影响具有临床实用性意义。方法:实验于2005-07/2006-10在南通大学神经生物学研究所完成。①细胞来源:孕14～16周流产胎儿,由南通市妇幼保健院妇产科提供,产妇及其家属均知情同意,实验经医学伦理委员会批准。银杏内酯由中国药科大学提供,神经生长因子为Roche公司产品。②实验方法:用非灌流法从人胚肝中分离肝细胞,以dMEM作为培养基,接种于4块24孔培养板中,每两块培养板各接种36孔,12孔/组,细胞3×105/孔。银杏内酯组各孔加入含37.5g/L银杏内酯和体积分数为0.1小牛血清的dMEM培养液2mL,神经生长因子组各孔加入含100mg/L神经生长因子和体积分数为0.1小牛血清的dMEM培养液2mL,空白对照组各孔加入仅含体积分数为0.1小牛血清的dMEM培养液2mL。③实验评估:人胚肝细胞原代培养至9d,倒置显微镜下计数每视野的肝细胞数,同时行MTT试验,并用流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况。分别于培养3,6,9d时收集肝细胞培养液进行白蛋白含量检测。结果:①原代肝细胞生长情况及肝细胞计数:接种12h后各组肝细胞均已贴壁,3d后可见由3～5个细胞组成的细胞集落,至9d时银杏内酯组和神经生长因子组肝细胞已基本铺满孔底,且呈立体生长倾向,空白对照组肝细胞较少,胞间有空隙存在。至培养9d,银杏内酯组、神经生长因子组、空白对照组每视野内肝细胞计数差异有显著性意义(F=12.97,P=0.00)。②MTT试验结果:原代肝细胞培养至9d时,银杏内酯组、神经生长因子组、空白对照组吸光度值差异有显著性意义(F=71.90,P=0.00)。③肝细胞培养液白蛋白含量:培养3d时各组细胞培养液的白蛋白含量方差分析无明显差异(F=0.23,P=0.79)。培养6,9d同一时间点组间比较差异有显著性意义(F=11.69,P=0.00;F=9.35,P=0.00)。④细胞凋亡情况:银杏内酯组、神经生长因子组、空白对照组凋亡肝细胞百分率分别为11.53%,9.29%,15.27%。结论:银杏内酯和神经生长因子对原代人胚肝细胞的增殖和分泌白蛋白功能均具有促进作用,并抑制细胞凋亡。

关键词：银杏内酯神经生长因子肝细胞细胞培养人胚